基于Wnt/β-catenin通路探讨拔毒生肌散对糖尿病大鼠皮肤溃疡愈合的促进作用

目的探讨拔毒生肌散通过调控Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)通路对糖尿病大鼠皮肤溃疡愈合的促进作用。方法随机将60只Wistar雄性大鼠分为正常对照组和糖尿病组。采用腹腔注射链脲佐菌素结合喂食高脂高糖饲料方法制备糖尿病模型。28 d后,对比正常对照组和糖尿病组大鼠的体质量和血糖,然后制备背部皮肤溃疡模型。造模成功的糖尿病大鼠分为模型组、拔毒生肌散组、一效膏组、清创胶组。各组用药14 d。在第7、14天,采用Image-pro plus 6.0软件测量各组大鼠创面愈合率,采用苏木素-伊红(HE)染色法检测肉芽组织病理变化,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测肉芽组织晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)、晚期糖基化终末产物受体(receptor for advanced glycation end-products,RAGE)、Wnt1、β-catenin、糖原合成酶激-3β(glycogen synthase exciter-3β,GSK-3β)蛋白含量,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肉芽组织RAGE、Wnt、β-catenin、GSK-3βmRNA表达水平。结果与正常对照组比较,糖尿病组大鼠的体质量下降(P<0.01),血糖升高(P<0.01)。与正常对照组比较,模型组第7、14天创面愈合率均较低(P<0.01);肉芽组织中炎症细胞较多,成纤维细胞、胶原纤维和毛细血管数量较少;肉芽组织Wnt1、β-catenin mRNA表达水平较低(P<0.01),AGEs蛋白、RAGE、GSK-3β蛋白和mRNA含量较高(P<0.01)。与模型组比较,拔毒生肌散组第7、14天创面愈合率较高(P<0.01);肉芽组织AGEs蛋白、RAGE、GSK-3β蛋白和mRNA含量较低(P<0.05,P<0.01),Wnt1、β-catenin mRNA表达水平较高(P<0.01)。结论拔毒生肌散通过调节Wnt/β-catenin通路促进糖尿病大鼠皮肤溃疡的愈合。AGEs的沉积导致Wnt/β-catenin通路的抑制。

拔毒生肌散调控Keap1/Nrf2通路促进糖尿病大鼠皮肤溃疡愈合的机制研究

目的 观察拔毒生肌散对糖尿病大鼠皮肤溃疡肉芽组织Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白(Kelch-like ECH-associated protein,Keap)-1/核因子E2相关因子(nuclear factor-E2-related factor 2,Nrf2)通路的影响,探讨拔毒生肌散促进糖尿病大鼠皮肤溃疡愈合的作用机制。方法 将60只大鼠随机分为正常对照组、模型组、拔毒生肌散组、一效膏组、清创胶组,每组12只。除正常组外,其他4组大鼠采用腹腔注射链脲佐菌素(streptozocin,STZ)结合喂食高脂高糖饲料的方法建立糖尿病模型,在此基础上建立背部皮肤溃疡模型。外用相应药物治疗14 d后,评估并比较各组大鼠溃疡面面积及愈合率;苏木素-伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色、Masson染色、CD34免疫组化检测大鼠肉芽组织病理变化;Western blot、荧光定量PCR分别检测大鼠肉芽组织Keap1、Nrf2蛋白和m RNA表达水平。结果 与正常对照组比较,模型组大鼠溃疡面愈合率、胶原纤维阳性面积、血管内皮细胞阳性率、Nrf2蛋白和m RNA表达显著降低(P<0.01),Keap1蛋白和m RNA表达显著升高(P <0.01),炎性细胞浸润较多,胶原纤维蓝染少,排列紊乱,分布稀疏,CD34标记新生血管较少,管径较细。与模型组比较,拔毒生肌散组大鼠溃疡面愈合率、胶原纤维阳性面积、血管内皮细胞阳性率、Nrf2蛋白和m RNA表达显著升高(P <0.01),Keap1蛋白和m RNA表达显著降低(P <0.01),炎性细胞浸润较少,胶原纤维蓝染增多,排列相对整齐有序,CD34标记新生血管较多,管径较粗。各治疗组之间溃疡面愈合率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 拔毒生肌散能够通过抑制溃疡面炎症、促进胶原纤维沉积和血管新生以及调控Keap1/Nrf2通路促进糖尿病大鼠皮肤溃疡的愈合。

基于伏毒理论研究糖尿病大鼠皮肤溃疡难愈机制

目的观察正常大鼠和糖尿病大鼠皮肤溃疡愈合过程中肉芽组织晚期糖基化终末产物(AGEs)、晚期糖基化终末产物受体(RAGE),Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)/核因子E2相关因子(Nrf2)通路和Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)通路的变化,以研究糖尿病皮肤溃疡难愈的机制。方法Wistar雄性大鼠采用链脲佐菌素腹腔注射结合喂食高脂高糖饲料方法造糖尿病模型。28 d后,正常对照组和糖尿病组造背部皮肤溃疡模型。分别在第7、14天取溃疡肉芽组织。采用苏木素-伊红(HE)染色法检测肉芽组织病理变化;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测肉芽组织AGEs、RAGE、Wnt1、β-catenin、糖原合成酶激-3β(GSK-3β)蛋白含量;蛋白质印迹法(Western blot)法检测肉芽组织Keap1、Nrf2蛋白表达;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肉芽组织RAGE、Keap1、Nrf2、Wnt1、β-catenin、GSK-3βmRNA表达水平。结果相比于正常对照组,糖尿病组大鼠肉芽组织中炎症细胞较多,成纤维细胞、胶原纤维和毛细血管数量较少。第7天的Wnt1、β-catenin蛋白含量均数上有差异,但无统计学意义(P>0.05),第14天的Wnt1、β-catenin蛋白含量低(P<0.05)。第7、14天的Wnt1、β-catenin mRNA表达水平低(P<0.01)。Nrf2蛋白和mRNA含量较低(P<0.01)。AGEs、RAGE、Keap1、GSK-3β蛋白和mRNA含量较高(P<0.01)。结论具有伏毒性质的AGEs在组织中的沉积,可能抑制了Keap1/Nrf2通路和Wnt/β-catenin通路,这可能是导致了糖尿病大鼠皮肤溃疡难愈合的原因之一。

中医针刺联合刺络拔罐治疗痤疮、黄褐斑等面部损美性疾病的临床分析

目的探究中医针刺联合刺络拔罐治疗痤疮、黄褐斑等面部损美性疾病的疗效。方法将2015年2月—2017年2月在该院接受治疗的80例痤疮、黄褐斑等面部损美性疾病患者作为研究对象,并给予随机分组,对照组40例,给予常规治疗;观察组40例,在常规治疗基础上给予中医针刺联合刺络拔罐治疗,对两组患者治疗前后的痤疮、黄褐斑面积以及临床治疗效果进行综合评价。结果观察组患者治疗后的痤疮、黄褐斑面积分别为(2. 14±0. 13) cm^2、(2. 31±0. 53)cm^2,均显著低于对照组(P <0. 05),有统计学意义;且观察组治疗后有38例患者显示有效,占95. 0%(38/40),显著高于对照组的72. 5%(29/40),两组差异较大(P <0. 05),统计学有意义。结论中医针刺联合刺络拔罐治疗痤疮、黄褐斑等面部损美性疾病,可缩小面部损美面积,促进面部恢复,值得推广应用。

桃红四物汤结合当归芍药散治疗女性黄褐斑有效应用研究

目的研究运用桃红四物汤结合当归芍药散对女性黄褐斑患者所起到的治疗作用。方法选取辽宁中医药大学附属医院2017年1月—2018年5月收治的80例女性黄褐斑患者,将其随机分为对照组与观察组各40例,对照组患者采用维生素治疗方式,观察组患者采用桃红四物汤结合当归芍药散的中医治疗方式,从治疗前与治疗后的色斑面积、斑色以及治疗效果方面对于不同治疗方式进行数据收集与对比分析。结果治疗前对照组患者斑色评分为(2.08±0.30)分,治疗后为(1.35±0.25)分;治疗前观察组患者斑色评分为(1.12±0.27)分,治疗后为(0.39±0.13)分,两组比较差异具有统计学意义,P<0.05。治疗前,对照组患者色斑面积评分为(2.26±0.28)分,治疗后为(1.48±0.20)分;治疗前观察组患者色斑面积评分为(2.35±0.35)分,治疗后为(0.67±0.16)分,两组比较差异具有统计学意义,P<0.05。经过12周的治疗后,对照组基本治愈3例,显效12例,有效19例,无效6例,愈显率37.5%;观察组基本治愈19例,显效15例,有效5例,无效1例,愈显率85%,两组比较差异具有统计学意义,P<0.05。与治疗前相比,两组患者治疗后血清雌二醇(E2)、α-黑色素细胞雌激素(α-MSH)水平均显著降低(P<0.05);治疗前两组患者血清E2、α-MSH水平比较差异均不显著(P>0.05)。与对照组治疗后相比,观察组患者血清E2、α-MSH水平均显著降低(P<0.05)。结论桃红四物汤结合当归芍药散运用于女性黄褐斑的治疗过程中能够有效改善患者色斑面积与斑色情况,提升治疗效果,具有重要的临床推广应用价值。

枇杷清肺饮联合刺血拔罐治疗肺经风热型痤疮52例

目的:观察方剂枇杷清肺饮结合刺血拔罐治疗治疗肺经风热型痤疮的临床疗效及对睾酮水平的影响。方法:将104例肺经风热型痤疮患者随机分为治疗组和对照组各52例。对照组口服清热暗疮胶囊,3次/d,3粒/次,外用克林霉素磷酸酯溶液,2次/d。治疗组枇杷清肺饮,1剂/d,分3次口服,刺血拔罐治疗,1次/周。两组疗程均为8周。观察治疗前后患者血清睾酮水平的变化。结果:总有效率治疗组84%,对照组70%,两者比较差异具有统计学意义(P<0.05)。睾酮水平两组均明显下降,治疗组下降幅度高于对照组(P<0.05)。结论:枇杷清肺饮联合刺血拔罐治疗肺经风热型痤疮临床疗效确切,有效降低睾酮水平,安全性好。

桃红四物汤结合围刺治疗血瘀型黄褐斑临床观察及对超氧化物岐化酶水平的影响

目的:观察方剂桃红四物汤结合围刺治疗气滞血瘀型黄褐斑的临床疗效及对超氧化物岐化酶(SOD)水平的影响。方法:采用随机对照的方法分为治疗组和对照组,治疗组50例,对照组50例,进行统计分析。治疗组用方剂桃红四物汤每日1剂,分3次口服。局部围刺治疗,两日1次。对照组口服维生素C200mg维生素E50mg每日3次口服,配合外用氢醌乳膏,每日2次外用。同时两组治疗前后,采用黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物岐化酶SOD水平。12周后进行疗效判定和SOD水平变化观察。结果:总有效率治疗组为62%,对照组为54%,两组比较差异有显著性意义(P<0.05)。治疗组患者治疗后血SOD水平提高,与对照组比较,差异具有显著性意义(P<0.01)结论:桃红四物汤结合围刺治疗气滞血瘀型黄褐斑治疗临床疗效确切,并提高患者SOD水平,值得临床推广应用。

补阳还五汤联合刺血拔罐治疗带状疱疹后遗神经痛

目的观察补阳还五汤联合刺血拔罐治疗带状疱疹后遗神经痛的临床疗效。方法将89例带状疱疹后遗神经痛患者随机分为2组,治疗组30例口服补阳还五汤,同时配合刺血拔罐。对照组30例口服布洛芬,维生素B_1,维生素B_(12)。采用视觉模拟尺评分法(VAS)和睡眠质量评分法(QS)为判定标准,同时观察2组安全性。治疗1疗程后评定疗效。结果 2组VAS评分和QS评分均明显下降,2组差异均有统计学意义(P<0.05),治疗组有效率高于对照组(P<0.05)。2组均无不良反应。结论补阳还五汤结合刺血拔罐安全有效,可活血祛瘀、通络止痛,能明显减轻疼痛,提高患者睡眠质量。

黑布药膏治疗增生性瘢痕临床观察

[目的]观察黑布药膏治疗增生性瘢痕的临床效果。[方法]选择外伤愈合后10～30天,具有可比性的增生性瘢痕患者40例(瘢痕共计50处)。随机分为两组:治疗组采用黑布药膏外敷治疗;对照组外用康瑞保凝胶治疗。比较两组在治疗3个月后的临床疗效。[结果]治疗组与对照组在治疗后3个月疗效比较P值>0.05,无显著性差异。[结论]黑布药膏治疗外伤后增生性瘢痕临床疗效确切。

植块法原代培养人衰老皮肤成纤维细胞

目的:探索和建立人衰老皮肤成纤维细胞的体外培养的方法,为其在医学美容抗衰老研究中的应用提供科学依据。方法:植块法原代培养人衰老皮肤成纤维细胞;倒置显微镜下观察细胞的生长状态;HE染色观察细胞的形态及着色情况。结果:用植块法培养的人衰老皮肤成纤维细胞在显微镜下呈长梭形,有突起,平行、放射状或漩涡状排列。结论:确立了人衰老皮肤成纤维细胞的体外培养的方法,使其可供于延缓皮肤衰老的实验研究。

补肾祛斑汤治疗黄褐斑临床观察

目的黄褐斑是一种常见的难治性皮肤病,治疗手段匮乏。本研究探讨补肾祛斑汤治疗黄褐斑的临床效果。方法选取2017-04-01-2018-04-01辽宁中医药大学附属医院收治的80例黄褐斑患者作为研究对象,按照年龄、病程组间均衡的原则选择观察组与对照组,各40例。对照组给予维生素C及维生素E药物治疗;观察组给予补肾祛斑汤治疗。两组均连续治疗90d。对比分析两组患者的临床疗效、治疗前后血清SP和MSH指标水平及患者皮肤病生活质量。结果观察组临床有效率为92.50%,高于对照组的75%,χ2=4.501,P=0.034。治疗后观察组血清SP水平为(16.54±1.48)ng/L,低于对照组的(34.69±3.18)ng/L,t=32.726,P<0.001;MSH水平为(364.28±34.23)pmol/mL,低于对照组的(385.25±25.91)pmol/mL,t=3.089,P=0.003。治疗后观察组患者生理领域评分为(44.81±4.54)分,高于对照组的(40.54±4.43)分,t=4.257,P<0.001;心理领域评分为(73.62±10.84)分,高于对照组的(63.55±9.57)分,t=4.404,P<0.001;症状领域评分为(65.42±8.84)分,高于对照组的(55.61±8.54)分,t=5.047,P<0.001;社会关系领域评分为(45.57±7.36)分,高于对照组的(39.14±6.73)分,t=4.077,P<0.001;环境领域评分为(108.12±11.45)分,高于对照组的(97.48±10.88)分,t=4.260,P<0.001;精神支柱评分为(18.25±3.58)分,高于对照组的(15.42±3.82)分,t=3.418,P<0.001;生活质量总分为(21.54±3.68)分,高于对照组的(16.16±3.47)分,t=6.727,P<0.001。结论补肾祛斑汤治疗黄褐斑临床疗效显著,可有效改善患者的生活质量、调节血清神经肽水平,发挥祛斑悦颜的效果。

“黑布膏药”治疗增生性瘢痕的实验研究

目的 探讨＂黑布膏药＂防治增生性瘢痕的作用机制,为该药临床推广研发提供理论依据.方法 黑布膏药是一种外用中药制剂,其药物组成为黑醋、五倍子、蜈蚣、蜂蜜、冰片.利用兔耳腹侧面建立增生性瘢痕模型,将瘢痕随机分为实验组、康瑞宝埘照组和空白对照组3组,将药膏作用在兔耳瘢痕表面,分别于用药14 d和28 d取材,进行局部标本形态比较,应用HE染色进行瘢痕指数比较,应用免疫组化ABC法对比研究TGF-β1、aFGF细胞因子的变化.结果 空白对照组瘢痕彤成较厚,实验组和康瑞保组较薄,实验组和康瑞保对照组瘢痕增生发生率明显低于空白对照组;实验组和康瑞保对照组的瘢痕增生指数均明显低于空白对照组;兔耳瘢痕组织中转化生长因子-β1（TGF-β1）表达明显降低;酸性成纤维细胞生长因子aFGF表达增高.结论 ＂黑布膏药＂有明显抑制兔耳增生性瘢痕的作用.