眼轮匝肌蒂颞区皮瓣修复眼睑缺损

目的:探讨以眼轮匝肌为蒂的颞区皮瓣修复眼睑缺损的临床应用。方法:根据对耳颞部颞浅动脉系统与额部及眼眶区周围血管系统之间的交通吻合情况的解剖学研究结果,应用以眼轮匝肌为蒂的颞区皮瓣修复眼睑缺损12例。结果:12例眼睑缺损修复均取得了满意的效果,未出现并发症。结论:眼轮匝肌蒂颞区皮瓣修复眼睑缺损比局部或皮下蒂组织瓣易于移转,修复后外形满意且供区隐蔽,是修复眼睑缺损的良好选择。

正常人成纤维细胞老化过程中β-半乳糖苷酶的变化

目的 研究正常人成纤维细胞老化过程中 β 半乳糖苷酶的变化规律。 方法 取正常人二倍体成纤维细胞进行传代培养 ,以不同代龄的细胞为实验对象 ,通过细胞生长曲线、群体倍增时间和β 半乳糖苷酶染色等一系列检测方法 ,对成纤维细胞老化过程进行了观察。结果 随着成纤维细胞的连续传代培养 ,SA Gal表达呈现从弱 (在年轻细胞中占 4 % )到强 (在老化细胞中占 6 0 % )的趋势。

RPs29,RPs15,EndoA及septin2基因表达产物对小鼠皮肤培养细胞的作用

目的构建RPs29,RPs15,EndoA及septin2基因短剪接本真核表达载体,研究其对体外小鼠皮肤培养细胞的作用。方法PCR扩增鼠胚皮肤mRNA逆转录产物,分别获得RPs29,RPs15,EndoA及septin2基因短剪接本septin2s。构建其真核表达载体pcDNA3.1(-)/RPs29,pcDNA3.1(-)/RPs15,pcDNA3.1(-)/EndoA及pcDNA3.1(-)/septin2s,转染体外培养的小鼠表皮细胞及成纤维细胞。观察基因的表达情况及其对小鼠皮肤培养细胞生物学特性的影响。结果RT-PCR法检测RPs29,RPs15,EndoA及septin2s在转染的表皮细胞及成纤维细胞中均获得表达,pcDNA3.1(-)/RPs29和pcDNA3.1(-)/RPs15转染组成纤维细胞生长密度下降,其中pcDNA3.1(-)/RPs29转染组成纤维细胞发生凋亡,pcDNA3.1(-)/EndoA和pcDNA3.1(-)/septin2s转染组表皮细胞明显增殖。结论RPs29,RPs15,EndoA及Sep-tin2基因短剪接本能够影响小鼠表皮细胞及成纤维细胞的增殖。

正常人表皮细胞老化过程中生物学特性研究

目的 研究表皮细胞体外增殖与老化规律 ,为选择合适的组织工程化皮肤种子细胞提供依据。方法 取正常年轻人表皮细胞进行传代培养 ,以不同代龄细胞为实验对象 ,采用形态学观察、群体倍增时间(PDT)、免疫细胞化学及 β 半乳糖苷酶染色等一系列方法 ,检测表皮细胞老化规律。 结果 体外单层培养 9代 ,P2 (第 2代 )的PDT最短 ,前 5代增殖能力较强 ,P5(第 5代 )以后PDT明显延长 ,P8细胞不再增殖 ;随着细胞的连续传代培养 ,SA β Gal表达呈现从弱 (在年轻细胞中占 9% )到强 (在老化细胞中占 6 5 % )的趋势。 结论 体外培养第 1～第 5代表皮细胞可作为构建组织工程化皮肤的种子细胞。

预扩张岛状皮瓣移植修复面部软组织缺损

目的:提供一种面部及眼睑软组织缺损的修复方法。方法:1995年4月至2003年4月采用颞浅动脉额支预扩张岛状皮瓣修复面部及眼睑软组织缺损16例,切取皮瓣大小最大4.5cm×6.5cm,最小4.5cm×2cm。结果:预扩张皮瓣全部成活,颜色、质地与周围组织无明显异常;3～6个月后行皮瓣修整术,效果理想;供瓣区瘢痕位于头皮内,发际无明显改变。结论:颞浅动脉额支预扩张岛状皮瓣修复面部及眼睑软组织缺损,皮瓣色泽与周围一致,外形满意,且切口隐蔽,是修复面部软组织缺损的一种较好方法。

逆行颧眶动脉蒂皮瓣的应用解剖学研究

目的 :为逆行颞区皮瓣的应用提供解剖学基础。方法 :成尸标本 3 0侧头面部颧眶动脉进行肉眼解剖 ;15例活体行颈总动脉数字减影血管造影 (DSA) ,观察颧眶动脉与眼轮匝肌营养血管的关系 ,将信息输入计算机图像分析仪 ,行图像分析。结果 :眼轮匝肌有多条血管在眼睑内形成动脉网 ,此动脉网与供应颞区皮肤颞浅动脉分支的额支和颧眶动脉相吻合 ,且颧眶动脉位置较恒定 ,外径平均在 1.0mm以上。结论 :颞区皮瓣可被认为是以颧眶动脉为轴的轴型皮瓣 ,且以颧眶动脉远端为蒂的逆行皮瓣的存活是完全有保障的。

易性癖诊治前后的几点思考

探讨易性病的病因、诊断和治疗方法以及由此引发的一些社会问题。近年来易性病患者的就诊数量不断增多,如何正确处理该类患者,不仅是医学问题,而且牵涉法律和伦理方面的很多问题。正确认识易性病,实施正确而完善的治疗措施,将对治疗病患,维持社会稳定具有重要的意义。

软骨细胞与骨髓基质细胞共培养裸鼠体内构建软骨组织的实验研究

目的:探讨软骨细胞在裸鼠体内促进骨髓基质细胞(BMSCs)向软骨分化并形成软骨组织的可行性。方法:从SD大鼠中分别分离出BMSC和软骨细胞进行体外培养。收集软骨细胞培养上清液,作为BMSCs诱导液从第2代开始进行诱导分化,7天后取出标本,免疫组织化学检测软骨特异性Ⅱ型胶原表达,RT-PCR检测Ⅱ型胶原和aggrecan的mRNA表达。SD大鼠BMSCs与软骨细胞按一定比例(7:3)混匀,取5.0×107个混合细胞/ml的各组细胞悬液接种至壳聚糖生物材料,体外培养一周后植入裸鼠皮下,相同数量的单纯软骨细胞或BMSCs同样方法植入,分别作为阳性对照及阴性对照,1.5×107个软骨细胞同样植入作为低浓度软骨细胞对照。各组均8周后取材检测。结果:经诱导后的大鼠BMSCs的Ⅱ型胶原免疫组化检测阳性,RT-PCR检测Ⅱ型胶原和aggrecanmRNA呈阳性表达;混合细胞组及阳性对照组均形成了成熟的软骨,组织学可见成熟软骨陷窝、异染基质及Ⅱ型胶原表达;BMSCs组仅形成了纤维性组织;低浓度软骨细胞组在局部形成了少量软骨。结论:软骨细胞能在一定程度上提供软骨形成的微环境,诱导BMSCs在裸鼠体内向软骨组织分化并形成软骨组织。

跨血管区反流耳颞部皮瓣应用解剖学

目的：明确耳颞部颞浅动脉系统与额部及眼眶区周围血管系统之间的交通吻合情况，为临床跨血管区反流耳颞部岛状皮瓣的应用提供解剖学基础。方法：15具福尔马林保存的成人尸体头面部进行肉眼解剖；5具新鲜成人头部标本制作血管铸型，观察颞浅动脉额支与眶上及滑车上动脉的相互交通吻合状况以及颞浅动脉分支与眼轮匝肌营养血管之间的吻合情况。结果：眶上及滑车上动脉和颞浅动脉额支走行基本恒定，且三者存在众多吻合，吻合支集中区域为上界距眶上缘（4．9±o．4）cm，下界为眶上缘水平，上界内侧距离前正中线（1．o±o．2）CITI，外侧距离前正中线（4．5±0．4）CITI；下界内侧距离前正中线（1．4：k0．2）cm，外侧（2．3±0．5）cm；颞浅动脉分支一颧眶动脉以3种分支类型与面动脉的终末支一内眦动脉在眼轮匝肌内形成稳定的交通吻合。结论：颞浅动脉额支与滑车上动脉存在吻合支集中区域；眶上动脉与颞浅动脉额支在眉外侧存在位置恒定吻合点。以眼轮匝肌为蒂的颞区皮瓣实际上是以颧眶动脉远端和眼睑动脉弓为蒂的跨区反流轴型皮瓣。

软组织扩张术后纤维囊的组织学及超微结构观察

目的 :探讨纤维囊在软组织扩张后皮瓣的作用及意义。方法 :应用光镜、电镜对 6例纤维囊组织进行观察及形态学计量分析。结果 :纤维囊主要由成纤维细胞、胶原纤维、成肌纤维细胞所组成 ,其内的毛细血管数目明显高于正常人真皮内毛细血管数目 ( P<0 .0 1)。结论 :纤维囊对扩张后之皮瓣起支持保护及营养作用 。

体外培养不同代次成纤维细胞胶原基因表达及成纤维细胞对EGF的反应性

目的 观察体外培养不同代次人成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原基因的表达及对EGF刺激的反应性。方法 将正常人二倍体成纤维细胞进行连续传代培养 ,以不同代次的细胞为实验对象 ,应用RT PCR、3 H TdR掺入量测定等方法对不同代次细胞进行检测。结果 随细胞代次的增加 ,Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA含量逐渐降低 ,3 H TdR掺入量降低 ,EGF促进P10 培养的成纤维细胞增殖 ,对衰老成纤维细胞 (P60 )无生长增殖的调控能力。结论 为建立人成纤维细胞衰老模型提供部分实验依据。

软骨组织工程种子细胞的医学伦理分析

软骨组织工程作为一项新兴技术成为治疗软骨缺损的新途径,本文通过探讨软骨组织工程学研究与临床应用的医学伦理学问题。从组织工程学研究的各种不同的种子细胞来源方面阐述其各自存在的伦理学问题及其对策。从而阐明在进行软骨组织工程种子细胞研究的同时,必须充分考虑相关的伦理学问题,遵循伦理原则,使软骨组织工程不仅在技术上可行,在伦理学上也是可行的。

成纤维细胞体外培养过程中超微结构改变的观察

目的 观察正常人成纤维细胞体外培养过程中超微结构的变化规律。方法 将正常人二倍体成纤维细胞进行传代培养 ,以不同代次的细胞为实验对象 ,通过倒置相差显微镜与透射电镜对各代细胞进行了观察。结果 4 5代以内的细胞生长较迅速 ,4 5代后的细胞生长逐渐缓慢 ,6 5代细胞几乎无增殖趋势。 4 0代以内细胞的超微结构无明显变化 ,4 1～ 6 5代细胞出现核膜内折 ,细胞核 浆比例减小 ,细胞表面突起和微绒毛减少。结论 各代成纤维细胞超微结构改变程度不同 ,4 1代后变化明显。

成纤维细胞体外培养过程中β-半乳糖苷酶的变化

目的 观察正常人成纤维细胞老化过程中β 半乳糖苷酶的变化规律。 方法 取正常人二倍体成纤维细胞进行传代培养 ,以不同代次的细胞为实验对象 ,通过细胞生长曲线、群体倍增时间和 β 半乳糖苷酶染色等一系列检测方法 ,对成纤维细胞老化过程进行了观察。结果 随着成纤维细胞的连续传代培养 ,SA β Gal表达呈现从弱 (在年轻细胞中占 4 % )到强 (在老化细胞中占 6 0 % )的趋势。

皮肤软组织扩张对静脉皮瓣成活安全性的影响

目的:研究皮肤软组织扩张术对静脉皮瓣成活的影响,以及经预扩张后皮瓣成活的安全性变化。方法:实验于2001-03/2002-06在潍坊医学院整形外科研究所动物实验室完成。以新西兰成年兔30只为实验动物,采用自身双耳对照的方法,用激光多普勒微循环成像、酶组织化学染色+计算机图像分析、组织形态计量学测量以及皮瓣成活面积的测量等手段,观测预扩张静脉皮瓣的微循环变化及皮瓣的成活情况。结果:30只兔均进入结果分析。静脉皮瓣经预扩张后,皮瓣内微血管管径由扩张前的(7.2±0.7)μm增至扩张后的(15.6±1.9)μm,微血管密度比值由0.0108±0.0002增至0.0525±0.0021(t=108.312,P<0.01)。预扩张静脉皮瓣的成活率由对照组的(21.89±1.12)%增至扩张后的(85.10±2.32)%(t=134.404,P<0.001)。结论:静脉皮瓣经预扩张后,皮瓣内的微血管密度、管径均有明显增加。经预扩张静脉皮瓣的成活率显著提高。

软组织扩张术后皮肤组织形态计量学改变

本文对６例额部皮肤软组织扩张术后皮瓣和８例正常人额部皮肤组织进行形态计量学分析及超微结构观察，探讨软组织扩张后“额外”皮肤组织的来源及形态计量学指标的改变。结果表明，扩张后表皮层数、表皮细胞面积及表皮、真皮厚度的检测值均明显高于正常对照组（Ｐ＜０．０１），而且真皮内血管数目增多。提示，软组织扩张后，表皮细胞增殖及真皮内胶原纤维合成增加是“额外”皮肤来源的形态学基础。

静脉皮瓣供区预扩张的实验研究

目的研究皮肤软组织扩张术对静脉皮瓣成活的影响,探讨静脉皮瓣经预扩张后皮瓣成活安全性的变化。方法以新西兰成年兔为实验对象,进行自身双耳对照。采用激光多普勒微循环成像、酶组织化学染色+计算机图像分析、组织形态计量学测量以及皮瓣成活面积的测量等方法,观测预扩张静脉皮瓣的微循环变化及皮瓣的成活情况。结果静脉皮瓣经预扩张后,皮瓣的微血管管径由扩张前的(7.2±0.7)μm增至扩张后的(15.6±1.9)μm,微血管密度由(0.010 8±0.000 2)μm2/μm2增至(0.052 5±0.002 1)μm2/μm2(P<0.01),成活率由(21.89±1.12)%增至(85.10±2.32)%(P<0.001)。结论静脉皮瓣经预扩张后,皮瓣的微血管密度、管径均有明显增加,皮瓣的成活率显著提高。

眼睑大面积组织缺损应用预扩张颞浅动脉额支岛状皮瓣修复重建的研究

目的探讨眼睑大面积组织缺损的修复重建方法。方法采用预扩张的颞浅动脉额支岛状皮瓣转移后修复眼睑大面积组织缺损计２６例，２６只眼睑，修复缺损面积最大为２３ｃｍ２，平均为１２ｃｍ２。结果预扩张后转移的皮瓣血供明显增高，所有皮瓣１００％成活，皮瓣切取后一期拉拢缝合，外形满意。结论此方法修复的眼睑外形及功能均良好，上睑不臃肿，下睑不下坠，为眼睑大面积组织缺损的修复重建提供了一新的治疗途径。

表皮细胞体外培养过程中生物学特性改变的观察

目的 通过观察表皮细胞体外增殖与老化规律 ,为选择合适的组织工程化皮肤种子细胞提供依据。方法 取正常年轻人表皮细胞进行传代培养 ,以不同代龄细胞为实验对象 ,采用形态学观察、群体倍增时间(PDT)、免疫细胞化学及β 半乳糖苷酶染色等一系列方法 ,检测表皮细胞老化规律。结果 体外单层培养 9代 ,P2的PDT最短 ,前 5代增殖能力较强 ,P5以后PDT明显延长 ,P8细胞不再增殖 ;随着细胞的连续传代培养 ,SA β Gal表达呈现从弱 (在年轻细胞中占 9% )到强 (在老化细胞中占 6 5 % )的趋势。结论 建立了体外培养正常人表皮细胞的衰老模型 ,第 1～ 5代表皮细胞 (供者年龄 16～ 18岁 )

扩张时限对皮肤微循环的影响

目的 实验观察不同扩张时间皮肤微血管系及其血流动力学的变化规律。方法 以兔为实验动物 ,用激光多普勒微循环显微成像、酶组织化学染色并计算机图像分析等形态学研究手段 ,观测正常及不同扩张时间皮肤血液流速、流量等血流动力学指标及管径、密度等微血管形态学指标。结果 对照组、扩张组在微血管直径、血流速度、血流量及微血管密度方面存在显著差异 (P<0 .0 1) ,直径、流量测量值从第 1～ 3周分别从 11.16± 1.0 1μm,(11.15± 0 .85 )×10 5 μm3增至 13.91± 1.4μm,(15 .86± 0 .93)× 10 5 μm3,微血管密度在第 1～ 4周从 0 .0 2 2± 0 .0 2μm2 /μm2 增至 0 .0 6 1± 0 .0 0 3μm2 /μm2 ,随扩张时间延长上述观测值在出现一过性下降后又呈现同样变化。流速在扩张后增大并维持平均 10 12 .45 μm/s的较高水平。结论 扩张皮肤约 3～ 4周完成一个微血管增生构筑演变周期 ,达到一次直径、流量及密度最大值。