“阶段—多样混合培养模式”在临床病理住培中的探索与实践

临床病理医生作为我国医疗行业急需人才,目前已成为提升当今医疗行业服务质量的瓶颈之一。如何培养较高质量的临床病理住院医师是目前规范化培训中的热点。自2014年1月成为临床病理住院医师规范化培训基地以来,重庆医科大学附属第一医院病理科专业基地经过多年的实践与探索,将培训分成了临床病理基础夯实、临床病理能力培养、亚专科与科学研究发展兴趣培养三个阶段。在不同阶段,重庆医科大学附属第一医院病理科专业基地采用了专题讲座、教学会诊、多头镜下教师示教、定期疑难病例讨论、文献汇报等面授方式教学,同时结合视频学习、数字化标本切片等多种技术媒介手段进行多维度教学。同时建立并培养经验丰富的住培带教师资队伍,形成了包含老中青的高素质教师梯队。最终形成“阶段—多样混合培养模式”住培制度,保证住培学员通过住培业考试、职业医师考试等。并助力住培学员通过中级考试、同等学力申请专业学位硕士考试等。因此,该基地逐步建立“阶段—多样混合培养模式”,希望为优化临床病理专业人才的培训提供经验,为培养合格的临床病理诊断医生打下基础。

脂肪肉瘤c-myc和p53基因蛋白的表达及意义

背景与目的:原癌基因c-myc和抑癌基因p53与脂肪肉瘤的关系的研究较少,脂肪肉瘤中是否存在p53基因突变文献报道不一,本文拟探讨脂肪肉瘤中c-myc、p53基因蛋白表达的水平及意义,以期为本组肿瘤发生发展及病理诊断、鉴别诊断提供一定的分子生物学资料。方法:采用链菌素抗生物素-生物素(labelledstreptavidin-biotin,LSAB)免疫组化法、聚合酶链反应-单链构象多态性分析(Singlestrandconformationpolymorphismanalysisofpolymerasechainreactionproducts,PCR-SSCP)及DNA序列分析方法。结果:c-myc和p53蛋白在脂肪肉瘤表达阳性率分别为38.09%(16/42)和48.08%(25/52)。不同类型脂肪肉瘤,分化良好者阳性率均明显低于分化较差者。脂肪肉瘤中c-myc和p53蛋白表达呈正相关。c-myc和p53蛋白表达在原发者和复发者之间的差异均无统计学意义。p53第6、7、8外显子PCR-SSCP分析,2例多形性脂肪肉瘤出现异常泳动带。DNA序列分析证实1例第8外显子第268位编码区出现错义突变(AAC→ATC),另1例第6外显子第221位编码区出现可疑杂合性同义突变(GAG→GAA)。结论:c-myc和p53蛋白与脂肪肉瘤的形成及分化和恶性程度有关,它们可作为判断脂肪肉瘤分化程度及恶性程度参考指标之一,但与肿瘤复发无关。在脂肪肉瘤发生发展中两者可能起协同作?

大肠癌组织蛋白酶D表达及其与EGFR,PCNA表达的关系

目的：探讨不同类型大肠癌组织蛋白酶Ｄ表达及其与表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）、内源性雌二醇、增殖细胞核抗原（ＰＣ－ＮＡ）的相互关系。方法：采用免疫组化链亲生物素－过氧化酶（Ｓ－Ｐ）法。结果：粘液性大肠癌癌细胞浆组织蛋白酶Ｄ不同程度阳性，同时，组织蛋白酶Ｄ弥散于细胞外粘液中，尤以印戒细胞周围为著。非粘液性癌，胞核多者组织蛋白酶Ｄ多为阴性。组织蛋白酶Ｄ阳性的大肠癌淋巴结转移率明显高于阴性者。大肠癌组织蛋白酶Ｄ表达与表皮生长因子受体表达成正相关。结论：组织蛋白酶Ｄ具有破坏宿主间质天然屏障作用。

脂肪组织源性肿瘤中c-myc和p53基因的异常表达

目的：探讨脂肪组织源性肿瘤与ｃｍｙｃ 和ｐ５３ 基因的关系。方法：采用 Ｌ Ｓ Ａ Ｂ 免疫组化法，检测６２ 例脂肪组织源性肿瘤及瘤样病变ｃｍｙｃ 和ｐ５３ 蛋白表达。结果：ｃｍｙｃ 在正常脂肪组织、脂肪组织良性病变中几乎不表达，主要在脂肪肉瘤中表达。ｐ５３ 只在脂肪肉瘤中表达。分化较高类型脂肪肉瘤ｃｍｙｃ 和ｐ５３ 表达阳性率明显低于分化较低类型脂肪肉瘤。脂肪肉瘤中，ｃｍｙｃ 和ｐ５３ 表达呈正相关。结论：实验结果提示，ｃｍｙｃ 、ｐ５３ 蛋白与脂肪肉瘤的发生、细胞分化和恶性程度有关。它们可作为判断脂肪肉瘤分化程度及恶性程度的参考指标。在脂肪肉瘤的发生发展中两者可能起协同作用。

粘液性大肠癌组织蛋白酶B、D表达与肿瘤浸润

目的 组织蛋白酶B(Cathepsin B,CB)在粘液性大肠癌的表达尚未明了。组织蛋白酶D(Cathepsin D,CD)在肿瘤浸润和转移中的作用仍存在争议。本实验目的系探讨粘液性大肠癌CB和CD表达及其与肿瘤浸润转移的关系。方法 采用免疫组化方法对48例人不同类型大肠癌CB及CD表达进行半定量检测。结果 伴淋巴结转移大肠癌CB和CD表达率高于不伴淋巴结转移大肠癌,差异具显著性(P<0.05;P<0.005)。粘液性大肠癌CB表达高于非粘液性者,差别具显著性(P<0.05),但CD表达差异却无显著性意义(P>0.05)。结论 提示大肠癌CB和CD表达与肿瘤浸润转移有关,CB在粘液性大肠癌浸润转移中作用可能更为重要。

医学形态学科网络辅助教学实践与思考

良好的网络教学系统有利于教学资源的节约,激发学生学习积极性,但缺乏传统面授时师生的情感交流。网络辅助教学是医学形态学科教学的重要辅助手段,但不能代替传统的面授教学,二者应该有机地结合起来,才能真正提高教学质量。

研究生分子病理学课程教改探析

培养高素质创新型人才是医学研究生教育的目的,打破教研室界限,结合教师科研特长,实现跨学科教师的联合教学,是既能向学生传授理论知识,又能培养学生创新能力的良好方法;改变传统课堂教学方式,则有利于发挥学生学习主动性。

硕士研究生病理学相关课程教学现状分析及思考

医学研究生教育是高层次的医学专业教育,其目的是培养高级专门人才,与本科教学比较,它滞后于本科教学的发展.探讨教学内容及教学方法的改革措施,有利于全面提高硕士研究生教学质量.

5-AIQ对大肠癌细胞系HT-29细胞PARP活性抑制的生物学作用

背景与目的:聚(腺苷二磷酸核糖)聚合酶[poly(adenosine 5′-diphosphate ribose)polymerase,PARP]抑制剂5-氨基异喹啉酮(5-aminoisoquinolinone,5-AIQ)在炎症中具重要作用,但在肿瘤中的作用尚不清楚。本研究初步探讨5-AIQ对大肠癌PARP活性抑制的生物学作用。方法:链霉生物素-过氧化物酶法(Streptavidin-Peroxidase,SP)免疫组化法和免疫荧光双标法用于检测人大肠癌组织聚(腺苷二磷酸核糖)[poly(adenosine 5′-diphosphate ribose),PAR],及其与P-选择素(P-selectin)、细胞间粘附分子(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)的共表达,大肠癌切缘肠粘膜为对照。通过粘附实验观察5-AIQ对结肠癌HT-29细胞系与人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)粘附的影响;同时采用SP法观察5-AIQ对HT-29细胞PAR、P-selectin和ICAM-1表达的影响。结果:45例大肠癌组织中,PAR阳性率(77.8%,35/45)明显高于对照肠粘膜(10.0%,1/10)(P<0.05);其中伴转移者PAR阳性率(86.7%,26/30)高于不伴转移者(60.0%,9/15)。PAR阳性与P-selectin和ICAM-1表达相关。结肠癌HT-29细胞与HUVEC粘附实验显示,5-AIQ浓度为100、300、500μmol/L时,细胞粘附率分别为56.79%、46.31%和39.77%,明显低于对照组(未加5-AIQ者)(粘附率为100%)。经5-AIQ处理的HT-29细胞PAR、P-selectin和ICAM-1表达HSCOR得分分别为1.41±0.12、1.57±0.13和1.23±0.13,明显低于未经5-AIQ处理的HT-29细胞(HSCOR得分分别为2.61±0.10、2.73±0.16和2.30±0.12)(P<0.05)。结论:大肠癌组织内PARP活性增强。PARP抑制剂5-AIQ可抑制大肠癌HT-29细胞与HUVEC的粘附,并可抑制大肠癌HT-29细胞PAR、P-selectin和ICAM-1表达。

大肠癌PARP表达与P-selectin和ICAM-1表达的相关性

目的初步探讨聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)与大肠癌侵袭转移的关系及其可能机制。方法采用SP免疫组化法检测PAR(聚腺苷二磷酸核糖,系PARP产物)、P-selectin及ICAM-1的表达;并应用免疫荧光双标法检测PAR与P-selectin、ICAM-1的共表达。结果大肠癌组织内PAR、P-selectin及ICAM-1的表达均明显高于对照肠黏膜(P<0.05);3种蛋白的表达仅与大肠癌转移有关(P<0.05),而与其他临床病理因素无关;PAR与P-selectin和ICAM-1的表达均呈正相关关系(P<0.05)。结论大肠癌组织内PARP活性增强,并可能通过上调P-selectin和ICAM-1的表达而有利于大肠癌侵袭转移,有望成为判断大肠癌转移的参考指标之一。

七年制医学本科病理学理论课教学初探

七年制高等医学教育是为适应我国医药卫生事业发展的需要,立足培养具有良好思想品质和职业道德,自然科学及基础医学理论较为宽厚,专业实践技能和实际解决问题能力较强, 能达到硕士水平的高质量的临床医生.

大肠癌ART1的表达与VEGF、整合素αVβ3表达及微血管形成的相关性

目的探讨大肠癌组织中单ADP核糖基转移酶ART1的表达与VEGF、整合素αVβ3表达的相关性及其对大肠癌组织微血管生成的影响。方法免疫组化检测大肠癌组织中ART1、VEGF及整合素αVβ3的表达;免疫荧光双标检测ART1/VEGF及ART1/整合素αVβ3的共表达,用Chalkley分析法评估微血管的形成。结果 ART1、VEGF与整合素αVβ3的表达高于对照(P<0.05),且ART1与VEGF、整合素αVβ3的表达呈正相关(P<0.05)。ART1/VEGF及ART1/整合素αVβ3共表达的大肠癌组织微血管密度较高(分别为25.4±8.23和22.3±5.9),且高于非共表达组(分别为5.5±2.0和8.1±3.3,P<0.01)。结论 ART1在大肠癌组织中表达增强,并与VEGF及整合素αVβ3的表达具有正相关性,可能促进肿瘤微血管生成。

PARP抑制剂5-AIQ对小鼠结肠癌CT26细胞PARP/NF-κB复合物和NF-κB活性的影响

目的探讨PARP抑制剂5-AIQ对小鼠结肠癌CT26细胞核内PARP抑制后,对PARP/NF-κBP65复合物形成和NF-κB活性的影响。方法Western blot检测结肠癌CT26细胞核内PARP与NF-κBP65的表达,免疫共沉淀法分析CT26细胞核内PARP/NF-κBP65复合物形成,电泳迁移率改变分析法检测CT26细胞核转录因子NF-κB的结合活性。结果5-AIQ处理组与5-AIQ未处理组比较,前者小鼠结肠癌CT26细胞核内PARP与NF-κBP65的表达水平均明显减弱(P<0.05),PARP/NF-κBP65复合物形成明显减少(P<0.05),NF-κB的活性显著降低(P<0.05)。结论5-AIQ可通过抑制PARP的表达,减少PARP/NF-κBP65复合物的形成,进而使NF-κB活性降低。

大肠癌组织中PARG与血管生成相关因子的关系

目的:初步探讨大肠癌组织中聚(腺苷二磷酸核糖)水解酶(PARG)与血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的关系。方法:采用免疫组织化学SP法检测43例大肠癌患者癌组织和10例对照切缘肠黏膜组织中聚(腺苷二磷酸核糖)聚合酶(PARP)、VEGF及bFGF。采用Western blotting检测PARG抑制剂单宁酸(GLTN)处理前后人结肠癌Lovo细胞PARG、PARP、NF-κB、VEGF及bFGF表达。结果:PARP、VEGF和bFGF在大肠癌组织中表达阳性率分别为97.67%(42/43)、79.07%(34/43)和81.40%(35/43),均高于对照组(P<0.05)。PARP分别与VEGF(r=0.3968,P<0.05)和bFGF(r=0.5610,P<0.05)表达呈正相关关系。在Lovo细胞中,GLTN处理组PARG、PARP、NF-κB、VEGF和bFGF的表达均低于GLTN未处理组(P<0.01)。结论:PARG可影响大肠癌血管生成相关因子表达,可能与其调节PARP进而影响NF-κB活性有关。

PARG基因沉默抑制小鼠结肠癌CT26细胞系体外淋巴管形成

目的初步探讨聚腺苷二磷酸核糖水解酶(PARG)基因沉默对肿瘤淋巴管形成的影响。方法 CT26细胞分为未转染组,空载组和PARG-shRNA慢病毒载体转染组,经嘌呤霉素筛选后获得稳定转染细胞克隆。用Westernblot法检测PARG、PARP-1、NF-κB和VEGF-C蛋白表达。给BALB/c小鼠腹腔注射不完全弗氏佐剂,诱导良性淋巴管瘤形成,分离并培养小鼠淋巴管内皮细胞(LEC)。免疫荧光细胞化学检测VEGFR-3和Podoplanin的表达,共培养实验检测LEC体外淋巴管样结构的形成。结果与对照组相比,PARG-shRNA慢病毒载体转染CT26细胞系后PARP-1、NF-κB及VEGF-C蛋白表达显著减弱,相对灰度值分别为1.0±0.05,0.9±0.02和0.2±0.02(P<0.05)。LEC表达VEGF-C和Podoplanin;PARG沉默组的LEC体外形成淋巴管样结构明显较未转染组和空载组少(P<0.05)。结论 PARG抑制肿瘤淋巴管形成可能与降低VEGF-C的表达有关。

PARP抑制剂5-AIQ对CT26细胞侵袭及转移的影响

目的探讨多聚(腺苷二磷酸核糖)聚合酶[Poly(ADP-ribose)polymerases,PARPs]抑制剂5-氨基异喹啉酮[5-Aminoisoquinolinone.HCl,5-AIQ]对小鼠结肠腺癌CT26细胞基质黏附、运动、侵袭能力的影响。方法应用Westernblot检测5-AIQ对PARP表达的影响,细胞-基质黏附实验、细胞运动及侵袭实验观察5-AIQ抑制CT26细胞PARP后,其基质黏附、运动及侵袭能力的变化。结果5-AIQ处理组PARP表达明显弱于未处理组(P<0.05);黏附实验结果显示,与5-AIQ未处理组比较,5-AIQ100、500μmol/L处理组的吸光度值明显降低(P<0.01),其黏附抑制率分别是14.54%、21.69%;运动及侵袭实验中,5-AIQ500μmol/L处理组与未处理组的细胞数差别显著(P<0.05),其运动及侵袭抑制率分别是30.09%、37.47%。结论5-AIQ可抑制CT26细胞PARP的表达,并可降低CT26细胞基质黏附、运动及侵袭能力,5-AIQ在抗肿瘤侵袭转移中可能发挥作用。

三种耐药蛋白在胃癌中的表达及意义

目的 探讨多药耐药蛋白 ( MRP)、谷胱甘肽转移酶 Pi( GST-π)和肺耐药蛋白 ( L RP)在胃癌中的表达及意义。方法 应用免疫组化 S- P法 ,检测 MRP、GST-π和 L RP在 90例胃癌及 30例正常胃黏膜中的表达。结果 MRP、GST-π及 L RP在胃癌中的阳性表达率分别为 92 .2 %、99.0 %和 93.3% ,均显著高于其在正常胃黏膜中的表达 ( P<0 .0 5 ) ,且 MRP、GST-π和 L RP在高、中分化腺癌中的表达显著高于在低分化腺癌和黏液癌中的表达 ( P<0 .0 5 )。但它们的表达与胃癌浸润深度、淋巴结转移无关。结论 MRP、GST-π和 L RP在胃癌中高表达 ,在胃癌的原发性耐药中起重要作用。这可能是胃癌化疗效果差、死亡率高的重要原因之一。

大肠癌组织蛋白酶B表达及其与肿瘤微血管密度和生物学行为的关系

目的:探讨不同类型大肠癌组织蛋白酶()表达及其与肿瘤微血管密度(BCathepsinB,CBmicrovesseldensity,)和生物学行为的关系。MVD方法:采用免疫组化方法对例不同类型大肠癌及进行半定量和定量研究。47CBMVD结果:CB在大肠癌粘液性癌表达高于非粘液性癌,差别具显著性(P<),强阳性组值高于阴性组,二者具有显著差异0.05CBMVD(P<)。大肠癌表达与淋巴结转移关系密切(0.05CBP<)。0.05结论:结果提示,大肠癌表达与值和肿瘤浸润转CBMVD移有关,在粘液性大肠癌浸润转移中作用可能更为重要。

PARP抑制与小鼠结肠癌CT26细胞生长活性的关系

目的:探讨PARP抑制与结肠癌CT26细胞生长活性的关系。方法:采用PARP抑制剂5-氨基异喹啉酮(5-aminoisoquinolinone,5-AIQ)处理小鼠结肠癌CT26细胞,MTT法检测CT26细胞离体生长,免疫荧光双标、激光共聚焦检测结肠癌CT26细胞核内PARP与NF-κB p65的表达。结果:不同浓度的5-AIQ处理组(0.1mmol/L、0.5mmol/L、1.0mmol/L)结肠癌CT26细胞生长抑制率分别为17.52%、27.63%和39.93%,抑制率随5-AIQ浓度的增加而增加,差异具显著性(P<0.05)。PARP与NF-κB p65在CT26细胞核内存在共表达,且呈正相关(P<0.05)。5-AIQ处理组与5-AIQ未处理组相比,PARP与NF-κB p65的表达均减弱,差异具显著性(P<0.05),PARP与NF-κB p65亦呈正相关(P<0.05)。结论:PARP抑制剂5-AIQ可以抑制结肠癌CT26细胞生长活性。其可能与PARP抑制,使NF-κB活性降低有关。PARP在结肠癌生长过程中可能具有重要作用。