塞来昔布抑制凝血酶诱导的大鼠软骨细胞退变

背景:骨关节炎患者血清中凝血酶含量显著高于正常人,且凝血酶可以诱导大鼠软骨细胞退变,提示抑制凝血酶功能可能成为治疗骨关节炎的一种方法。塞来昔布为临床治疗骨关节炎的常见药物,是否可以抑制凝血酶的促炎作用而改善大鼠软骨细胞退变尚未可知。目的:探讨塞来昔布对凝血酶诱导软骨细胞退变的影响。方法:使用ELISA试剂盒检测骨关节炎患者与正常人血清中凝血酶含量。体外提取、培养SD乳鼠关节软骨细胞,使用第一代细胞进行实验,将软骨细胞分对照组、凝血酶组和塞来昔布组。显微镜下观察3组细胞形态,并使用Edu试剂盒检测细胞增殖情况;qRT-PCR检测软骨细胞外基质成分(聚集蛋白聚糖、弹性蛋白、软骨寡聚基质蛋白)、炎症因子(白细胞介素1、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α)、炎症趋化因子(单核细胞趋化蛋白2、单核细胞趋化蛋白7、粒细胞趋化蛋白6)的表达;免疫荧光法检测Ⅱ型胶原α1的表达;Western Blot检测分解代谢基因如基质金属蛋白酶9、基质金属蛋白酶13和环氧化酶2等蛋白的表达。结果与结论:(1)与正常人相比,骨关节炎患者血清中凝血酶含量显著增高;(2)塞来昔布可明显抑制凝血酶诱导的软骨细胞纤维样形态改变;(3)与凝血酶组相比,塞来昔布抑制了软骨细胞的增殖;(4)凝血酶组Ⅱ型胶原α1等软骨细胞外基质基因表达的下调被塞来昔布抑制(P <0.05);(5)凝血酶可促进软骨细胞炎症因子(白细胞介素1、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α)、炎症趋化因子(单核细胞趋化蛋白2、单核细胞趋化蛋白7、粒细胞趋化蛋白6)以及分解代谢基因(基质金属蛋白酶9、基质金属蛋白酶13和环氧化酶2)的表达,在塞来昔布干预下,上述基因的表达下调(P <0.05);(6)结果提示,塞来昔布可以抑制凝血酶的促炎作用,从而改善大鼠软骨细胞退变。

颊针理念下针灸治疗肢体疼痛验案举隅

颊针疗法为王永洲教授经数十年临床研究总结而出的一种新的针法体系。该针法体系在全息理论指导下在面颊部取穴,具有取穴少、定位精确、身心同调等优点,临床使用效果显著。笔者有幸跟随王永洲教授学习此针法,并在临床应用,取得较好疗效。现选择浙江康复医院针灸科收治的肢体疼痛验案三则介绍如下。

基于膝骨关节炎患者中医体质分层探讨风寒湿外部因素对临床症状的影响特点

目的:探讨不同中医体质膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)患者中风寒湿外部因素对临床症状的影响特点。方法:采用横断面分层研究方法,选取108例Kellgren&Lawrence(K-L)分级Ⅱ级的KOA患者,其中男22例,女86例;年龄47~75(60.7±6.0)岁;身体质量指数(body mass index,BMI)17.87~31.22(23.80±2.86) kg·m^(-2)。其中3例主要体质为倾向体质,其余105例参照《中医体质分类与判定(ZYYXH/T157-2009)》判断中医体质类型,并根据体质虚实分为4层,其中无偏颇体质24例,男12例,女12例,年龄51~73(62.8±6.0)岁,BMI 17.87~31.14(24.32±3.25) kg·m^(-2);虚性偏颇体质46例,男7例,女39例,年龄47~70(60.0±5.8)岁,BMI 19.38~31.22(23.42±2.97) kg·m^(-2);实性偏颇体质26例,男2例,女24例,年龄48~75(60.4±5.8)岁,BMI 21.16~30.76(24.15±2.33) kg·m^(-2);特禀质9例,男1例,女8例,年龄53~75(59.8±7.5)岁,BMI 19.26~26.67(23.79±2.49) kg·m^(-2)。采用Western Ontario and McMaster大学骨关节炎指数(Western Ontario and McMaster Universities Osteoarthritis Index,WOMAC)评价患者临床症状严重程度;通过风寒湿痹证量表的问卷调查形式计算风寒湿外部因素积分,评价风寒湿外部因素影响的程度。采用Pearson相关分析和偏相关分析计算不同中医体质分层患者的风寒湿外部因素影响严重程度与临床症状严重程度的相关系数。结果:无偏颇体质、特禀质患者风寒湿总积分与WOMAC评分无相关性(P>0.05);虚性偏颇体质患者风寒湿总积分与WOMAC僵硬评分呈正相关(r=0.327,P=0.032),实性偏颇体质患者风寒湿总积分与WOMAC疼痛评分(r=0.561,P=0.005)、WOMAC总分(r=0.446,P=0.033)呈正相关。进一步校正风寒湿外部因素的相互影响后,实性偏颇体质风寒湿各项评分与WOMAC评分的相关性无统计学意义;虚性偏颇体质湿邪评分与WOMAC僵硬评分(r=0.414,P=0.007)呈正相关。结论:风寒湿外部因素对不同中医体质KOA患者临床症状的影响程度不一,相较于其他体质状态,虚性偏颇体质患者的僵硬症状更易受到湿邪的影响。

膝骨关节炎风寒湿痹证素评分与膝骨关节炎病情严重程度的关系研究

目的:探讨膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)风寒湿痹证素评分与膝骨关节炎病情严重程度的关系。方法:从课题组前期风寒湿痹证队列研究中筛选患者,从病例资料中提取患者的性别、年龄、体质量指数、中医证候、西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎指数(Western Ontario and McMaster Universities osteoarthritis index,WOMAC)评分和膝骨关节炎全器官磁共振成像评分(whole-organ magnetic resonance imaging score,WORMS)。拟定包含25个证候条目的KOA风寒湿痹证素评分量表,并对入选患者进行证素评分。分析KOA风寒湿痹证素评分与WOMAC评分、WORMS的关系。结果:①一般情况。共纳入102例KOA患者,男22例、女80例;年龄47~73岁,中位数61岁;体质量指数17.87~31.14 kg·m^(-2),中位数23.43 kg·m^(-2);KOA风寒湿痹证素评分0~21分,中位数7分;WOMAC评分0~159.4分,中位数39.7分;WORMS 6~60分,中位数18.75分。②相关性分析结果。KOA风寒湿痹证素评分与WOMAC评分、WORMS均呈正相关(r=0.495,P=0.000;r=0.243,P=0.014);排除年龄、性别、体质量指数的影响后,KOA风寒湿痹证素评分与WOMAC评分呈正相关(r=0.419,P=0.000),与WORMS不存在相关性(r=0.163,P=0.108)。③回归分析结果。KOA风寒湿痹证素评分≥12分对WOMAC评分、WORMS均具有正向影响(β=42.86,P=0.000;β=6.89,P=0.018);排除年龄、性别、体质量指数的影响后,KOA风寒湿痹证素评分≥12分对WOMAC评分具有正向影响(β=24.13,P=0.016),对WORMS无影响(β=4.87,P=0.120)。结论:KOA风寒湿痹证素评分与KOA的病情严重程度呈正相关,KOA风寒湿痹证素评分≥12分可提示KOA患者病情较重。

全膝关节磁共振成像积分对膝骨关节炎诊断价值的探讨

目的:探讨全膝关节磁共振成像积分(WORMS)对膝骨关节炎(KOA)患者的诊断价值。方法:回顾性分析2009年11月至2011年1月门诊及住院KOA伴膝关节积液患者70例,男12例,女58例;年龄46～75岁,平均(59.66±9.93)岁。用WOMAC量表进行临床症状评估,用K-L分级及全膝关节磁共振成像积分(WORMS)进行放射学评估,同时应用ELISA法检测患者关节液中COMP及CTX-Ⅱ的浓度。并对上述指标进行相关性分析及多重线性回归分析。结果:WOMAC评分及WORMS分别为(57.50±8.20)和(64.54±16.45)分,CTX-Ⅱ及COMP含量分别为2.42ng/ml和4.56ng/ml。选择WORMS四分位数中轻和严重2组,比较2组COMP差异有统计学意义(Z=2.04,P=0.039),而CTX-Ⅱ差异则无统计学意义(Z=0.79,P=0.427)。相关性分析发现WORMS与WOMAC评分、K-L分级呈正相关(r=0.777,P<0.01;r=0.716,P<0.01),K-L分级与WOMAC评分也呈正相关(r=0.692,P<0.01)。WORMS中关节软骨积分、骨赘积分、滑膜炎积分分别与WOMAC评分、K-L分级及COMP亦呈正相关(r=0.771,P<0.01;r=0.509,P<0.01;r=0.917,P<0.01)。以WOMAC评分为应变量,年龄、性别、K-L分级、WORMS、COMP和CTX-Ⅱ为自变量进行逐步回归(F=20.327,P<0.01),KOA病情主要受WORMS、K-L分级影响(P=0.015,P=0.025)。结论:WORMS对膝骨关节炎的诊断有较高的参考价值。WORMS高时,关节液中COMP含量升高。膝骨关节炎的临床症状主要受WORMS、K-L分级影响。

TLR4/NF-κB通路参与大鼠膝骨关节炎滑膜早期病变的研究

目的:探讨TLR4/NF-κB通路在大鼠膝骨关节炎(OA)滑膜早期病变的表达情况。方法:将8周龄体重为(200±20) g的18只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为模型组和对照组,每组9只。模型组按照改良Hulth法构建膝OA模型,对照组不做手术。分别于术后4、 21 d提取滑膜组织和血清,采用PCR法检测CD14、TLR-4、IL-1β、TNF-α、MMP-13、ADAMTS-4表达;采用Western blot法检测NF-κB p65蛋白表达;采用Elisa法检测血清中透明质酸(HA)及Ⅲ型前胶原氨基端(PⅢNP)浓度。结果:术后4、21 d时模型组CD14、ADAMTS-4及NF-κB p65表达均较对照组升高,术后21 d时模型组TLR-4、Ⅱ-1β、TNF-α及MMP-13表达较对照组升高(P<0.01)。模型组术后4 d时血清PⅢNP和HA浓度高于对照组,术后21 d时两组比较差异无统计学意义。结论:NF-κB通路可通过CD14/TLR-4早期激活进而触发滑膜分泌炎性因子IL-1β、TNF-a、MMP-13、ADAMTS-4,PⅢNP和HA增加介导膝OA发生。

软骨标志物CTX-Ⅱ在骨关节炎中的应用

骨关节炎(OA)的临床诊断尚缺乏有效的生物学标志物。研究证实标志物Ⅱ型胶原羧基端交联肽(CTX-Ⅱ)是关节软骨降解的特异性指标。CTX-Ⅱ检测可及时反映软骨损伤和退变程度、诊断OA发生、预测OA进展和监测药物治疗效果,从而间接反映OA患者的病情。CTX-Ⅱ的应用主要集中于OA早期,并需联合其他生物学标志物一起检测,以便更准确的反映OA病变,但其检测结果具体临床指导意义还需进一步完善。

柔肝和化痰中药复方对膝骨关节炎患者关节功能及关节液软骨寡聚基质蛋白浓度的影响

目的:比较柔肝和化痰中药复方对膝骨关节炎患者膝关节功能及关节液软骨寡聚基质蛋白浓度的影响及其安全性。方法:将61例符合要求的膝骨关节炎患者随机分为2组,Ⅰ组32例,Ⅱ组29例。Ⅰ组患者口服柔肝中药复方治疗,Ⅱ组口服化痰中药复方治疗。分别于治疗前和治疗4周后采用酶联免疫吸附法测定患者膝关节液中软骨寡聚基质蛋白的浓度,并采用自拟的膝关节功能评分量表评定患者的膝关节功能,同时观察记录2组患者治疗期间的不良反应发生情况。结果:①关节液COMP浓度测定结果。治疗前2组患者膝关节液中软骨寡聚基质蛋白浓度比较,差异无统计学意义[(4.35±1.42)ng·mL-1,(4.77±1.74)ng·mL-1,t=1.437,P=0.601];治疗后2组患者膝关节滑液中软骨寡聚基质蛋白浓度均降低[(4.21±1.66)ng·mL-1,(3.51±1.25)ng·mL-1],Ⅱ组降低程度更明显[(0.35±0.12)ng·mL-1,(1.05±0.09)ng·mL-1,t=4.024,P=0.038]。②膝关节功能评定结果。治疗前2组患者膝关节功能评分比较,差异无统计学意义[(20.63±4.89)分,(19.94±4.92)分,t=1.458,P=0.546];治疗后2组患者膝关节功能评分均降低[(9.25±3.01)分,(9.13±2.83)分],2组治疗前后降低程度比较,差异无统计学意义[(10.54±4.15)分,(9.97±4.07)分,t=1.913,P=0.205]。③不良反应评定结果。2组患者治疗期间均未发生与药物相关的不良反应。结论:与柔肝中药复方相比,化痰中药复方能更好地抑制膝骨关节炎患者软骨寡聚基质蛋白分泌,但二者改善膝关节功能的作用及其安全性相当。

中药贴膏治疗膝骨关节炎及其作用机制的研究思路初探

探讨中药贴膏干预膝骨关节炎及其作用机制的研究思路。认为应重视阐释贴膏的镇痛抗炎作用途径,明确延缓软骨退变的原理,加强对免疫和神经化学系统的影响及安全性研究。

骨软骨连接处血管生成与骨关节炎

健康成年人关节软骨内既不含血管,也不含神经。近年研究证实骨关节炎患者软骨中可见骨软骨连接处血管向软骨内延伸,而骨关节炎软骨内血管生成的具体机制尚不清楚,所涉及的各种因素正成为目前研究的热点。该文基于有关文献,就软骨血管生成的结构、代谢改变机制,及其在骨关节炎发病过程中的作用和临床病理意义作一综述。

手法闭合复位经皮微创固定治疗胫骨中下段骨折的病例对照研究

目的 ：采用手法闭合复位结合MIPPO技术经皮锁定接骨板固定与常规小腿下段前外侧入路切开复位内固定治疗胫骨中下段骨折,比较两种方法的临床效果。方法：2009年3月至2013年5月,治疗并获得随访的124例胫骨中下段骨折,其中男89例,女35例;左侧53例,右侧71例;年龄21~81岁,平均（48.62±8.93）岁;摔伤94例,车祸伤30例。微创组66例,男48例,女18例;平均年龄（47.72±9.23）岁;29例合并腓骨（或外踝）骨折;根据AO分型,A型45例,B型12例,C型9例;受伤至手术时间平均1.9 d;采用手法闭合复位技术结合MIPPO治疗。常规组58例,男41例,女17例;平均年龄（49.08±9.66）岁;26例合并腓骨（或外踝）骨折;根据AO分型,A型41例,B型10例,C型7例;受伤至手术时间平均2.3 d;采用常规小腿下段前外侧入路切开复位内固定治疗。所有患者为闭合性骨折。结果：微创组手术切口（7.34±1.42）cm,常规组（21.82±2.35）cm,微创组较常规组切口小;微创组手术时间（44.48±10.00）min,常规组（59.42±11.84）min,微创组手术时间较常规组短。随访时间10~24个月,平均15.2个月。微创组65例在术后15~20周骨折愈合,1例发生骨折延迟愈合,予补肾续骨中药口服后愈合,术后均未出现伤口处表皮感染、皮肤裂开及骨外露;常规组4例出现伤口裂开、感染,致钢板外露,3例出现骨不连并再次手术,其余骨折均愈合良好。随访过程中未出现钢板及螺钉松动、断裂及骨折再移位等现象。按照Johner-Wruhs功能评定标准,微创组疗效优于常规组。结论：手法闭合复位结合MIPPO技术治疗胫骨中下段骨折,结合了传统正骨手法与现代骨科的优点,既保护了软组织,将手术程序简化,创伤降到最小,又能获得较坚强的内固定,保证踝关节的早期功能活动,具有软组织创伤小、血运破坏少、固定可靠等优点,是治疗胫骨中下段骨折的一种有效方法,也符合微创生物学内固定观点。

“石氏手法”治疗膝骨关节炎的临床疗效回顾性分析

目的通过对"石氏手法"治疗膝关节炎临床资料的回顾并与中成药制剂的比较以观测其有效性。方法采集自2009年1月至2012年8月的膝骨关节炎病例资料。通过纳入排除标准筛选,最终纳入病例195例,其中手法组98例,中药组97例。在对两组的年龄、患者例数及首次访视的WOMAC评分的统计分析后,显示两组基线资料具有可比性。观察时程4周。结果通过治疗前后结果观察显示手法治疗组与对照组在疼痛、功能、WOMAC总分等方面都较治疗前都有明显改善(P<0.05);而对比两组间各指标治疗前后差值发现,试验组在疼痛、僵硬、功能、WOMAC总分方面与对照组差异不明显,且未见显著统计学差异(P<0.05)。所有病例未见不良事件反馈。结论手法治疗可以改善膝关节骨关节炎患者的疼痛、僵硬、关节功能障碍等症状。

河蚌提取物葡聚糖对软骨细胞Wnt通路的调控作用研究

目的 :探讨河蚌肉提取物葡聚糖HBP-A(anodonta glucan HBP-A)对体外软骨细胞Wnt通路的调控作用。方法:体外培养大鼠软骨细胞,添加IL-1β(10 ng/ml)诱导分化,分为空白组,IL-1β组,IL-1β+IWP-2(5μM,Wnt通路抑制剂)组,IL-1β+HBP-A(0.3 mg/ml)组,IL-1β+IWP-2+HBP-A共5组培养,提取各组细胞RNA和蛋白,采用Rt-PCR检测各组细胞Wnt-3a、β-catenin(24、48、72 h)及MMP-13(72 h)的基因表达;采用Western-blot检测β-catenin、MMP-13、Sox-9和Coll-Ⅱ蛋白的表达水平(48 h)。结果:细胞经IL-1β诱导分化,Wnt-3a基因表达升高,β-catenin以及MMP-13基因和蛋白表达升高,Sox-9和Coll-Ⅱ蛋白表达下调。添加HBP-A干预可以抑制IL-1β诱导下软骨细胞Wnt-3a基因的高表达、β-catenin以及MMP-13基因和蛋白的高表达,上调Sox-9和Ⅱ型胶原蛋白的表达。IWP-2和HBP-A合用时,Wnt-3a、β-catenin基因以及β-catenin蛋白表达最低,Sox-9蛋白表达最高。结论:HBP-A可通过降低Wnt/β-catenin信号通路表达,延缓软骨细胞分化,并且可与Wnt抑制剂协同调节Wnt-3a、β-catenin和Sox-9因子的表达。

膝骨关节炎患者膝关节区域局部皮温与临床症状及炎症因子的相关性研究

目的研究膝骨关节炎患者膝关节区域局部皮温与临床症状及炎症因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)]水平的相关性。方法随机选择膝骨关节炎患者104例,以近红外成像拍照技术采集患者膝关节区域局部温度,运用WOMAC评分评定患者临床症状,同时采用ELISA法测定患者血浆TNF-α、IL-6、IL-1β水平,利用Spareman相关和偏相关性分析膝关节各区域皮温与WOMAC评分、炎性因子水平的相关性。结果校正相关协变量后,膝关节内侧胫骨平台区温度与WOMAC功能评分及总体评分均具有相关性(r=0.203,P=0.043;r=0.205,P=0.041);膝关节内侧胫骨平台区、外侧胫骨平台区、股骨内侧髁区、股骨外侧髁区、髌上区及整个膝关节的皮温与血浆IL-1β水平均呈正相关(r=0.263,P=0.013;r=0.224,P=0.036;r=0.236,P=0.027;r=0.269,P=0.011;r=0.246,P=0.021;r=0.269,P=0.011)。结论膝骨关节炎患者膝关节区域局部皮温不仅可以反映患者膝关节临床症状的严重程度,而且还能体现患者体内的炎症水平。

一种获取具有旺盛增殖力的大鼠软骨细胞培养方法

目的探讨大鼠软骨细胞的培养方法。方法采用单纯胶原酶消化配合吹打法,从新生(出生24 h内)SD大鼠的膝、肩、肘关节和股骨头处的软骨中提取软骨细胞进行原代培养,在显微镜下观察并对甲苯胺蓝染色、阿利新蓝染色、II型胶原免疫荧光染色和增殖细胞核抗原免疫荧光染色进行鉴定;针对不同批次的实验观察结果,进行一致性检验。结果原代细胞培养第3天即可传代,前3代细胞表型稳定,增殖力良好;第4代开始出现细胞分化的迹象。不同批次实验的一致性检验结果稳定。结论采用单纯胶原酶消化配合吹打法能够在短时间内获取大量纯化且增值能力旺盛的软骨细胞。

关节镜下改良Mason-Allen法与缝线桥法治疗肩袖损伤的疗效比较

目的探讨关节镜下以改良Mason-Allen(mMA)法及双排缝线桥(SB)法修复肩袖损伤的治疗效果。方法回顾性分析自2013年9月至2017年10月上海中医药大学附属曙光医院骨关节病专科诊治的59例肩袖损伤患者的病例资料,其中男26例,女33例,年龄(58.1±9.1)岁(34～79岁)。行全关节镜下手术,采用mMA法34例(mMA组),采用双排SB法25例(SB组)。术中记录包括肩袖撕裂大小、使用锚钉数量。分析术前及术后肩关节活动度(前举、外展、内旋、外旋)及疼痛视觉模拟评分(VAS)、Constant评分、加利福尼亚大学洛杉矶分校(UCLA)评分,并用MRI检查评估患者术后肩袖再撕裂情况。结果所有患者随访至少个12月。术前mMA组肩袖撕裂为(1.2±0.7)cm,小于SB组[(1.6±0.6)cm,P<0.05];肩关节外展及外旋角度、Constant评分和UCLA评分SB组均低于mMA组(P<0.05)。术中mMA组使用锚钉(1.2±0.4)个,少于SB组[(2.8±0.8)个,P<0.05]。术后末次随访时两组患者的肩关节活动度及VAS、Constant评分和UCLA评分均较术前明显改善(P<0.05),两组间的肩关节活动度及各项临床评分均无明显差异(P>0.05)。MRI检查随访发现,两组患者肩袖再撕裂情况无差异(P>0.05)。结论关节镜下以mMA法和双排SB法修复肩袖损伤均能有效改善患者肩关节功能并缓解症状,mMA法手术操作更为简单,植入锚钉相对较少,而SB法可能更适用于肩袖撕裂较大的患者。

从经筋理论探讨膝关节骨性关节炎发病力学机制概述

现代医学研究发现生物力学机制在膝关节骨性关节炎(KOA)发病过程中具有非常重要的作用,临床上基于生物力学的治疗方法虽然较多,但在实际应用上却比较单一,没有体系化的治疗方案。以中医经筋理论为基础,结合现代医学研究成果,简述经筋力学失衡导致KOA发病的力学机制,提示临床上可从经筋力学角度制定能有效改善患膝力学环境的治疗方案。参考文献38篇。

手术治疗膝关节巨大痛风石1例

患者,男,43岁。因发现左膝关节肿块4年,左下肢活动受限半年余入院。患者既往有大量饮酒史。2006至2012年,左膝红肿疼痛间歇性发作,每年2次,曾在外院诊断为痛风,期间不规则服用碳酸氢钠片及苯溴马隆片,症状缓解,近几年未发作。4年前无明显诱因下左膝内上方出现一鹌鹑蛋大小的肿块,无明显疼痛,未予特殊处理,后肿块逐渐增大,至2013年发现肿块大小增至约5 cm×5 cm。

河蚌葡聚糖含药血清对软骨细胞β-catenin及MMP-13基因表达的影响

目的探讨河蚌葡聚糖(HBP-A)治疗骨关节炎大鼠6周后的含药血清对软骨细胞β-catenin和MMP-13基因表达的影响。方法采用6周龄的雄性SD大鼠,随机分为空白组、模型组、西药组和中药组,每组5只。采用ACLT造模方法建立膝骨关节炎模型,造模后采取相应的干预措施,连续灌胃6周后采含药血清。软骨细胞依次用2.5%、5%、10%浓度的HBP-A含药血清进行体外培养,分为空白组、模型组、西药组和中药组。培养48h后观察细胞的形态变化,采用PCR实验检测各组细胞β-catenin和MMP-13基因的表达。结果形态学观察发现10%含药血清明显促进细胞增殖,同时伴发细胞老化凋亡现象。5%浓度含药血清培养的β-catenin、MMP-13基因表达较2.5%增加,差异有统计学意义(P<0.001)。与空白组比较,2.5%、5%的模型组β-catenin和MMP-13基因表达升高,差异有统计学意义(P<0.001)。与模型组比较,2.5%、5%浓度的西药组和中药组β-catenin、MMP-13基因表达降低,差异有统计学意义(P<0.001)。与西药组比较,2.5%、5%浓度的中药组β-catenin、MMP-13基因表达降低,差异有统计学意义(P<0.001)。结论 HBP-A含药血清通过降低β-catenin和MMP-13基因的表达起到保护软骨细胞的作用。

如意珍宝片含药血清对大鼠软骨细胞增殖及分化的影响

目的探讨如意珍宝片含药血清对大鼠软骨细胞增殖及分化的影响。方法以如意珍宝片给大鼠灌胃1周后的含药血清干预软骨细胞,观察不同时间点的细胞形态,用蛋白印迹法检测细胞增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达情况。进一步采用10 ng/ml浓度的白细胞介素(IL)-1β诱导软骨细胞分化,分为空白血清组,IL-1β诱导+空白血清组,IL-1β诱导+含药血清组共3组培养,采用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组细胞的Sox-9和基质金属蛋白酶13(MMP-13)基因的表达,用蛋白印迹法检测各组细胞的β-catenin蛋白表达情况。结果如意珍宝片含药血清能促进软骨细胞的增殖,提高软骨细胞PCNA蛋白及Sox-9基因表达(P<0.05),但对MMP-13基因和β-catenin蛋白表达无明显影响(P>0.05)。结论如意珍宝片含药血清具有一定的促进软骨细胞增殖,抑制细胞分化的作用。