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重组猪α干扰素急性毒性研究 被引量:1
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作者 王兴满 赵俊 +6 位作者 李京培 刘伯玉 汤仁树 俞海洋 胡勇 王燕来 王明丽 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第33期16386-16388,共3页
[目的]研究小白鼠体内重组猪α干扰素急性毒性反应,为临床安全用药提供依据。[方法]依据急性毒性实验原则,将小白鼠分为2大组:腹腔注射组和肌肉注射组,每组又分高、中、低3个剂量组,同时设正常对照组。给药后14d内连续观察小鼠行为活动... [目的]研究小白鼠体内重组猪α干扰素急性毒性反应,为临床安全用药提供依据。[方法]依据急性毒性实验原则,将小白鼠分为2大组:腹腔注射组和肌肉注射组,每组又分高、中、低3个剂量组,同时设正常对照组。给药后14d内连续观察小鼠行为活动等指标和毒性反应程度,取血作血液学检查和生化检查,以获得重组猪α干扰素初步毒性资料,并在实验结束时处死小白鼠进行剖检。[结果]各组小鼠外部表现及行为特征均正常,体温和体重的变化也在正常范围之内,内脏病理解剖无器官病变情况,血液、生化指标与正常对照组无明显差异。[结论]该实验设定的猪α干扰素最高剂量(5.0×105IU/只)及其以下剂量,均对小白鼠无明显毒性作用,在临床上应用重组猪α干扰素是安全的。 展开更多
关键词 重组猪Α干扰素 急性毒性 小白鼠
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HCMV pp65在原核细胞中的表达、纯化及其抗血清的制备 被引量:1
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作者 王兴满 吴琼 +3 位作者 汤仁树 甘霖 赵俊 王明丽 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2010年第6期737-739,共3页
目的采用原核表达系统获得HCMV pp65目的蛋白,免疫家兔制备该蛋白特异性抗血清。方法构建表达GST-HCMV pp65融合蛋白的质粒,在大肠杆菌中诱导表达,经GST亲和层析纯化后的pp65蛋白免疫家兔,获得兔多克隆抗血清。采用ELISA、SDS-PAGE电泳... 目的采用原核表达系统获得HCMV pp65目的蛋白,免疫家兔制备该蛋白特异性抗血清。方法构建表达GST-HCMV pp65融合蛋白的质粒,在大肠杆菌中诱导表达,经GST亲和层析纯化后的pp65蛋白免疫家兔,获得兔多克隆抗血清。采用ELISA、SDS-PAGE电泳及Western blot检测纯化后的蛋白,并以间接免疫荧光染色法检测鉴定该蛋白的抗原性。结果成功构建PGEX-5X-pp65重组质粒,转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,获得可溶性的融合蛋白;GST亲和层析纯化后的蛋白免疫家兔获得特异性抗血清。结论在原核细胞中成功获得了融合蛋白pp65,免疫家兔后获得具有高度特异性抗血清。为进一步揭示该蛋白的功能及作用机制奠定了重要基础。 展开更多
关键词 原核细胞 免疫血清
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两种细胞株滴定重组猪α干扰素效价的比较研究 被引量:1
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作者 王兴满 汤仁树 +2 位作者 俞海洋 赵俊 王明丽 《现代农业科技》 2009年第24期290-292,297,共4页
采用水泡性口炎病毒(VSV)作为攻击病毒,以微量细胞病变抑制法对同批次不同浓度的8组重组猪α干扰素(rPoIFN-α)样品进行了效价检测,以中国药品生物制品检定所指定使用的标化重组人α干扰素为效价滴定的参比标准,对在牛肾细胞(MDBK)株和... 采用水泡性口炎病毒(VSV)作为攻击病毒,以微量细胞病变抑制法对同批次不同浓度的8组重组猪α干扰素(rPoIFN-α)样品进行了效价检测,以中国药品生物制品检定所指定使用的标化重组人α干扰素为效价滴定的参比标准,对在牛肾细胞(MDBK)株和人喉癌上皮细胞(HEp-2)株所得结果进行比较,并对细胞与待测样品按"一步法"和先加细胞,待细胞长满单层再加待测样品的"两步法"所得的rPoIFN-α抗病毒效价进行比较。结果表明:MDBK细胞株与HEp-2细胞株对于rPoIFN-α抗病毒活性检测结果无显著性差异,均可用于rPoIFN-α抗病毒活性的检测,重组人α干扰素滴定系统可用于rPoIFN-α效价检测。两种加样方法所得结果基本相同,推荐使用"一步法"。 展开更多
关键词 重组猪Α干扰素 效价 MDBK细胞 HEP-2细胞
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Acute Toxicity of Recombinant Porcine Interferon-alpha
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作者 王兴满 赵俊 +6 位作者 李京培 刘伯玉 汤仁树 俞海洋 胡勇 王燕来 王明丽 《Animal Husbandry and Feed Science》 CAS 2009年第4期38-40,46,共4页
To observe the acute toxicity of recombinant porcine interferen-alpha (IFN-alpha) in mice and thus provide a basis for the clinical safety. [Method] According to the principles of acute toxicity, all the mice were d... To observe the acute toxicity of recombinant porcine interferen-alpha (IFN-alpha) in mice and thus provide a basis for the clinical safety. [Method] According to the principles of acute toxicity, all the mice were divided into two major groups (intraperitoneally injected group and intramuscularly injected group) respectively at high dose, moderate dose and low dose. And the normal control group was also set up. Within 14 d after administration, the behavior of mouse and the degree of toxicity were continuously observed. The hematological indexes and biochemical indexes of blood were detected to obtain the preliminary toxicity data of the recombinant porcine IFN-alpha. And at the end of the experiment, mice were sacrificed for autopsy. [ Result] There was not significant difference in external performance, behavioral characteristics, body temperature, weight, pathological anatomy of visceral organs, hematological indexes and biochemical indexes between the experimental groups and the control group. [ Conclusion] The highest dose of porcine interferon (5.0 x 10s IU per mouse) in this experiment or the dose lower than this dosage should not have significant toxic effects on mice, and the recombinant porcine IFN-alpha is safe in clinical application. 展开更多
关键词 Recombinant porcine interferon-alpha Acute toxicity MICE
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HCMV pp65 DNA疫苗的纯化与检定
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作者 王兴满 汤仁树 +2 位作者 赵俊 陈敬贤 王明丽 《安徽医学》 2010年第3期201-204,共4页
目的研究HCMV pp65 DNA疫苗(pcDNA3.1-pp65)的纯化工艺,并建立质控标准。方法对工程菌(DH5α/pcDNA3.1-pp65)的高效发酵菌体采用碱裂解法进行质粒初提;三步柱层析(依次为分子筛层析、亲和层析、阴离子层析)对质粒进行纯化,检测质... 目的研究HCMV pp65 DNA疫苗(pcDNA3.1-pp65)的纯化工艺,并建立质控标准。方法对工程菌(DH5α/pcDNA3.1-pp65)的高效发酵菌体采用碱裂解法进行质粒初提;三步柱层析(依次为分子筛层析、亲和层析、阴离子层析)对质粒进行纯化,检测质粒含量、超螺旋比例、内毒素等,最后对终产品质粒溶液进行全面质量检定。结果质粒初提液通过分子筛层析后,去除了大量RNA、宿主DNA、内毒素等,再经亲和柱纯化后获得了高比例的超螺旋质粒DNA,达95%,经阴离子柱层析有效去除内毒素,质粒得率为0.8-0.95 mg/g菌,质粒总回收率达72.7%。三批终产品全面质量检定均符合规定。结论建立了稳定的HCMV pp65 DNA疫苗(pcDNA3.1-pp65)纯化工艺及质量控制标准,为进一步研究奠定了重要基础。 展开更多
关键词 HCMV PP65 DNA疫苗 质粒 纯化
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动物细胞培养物中支原体污染的检测 被引量:14
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作者 赵俊 王兴满 +2 位作者 胡勇 陈敬贤 王明丽 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第3期1151-1153,共3页
[目的]建立检测细胞培养物中支原体快速有效的方法。[方法]从6种常见污染细胞的支原体16sRNA中选择2段高度保守的核酸序列作为引物,用PCR和DNA荧光染色法来检测实验室中25种动物细胞株。[结果]用DNA荧光染色法检测实验室中25种动物细胞... [目的]建立检测细胞培养物中支原体快速有效的方法。[方法]从6种常见污染细胞的支原体16sRNA中选择2段高度保守的核酸序列作为引物,用PCR和DNA荧光染色法来检测实验室中25种动物细胞株。[结果]用DNA荧光染色法检测实验室中25种动物细胞株阳性率为24%,可疑阳性为16%;而用PCR法检测阳性率为36%。[结论]PCR法较DNA荧光染色法灵敏度更高、特异性更强,将2种方法结合应用效果更好。 展开更多
关键词 支原体 细胞培养 DNA荧光染色法 聚合酶链反应
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关于加强高等医学院校青年教师队伍建设的实施与思考 被引量:7
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作者 黄升海 冯晓亮 +1 位作者 胡涛 王兴满 《中国实用医药》 2009年第24期251-253,共3页
教师队伍建设是高校发展的永恒主题,随着我国高校招生规模的不断扩大,大批青年教师充实到了医学高等院校教学和科研工作的第一线,如何加强青年教师队伍建设成为目前提高教学质量的重要环节,笔者从多角度展示本教研室就加强青年教师队伍... 教师队伍建设是高校发展的永恒主题,随着我国高校招生规模的不断扩大,大批青年教师充实到了医学高等院校教学和科研工作的第一线,如何加强青年教师队伍建设成为目前提高教学质量的重要环节,笔者从多角度展示本教研室就加强青年教师队伍思想道德建设和制度建设的实施经验和体会,以供借鉴。 展开更多
关键词 高校 青年教师 素质 培养
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重组猪干扰素α1冻干粉针剂对猪的安全性试验研究 被引量:2
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作者 赵俊 张俊玲 +3 位作者 李增 王兴满 李京培 王明丽 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第1期195-198,共4页
试验旨在观察自行研制的重组猪干扰素α1冻干粉针剂对猪的安全性。将20头健康仔猪随机分为4组(3组试验组和1组对照组),每组5只,3组试验组分别肌肉注射低、中和高剂量重组猪干扰素α1冻干粉针剂,连续注射7d,对照组同时肌肉注射生理盐水... 试验旨在观察自行研制的重组猪干扰素α1冻干粉针剂对猪的安全性。将20头健康仔猪随机分为4组(3组试验组和1组对照组),每组5只,3组试验组分别肌肉注射低、中和高剂量重组猪干扰素α1冻干粉针剂,连续注射7d,对照组同时肌肉注射生理盐水。对动物基本生命体征、血常规、血液生化指标、组织标本病理学指标进行观察。各试验组仔猪的外表及行为特征均正常;体温、体重的变化也在正常范围之内;重要脏器如脑、肺脏、肝脏、心脏和脾脏病理解剖HE染色结果显示无器质性病变发生;血常规、血液生化指标均正常。试验结果表明本项目研制的重组猪干扰素α1冻干粉针剂对仔猪无明显毒副作用,使用安全。 展开更多
关键词 重组猪干扰素&alpha 1 安全性 病理学
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四针状氧化锌复合抗菌材料滤片抑菌和毒性作用的实验研究 被引量:6
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作者 胡涛 王明丽 +3 位作者 吴建军 王兴满 程正勇 胡春池 《疾病控制杂志》 2005年第3期273-274,共2页
关键词 抗菌材料 氧化锌 实验研究 毒性作用 复合 四针 抑菌试验 抑菌作用 结果报告 教研室
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公共图书馆开展经营创收的探讨 被引量:1
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作者 王兴满 《图书馆杂志》 CSSCI 北大核心 1993年第1期7-9,共3页
一、公共图书馆开展经营创收的必然性公共图书馆开展经营创收是深化改革的一项重要内容。所谓经营创收,是指开展多种经营项目(活动),抓好经济收入,发展图书馆事业。它是有偿服务、以文补文、多业助文的扩大和深化。 1.从理论方针来看。
关键词 公共图书馆 经营管理
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分离病鸡3株大肠埃希菌的鉴定及毒力和细胞毒测定
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作者 胡涛 龚蕴贞 +2 位作者 王兴满 吴建军 王明丽 《安徽医科大学学报》 CAS 2004年第4期270-272,共3页
目的 分离病鸡中 3株大肠埃希菌和鉴定其对小鼠的致病力及对Vero细胞毒性作用。方法 将按常规细菌的分离并鉴定的 3株大肠埃希菌 ,接种至昆明系小鼠体内做毒力试验 ,计算死亡率和LD50 (5 0 %致死量 )。采用微量单层细胞培养法测定细... 目的 分离病鸡中 3株大肠埃希菌和鉴定其对小鼠的致病力及对Vero细胞毒性作用。方法 将按常规细菌的分离并鉴定的 3株大肠埃希菌 ,接种至昆明系小鼠体内做毒力试验 ,计算死亡率和LD50 (5 0 %致死量 )。采用微量单层细胞培养法测定细菌上清液的细胞毒性作用。结果 分离的 3株细菌生物学性状均符合大肠埃希菌。分离的 3株细菌对小鼠致病率为 10 0 % ;菌量达 6× 10 11CFU/L时死亡率为 10 0 % ;LD50 为 1 5× 10 10 CFU/L。分离的 3株细菌对 2株细胞均无细胞毒性作用。结论 分离的 3株致病性大肠埃希菌与O157∶H7株对小鼠致病力相似 ,可能是潜在的人类的传染源。 展开更多
关键词 大肠埃希菌 鉴定 毒力 细胞毒 测定 致病力
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重组猪干扰素α1冻干粉针剂在猪体内的药代动力学研究
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作者 赵俊 俞海洋 +8 位作者 王兴满 李京培 胡涛 胡勇 苏世云 李超 鲁兴生 徐敬东 王明丽 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期756-759,共4页
为研究重组猪干扰素α1(rPoIFN-α1)冻干粉针剂在猪体内的药代动力学特征,本研究将实验猪随机分为3组:分别静脉、肌肉和皮下注射rPoIFN-α1 1.0×107IU,每组设立对照组,于注射后间隔不同时间采血,采用细胞病变抑制法测定其血清样品... 为研究重组猪干扰素α1(rPoIFN-α1)冻干粉针剂在猪体内的药代动力学特征,本研究将实验猪随机分为3组:分别静脉、肌肉和皮下注射rPoIFN-α1 1.0×107IU,每组设立对照组,于注射后间隔不同时间采血,采用细胞病变抑制法测定其血清样品中rPoIFN-α1的效价。结果表明,肌肉注射组和皮下注射组药动学特征符合一室开放模型,呈一级动力学消除,血药峰时间(Tmax)分别为2.872±0.314 h和4.000±0.539 h,消除半衰期(T1/2)分别为6.236±0.551 h和6.644±0.751 h,血药峰浓度(Cmax)分别为3.980±2.875×104IU/L和1.080±0.986×104IU/L。静脉注射组符合二室开放模型,呈一级动力学消除,分布半衰期(T1/2α)为0.136±0.021 h,消除半衰期(T1/2β)为5.195±0.351 h,Cmax值为6.380±0.546×104IU/L。rPoIFN-α1静脉、肌肉和皮下注射组清除率分别为0.930±0.132 L/h、0.677±0.228 L/h和0.879±0.210 L/h。与静脉注射组相比,肌肉注射组的生物利用度为47.82%,皮下注射组的生物利用度为35.09%。本实验结果提示这3种rPoIFN-α1的注射方法在猪体内吸收、消除较快,具有线性动力学特征。rPoIFN-α1肌肉注射给药的生物利用度高于皮下注射组,消除半衰期比静脉注射组延长,可以作为替代静脉注射的一种方便和安全给药途径。 展开更多
关键词 重组猪干扰素α1 药代动力学 细胞病变抑制法
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一种短期保存肺炎双球菌的简单方法
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作者 李京培 毕克菊 +1 位作者 王兴满 王明丽 《安徽医科大学学报》 CAS 2002年第5期403-405,共3页
目的 寻求一种简单易行的保存肺炎双球菌的方法。方法 在 - 2 0℃和 - 80℃条件下 ,用体积分数为 10 %的甘油新鲜兔脱纤维血 (新鲜兔血 )、体积分数为 10 %的甘油陈旧兔脱纤维血 (陈旧兔血 )和脱脂鲜奶作为保存剂 ,观察保存一定时间... 目的 寻求一种简单易行的保存肺炎双球菌的方法。方法 在 - 2 0℃和 - 80℃条件下 ,用体积分数为 10 %的甘油新鲜兔脱纤维血 (新鲜兔血 )、体积分数为 10 %的甘油陈旧兔脱纤维血 (陈旧兔血 )和脱脂鲜奶作为保存剂 ,观察保存一定时间后肺炎双球菌存活百分率和其生物学性状的变化。结果 在 - 80℃保存 18个月其存活率均达 10 0 % ,且生物学性状保存前后无明显变化 ;在 - 2 0℃该菌株保藏 12个月以上时 ,用新鲜兔血、陈旧兔血和脱脂鲜奶保存剂保存该菌 ,其存活率分别为 70 %、30 %和 5 5 % ,差异有显著性 (P <0 0 1) ;而用新鲜兔血方法保存的菌株 ,其菌形、胆汁溶解和荚膜试验与保存前菌株相似 ,生化反应与保存前菌株相比稍有改变 ,而其它生物学性状无变化。结论 在 - 80℃保存该菌 ,上述 3种保存剂均可使用 ;在 - 2 0℃保存该菌 。 展开更多
关键词 肺炎双球菌 生物学保存 培养基 微生物学
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Detection of Mycoplasma Contamination in Animal Cell Cultures
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作者 赵俊 王兴满 +2 位作者 胡勇 陈敬贤 王明丽 《Animal Husbandry and Feed Science》 CAS 2009年第4期4-6,33,共4页
[ Objective ] To develop a rapid efficient method for detecting mycoplasma contamination in cell cultures. [ Method] A pair of primers was designed according to two highly conserved nucleotide sequences of the 16S RNA... [ Objective ] To develop a rapid efficient method for detecting mycoplasma contamination in cell cultures. [ Method] A pair of primers was designed according to two highly conserved nucleotide sequences of the 16S RNA from six kinds of mycoplasma that commonly contaminated cells. Then the mycoplasma contamination of 25 cell samples was defected by PCR and DNA fluorescence staining. EResultl When these cell samples were detected by DNA fluorescence staining, the positive rate and probable positive rate were respectively 24% and 16%. And when they were detected by PCR, the positive rate was 36%. [ Condusion] The PCR method is more sensitive and specific than the DNA fluorescence staining, and combining these two methods is the optimal way to detect mycoplasma contamination in cell cultures. 展开更多
关键词 Mycoplasma Cell Cultures DNA fluorescence staining Polymerase chain reaction
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淋球菌培养基的改良
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作者 万声贵 王兴满 苏晓红 《安徽医科大学学报》 CAS 1992年第1期72-72,84,共2页
淋球菌(Neisseria gonorrhea)在人工培养时,培养基中需添加血清、腹水等营养物方能生长。目前国外常用的培养基有Thyer-Martin培养基。
关键词 培养基 淋球菌
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232例淋球菌感染的实验室诊断
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作者 万声贵 王兴满 《安徽医科大学学报》 CAS 1992年第2期155-156,共2页
淋球菌是我国目前性病中最常见的一种病原菌。病人泌尿生殖道分泌物涂片,革兰氏染色镜检的方法在男性急性病人的诊断中较有意义,而女性病人则由于阴道杂菌多,常有形态相似的细菌寄生。
关键词 淋球菌 感染 实验室诊断
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论路桥施工企业内部会计控制的构建 被引量:2
17
作者 王兴满 《中国集体经济》 2011年第9X期178-179,共2页
随着我国路桥建设规模的逐渐放开,路桥施工企业所要面临的外部竞争也日益增大,若要使其能够在瞬息万变的市场氛围中稳住脚,首要做的就是强化路桥内部控制机制,建立、健全施工企业内部会计控制制度,这样才能够增强路桥施工企业参与市场竞... 随着我国路桥建设规模的逐渐放开,路桥施工企业所要面临的外部竞争也日益增大,若要使其能够在瞬息万变的市场氛围中稳住脚,首要做的就是强化路桥内部控制机制,建立、健全施工企业内部会计控制制度,这样才能够增强路桥施工企业参与市场竞争,不断增强路桥施工企业的综合竞争力。文章首先分析了路桥施工企业内部会计控制现状,并从路桥施工企业内部会计控制的原则以及路桥施工企业成本费用内部会计控制重点两个方面阐述了路桥施工企业内部会计控制的实施,最后简要论述了当前时期下加强路桥施工企业加强内部会计控制构建的意义。 展开更多
关键词 路桥 施工企业 内部会计控制 构建 意义
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野外林间袋料栽培竹荪技术研究 被引量:3
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作者 童云霞 谭伟 +1 位作者 王兴满 郑林用 《西南农业学报》 CSCD 1992年第2期55-62,共8页
本文综合报道了四川竹荪生态环境条件、子实体显微结构、菌种选育、野外林间配套栽培竹荪的技术和营养成份。从野生竹荪菌蕾中,分离选育出高产、优质、生长周期短、适合野外林间栽培的“601”和“602”菌株。研究出了适合我省资源和气... 本文综合报道了四川竹荪生态环境条件、子实体显微结构、菌种选育、野外林间配套栽培竹荪的技术和营养成份。从野生竹荪菌蕾中,分离选育出高产、优质、生长周期短、适合野外林间栽培的“601”和“602”菌株。研究出了适合我省资源和气候条件的配套栽培技术和工艺流程。其推广面积达2500多m^2。 展开更多
关键词 竹荪 人工栽培 野外林栽培
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宁海的一港一湾
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作者 王兴满 《宁波通讯》 2010年第3期34-35,共2页
宁海县位于浙东沿海,境内东南北三面临海,但不靠大海而靠一港一湾。北濒象山港,南隅三门湾,曲折多汉的港湾直伸纵深陆地,大半个县域被港湾所环抱,处在陆海相连、山海兼优的特有地理位置。象山港、三门湾的成形,据有关史料记载,... 宁海县位于浙东沿海,境内东南北三面临海,但不靠大海而靠一港一湾。北濒象山港,南隅三门湾,曲折多汉的港湾直伸纵深陆地,大半个县域被港湾所环抱,处在陆海相连、山海兼优的特有地理位置。象山港、三门湾的成形,据有关史料记载,经亿万年星移斗转的历史变迁,宁海县大陆边缘在地貌形态的径流和海水潮流的双重作用下, 展开更多
关键词 宁海县 浙东沿海 地理位置 史料记载 历史变迁 三门湾 象山 港湾
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宁海的望海茶与望府茶
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作者 王兴满 《宁波通讯》 2010年第4期32-33,共2页
宁海的茶以望海茶、望府茶为代表,是宁波市八大名茶之一,具有名特优著名商标和驰名品牌。1984年望海茶获浙江省名茶证书,1989年望府茶荣获国家农业部授予的全国名茶称号,在宁波市均是首次获此殊荣。自此,望海茶、望府茶年年获得省... 宁海的茶以望海茶、望府茶为代表,是宁波市八大名茶之一,具有名特优著名商标和驰名品牌。1984年望海茶获浙江省名茶证书,1989年望府茶荣获国家农业部授予的全国名茶称号,在宁波市均是首次获此殊荣。自此,望海茶、望府茶年年获得省级、国家级金奖和名茶复评证书。2009年,全县茶叶基地5万亩,总产量达2345.5吨,茶叶销售到国内外,广泛受到消费者的青昧。宁海出名茶,茶香飘天下。 展开更多
关键词 名茶 宁海 2009年 驰名品牌 著名商标 茶叶基地 茶叶销售 宁波市
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