基于简化基因组测序技术的油茶SNP标记开发及指纹图谱构建

【目的】基于简化基因组,挖掘油茶单核苷酸多态性(SNP)位点,筛选可用于油茶种质鉴定的简化SNP组合位点,构建SNP指纹图谱,建立一种快速准确鉴定广西油茶主栽良种苗木的SNP分子标记方法。【方法】以12个油茶无性系种质的两个重复共24份油茶标准样本为材料,采用ddRADseq流程进行文库构建,使用BWA将过滤后的测序数据比对到已发布的南荣油茶Camellia oleifera var.“Nanyongensis”参考基因组上,利用GATK进行SNP位点筛选,ANNOVAR软件进行SNP位点注释,STRUCTURE软件进行群体结果分析,使用PLINK进行主成分分析;利用R语言,使用条件随机筛选法(CRS),筛选能够区分出油茶种质的最简SNP组合,绘制指纹图谱。【结果】测序数据质量良好,可用于SNP分子标记位点的开发筛选。与参考基因组比对后,共获得622064个为SNP标记位点,其中无基因型缺失的SNP位点40147个,多态性信息含量(PIC)大于0.35的SNP位点2094个,前后60 bp碱基保守无变异的SNP位点共184个。最终筛选出可以将12个油茶无性系种质区分开的15个核心SNP标记位点组合,并以此绘制出SNP指纹图谱。【结论】基于简化基因组,建立了广西主要栽培油茶种质的SNP标记开发和指纹图谱绘制的方法,为苗期油茶种质的快速准确鉴定提供了理论依据和技术指导,助力规范油茶苗木市场,促进油茶产业健康发展。

岑溪软枝油茶果实性状的遗传变异与相关性

对6-10年生岑溪软枝油茶果实性状的遗传变异特性调查研究结果表明,果实形态主要呈球形,占78.95%,果实颜色主要有青色和黄色2种,分别占到调查总数的45.75%和29.55%;果实各经济性状的变异幅度较大,变异系数由高到低依次为：平均单果重〉平均单籽重〉平均单果籽粒数〉平均果皮厚〉平均鲜出籽率〉平均果实横径〉平均果实纵径〉平均果形指数;果实性状的变异表现为连续变异,属于数量性状遗传,而且呈正态分布规律,并具有集中性和分散性;果实性状多数指标间都呈极显著或显著相关,只有单籽重与果实横径、果形指数、果皮厚和鲜出籽率与果形指数、籽粒数的相关性不显著。

遮荫强度对油茶春季芽苗砧嫁接育苗的影响

通过4种不同遮荫强度(遮荫度实测值分别为81.6%、70.5%、50.4%、24.5%)对油茶春季芽苗砧嫁接育苗的影响试验研究。经方差分析和多重比较分析,结果表明,遮荫度为81.6%的黑色遮荫网对油茶嫁接苗的成活率、苗高、叶面积、地上部分生物量、SPAD值等生长指标表现最佳,可在油茶春季芽苗砧嫁接苗培育中推广使用。

油茶新造林套种花生试验初报

在新造林第2年的油茶林地中套种花生良种"桂花21号",从套种对油茶生长的影响、经济效益以及套种后林地的土壤肥力三个方面对油茶林套种花生的可行性进行了研究。结果表明,油茶林地套种花生未对油茶幼龄植株生长造成明显影响;每公顷油茶林地中套种0.6hm2"桂花21号",产量可达2 641.32kg,有效面积产量明显高于全国平均水平,但由于未能机械化作业导致人工成本较高,其利润仅为3 306.25元.hm-2,有效面积利润要低于全国平均水平;套种花生过程大量施入磷肥能明显改善土壤中有效磷含量,但却降低了土壤有效钾含量。油茶新造林套种花生具有一定的可行性,"桂花21号"适合用于油茶新造林内套种。

施磷水平对接种AM真菌白术植株生长和生理特征的影响

以非灭菌土为生长基质,采用盆栽实验研究了不同施磷水平下接种摩西球囊霉（Glomus mosseae）对白术生长和生理特征的影响。结果表明,摩西球囊霉能够与白术形成良好的共生关系,在0-0.4 g P/kg土水平时,接种摩西球囊霉可显著提高白术根系菌根侵染率,并以0.05 g P/kg土水平时侵染率最大,磷水平继续提高则菌根侵染率反而降低;接种摩西球囊霉对白术地下部的影响效果尤为明显,其根长、株高、地下部干重均在0.1 g P/kg水平时达到最大值;适量施磷条件下,接种摩西球囊霉可显著提高植株可溶性糖和可溶性蛋白含量,有效增强保护酶SOD、POD和CAT活性。研究发现,当施磷量为0.05-0.1 g/kg土时,摩西球囊霉接种效果最佳,对白术的生长最为有利。

香花油茶种质资源评价与筛选

为了选育出香花油茶优良品系,对定植于广西壮族自治区林业科学研究院油茶种质资源收集圃的39株5年生香花油茶的生长情况及果实性状进行了调查与分析。结果表明:香花油茶具有速生性和早实性,是非常有潜力的油料树种;各单株果实产量的变异度大,其单果质量、果高、果径、果皮厚、籽粒数、鲜籽质量间均存在极显著差异。参照小果油茶选出优标准,文中初选了31号等9个优株。

油茶F1代苗期叶表型性状遗传多样性研究

探索油茶(Camellia oleifera)杂交F1代叶表型性状的遗传变异特征,为杂交后代早期选择提供依据,以"岑软24号×湘林210"杂交F1代的62个单株为试验材料,对其叶表型性状多样性进行研究。结果表明:1)14个性状的变异系数为2.21%～37.50%,其中叶面积的变异系数最小,仅为2.21%,而叶片鲜重、干重和饱和鲜重的变异系数均较大,分别为35.42%、37.50%和36.84%;2)各性状均具有较好的连续性正态分布趋势;3)14个性状在F1代的中亲优势率为-16.60%～44.66%,超亲优势率为-21.05%～38.06%,其中10个性状的中亲优势值为正值,且遗传传递力都超过100%,叶面积、叶周长、叶长和叶片干物质含量这4个性状的超亲优势值为正值;4)91对相关性分析中有65对达到极显著水平,8对达到显著水平;5)系统聚类将F1代的62个单株分为2个类群、4个亚类,聚类结果充分反映了各类群的特征。

岑溪软枝油茶全同胞家系遗传变异分析

以岑溪软枝油茶全同胞家系子代测试林为研究对象,进行果实经济性状遗传变异分析,结果表明:岑溪软枝油茶全同胞家系子代果实性状变异比较丰富,尤其是单果重、鲜籽数和单粒籽重3个指标,其变异系数分别为24.58%、33.14%和35.15%,为选择果大、籽粒重的油茶优良品系提供了物质基础;全同胞家系子代的单果鲜籽数和单粒籽重在各家系间均存在极显著差异,单果重和鲜出籽率在各家系间差异显著;单果重、单果鲜籽数、单粒籽重和鲜出籽率等4个主要性状指标具有较高的遗传强度,其家系遗传力都在0.50以上。分析岑溪软枝油茶同胞优良家系的遗传变异,对下一步岑溪软枝油茶优良单株的评选以及高世代改良都具有重要意义。

4个油茶无性系耐热、耐寒性研究

[目的]研究鉴定引种到南宁的4个油茶无性系的耐热、耐寒性。[方法]取4个油茶无性系的成熟叶片,分别进行0、-2、-4、-6、-8、-10、-12、-14、-16℃低温处理和30、35、40、45、50、55、60、65、70℃高温处理,用电导法配合Logistic方程,求得拐点温度(LT50),即半致死温度。[结果]在低温处理过程中,4个油茶无性系的相对电导率均随温度的降低而持续上升,基本呈"S"型;其半致死温度在-10.7～-13.3℃,耐寒性从强到弱依次为:长林4号﹥长林166号﹥长林55号﹥湘林86号。在高温处理过程中,4个油茶无性系的相对电导率均随温度的升高呈"S"型升高;其半致死温度在52.0～55.2℃,耐热性从强到弱依次为:长林166号>湘林86号>长林55号>长林4号。[结论]研究结果为油茶品系的早期鉴定、引种栽培提供了理论依据。

舒适护理在断指再植护理中的运用分析

目的:探究断指再植的患者在治疗中给予舒适护理的方法和效果。方法:选取收治的57例断指再植的患者给予治疗和护理,随机分组,试验组33例患者采取舒适护理的模式,对照组24例患者仅接受常规护理,对患者的手术效果和术后并发症情况进行观察和评价。结果:试验组护理满意度为96.97%,对照组护理的满意度为75.0%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:断指再植患者在治疗中采取舒适护理,可以使手术的成功率得到提高,减少患者的疼痛,使身体和心理上都得到一定程度的放松。

岑溪软枝油茶全同胞家系子代优良无性系选育

以岑溪软枝油茶(Cenxi soft-branch Camellia oleifera)全同胞家系林中初选的25株优良单株为材料,开展无性系测定试验,选育出岑软ZJ11、岑软ZJ14和岑软ZJ24三个油茶优良无性系。通过对三个无性系进行主要农艺性状遗传分析和产量差异比较,结果表明:无性系的鲜出籽率、干出籽率、种仁含油率和果油率的遗传力估计值h2分别为0.986、0.978、0.998和0.980,均接近1.0,表现出较高的遗传力。4~7年生平均产量、果油率在各无性系间均存在显著差异。选育出的3个无性系的早期产量和主要农艺性状均超过或优于对照良种岑软2号和岑软3号,其中每公顷产油量的对照遗传增益分别为4.72%~13.91%和5.49%~14.77%,果油率的对照遗传增益分别为13.15%~23.33%和7.81%~17.50%。

TIMP3对鸡前脂肪细胞增殖与分化的影响

实验旨在为探讨组织金属蛋白酶抑制剂3(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase 3,TIMP3)对鸡前脂肪细胞增殖与分化的影响。以qRT-PCR技术检测TIMP3在30周龄固始鸡不同组织和2周龄固始鸡胸肌脂肪细胞不同分化时期中的表达情况,通过脂质体转染法在肌内前脂肪细胞中过表达和干扰TIMP3,利用5-乙炔基-2'-脱氧尿苷、Cell Counting Kit-8法、油红O染色法、qRT-PCR技术检测TIMP3对脂肪细胞的增殖和分化的影响。结果表明:TIMP3在不同组织和不同发育阶段的表达存在差异,TIMP3在固始鸡胸肌中表达量最高,在不同分化时期的胸肌脂肪细胞中的表达量先升高后下降,在第4天最高;在鸡肌内前脂肪细胞中过表达TIMP3后,细胞显著增殖且存活率上升(P<0.05),细胞内脂滴增加(P<0.001),脂肪细胞分化标志基因脂肪酸合成酶(Fatty Acid Synthase,FASN)、过氧化物酶体增殖物激活受体-a(Peroxisome ProliferatorActivated Receptor-Alpha,PPARa)上调(P<0.001);干扰TIMP3的检测结果则相反。由此可见,TIMP3能促进鸡前脂肪细胞的增殖和脂肪细胞的分化,参与鸡脂肪沉积过程。

丛枝菌根对油茶幼苗生长和氮磷吸收的影响

通过非灭菌土盆栽接种试验,观察了Glomus versiforme(GV)和Glomus mosseae(GM)两种AM真菌对油茶幼苗生长和氮磷吸收的影响,结果表明丛枝菌根的形成对油茶幼苗的生长以及氮磷的吸收均有影响。在接种后7个月时,GV和GM均可显著提高油茶的菌根侵染率,分别为56.5%和72.4%,比对照分别提高了80.5%和131.3%;GV对植株苗高和地径的影响与对照株相比未见差异,但却极大地增加了根系的干物质量,接种GM显著增加了植株高度和茎粗,对地上部分和根系的干物质量都有显著的促进作用;两种真菌均降低了油茶幼苗全株的氮含量,对全株的磷含量有一定程度提高,GV显著提高了油茶幼苗根部的氮含量,而降低了幼苗茎、叶中的氮含量;接种GM和GV均增加了根、茎中的磷含量,而降低了叶片中的磷含量。

基于优良农艺性状的岑溪软枝油茶不同世代优树筛选

通过岑溪软枝油茶(Cenxi soft-branch Camellia oleifera)一代和二代优树筛选,选出优良单株98株,其中特优株36株,并采用主成分分析对36个特优株进行综合评价。结果表明:在单果重、鲜出籽率和果油率3个主要性状指标上,2代优树显著优于1代优树,分别提高了21.01%、7.11%和5.11%,且2代优树中特优株的比例高达47.06%,能选育出优质良种的几率更大。鲜出籽率与干出籽率、果油率与干出籽率以及果油率与干出仁率均存在极显著的正相关关系。前3个主成分的累计贡献率达到77.90%,对3个主成分进行加权综合,得出各特优树的综合得分,其中jp2排名第一。

丛枝菌根对油桐幼苗生长和氮磷吸收的影响

通过非灭菌土盆栽接种试验,观察了Glomus mosseae(GM)、G.intraradices(GI)、G.aggregatum(GA)和G.atunicatum(GE)4种AM真菌对油桐幼苗生长和氮磷吸收的影响,结果表明接种GM、GI和GE后菌根侵染率显著提高,侵染率分别为77.4%、92.3%和96.7%,比对照分别提高20.4%、43.5%、50.4%。接种GA与对照无显著差异;接种GM和GI后植株的干质量增加,而接种GA和GE对全株及各器官干质量影响不明显;接种4种真菌对油桐幼苗的氮素营养影响不大;接种GM、GI和GE显著提高了根部磷含量。综合考虑,接种GM效果最好。

岑溪软枝油茶籽成熟过程中营养物质含量变化和萌发能力研究

以岑溪软枝油茶优良无性系‘岑软2号’为试验对象,从油茶籽仁发育初期持续取样至油茶籽大部分自然脱落,研究油茶籽在成熟过程中主要营养物质含量的动态变化,并分析其与种子萌发率之间的关系。结果表明:随着油茶籽的发育,种仁含水量均匀下降,脂肪含量不断上升,蛋白质含量呈先升后降再升的变化趋势,总糖和淀粉含量不断下降;油茶籽成熟过程中种仁含油率与总糖含量呈极显著负相关,与淀粉含量呈显著负相关,但与蛋白质含量正相关不显著;种子萌发率与种仁含油率呈极显著正相关,与总糖呈极显著负相关,与淀粉和蛋白质的相关性不显著;在本调查区域,针对油茶栽培生产,11月中旬至12月中旬采收最佳;针对育苗生产,10月中旬即可采收。

喷施外源物质对油茶采穗圃穗条生长的影响

研究了不同植物生长调节剂和叶面肥等外源物质对油茶采穗圃穗条生长的影响。结果表明：处理8（萘乙酸2000mg／L）和处理10（生命素400倍液）的穗条木质化程度显著高于对照；不同处理对油茶采穗圃穗条质量和产量的影响有显著差异，其中，处理1-处理3（喷施赤霉素500～1500mg／L）效果最好，其穗条的长度、粗度等质量指标均显著高于对照及其他处理，而且穗条节间距适度合理、利用率高，能有效提高穗条产量；除穗芽数与节问距呈负相关，且未达到显著水平外，其他指标间的相关性均达到显著或极显著水平，且均呈正相关。

AM真菌对油茶生长和抗旱性的影响

AM(Arbuscular mycorrhiza)真菌能够促进植物生长,提高植物的抗逆性。AM真菌对油茶生长和抗旱性的影响的研究表明:接种AM真菌促进了油茶生长,改善了油茶叶片水分状况,增强了叶片细胞质膜的稳定性,使可溶性糖含量增加。

岑溪软枝油茶无性系苗期速生性评价

选择岑溪软枝油茶半同胞子代的优株采集接穗,以香花油茶(Camellia osmantha)1年生实生苗为砧木建立无性系,进行苗期速生性试验测定。结果表明:苗高和地径在无性系间均达到了极显著差异(P=0.01),而叶片数差异不大;苗高和地径的重复力分别为0.809和0.703,受遗传控制程度高,叶片数的重复力仅为0.444,受遗传控制程度较低;以苗高、地径和叶片数为指标,采用加权系数法进行综合评价,按10%的入选率,筛选出54号速生无性系,其苗高、地径和叶片数的遗传增益分别为12.31%、11.01%和1.38%。由此可见,从苗期生长性状角度,进行岑溪软枝油茶无性系速生性早期选育是可行的。

岑溪软枝油茶油脂积累过程产量性状动态分析

以岑溪软枝油茶优良无性系岑软2号为材料,研究果实油脂积累过程中主要产量性状的动态变化,并分析其相关性。结果表明:在整个测定周期内,鲜出籽率无显著变化;干籽出仁率在9月20日之后快速上升,10月25日之后速度逐渐减慢,11月15日之后达到最高水平;种仁含油率和干出籽率均呈上升趋势,10月25日前上升幅度较大,此后速度减慢,并在11月8日之后达到最高水平;果油率9月27日前缓慢升高,之后进入积累高峰期,11月8日后达到最高水平。果油率、干出籽率、干籽出仁率和种仁含油率4个性状指标,两两之间均呈极显著正相关,鲜出籽率仅与干出籽率呈极显著正相关。建立了以果油率为因变量,干出籽率、干籽出仁率和种仁含油率为自变量的回归模型:y=-6.402+0.225x1+0.104x2+0.025x3,3个自变量的重要程度为干出籽率>干籽出仁率>种仁含油率。在广西不同生态区域,针对岑溪软枝油茶栽培品种,11月中旬至12月上旬为果实的适宜采收期。