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清除幽门螺杆菌过程中血清特异性IgG、IgA、IgM的变化 被引量:4
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作者 王丕龙 杨致邦 +3 位作者 余建平 龚能平 李华平 李宗明 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1998年第5期66-68,共3页
研究清除HP过程中血清抗体滴度的变化。方法51例pU伴Hp感染者,用三联疗法清除Hp,用ELISA法前瞻性定量检测血清特异性IgG、IgA、IgM的变化。结果治疗后9周,23例Hp转阴者,IgG、lgA、lgM平均滴度比治疗前分别下降14·2%、15.1%... 研究清除HP过程中血清抗体滴度的变化。方法51例pU伴Hp感染者,用三联疗法清除Hp,用ELISA法前瞻性定量检测血清特异性IgG、IgA、IgM的变化。结果治疗后9周,23例Hp转阴者,IgG、lgA、lgM平均滴度比治疗前分别下降14·2%、15.1%、7.2%。20周时分别下降32.5%、34.0%、7.0%。治疗前后IgG、IgA、滴度有显著性差异(t—3·83、3·56,P<0·01)。治疗无效者16例,三类抗体呈上升趋势,其中9周时ItA、ItM滴度与治疗前相比有显著性差异(t=2.50、2.84,0.05>P>0.01);12例9周转阴,而20周又阳性者,三类抗体呈先下降后升高趋势,尤以IgA、变化较为显著(F=3.46,0.05>P>0.01)。结论ELISA法定量检测IgG、IgA滴度的改变可以评价药物清除Hp的效果。 展开更多
关键词 ELISA 幽门螺杆菌 IGG IGA IGM
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经内镜圈套电凝切除胃十二指肠息肉的探讨 被引量:1
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作者 王丕龙 皮新生 +2 位作者 高思齐 刘新才 唐承薇 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 1990年第2期126-128,共3页
从1988年4月至1988年12月,我们经内镜圈套高频电流切除14例胃十二指肠息肉,经病理检查有腺瘤性息肉11例、炎性增生性息肉2例、原发性十二指肠类癌1例。在手术后的第二周,内镜复查发现6例在切除息肉后的残根出现糜烂,在第三周复查时均已... 从1988年4月至1988年12月,我们经内镜圈套高频电流切除14例胃十二指肠息肉,经病理检查有腺瘤性息肉11例、炎性增生性息肉2例、原发性十二指肠类癌1例。在手术后的第二周,内镜复查发现6例在切除息肉后的残根出现糜烂,在第三周复查时均已愈合。因此,经内镜圈套高频电流凝切胃、十二指肠息肉是一种诊断和治疗的可靠方法。 展开更多
关键词 胃肠道息肉 内镜 切除 电凝
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PCR检测胃粘膜幽门螺杆菌与其它三种方法比较 被引量:1
3
作者 王丕龙 余剑平 +2 位作者 张玉洪 杨致邦 董临江 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 1998年第1期17-19,共3页
本文建立了聚合酶链反应(polymerasechainreaction,PCR)检测胃粘膜幽门螺杆菌(HelicobacterPylori,Hp)的方法,并与临床常用的快速脲素酶试验、涂片镜检、细菌培养3种方法进行比... 本文建立了聚合酶链反应(polymerasechainreaction,PCR)检测胃粘膜幽门螺杆菌(HelicobacterPylori,Hp)的方法,并与临床常用的快速脲素酶试验、涂片镜检、细菌培养3种方法进行比较。从100例十二脂肠溃疡患者的164份胃粘膜标本中,Hp的检出率分别是:PCR63%、快速脲素酶试验62%、涂片镜检59%.细菌培养55%。4种方法检出结果无显著性差异(P>0.05),若以细胞培养结果为标准,PCR法的敏感性和特异性分别为95.7%和97.2%。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 幽门螺杆菌 胃粘膜
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幽门螺杆菌外膜蛋白编码基因的克隆、表达、抗原性研究及其临床应用
4
作者 王丕龙 姜政 《重庆医学》 CAS CSCD 2003年第11期1443-1443,共1页
关键词 幽门螺杆菌 外膜蛋白编码基因 克隆 表达 抗原性研究 临床应用
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槲皮素对SGC-7901胃癌细胞生长及HSP70和EGFR表达的影响 被引量:12
5
作者 向廷秀 陶小红 +2 位作者 姜政 王丕龙 谯敏 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期411-414,共4页
目的观察槲皮素对胃癌细胞SGC-7901生长及HSP70和EGFR的影响。方法以台盼蓝拒染法计数胃癌细胞的生长抑制率,透射电镜从形态变化上了解凋亡的发生,流式细胞术检测细胞周期变化,免疫组化检测HSP70和EGFR的表达。结果台盼蓝拒染法计数显... 目的观察槲皮素对胃癌细胞SGC-7901生长及HSP70和EGFR的影响。方法以台盼蓝拒染法计数胃癌细胞的生长抑制率,透射电镜从形态变化上了解凋亡的发生,流式细胞术检测细胞周期变化,免疫组化检测HSP70和EGFR的表达。结果台盼蓝拒染法计数显示槲皮素抑制SGC-7901细胞增殖的作用明显,且呈浓度和时间依赖性,槲皮素处理48 h后的IC50为14.12μmol/L。形态学检测显示出细胞凋亡的特征变化,流式细胞仪检测表明经10-20μmol/L的槲皮素处理,SGC-7901细胞周期阻滞于G0/G1期,经10μmol/L槲皮素处理的SGC-7901下调HSP70和EGFR蛋白的表达。结论槲皮素能抑制胃癌细胞的生长,呈时间剂量依赖性,能诱导SGC-7901发生凋亡,使细胞周期阻滞于G0/G1期,抑制增生与诱导凋亡的机制可能与下调HSP70和EGFR的表达有关。 展开更多
关键词 槲皮素 胃癌细胞 凋亡 HSP70 EGFR
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槲皮素对胃癌细胞SGC-7901和BGC-823生长的影响 被引量:16
6
作者 向廷秀 王丕龙 +2 位作者 高青 姜政 张霞 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2003年第6期560-562,共3页
目的 观察槲皮素对胃癌细胞SGC 790 1和BGC 82 3生长和增殖的影响。方法 以台盼蓝拒染法计数胃癌细胞的生长抑制率 ,荧光显微镜了解凋亡的发生 ,流式细胞术检测细胞周期变化。结果 台盼蓝拒染法计数显示槲皮素抑制SGC 790 1和BGC 82 ... 目的 观察槲皮素对胃癌细胞SGC 790 1和BGC 82 3生长和增殖的影响。方法 以台盼蓝拒染法计数胃癌细胞的生长抑制率 ,荧光显微镜了解凋亡的发生 ,流式细胞术检测细胞周期变化。结果 台盼蓝拒染法计数显示槲皮素抑制SGC 790 1和BGC 82 3细胞增殖的作用明显 ,呈浓度和时间依赖性 ,槲皮素处理 48h后的Ic50为 14 12 μm(SGC 790 1)和 2 8 13 μm(BGC 82 3 )。形态学检测显示出细胞凋亡的特征变化 ,流式细胞仪检测表明经 10~ 2 0 μm/L的槲皮素处理 ,SGC 790 1细胞周期阻滞于G0 /G1期 ,BGC 82 3细胞周期阻滞于S期。结论 槲皮素能抑制胃癌细胞的生长并诱导其发生凋亡 。 展开更多
关键词 槲皮素 胃癌 SGC-7901细胞 BGC-823细胞 细胞增殖 流式细胞术 细胞凋亡
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红景天甙对肝纤维化大鼠Samds基因表达的影响 被引量:29
7
作者 吴晓玲 曾维政 +3 位作者 蒋明德 王丕龙 邓桂英 秦建平 《第四军医大学学报》 北大核心 2005年第10期923-926,共4页
目的: 观察红景天甙对肝纤维化大鼠TGFβ- Smad通路的影响.方法: CCl4 诱导大鼠肝纤维化,以红景天甙水溶液干预性治疗,Masson染色观察肝组织胶原沉积;ELISA法检测大鼠血清TGFβ1水平;原位杂交(insituhybridization,ISH)和免疫组化(immun... 目的: 观察红景天甙对肝纤维化大鼠TGFβ- Smad通路的影响.方法: CCl4 诱导大鼠肝纤维化,以红景天甙水溶液干预性治疗,Masson染色观察肝组织胶原沉积;ELISA法检测大鼠血清TGFβ1水平;原位杂交(insituhybridization,ISH)和免疫组化(immunohistochemistry,IH)检测大鼠肝组织Smads表达情况.结果: 红景天甙干预性治疗使肝纤维化大鼠血清TGFβ1水平明显下降[ (53. 4±19 .5)vs(88. 7±22. 8)mg/L,P<0 .05 ],肝脏胶原占肝组织面积比例减少为( 0 .041±0 .011) [模型组(0 .167±0 .052),P<0 05];治疗组肝脏Smad4蛋白表达阳性率降低为(0. 023±0. 008) [模型组( 0 .137±0. 090),P< 0 .01 ],Smad4 mRNA阳性率降低为( 0 233±0 .018) [模型组( 0 .741±0. 091 ),P<0. 01 ];Smad7蛋白阳性率增加为( 0. 067±0 .010 ) [模型组( 0 .019±0. 002 ),P<0 .05 ],Smad7mRNA阳性率增加为( 0. 198±0. 011 )[模型组( 0 .074±0. 012 ),P<0 .01 ];肝组织Smads蛋白表达与SmadsmRNA水平变化一致.结论: 红景天甙防治可显著降低肝纤维化大鼠血清TGFβ1水平,减少肝脏胶原沉积,抑制肝脏Smad4表达及促进Smad7mRNA表达,从而减弱了由TGFβ1介导的肝纤维化信号,可能是其发挥抗肝纤维化作用的分子机制之一. 展开更多
关键词 红景天甙 肝硬化 Smad基因
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人幽门螺杆菌18000外膜蛋白与HspA双价疫苗的构建和表达 被引量:13
8
作者 姜政 黄爱龙 +2 位作者 蒲丹 陶小红 王丕龙 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期62-66,共5页
目的 :构建含人幽门螺杆菌 (Hp)热休克蛋白A(HspA)和Mr为 180 0 0的外膜蛋白编码基因的重组载体 ,进行核苷酸序列分析 ,并在E .coliBL2 1中表达。方法 :用PCR方法从HpDNA染色体中 ,扩增HspA编码基因片段。将目的基因HspA与载体 pET32a(+... 目的 :构建含人幽门螺杆菌 (Hp)热休克蛋白A(HspA)和Mr为 180 0 0的外膜蛋白编码基因的重组载体 ,进行核苷酸序列分析 ,并在E .coliBL2 1中表达。方法 :用PCR方法从HpDNA染色体中 ,扩增HspA编码基因片段。将目的基因HspA与载体 pET32a(+)分别经kpnⅠ和BamHI双酶切后 ,进行连接、测序。同时将重组载体 pET32a(+) /HspA和pET32a(+) /Omp18,分别经HindIII和BamHI双酶切 ,通过凝胶电泳回收pET32a(+) /HspA和Mr180 0 0OMPDNA片段 ,经T4连接酶将HspA和Mr180 0 0OMP编码基因通过酶切粘端进行连接 ,而后转化并筛选含有两种目的基因的重组载体 ,并在大肠杆菌BL2 1(DE30 )中表达。表达产物经Ni NTA琼脂糖树脂纯化后 ,以Westernblot分析其抗原性。结果 :经酶切、测序表明 ,插入的基因片段为HpHspA和Mr 为 180 0 0OMP编码基因 ,由 891个碱基组成 ,与GenBank中登录的序列相比较 ,有 1.15 %的碱基发生变异 ,1.2 6 %的氨基酸残基改变。经SDS PAGE分析发现 ,融合基因表达的蛋白Mr 为 5 1× 10 3 ,其中 pET32a(+)表达的蛋白Mr 约为 2 0×10 3 ,可溶性表达产物占菌体总蛋白的 18.96 %。重组蛋白经Ni NTA琼脂糖树脂纯化后 ,其纯度达 95 %以上。用Westernblot分析显示 ,该重组蛋白可被Hp阳性患者的血清及抗Mr为 180 0 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 热休克蛋白A 外膜蛋白 原核表达载体
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槲皮素对BGC823胃癌细胞p53、Bcl-2/Bax、PCNA表达影响与抑癌作用研究 被引量:13
9
作者 向廷秀 陶小红 +1 位作者 姜政 王丕龙 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期95-96,共2页
目的:观察槲皮素对胃癌细胞BGC823生长及p53、Bcl-2/Bax、PCNA的影响。方法:以台盼蓝拒染法计数胃癌细胞的生长抑制率,透射电镜从形态变化上了解凋亡的发生,流式细胞术检测细胞周期变化,免疫细胞化学检测p53、Bcl-2/Bax、PCNA蛋白的表... 目的:观察槲皮素对胃癌细胞BGC823生长及p53、Bcl-2/Bax、PCNA的影响。方法:以台盼蓝拒染法计数胃癌细胞的生长抑制率,透射电镜从形态变化上了解凋亡的发生,流式细胞术检测细胞周期变化,免疫细胞化学检测p53、Bcl-2/Bax、PCNA蛋白的表达。结果:台盼蓝拒染法计数显示槲皮素抑制BGC823细胞增殖的作用明显,且呈浓度和时间依赖性,槲皮素处理48h后的Ic50为28.12μm。形态学检测显示出细胞凋亡的特征变化,流式细胞仪检测表明经10-20μm/L的槲皮素处理,BGC823细胞周期阻滞于S期,药物浓度呈正相关。细胞呈现核固缩、染色质边集、凋亡小体形成等典型凋亡表现。经槲皮素处理后BGC823细胞株bax蛋白表达明显增加,bcl-2、PCNAp、53蛋白表达降低。结论:槲皮素能抑制胃癌细胞的生长,呈时间剂量依赖性,能诱导BGC823发生凋亡,使细胞周期阻滞于S期,抑制增生与诱导凋亡的机制可能与下调p53、PCNA的表达,降低bcl-2/Bax比值有关。 展开更多
关键词 槲皮素 BGC-823 凋亡 P53 BCL-2/BAX PCNA
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红景天甙对肝纤维化大鼠肝组织CBP、Smad基因表达的影响 被引量:15
10
作者 曾维政 吴晓玲 +2 位作者 蒋明德 王丕龙 褚桂珍 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2005年第3期341-345,共5页
目的:研究红景天甙对CCl4诱导的肝纤维化大鼠肝组织CBP、Smad基因表达的影响. 方法:SD大鼠90只分为3组:正常对照组(C组)、模型组(M组)和红景天甙干预组(T组).以CCl4SC诱导肝纤维化,T组在造模同时给予红景天甙溶液ip.HE和Masson染色观察... 目的:研究红景天甙对CCl4诱导的肝纤维化大鼠肝组织CBP、Smad基因表达的影响. 方法:SD大鼠90只分为3组:正常对照组(C组)、模型组(M组)和红景天甙干预组(T组).以CCl4SC诱导肝纤维化,T组在造模同时给予红景天甙溶液ip.HE和Masson染色观察肝脏胶原沉积情况,原位杂交和免疫组化检测肝组织Smad 3,Smad 7和CBP基因表达. 结果:T组肝脏组织学积分减少(2.1±0.3 vs 3.6±0.8, P=0.041),胶原平均面积显著减少(1 38±66 vs 691±189 μm2,P=0.046);肝脏Smad 7蛋白表达阳性率增加[(4.27±0.43)%vs(2.86±0.86)%,P=0.035, P<0.05];Smad 3mRNA表达阳性率减少(0.18±0.03 vs 0.62±0.23,P=0.026),CBP mRNA表达吸光度值亦明显减少(0.092±0.032 vs 0.235±0.025,P=0.00012). 结论:红景天甙能有效抑制Smad 3和CBP基因表达, 促进Smad 7表达,从而干扰肝纤维化的形成. 展开更多
关键词 红景天甙 肝纤维化 肝组织 CBP SMAD 基因表达
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大鼠慢性酒精性脂肪肝模型的建立 被引量:25
11
作者 古赛 蒋小黎 +1 位作者 何琳 王丕龙 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2006年第1期81-84,共4页
目的:复制大鼠慢性酒精性脂肪肝模型。方法:53只大鼠分为对照组和模型组(分别为小、中、大剂量组)。模型各组给予40%(v/v)乙醇[小剂量组7 g/(kg.d)、中剂量组8 g/(kg.d)、大剂量组9g/(kg.d)]分2次灌胃至4w末,乙醇浓度增至50%(v/v)[小剂... 目的:复制大鼠慢性酒精性脂肪肝模型。方法:53只大鼠分为对照组和模型组(分别为小、中、大剂量组)。模型各组给予40%(v/v)乙醇[小剂量组7 g/(kg.d)、中剂量组8 g/(kg.d)、大剂量组9g/(kg.d)]分2次灌胃至4w末,乙醇浓度增至50%(v/v)[小剂量组8 g/(kg.d)、中剂量组9 g/(kg.d)、大剂量组10g/(kg.d)]分2次灌胃至8w末,做肝脏B超,测血清ALT、AST、γ-GT及病理形态学观察。结果:模型组大鼠8周末除ALT与对照组无显著性差异外,AST、γ-GT、AST/ALT均有显著性差异,但组间无差异。病理观察中和大剂量组出现肝脏脂肪变,小剂量组仅部分出现脂肪变。B超与病理吻合率达79.17%。结论:中剂量组乙醇灌胃8w末,即可造成稳定的慢性酒精性脂肪肝模型。 展开更多
关键词 慢性酒精性肝病 大鼠模型 病理学 超声学
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可溶性人TRAIL诱导胃癌细胞BGC-823凋亡的研究 被引量:7
12
作者 李彦 姜政 +3 位作者 向廷秀 曾波 陶小红 王丕龙 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1066-1070,共5页
目的通过构建pBud-EGFP-TRAIL质粒体外观察可溶性人TRAIL蛋白(sTRAIL)对胃癌细胞BGC-823的作用。方法以EFGP基因为报告基因,sTRAIL为目的基因,构建pBud-EGFP-TRAIL双表达质粒,鉴定酶切和测序重组体。经脂质体转染法转染体外培养的胃癌细... 目的通过构建pBud-EGFP-TRAIL质粒体外观察可溶性人TRAIL蛋白(sTRAIL)对胃癌细胞BGC-823的作用。方法以EFGP基因为报告基因,sTRAIL为目的基因,构建pBud-EGFP-TRAIL双表达质粒,鉴定酶切和测序重组体。经脂质体转染法转染体外培养的胃癌细胞BGC-823,用荧光显微镜观察EGFP的表达,RT-PCR及Western blot进一步检测sTRAIL mRNA及其蛋白的表达,MTT法检测转染后对胃癌细胞的生长抑制率,TUNEL法观察细胞的凋亡情况,流式细胞仪分析转染后胃癌细胞的凋亡率。结果测序结果证实pBud-EGFP-TRAIL载体构建成功,质粒经脂质体转染后,通过表达sTRAIL蛋白对胃癌细胞发挥作用。MTT法显示转染该质粒的细胞的生长抑制率明显高于对照组,TUNEL法显示细胞核固缩,核染色质聚集或断裂,形成凋亡小体。流式细胞仪结果表明转染该质粒的细胞的的凋亡率明显高于对照组。结论在体外初步证实TRAIL能诱导胃癌细胞BGC-823凋亡。 展开更多
关键词 胃肿瘤 肿瘤坏死因子 肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体 细胞凋亡 BGC-823细胞
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TGFβ-Smad信号转导通路与肝纤维化 被引量:19
13
作者 吴晓玲 曾维政 王丕龙 《世界华人消化杂志》 CAS 2003年第10期1601-1605,共5页
转化生长因子β(transforming growth factor beta.TGF β)是一类能够调节细胞生长和分化的多肽,具备多种生物作用,在肝纤维化发生、发展过程中具有活化肝星状细胞(hepatocelluar stellate cell,HSC),促进胶原基因表达,促进细胞外基质... 转化生长因子β(transforming growth factor beta.TGF β)是一类能够调节细胞生长和分化的多肽,具备多种生物作用,在肝纤维化发生、发展过程中具有活化肝星状细胞(hepatocelluar stellate cell,HSC),促进胶原基因表达,促进细胞外基质合成与沉积等作用,是最重要的促肝纤维化细胞因子之一、大量研究证实,TGF β-Smad信号转导通路是TGF β发挥生物学作用的主要通路,其分子组成与分子调节复杂,与其他信号通路存在广泛的交互影响,对不同的组织、细胞及肝纤维化的不同病程的作用均有明显的差异,对TGF β-Smad信号转导通路的深入研究不仅使肝纤维化的发病机制得到进一步的阐明,也给肝纤维化的防治研究提供了新的有效途径,本文综述TGF β-Smad信号转导通路的组成与调控,在肝纤维化发病与防治中的作用的研究进展。 展开更多
关键词 TGFΒ SMAD 信号转导通路 肝纤维化 肝星状细胞 细胞外基质 肝损伤
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幽门螺杆菌Mr26000外膜蛋白编码基因的克隆及表达 被引量:10
14
作者 姜政 黄爱龙 +2 位作者 陶小红 王丕龙 蒲丹 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期376-379,共4页
目的 构建含幽门螺杆菌 (Hp)Mr 2 6 0 0 0外膜蛋白编码基因的重组载体 ,并在E .coliBL2 1中表达。方法 用PCR从Hp染色体中 ,扩增Mr 2 6 0 0 0外膜蛋白编码基因片段。将目的基因与pET32a(+)同时经BamHI、HindⅢ双酶切、纯化、连接后 ,... 目的 构建含幽门螺杆菌 (Hp)Mr 2 6 0 0 0外膜蛋白编码基因的重组载体 ,并在E .coliBL2 1中表达。方法 用PCR从Hp染色体中 ,扩增Mr 2 6 0 0 0外膜蛋白编码基因片段。将目的基因与pET32a(+)同时经BamHI、HindⅢ双酶切、纯化、连接后 ,构建含有目的基因的重组载体。以含目的基因片段的重组载体转化大肠杆菌BL2 1(DE30 )并表达。表达产物经纯化后 ,用ELISA法检测其抗原性。结果 经酶切、测序分析表明 ,插入的基因片段为HpMr 2 6 0 0 0的外膜蛋白编码基因 ,与Tomb等的报道相比较 ,有 1.1%的bp发生变异 ,1.5 1%的氨基酸残基改变。经SDS PAGE分析发现 ,融合基因表达的蛋白Mr为 4 6× 10 3 ,可溶性表达产物占细菌总蛋白的 38.96 %。重组蛋白经Ni NTA琼脂糖树脂纯化后 ,其纯度达 95 %以上。ELISA法检测显示 ,该重组蛋白可被Hp阳性患者的血清所识别 ,具有良好的抗原性。结论成功地克隆并表达Mr为 2 6 0 0 0的Hp外膜蛋白编码基因 。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 外膜蛋白基因 原核表达
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白藜芦醇对胃癌细胞系SGC-7901细胞增殖和凋亡作用的实验研究 被引量:6
15
作者 吴莹 姜政 +2 位作者 陶小红 黄爱龙 王丕龙 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期523-526,共4页
目的:研究白藜芦醇(resveratrol,Res)影响人胃癌细胞SGC-7901增殖及凋亡的机制。方法:使用不同浓度Res处理SGC-7901细胞不同时间后,采用MTT法测定肿瘤细胞生长抑制率;FCM和TUNEL法检测分析细胞周期和细胞凋亡率;免疫细胞化学法检测细胞... 目的:研究白藜芦醇(resveratrol,Res)影响人胃癌细胞SGC-7901增殖及凋亡的机制。方法:使用不同浓度Res处理SGC-7901细胞不同时间后,采用MTT法测定肿瘤细胞生长抑制率;FCM和TUNEL法检测分析细胞周期和细胞凋亡率;免疫细胞化学法检测细胞中bcl-2、bax、caspase-3和Fas蛋白的表达;RT-PCR检测Fas、bcl-2、bax、caspase-3 mRNA的表达。结果:Res对胃癌SGC-7901细胞的生长抑制作用随着Res作用时间的延长和浓度的增加而明显增强(P<0.01,P<0.05),同时能诱导其发生凋亡(P<0.01);Res(150μmol/L)能明显上调SGC-7901细胞中bax、caspase-3、Fas mRNA及其蛋白的表达,下调bcl-2 mRNA及其蛋白的表达。结论:Res抑制SGC-7901细胞的增殖、诱导细胞凋亡呈浓度、时间依赖性;这可能与Res上调肿瘤细胞Fas、bax和caspase-3的表达及下调bcl-2的表达有关。 展开更多
关键词 胃肿瘤 凋亡调节蛋白质类 白藜芦醇 SGC-7901细胞
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幽门螺杆菌感染与胃肠外疾病关系的研究 被引量:18
16
作者 姜政 黄爱龙 +1 位作者 陶小红 王丕龙 《世界华人消化杂志》 CAS 2002年第6期706-709,共4页
幽门螺杆菌是人类最常见的致病菌,也是人类第一类致癌原,他的感染不但与胃肠道疾病有直接关系,而且与肠外疾病的发生也有重要的关系。Hp感染是一种慢性、持续性感染,通过慢性炎症免疫反应、毒素的释放、炎症递质的增多以及自由基的生成... 幽门螺杆菌是人类最常见的致病菌,也是人类第一类致癌原,他的感染不但与胃肠道疾病有直接关系,而且与肠外疾病的发生也有重要的关系。Hp感染是一种慢性、持续性感染,通过慢性炎症免疫反应、毒素的释放、炎症递质的增多以及自由基的生成,引起感染局部和远处损害,从而导致或加重了除胃肠疾病外其他系统疾病。近年来,随着对Hp致病机制进一步认识,Hp与胃外疾病关系引起了广泛的关注,如Hp的感染增加了心脑疾病的危险因素,引起心肌缺血、坏死、以及脑卒中的发生;Hp)的感染导致了胃泌素的增高,刺激了肺癌的发生与发展,同时Hp的感染还增加了支气管炎的发生;硬皮病、酒渣鼻患者,Hp感染率显著地增高,根治Hp之后,上述症状得到了明显地改善等。综述近年来Hp与胃外疾病关联的研究报道,为临床诊断、鉴别诊断以及治疗提供理论依据。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌感染 胃肠外疾病 致病机制
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沉默dnmt1基因对胃癌细胞株AGS细胞周期、增殖及凋亡的影响 被引量:4
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作者 陈道荣 王丕龙 +1 位作者 黄爱龙 张秉强 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第3期308-314,共7页
背景与目的:DNA甲基转移酶1(DNAmethyltransferase1,dnmt1)基因在多种肿瘤细胞中表达量相当高,而在正常成人细胞中则低表达,因此dnmt1基因的高表达与肿瘤的发生有密切的关系。本研究观察以dnmt1基因为靶基因的重组质粒对胃癌细胞株AGS... 背景与目的:DNA甲基转移酶1(DNAmethyltransferase1,dnmt1)基因在多种肿瘤细胞中表达量相当高,而在正常成人细胞中则低表达,因此dnmt1基因的高表达与肿瘤的发生有密切的关系。本研究观察以dnmt1基因为靶基因的重组质粒对胃癌细胞株AGS细胞周期、增殖及凋亡的影响。方法:设计短发夹状RNA(shorthairpinRNA,shRNA)的寡核苷酸片段,再克隆至载体pTZU6+1中构建重组体pshRNA-dnmt1,转染胃癌细胞株AGS。实验分为空白对照组(仅予脂质体)、pTZU6+1组(予空质粒pTZU6+1)和pshRNA-dnmt1组(予以重组质粒pshRNA-dnmt1)3组。Westernblot检测dnmt1蛋白水平变化;RT-PCR法评估mRNA水平;流式细胞技术分析细胞周期的变化;MTT法检测细胞生长情况;吖啶橙/溴乙锭双染色(AO/EB)法、电镜和TUNEL观察细胞凋亡情况。结果:成功构建重组质粒pshRNA-dnmt1,并经序列分析得到确认。pshRNA-dnmt1转染AGS细胞后24h出现dnmt1蛋白表达量减少,24、48、72h抑制率分别为28.24%、68.54%、81.47%。转染pshRNA-dnmt1后24、48、72h对AGS细胞中dnmt1mRNA的抑制率分别为21.63%、52.97%、72.06%。转染后72hS期细胞由空白对照组的(36.58±1.76)%降至pshRNA-dnmt1组的(18.54±6.59)%;G2/M期细胞由空白对照组的(6.18±0.32)%升至pshRNA-dnmt1组的(18.53±1.42)%,均有显著性差异(P<0.05)。转染后24、48、72h细胞存活率分别为79.49%、51.63%和39.16%。AO/EB法、电镜和TUNEL均可见大量典型的凋亡和坏死细胞。结论:重组质粒pshRNA-dnmt1能特异有效地抑制AGS细胞内dnmt1的表达、抑制细胞增殖、促进细胞凋亡,为肿瘤的基因治疗提供依据。 展开更多
关键词 DNMT1基因 RNA干扰 胃肿瘤 AGS细胞 细胞周期 增殖 凋亡
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肝纤维化的信号转导通路 被引量:33
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作者 吴晓玲 曾维政 +1 位作者 蒋明德 王丕龙 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2006年第22期2223-2228,共6页
肝纤维化是多种慢性肝病进展至肝硬化的中间过程,其特征为以胶原蛋白为主的细胞外基质(extracellular matrix,ECM)合成与降解失衡.现有的研究表明,肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)是肝纤维化时过量ECM的主要来源,激活的HSC大... 肝纤维化是多种慢性肝病进展至肝硬化的中间过程,其特征为以胶原蛋白为主的细胞外基质(extracellular matrix,ECM)合成与降解失衡.现有的研究表明,肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)是肝纤维化时过量ECM的主要来源,激活的HSC大量增殖,发生表型改变并分泌过多的ECM沉积于肝脏是肝纤维化形成的关键.这一复杂的病理过程是多条细胞信号传导通路和一系列细胞信息分子网络共同控制的结果,转化生长因子β(transforming growth factor beta,TGFβ)等细胞因子分别通过TGFβ- Smad通路、ROCK通路、MAPK(丝裂原激活的蛋白激酶,mitogen activatecl protein kinase)通路、Rho-、PI-3K通路等众多细胞信号通路网络交互影响,共同介导肝纤维化复杂的病理生理变化.现综述参与肝纤维化的主要信号转导通路及其可能的致肝纤维化机制. 展开更多
关键词 肝纤维化 信号通路
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重组AQP9对L-02细胞脂质沉积的影响 被引量:6
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作者 王川 袁媛 +1 位作者 姜政 王丕龙 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第17期1722-1726,共5页
目的构建人水甘油通道蛋白9(aquaglyceroporin9,AQP9)重组质粒,验证其在L-02肝细胞中的表达,并检测其对非酒精性脂肪肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)细胞模型的作用。方法从人肝脏组织中提取总RNA,RT-PCR获得AQP9基因,克... 目的构建人水甘油通道蛋白9(aquaglyceroporin9,AQP9)重组质粒,验证其在L-02肝细胞中的表达,并检测其对非酒精性脂肪肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)细胞模型的作用。方法从人肝脏组织中提取总RNA,RT-PCR获得AQP9基因,克隆到载体pEGFP-N1上,构建重组质粒pEGFP-N1-AQP9。将其转染L-02细胞,通过荧光显微镜观察其转染情况,RT-PCR和Western blot检测AQP9基因在细胞中的表达。通过油红O染色,测定甘油三酯、游离脂肪酸及甘油含量,检测其对L-02细胞脂肪变性模型的作用。结果成功构建pEGFP-N1-AQP9重组质粒,并能在L-02细胞中表达,将其转染L-02细胞脂肪变性模型后,油红O染色可见油酸/pEGFP-N1-AQP9转染组较油酸组细胞内脂质含量明显升高,油酸/pEGFP-N1-AQP9转染组细胞内甘油三酯、游离脂肪酸及甘油含量分别为(5.435±0.337)、(2.016±0.144)、(1.485±0.113)mmol/L,而油酸组分别为(3.218±0.220)、(1.538±0.193)、(1.024±0.148)mmol/L,两者之间差异有统计学意义(P<0.01),说明上调AQP9表达量可使其脂肪变性程度加重。结论 AQP9异常升高能够引起或加重非酒精性脂肪肝病。 展开更多
关键词 水甘油通道蛋白9 非酒精性脂肪肝病 重组质粒 基因治疗
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表达人幽门螺杆菌外膜蛋白的穿梭质粒的构建及在耻垢分枝杆菌中的表达 被引量:5
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作者 向廷秀 谯敏 +3 位作者 姜政 陶小红 黄爱龙 王丕龙 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第20期3047-3051,共5页
目的建立表达人幽门螺杆菌外膜蛋白重组耻垢分枝杆菌疫苗株,为进一步应用重组耻垢分枝杆菌疫苗防治幽门螺杆菌感染打下基础。方法利用聚合酶链反应(Polymerasechainreaction,PCR)扩增的幽门螺杆菌的外膜蛋白528编码基因全长片段,克隆入p... 目的建立表达人幽门螺杆菌外膜蛋白重组耻垢分枝杆菌疫苗株,为进一步应用重组耻垢分枝杆菌疫苗防治幽门螺杆菌感染打下基础。方法利用聚合酶链反应(Polymerasechainreaction,PCR)扩增的幽门螺杆菌的外膜蛋白528编码基因全长片段,克隆入pET32a(+),鉴定无误后,再亚克隆入大肠杆菌-分枝杆菌穿梭质粒pLA71,构建pLA71-omp载体,将pLA71-omp电转化耻垢分枝杆菌,经卡那霉素筛选后,抽提质粒用PCR法鉴定,Westernblot检测omp的表达及活性。结果从幽门螺杆菌基因组中扩增出约528bp的基因片段。所构建重组体阳性克隆经酶切和PCR鉴定与预期结果一致,测序结果确证了插入片段的正确性,Westernblot检测说明幽门螺杆菌的外膜蛋白528编码基因在分枝杆菌中获得了表达并具有良好的免疫原性。结论成功构建了幽门螺杆菌外膜蛋白528编码基因大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达质粒。该质粒能在E.coli/MS间进行穿梭,并在耻垢分枝杆菌中表达。 展开更多
关键词 大肠杆菌-分枝杆菌穿梭质粒 幽门螺杆菌 OMP 耻垢分枝杆菌
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