梅毒抗体酶联免疫吸附试验S/CO比值与TPPA结果的相关性研究

目的探讨梅毒抗体ELISA试验的"灰区"设定值和确证试验阳性预测阈值的制定策略,建立输血系统梅毒筛检和确证程序。方法采用2种国产梅毒抗体ELISA试剂对本中心无偿献血者标本进行初复检测,收集抗梅毒抗体ELISA测定为阳性反应的献血者血清标本进行梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)确认试验,并进行统计学分析。结果无偿献血者中梅毒抗体ELISA试验可疑阳性反应率为2.26‰(116/51 207),确证试验阳性率为1.23‰(63/51 207),确证试验阳性有1份标本的S/CO值在"灰区"范围内。万泰试剂可预测确证试验阳性的S/CO阈值是1.61,预测率为98.3%,丽珠试剂可预测确证试验阳性的S/CO阈值是1.85,预测率为96.5%。结论 "灰区"的设定可有效降低输血传播梅毒的风险。梅毒抗体酶联免疫吸附试验S/CO值的高低和确证试验分级结果存在正相关性。

6σ标准在临床生化质量管理中的应用

目的应用6σ标准分析临床生化检验质控数据,评价常规检验项目的方法性能,改进检验质量。方法收集2012年度临床生化检验项目室内质量控制及室间质量评价数据;按照美国临床实验室改进修正法案中允许总误差(TEa)标准,采用公式σ=(TEa-Bias)/CV%,计算各检验项目的总分析性能σ值,联合方法性能决定图,评价分析性能,设计最佳室内质量控制方案,提出并实施改进措施。结果全部22个常规生化检测项目平均西格玛值2.83,其中12个质量水平大于3σ,其余10个项目均小于3σ,存在较严重的质量缺陷,采取质量改进措施后σ值明显提高。结论 6σ质量标准的应用,有助于了解和提高临床生化检验质量水平,是一项有效的实验室质量管理工具。

FDP和D-二聚体在急性脑梗塞和深静脉血栓中的诊断价值

目的探讨FDP和D-二聚体在急性脑梗塞和深静脉血栓中的诊断价值。方法回顾性分析急性脑梗塞患者295例、深静脉血栓患者84例和正常对照组300例的血浆FDP和D-二聚体水平,并进行统计分析。结果急性脑梗塞组和深静脉血栓组与对照组的血浆D-二聚体、FDP水平经方差分析,差异均有统计学意义存在显著差异(P<0.01),深静脉血栓组较之急性脑梗塞组水平明显升高,经统计分析差异有统计学意义存在显著差异(P<0.01),FDP和D-二聚体在对急性脑梗塞中的诊断敏感性分别为21.5%和36.2%,在对深静脉血栓中的诊断敏感性为44.1%和64.2%;二者在对急性脑梗塞中的阴性预测价值分别为48.8%和53.8%,而对在深静脉血栓中的阴性预测价值为86.1%和90.4%,ROC曲线分析表明二者在对急性脑梗塞和深静脉血栓中具有一定的诊断价值。结论血浆标志物FDP和D-二聚体可作为急性血管栓塞性疾病的辅助诊断指标,特别是在对深静脉血栓中的阴性排除价值较大。

驱动蛋白Eg5及其靶向治疗药物的抗肿瘤机制

Eg5又名Kif11(kinesin family member 11)是驱动蛋白家族成员之一,在增殖组织细胞中高表达,定位于有丝分裂期的微管,主要与细胞分裂中染色体的定位、中心体的分离以及双极纺锤体的形成和分离有关。Eg5是近年来研究较多的一种驱动蛋白分子,已开发出抑制其活性的肿瘤靶向治疗药物。该文介绍Eg5生物学特性、其抑制物在肿瘤靶向治疗中作用及与疾病关系等方面的最新研究进展。

合肥地区无偿献血者丙型肝炎病毒区段抗体表达模式分析

目的探讨无偿献血者丙型肝炎病毒(HCV)各区段抗体表达规律及模式,为明确各区段抗体在疾病诊断及预后分析中的可能价值提供依据。方法采用一种国产HCV抗体酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂对34 609例无偿献血者的187份HCV抗体阳性反应标本进行复检,复检阳性标本均进行重组免疫印迹(RIBA)确证试验,并对结果进行统计学分析。结果无偿献血者中HCV抗体ELISA初筛阳性反应率为5.40‰,RIBA复检结果显示阳性率为0.69‰,不确定比率为0.78‰,ELISA假阳性率为3.92‰,S/Co比值与RIBA试验结果呈正相关性;阳性结果中以抗Core阴性、抗NS3-1阴性、抗NS3-2阳性、抗NS4阳性、抗NS5阴性模式出现频率最高,NS4区段抗体检出率最高,为95.8%,而NS3-2区段抗体检出率则为87.5%;不确定结果中,以抗NS3-2出现频率最高,为66.7%,其次为抗NS4区段,不确定结果中仅见2份抗Core抗体阳性,未见NS5区段抗体的检出。结论采用RIBA试验作为HCV感染的诊断标准,本地区献血者人群中HCV感染率为0.69‰。抗NS3-2和NS4抗体可以作为早期诊断指标,证实NS5区段抗体在无偿献血的感染HCV患者的标本中检出频率较低。

S-Trityl-L-Cysteine诱导HL-60细胞有丝分裂阻滞和凋亡

目的研究S-三苯甲基-L-半胱氨酸(S-Trityl-L-Cysteine,STLC)对急性白血病HL-60细胞有丝分裂阻滞和凋亡的影响,初步探讨药物作用下HL-60细胞有丝分裂阻滞和凋亡间的因果关系。方法将HL-60细胞分成不加药对照组和不同剂量(1、2.5、5、10、50、100μmol/L)STLC加药组,药物作用一定时间后,台盼蓝染色观察HL-60细胞活性变化,MTT法检测其对HL-60细胞的抑制效应,免疫荧光染色观察细胞及其核的特征,流式细胞术分析细胞周期和亚二倍体峰的变化,Annexin-v/PI双染检测药物处理前后正常骨髓细胞凋亡比率。结果MTT和台盼蓝染色实验显示STLC抑制HL-60细胞生长并致其死亡;免疫荧光染色见核破裂及凋亡小体和细胞体积增大等典型有丝分裂灾变细胞凋亡现象;细胞周期和凋亡分析表明STLC致HL-60细胞凋亡比率与药物浓度和作用时间呈正相关,致G2/M期阻滞比率24h和48h随药物浓度增加而升高,而72h无明显变化,进一步研究发现STLC处理早期即可致G2/M期有丝分裂阻滞和凋亡的同时发生,撤除药物作用后有丝分裂阻滞呈可逆性恢复,STLC作用下正常骨髓细胞凋亡比率无明显变化。结论STLC诱导HL-60细胞阻滞在G2/M期并致其凋亡,显示较强的抗有丝分裂和抗肿瘤效果,药物处理早期有丝分裂阻滞和凋亡同时发生提示尚有该药物作用新机制的存在。

EG5和BCR/ABL在慢性粒细胞白血病中表达及其临床意义

目的观察驱动蛋白EG5 mRNA在正常人外周血和骨髓中的表达情况,探讨其在各期慢性粒细胞白血病(CML)中的表达及与BCR/ABL mRNA表达的相关性,评估EG5 mRNA在CML诊断和预后分析中的应用价值。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测EG5 mRNA和筑巢式逆转录聚合酶链反应(Nested-RT-PCR)检测BCR/ABL mR-NA,分别对8例正常人外周血及骨髓样本和62例CML患者的外周血样本进行检测。结果正常外周血标本中未检测到EG5的表达,正常骨髓标本中可见EG5的低丰度表达;EG5辅助诊断CML的敏感度和特异性分别为89.6%(26/29)和84.8%(28/33);BCR/ABL融合基因诊断CML的敏感度和特异性分别为96.5%(28/29)和90.9%(30/33);CML中EG5和BCR/ABL表达的差异无统计学意义,且两者之间呈高度正相关。结论EG5和BCR/ABL在慢性粒细胞白血病疾病进展中的表达情况基本一致,EG5和BCR/ABL的联合检测及动态观察,可作为CML临床辅助诊断、疗效和预后判断的指标之一。

基于细胞培养的丙型肝炎病毒体外感染系统研究进展

近年来基于细胞培养的丙型肝炎病毒体外感染系统研究取得了突破性进展,促进人们对HCV生物学特性及其发病机制的全面认识,加速抗丙型肝炎药物及疫苗的研发步伐。本文就HCV发现以来的体外感染系统研究进展进行综述。

6027例孕产妇及新生儿TORCH检测结果分析

目的分析6 027例孕产妇及新生儿TORCH病原体感染情况。方法采用酶联免疫分析法对6 027例孕产妇及新生儿人群进行TORCH-IgM和TORCH-IgG检测。结果受检人群中单纯疱疹病毒(HSV)Ⅰ、HSVⅡ、风疹病毒(RV)、弓形虫(TOXO)、巨细胞病毒(CMV)IgM阳性率分别为0.02%、0.02%、0.12%、0.12%和0.20%;受检人群中HSVⅠ、HSVⅡ、RV、TOXO、CMV IgG阳性率分别为63.32%、13.31%、52.83%、12.68%和58.57%。新生儿CMV-IgM阳性率高于孕产妇,差异有统计学意义(P<0.05),共检出10例新生儿CMV急性感染患者。结论孕产妇和新生儿TORCH筛查有助于围产期感染性疾病的检出。

临床用血前交叉配血不合104例原因分析

目的分析总结临床输血中遇到的疑难交叉配血病例,探讨输血前交叉配血不合的原因,使临床输血更加的科学、安全、有效。方法回顾性分析合肥市不同医院送到本站进行用血前疑难交叉配血病例104例,疑难交叉配血采用盐水法、MP法和抗人球蛋白法等方法检测。结果 104例疑难交叉配血标本中,ABO血型正、反定型不符1例,受血者不规则抗体阳性28例,冷凝集素凝集5例,红细胞直接抗人球蛋白试验阳性43例。104例疑难交叉配血结果为,盐水法交叉配血主/次出现凝集13例,聚凝胺法交叉配血主/次侧出现凝集34例,抗人球蛋白法交叉配血主/次侧出现凝集44例。结论交叉配血不合的原因主要有:缗钱状假凝集,冷凝集素所致非特异性凝集,红细胞被致敏引起的凝集,不规则抗体引起的凝集等。临床用血前交叉配血应选择能同时检测完全抗体和不完全抗体的方法,确保患者输血安全。

血清TSH,TPOAb和TGAb水平在良恶性甲状腺结节中的鉴别诊断价值

目的研究促甲状腺激素(thyroid stimulating horomone,TSH)和甲状腺自身抗体(TPOAb,TGAb)在良恶性甲状腺结节中的鉴别诊断价值。方法采用回顾性调查研究方法,收集中国人民解放军联勤保障部队第九○一医院2013年3月~2018年9月期间因甲状腺结节行手术治疗且经病理证实的500例临床资料,其中分化型甲状腺癌(differentiated thyroid carcinoma,DTC)152例,甲状腺腺瘤(thyroid adenoma,TA)232例,结节性甲状腺肿(nodular goiter,NG)116例,并对检测结果进行统计分析。结果DTC组的TSH,TPOAb和TGAb水平显著高于TA组和NG组,经单因素方差分析,差异有统计学意义(F=4.120,4.636,6.638;P=0.016,0.01,0.001)。TSH在DTC组与良性甲状腺疾病的阳性率无差别,TPOAb在DTC组的阳性率为30.2%,而在TA组和NG组的阳性率分别为12.5%和13.7%,差异有统计学意义(χ^2=21.43,P<0.01)。DTC组的TGAb阳性率为26.9%,而TA和NG组的阳性率分别为15.5%和12.0%,差异有统计学意义(χ^2=11.91,P=0.002)。转移性DTC和未转移性DTC组的TSH,TPOAb和TGAb,经t检验统计分析,差异无统计学意义(t=1.976,1.974,1.973;P=0.572,0.574,0.577)。TPOAb和TGAb在鉴别DTC和TA的曲线下面积分别是0.612和0.610。TPOAb和TGAb在鉴别DTC和NG的曲线下面积分别是0.577和0.620。TGAb在最佳临界点诊断DTC的敏感度为73.7%,特异度为52.6%。结论TSH浓度和甲状腺自身抗体水平升高与DTC的发病有一定的相关关系,TGAb在甲状腺癌和甲状腺良性结节的鉴别诊断中具有一定价值。

83例疑难ABO血型鉴定及分析

目的检测和鉴定ABO疑难血型,为安全输血提供质量保障。方法采用血型血清学方法进行盐水介质正、反定型;对盐水介质正、反定型不合者使用聚凝胺法检测和不规则抗体检测;采用吸收试验和放散试验进行ABO血型的检测,以准确鉴定ABO疑难血型。结果 83例标本ABO血型检测结果为,AB亚型9例、B亚型1例、弱A抗原7例、弱B抗原6例、低抗-A效价2例、低抗-B效价3例、不规则抗体阳性7例、无抗体O型4例、低抗-B效价O型2例、无抗-B抗体A型5例;37例标本经盐水介质和Polybrine法检测,正、反定型结果符合。结论用聚凝胺法、吸收试验和放散试验进行ABO疑难血型检测,能准确、及时鉴定ABO疑难血型。

无偿献血者HIV-1抗体蛋白印迹确认与核酸检测结果分析

目的对酶联免疫检测HIV抗体呈反应性标本进行蛋白印迹(WB法)确认和TMA-化学发光法对照检测,以探讨其应用特点。方法将本中心检验科ELISA法检测结果呈HIV抗体反应性的117份标本,重新进行ELISA法检测,结果为S/CO>0.8的标本做蛋白印迹(WB法)确认试验。同时,对117份标本采用TMA-化学发光法检测核酸作为对照试验。血清学检测参加国家CDC及澳大利亚(CITIC)室间质评;核酸检测参加卫生部临检中心和澳大利亚(CITIC)室间质评。结果 ELISA初筛试验:117份标本中,S/CO>1的为37份;0.8<S/CO<1的为11份,S/CO<0.8的为69份;抗体确认试验:HIV抗体确认阳性7份,不确定4份,HIV抗体确认阴性106份;核酸检测试验:117份标本中11份检出HIV RNA阳性,106份标本为HIV RNA阴性。结论 ELISA方法检测HIV抗体存在一定的假阳性;HIV蛋白印迹确认试验存在一些不确定结果,对于只有gp160/120、P17、P24的抗体不确定标本,可以采用核酸检测方法辅助确认。

乙肝病毒基因组序列扩增的条件优化和结果分析

目的优化乙型肝炎病毒(HBV)不同长度基因片段PCR扩增条件,为后续机制研究提供实验基础。方法运用PCR或巢式PCR(Nested PCR)方法扩增6例临床乙肝患者HBV DNA,针对特异性目的片段,通过优化Mg2+浓度、引物浓度、Taq酶用量、DMSO浓度等,获得特异性扩增条带,PCR产物直接测序并使用CHROMAS、MEGA等生物学软件进行结果分析。结果通过综合分析各种实验条件对PCR扩增结果的影响,最终确认在50μL扩增体系中,2.5 mmol/L Mg2+、200 nmol/L特异性引物、1.5 U Taq酶、56℃退火在本实验室可获得良好的扩增效果,适量二甲基亚砜(DMSO)可减少非特异性干扰,同时建议对短片段可酌量减少Taq酶使用量。生物信息学分析示6例HBV感染标本中1例为B基因型,5例为C基因型,共发现S基因21个核酸变异及9个氨基酸可改变。结论建立了适合本实验室的HBV DNA扩增体系以及后续生物信息学分析方法,明确了不同的扩增体系条件对PCR扩增效果具有重要影响。

某三甲医院临床用血合理性调查及改进结果分析

目的了解近一年来解放军105医院临床用血状况,分析不合理用血的原因,提出临床科学合理用血水平策略。方法采用输血管理软件统计该院2013年10月至2014年10月有关科室用血情况,查阅统计时间段内各科输血病历,依据临床输血合理性调查标准,对输血状况进行评估,提出改进措施,分析改进效果。结果 2013年10月至2014年10月该院2 626份输血病历记录总用血量为15 358U,红细胞用量占比43.2%,血浆用量占比38.7%,血小板用量占比16.0%,冷沉淀输血量占比为2.1%。2013年10月至2014年3月该院临床用血合理输注率为红细胞83.7%、血浆83.5%、血小板96.2%、冷沉淀94.6%,其中外科红细胞不合理输注率20.9%,感染科血浆不合理输注率26.0%。2014年4-10月该院临床用血合理输注率为红细胞90.4%、血浆90.1%、血小板96.5%、冷沉淀100.0%,其中外科红细胞不合理输注率10.9%,内科血浆不合理输注率11.0%。结论临床科室不合理用血问题突出,经过增加医学培训、加强临床沟通及完善临床用血管理,该院临床用血不合理输注明显降低。

安徽省采供血机构输血传染病检测筛查实验室能力验证质量分析

目的总结2011—2013年安徽省采供血机构输血传染病检测筛查实验室能力验证经验，进一步提高安徽省采供血系统血液筛查能力和质量管理水平。方法省内共有31家采供血机构报名参加活动，考评项目：乙肝表面抗原（HBsAg）、丙型肝炎病毒抗体（抗-HCV）、人类免疫缺陷病毒抗体（抗-HIV）、梅毒螺旋体抗体（TP）血清学检测。每次分发考评样品前，组织召开培训会议。将参评实验室的定性检测结果与预期结果进行比较，并对使用相同试剂（n≥3）实验室的检测结果进行定量分析。对已开展的3次能力验证活动分别从使用试剂、仪器以及结果反馈方面进行分析和总结。结果参评实验室共使用10家公司的试剂，其中多为国产试剂，进口试剂使用较少。各地市中心血站全部使用全自动前加样及后处理设备或全自动一体机等检测仪器，单采浆站则使用的是洗板机和酶标仪。大部分实验室经过3次的能力验证活动实验室定性结果均与预期结果相一致；部分参评实验室虽然定性结果正确，但定量结果出现离群现象。结论安徽省采供血机构输血传染病检测筛查实验室能力验证项目运作比较成功。通过能力验证报告的回馈，各参评实验室可以针对存在问题，采取相应整改措施，促进血液检测水平的提高。

发现RhD阴性无效等位基因1例

目的鉴定1例疑似新的RHD无效等位基因引起的RhD阴性个体的分子背景。方法采用血清学吸收放散试验以及序列特异性引物PCR(PCR-SSP)法检测RhD阴性样本,对1例真实D阴性且存在RHD基因全长编码序列的个体,通过基因测序法进行分析鉴定。结果该例样本血清学表型为RhCcdee,其RHD基因第615-616位存在CA两个碱基缺失(RHD615-616delCA),由于框移突变造成第316位氨基酸时形成终止密码子。该基因序列已提交至Genbank,登录号为GQ289585。结论使用基因序列分析法鉴定出1例新的RHD无效等位基因。

尿微量白蛋白、血清胱抑素C和血清同型半胱氨酸联合检测在早期高血压肾病的诊断价值

目的探讨尿微量白蛋白(U-m Alb)、血清胱抑素C(cystatin C,Cys C)和血清同型半胱氨酸(Hcy)3项指标联合检测在高血压肾病早期的诊断价值。方法对50例高血压肾病患者(高血压肾病组)、67例高血压无明确肾病患者(高血压无明确肾病组)和44例该院同期健康体检合格者(对照组)分别检测Cys C、U-m Alb和Hcy水平,使用SPSS 17.0对结果进行分析。结果高血压肾病组Cys C、U-m Alb和Hcy水平均显著地高于高血压无明确肾病组和对照组,差异有统计学意义(P<0.01);高血压无明确肾病组也明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。3项联合检测能显著提高高血压肾病患者早期的诊断敏感性。结论 U-m Alb、Cys C和Hcy在高血压肾病早期显著增高,可作为早期诊断高血压肾病敏感的指标,联合检测对于监测早期高血压肾病的发生和病情发展有重要临床价值。