干扰hsa_circ_0013958/miR-637对人瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的:探讨环状RNA(circularRNA,circRNA)hsa_circ_0013958对人瘢痕疙瘩成纤维细胞(Humankeloid fibroblast,HKF)增殖、迁移、侵袭的影响及分子机制。方法:将人瘢痕疙瘩成纤维细胞分为si-NC组、si-hsa_circ_0013958组、miR-NC组、miR-637组、si-hsa_circ_0013958+anti-miR-NC组和si-hsa_circ_0013958+anti-miR-637组。实时荧光定量PCR(Real time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)试剂盒检测hsa_circ_0013958、miR-637表达;四甲基偶氮唑盐(Methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法检测细胞存活率;平板克隆实验检测细胞集落形成数;Transwell检测细胞迁移和侵袭能力;双荧光素酶报告实验检测hsa_circ_0013958和miR-637的靶向关系。结果:瘢痕疙瘩组织中hsa_circ_0013958表达水平较正常皮肤组织升高,miR-637表达水平降低(P<0.05)。干扰hsa_circ_0013958表达或过表达miR-637后,HKF细胞存活率、集落形成数以及迁移、侵袭细胞数均降低(P<0.05)。hsa_circ_0013958和miR-637有靶向调控关系;抑制miR-637表达逆转了干扰hsa_circ_0013958对HKF增殖、迁移侵袭的影响。结论:干扰hsa_circ_0013958通过调控miR-637抑制人瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖、迁移和侵袭。

脂肪源性血管基质成分对皮肤光老化的影响

目的：观察人脂肪源性血管基质成分（stromal vascular fractions,SVF）对中波紫外线（ultraviolet B,UVB）诱导的裸大鼠皮肤光老化的影响。方法：6周龄裸大鼠随机分为正常对照组及实验组,实验组持续UVB照射8周建立皮肤光老化模型并随机分为模型组,以及SVF低剂量（low-dose,LD）、中剂量（middle-dose,MD）和高剂量（high-dose,HD）（100μL悬液中的细胞数分别为10~4、10~5和10~6）治疗组;采用酶消化法提取健康女性脂肪组织中的SVF,分别取低、中、高剂量的SVF悬液注射于裸大鼠背部皮下;模型组注射相同剂量的生理盐水,正常对照组不做任何处理;7 d后取材,观察注射部位表皮厚度及结构的改变;28 d后取材观察注射部位真皮厚度及结构的改变。结果：SVF治疗7 d后,中、高剂量治疗组裸大鼠皮肤较实验对照组表皮层厚度减小、角质层比例下降、基底层处于异常增殖状态的细胞核减少（P〈0.05）。治疗28 d后,中剂量及高剂量治疗组Ⅰ型胶原蛋白mRNA相对表达量增加,Ⅲ型胶原蛋白及基质金属蛋白酶-3（matrix metalloproteinases-3,MMP-3）mRNA相对表达量下降（P〈0.05）,高剂量治疗组皮肤真皮层厚度增加（P〈0.05）。结论：SVF具有抗皮肤光老化的潜能,有潜在的临床应用价值。

髂腹下神经、髂腹股沟神经和生殖股神经变异1例

国内外文献中关于髂腹下神经、髂腹股沟神经或生殖股神经的变异包括起源、行程、数目、分支分布等诸多情况。作者在解剖1具青年女性尸体时，发现其髂腹下神经、髂腹股沟神经和生殖股神经分支或分布都有异常。该变异尚未见文献报道。

益母草对家兔离体小肠平滑肌的作用及其作用机制研究

目的研究益母草对家兔离体小肠平滑肌的作用及其机制。方法家兔小肠平滑肌标本置于恒温平滑肌槽中,用BL-420F生物机能实验系统记录小肠的收缩曲线,观察益母草对小肠收缩的影响,并观察阻断胆碱能M受体和组胺H1受体等对益母草作用的影响。结果益母草浓度依赖性兴奋离体小肠平滑肌,阻断胆碱能M受体或组胺H1受体能显著抑制益母草诱导的小肠平滑肌收缩。结论小肠平滑肌是益母草作用的靶器官,益母草通过激活小肠平滑肌上的M受体和H1受体而促进小肠平滑肌收缩。

职业苯接触后外周血中T细胞FcεRIγ基因表达下调

目的:了解职业苯接触及慢性苯中毒工人外周血中T细胞受体信号传导通路FcεRIγ基因的表达情况。方法:利用实时荧光定量PCR法分别检测22例职业苯接触工人、12例慢性苯中毒工人及9例正常人外周血单个核细胞(PBMC)中FcεRIγ基因表达情况。结果:正常人、职业苯接触及慢性苯中毒工人FcεRIγ基因表达水平的中位数分别为37.50%、12.65%、7.41%,职业苯接触及慢性苯中毒工人FcεRIγ基因表达与正常成人相比均显著下降(P<0.05);尽管慢性苯中毒工人外周血中FcεRIγ基因表达水平降低程度较职业苯接触更为明显,但二者之间无统计学意义(P>0.05)。结论:职业苯接触及慢性苯中毒工人外周血中T细胞FcεRIγ基因表达水平均下调,这种表达异常可能与接触苯后机体细胞免疫功能障碍有关。

miR-214-5p通过调控SFRP2影响人瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、凋亡

目的研究人瘢痕疙瘩形成过程中微小RNA-214-5p(miR-214-5p)与分泌型卷曲相关蛋白(SFRP)2对成纤维细胞增殖及凋亡的影响并分析可能作用机制。方法分离培养瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFB)与正常皮肤成纤维细胞(NFB),miR-214-5p mimic、miR-NC、si-SFRP2、si-NC分别转染KFB细胞,应用qRT-PCR与Western印迹分别检测miR-214-5p、SFRP2 mRNA及蛋白表达变化。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法与流式细胞术分别检测细胞增殖与凋亡。采用双荧光素酶报告实验检测miR-214-5p是否可调控SFRP2基因。结果 KFB细胞中miR-214-5p表达水平显著低于NFB细胞(P<0.05),而SFRP2 mRNA与蛋白表达水平显著高于NFB组(P<0.05)。miR-214-5p组KFB细胞增殖活力明显低于miR-NC组(P<0.05),与miR-NC组相比,miR-214-5p组CyclinD1蛋白表达水平显著降低(P<0.05),而p21、p27蛋白表达水平显著升高(P<0.05),转染miR-214-5p mimic后KFB细胞凋亡率显著高于miR-NC组(P<0.05),Bcl-2表达水平显著降低(P<0.05),而Bax、酶切caspase-3表达水平均显著升高(P<0.05),SFRP2与miR-214-5p存在结合位点,共转染miR-214-5p mimic与WT-SFRP2野生型质粒的KFB细胞相对荧光素酶活性显著低于共转染miR-NC与WT-SFRP2野生型质粒的KFB细胞(P<0.05),表明miR-214-5p可与SFRP2基因的3′UTR结合而调控其活性。miR-214-5p组SFRP2蛋白(0.17±0.03)显著低于miR-NC组(0.58±0.05,P<0.05);anti-miR-214-5p组SFRP2蛋白(0.92±0.08)显著高于anti-miR-NC组(0.59±0.06,P<0.05)。相较于si-NC组,转染si-SFRP2可显著抑制细胞增殖及显著促进细胞凋亡,共转染miR-214-5p mimic与pcDNA-SFRP2后细胞增殖活力显著高于miR-214-5p+pcDNA组(P<0.05),与miR-214-5p+pcDNA组比较,miR-214-5p+pcDNA-SFRP2组细胞凋亡能力显著降低(P<0.05)。结论 miR-214-5p负向调控SFRP2表达并通过影响细胞增殖及凋亡蛋白表达进而抑制KFB增殖并促进细胞凋亡。

重组人碱性成纤维细胞生长因子对难愈性创面愈合相关指标表达的影响研究

目的:分析并探讨重组人碱性成纤维细胞生长因子对难愈性创面愈合相关指标表达的影响,为临床治疗提供参考依据。方法:选取2019年1月-2020年12月笔者所在医院收治的难愈性创面患者100例作为观察对象,按照随机数字表法将其分为研究组和对照组,每组50例。两组患者均进行常规治疗,在此基础上研究组患者给予重组人碱性成纤维细胞生长因子治疗。对比两组患者的治疗效果及治疗期间的不良事件发生情况,对比两组患者治疗7、14 d的创面愈合面积和后期换药次数、创面愈合时间、住院时间,对比两组患者治疗前后的疼痛情况及炎症因子水平。结果:经过治疗,研究组患者的治疗总有效率为92.00%,明显高于对照组的76.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组患者的不良事件发生率为10.00%,稍微低于对照组的18.00%,但两组对比差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组患者对比,研究组患者治疗7、14 d的创面面积均缩小,后期换药次数更少,创面愈合时间及住院时间均更短,差异均有统计学意义(P<0.05)。两组患者治疗前的疼痛情况对比,差异无统计学意义(P>0.05),研究组患者治疗7、14 d的疼痛VAS评分均明显低于对照组(P<0.05)。两组患者治疗前及治疗7 d的炎症因子水平对比,差异均无统计学意义(P>0.05),且治疗7 d的炎症因子水平均较治疗前有升高的趋势(P<0.05),但两组治疗14 d的炎症因子水平均较治疗7 d明显下降(P<0.05),且研究组治疗14 d的IL-6、TNF-α、CRP均明显低于对照组(P<0.05)。结论:在难愈性创面患者的治疗中,重组人碱性成纤维细胞生长因子治疗的效果较好,可有效提高创面愈合率,缩短创面愈合时间及住院时间,缓解患者的疼痛情况,调节炎症因子水平,值得临床推广应用。

血必净减轻重度烧伤患者器官功能损害的临床研究

目的:研究血必净对重度烧伤患者的疗效及谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、降钙素原(PCT)水平的影响。方法:选取我院2014年12月-2018年12月收治的重度烧伤患者102例,根据治疗方法不同均分为两组。对照组给予补液、创面处理、抗生素等常规对症治疗,观察组在常规对症治疗基础上给予血必净治疗,分析两组患者治疗后的疗效、ALT、AST、PCT、白细胞介素-1(IL-1)、脂质过氧化物(LPO)水平变化及全身炎症反应综合征(SIRS)、多脏器功能障碍综合征(MODS)的发生率。结果:观察组总有效率(82.35%)高于对照组(62.75%),SIRS发生率(33.33%)低于对照组(60.78%),但MODS发生率(15.69%)与对照组(21.57%)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。两组治疗前ALT、AST、PCT、IL-1、LPO水平差异无统计学意义(P>0.05)。观察组治疗3天、7d后的ALT[(95.36±21.75)U/L、(61.25±10.14)U/L]、AST[(58.26±10.42)U/L、(45.36±9.98)U/L]、PCT[(3.26±0.36)ng/L、(1.45±0.22)ng/L]、IL-1[(129.02±12.63)ng/L、(118.55±10.42)ng/L]、LPO[(9.79±1.76)mg/L、(15.44±2.54)mg/L]水平低于对照组(P<0.05)。结论:血必净治疗重度烧伤可有效减轻器官功能的损害,降低SIRS的发生。

单细胞RNA测序解析普通小鼠和糖尿病小鼠全层皮肤缺损创面中CD34^(+)细胞的类型与功能

目的单细胞RNA测序解析普通小鼠和糖尿病小鼠全层皮肤缺损创面中CD34^(+)细胞的类型与功能。方法该研究为实验研究。构建CD34^(+)细胞谱系追踪小鼠,实现CD34^(+)细胞在荧光条件下可视化。取6只7~8周龄雄性CD34^(+)细胞谱系追踪小鼠(设为糖尿病组),腹腔注射链脲佐菌素构建糖尿病模型,于小鼠13周龄时在其背部制备全层皮肤缺损创面;另取6只13周龄雄性CD34^(+)细胞谱系追踪小鼠(设为对照组),在其背部制备全层皮肤缺损创面。伤后4 d,分别收集对照组3只小鼠和糖尿病组2只小鼠创面组织,消化制备单细胞悬液,采用荧光活化细胞分选法筛选出CD34^(+)细胞后进行单细胞RNA测序,采用R语言的Seurat 4.0.2程序通过降维可视化和细胞聚类分析CD34^(+)细胞类型并筛选注释各CD34^(+)细胞亚群的标记基因,对2组小鼠创面组织间CD34^(+)成纤维细胞(Fb)、平滑肌细胞、角质形成细胞(KC)、类软骨细胞的差异表达基因(DEG)进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)和基因本体论(GO)富集分析,探索细胞功能。结果伤后4 d,2组小鼠创面组织中CD34^(+)细胞均包含7种细胞类型,具体为内皮细胞、Fb、KC、巨噬细胞、T细胞、平滑肌细胞和类软骨细胞,其中Fb细分为5个亚群。与对照组比较,糖尿病组小鼠创面组织中的CD34^(+)内皮细胞、Fb亚群1、Fb亚群4、KC、类软骨细胞占比升高,CD34^(+)Fb亚群2、Fb亚群3和平滑肌细胞占比下降。注释CD34^(+)类软骨细胞、内皮细胞、Fb亚群1、Fb亚群2、Fb亚群3、Fb亚群4、Fb亚群5、KC、巨噬细胞、平滑肌细胞、T细胞的标记基因分别为转移相关肺腺癌转录本1、脂肪酸结合蛋白4、Gremlin 1、补体成分4B、H19印记母源表达转录本、Dickkopf Wnt信号通路抑制剂2、纤维调节蛋白、角蛋白5、CD74分子、G蛋白信号调节蛋白5、可诱导T细胞共刺激分子。KEGG和GO富集分析显示,与对照组比较,糖尿病组小鼠伤后4 d创面组织中CD34^(+)Fb差异表达显著的DEG显著富集于炎症反应、细胞外基质(ECM)组装、细胞增殖调控、衰老相关条目(P值均<0.05),CD34^(+)平滑肌细胞差异表达显著的DEG显著富集于细胞迁移、凋亡过程、转录的正调控、吞噬体等条目(P值均<0.05),CD34^(+)KC差异表达显著的DEG显著富集于线粒体功能、转录、神经退行性疾病相关条目(P值均<0.05),CD34^(+)类软骨细胞差异表达显著的DEG显著富集于节律调控、ECM、病毒感染等相关条目(P值均<0.05)。结论CD34^(+)细胞在普通小鼠和糖尿病小鼠全层皮肤缺损创面愈合过程中均存在高异质性,2种小鼠创面间CD34^(+)细胞亚群差异表达显著的DEG显著富集的相关功能与创面愈合过程紧密相关。

几种再生医学技术在面部年轻化治疗中的应用

衰老是机体的自然进程,皮肤老化是机体衰老最直观的表现形式.皮肤作为人体最大的器官,其老化是一个复杂的生物学过程,受内源性（遗传、病理生理、心理等）及外源性因素（物理化学因素、生物学因素等）的影响.内源性老化主要由遗传决定,常与机体其他器官共同发生,表现为皱纹产生、皮肤下垂和干燥.紫外线（UV）照射（光老化）是外源性皮肤老化的关键因素,长期接触UV的皮肤表现为粗糙、皱纹深乱、失去弹性,常伴有色素沉着或脱失[1].

温度对脂肪颗粒及脂肪干细胞活性的影响

目的探讨不同保存温度对移植脂肪组织的影响，为临床优化自体脂肪移植技术提供理论依据。方法将从健康女性脂肪抽吸所得脂肪颗粒按不同保存温度分组，对每组脂肪颗粒组织形态学、3-磷酸甘油醛脱氢酶活性、脂肪干细胞（ADsCs）提取效率及增殖能力进行观察。结果4℃保存体外脂肪颗粒24h内可以有效保护其活性，室温（25～28℃）保存体外脂肪颗粒可使其活性降低。体外脂肪颗粒提取干细胞的效率及其增殖能力受保存温度及时间的影响，室温（25～28℃）下保存超过1h的体外脂肪颗粒，ADSCs的提取效率及增殖能力明显下降。结论4℃可以有效保证脂肪组织及其所获得ADSCs的活性，在抽吸脂肪组织的过程及体外脂肪组织转运的过程中必须注意体外脂肪组织的低温保存。

自体富血小板血浆在糖尿病足治疗中的应用进展

糖尿病足引发的慢性难愈性创面是目前社会所面临的重要健康问题之一。目前,糖尿病足有越来越多先进的治疗方案,包括组织工程人工皮肤替代物法、高压氧治疗法、应用负压敷料等,然而,仍缺少十分有效的治疗手段。自体富血小板血浆(PRP)富含血小板、白细胞、生长因子等多种成分,具有促进创面修复,减轻创面疼痛,封闭保护创面,抑制局部细菌生长等特点,在糖尿病足治疗的应用中有确实的疗效。随着PRP技术日趋成熟,PRP可能成为糖尿病足领域最有发展前景的治疗方式之一。