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青年教师卓越教学能力的提升对留学生人体解剖与组织胚胎学教学的影响 被引量:5
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作者 王巧真 王箐 +5 位作者 刘焕彩 张香宁 刘金梦 蒋欣 周风华 陈燕春 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2019年第1期81-84,共4页
高校留学生教育迅速发展,我国高校青年教师教学能力的发展还存在诸多问题,"卓越计划"背景下高校青年教师的留学生教学能力亟待提高。根据我校青年教师的发展特点以及留学生教学现状,我们通过组织精彩示范课、教师系列培训等... 高校留学生教育迅速发展,我国高校青年教师教学能力的发展还存在诸多问题,"卓越计划"背景下高校青年教师的留学生教学能力亟待提高。根据我校青年教师的发展特点以及留学生教学现状,我们通过组织精彩示范课、教师系列培训等活动以及加强基础教师实践能力培养等一系列措施,形成了一套切实可行的提高青年教师人体解剖与组织胚胎学教学能力的有效策略。经过统计分析发现,教学效果显著提高。 展开更多
关键词 卓越教学能力 青年教师 留学生教学
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药学专业人体解剖学教学体会 被引量:4
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作者 王巧真 王箐 +3 位作者 刘永新 蒋吉英 刘清华 陈燕春 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2016年第2期202-204,共3页
人体解剖学是我校药学专业的基础必修课,但教学效果往往不佳。本文分析了我校药学专业目前在人体解剖学教学中遇到的问题,并从教学内容、教学方法以及考核形式等方面提出了一系列行之有效的教学改革措施。
关键词 人体解剖学 药学专业 教学改革
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无血清培养上调N2a细胞钙反应性反式激活因子的表达 被引量:2
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作者 王巧真 金真真 +2 位作者 彭挺 管英俊 李和 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2012年第5期447-452,共6页
目的探讨钙反应性反式激活因子(calcium-responsive transactivator,CREST)是否与神经细胞的分化有关。方法选用在促分化因素作用下具有分化为神经元能力的小鼠神经母细胞瘤(N2a)细胞,用无血清培养(血清撤除)诱导N2a细胞分化。接种和培... 目的探讨钙反应性反式激活因子(calcium-responsive transactivator,CREST)是否与神经细胞的分化有关。方法选用在促分化因素作用下具有分化为神经元能力的小鼠神经母细胞瘤(N2a)细胞,用无血清培养(血清撤除)诱导N2a细胞分化。接种和培养N2a细胞12~24h后,将其分为对照组和无血清诱导组,对照组继续在含5%胎牛血清(FBS)的培养基中培养,无血清诱导组在不含FBS的培养基中培养。采用免疫印迹技术、免疫荧光技术和RT-PCR检测无血清诱导分化对N2a细胞CREST蛋白和mRNA表达的影响。结果在含5%胎牛血清(FBS)培养基培养的对照N2a细胞中,CREST蛋白水平在各时间点均无明显变化,CREST mRNA水平仅在培养48h后略有升高。而在无血清诱导分化的N2a细胞中,CREST蛋白表达水平在无血清诱导12h时无明显变化,但在诱导24h后明显升高,诱导48h后进一步升高;RT-PCR检测显示,CREST mRNA在无血清诱导12h后即开始升高,诱导24h和48h则升高更为明显。结论无血清诱导分化的N2a细胞中CREST的表达上调,提示CREST可能参与神经细胞的分化。 展开更多
关键词 钙反应性反式激活因子 小鼠神经母细胞瘤细胞 神经元分化
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超声波抑垢强化换热实验研究 被引量:8
4
作者 王巧真 赵晓彤 +2 位作者 程金明 蓝澜 傅俊萍 《电力设备》 2006年第12期38-40,共3页
一定功率和频率下的超声波不仅可以满足防、除垢要求,而且可以起到强化传热的效果。文章论述了超声波在防除垢与强化传热方面的作用。建立了超声波对防除垢和换热系数影响的数学模型,并通过模拟换热器实际的工作状况,获得有超声波和无... 一定功率和频率下的超声波不仅可以满足防、除垢要求,而且可以起到强化传热的效果。文章论述了超声波在防除垢与强化传热方面的作用。建立了超声波对防除垢和换热系数影响的数学模型,并通过模拟换热器实际的工作状况,获得有超声波和无超声波的相应的实验数据并进行计算,从而得出了超声波的抑垢率和平均换热系数,证明了超声波可应用于电厂换热器的防除垢和强化换热效果。 展开更多
关键词 超声波 防除垢 强化传热
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CREST在骨巨细胞瘤中的表达及意义
5
作者 王巧真 刘焕彩 +1 位作者 陈燕春 周风华 《潍坊医学院学报》 2014年第6期408-410,446,共4页
目的研究钙反应性反式激活因子(CREST)在各级骨巨细胞瘤组织中的表达变化,探讨其与骨巨细胞瘤临床病理分级的关系。方法应用免疫组织化学技术检测60例骨巨细胞瘤标本中CREST的表达变化。结果 CREST定位于细胞核,表达于大多数骨巨细胞瘤... 目的研究钙反应性反式激活因子(CREST)在各级骨巨细胞瘤组织中的表达变化,探讨其与骨巨细胞瘤临床病理分级的关系。方法应用免疫组织化学技术检测60例骨巨细胞瘤标本中CREST的表达变化。结果 CREST定位于细胞核,表达于大多数骨巨细胞瘤的肿瘤细胞中。随着肿瘤组织临床病理分级增高,CREST表达率增高,CREST的表达在骨巨细胞瘤率Ⅰ级和骨巨细胞瘤Ⅲ级间的差别有统计学意义(P<0.05),在骨巨细胞瘤其他各分级间差异无显著性(P>0.05)。结论 CREST的表达与临床病理分级存在一定相关性。 展开更多
关键词 钙反应性反式激活因子 骨巨细胞瘤 免疫组织化学技术
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CREST对N2a细胞突起生长的影响
6
作者 王巧真 李和 +1 位作者 金真真 彭挺 《潍坊医学院学报》 2014年第5期321-323,351,共4页
目的观察钙反应性反式激活因子(CREST)过表达对小鼠神经母细胞瘤(N2a)细胞突起生长的影响。方法实验分为3组,实验组用pCMV-HA-CREST转染的N2a细胞,空载体对照组用pCMV-HA转染的N2a细胞,空白对照组用未转染任何试剂的N2a细胞,分别加入70m... 目的观察钙反应性反式激活因子(CREST)过表达对小鼠神经母细胞瘤(N2a)细胞突起生长的影响。方法实验分为3组,实验组用pCMV-HA-CREST转染的N2a细胞,空载体对照组用pCMV-HA转染的N2a细胞,空白对照组用未转染任何试剂的N2a细胞,分别加入70mmol/L KCl孵育过夜。在转染后24h,48h采用考马斯亮蓝染色法检测N2a细胞突起生长状态。结果在转染后24h,CREST基因过表达的细胞与两对照组细胞相比较,细胞突起生长差异无显著性。在转染后48h,CREST基因过表达的细胞与两对照组细胞相比较,突起生长明显,部分突起交织成网络。两对照组间在细胞转染后各时间点突起生长状态差异无显著性(P<0.05)。结论过表达CREST可促进N2a细胞突起的生长。 展开更多
关键词 钙反应性反式激活因子 小鼠神经母细胞瘤细胞 突起生长
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CREST与MMP-2、MMP-9在乳腺癌侵袭转移中的作用及关系 被引量:8
7
作者 任甜甜 王巧真 +3 位作者 周风华 田红艳 陈萍萍 吕世军 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第23期6700-6702,共3页
目的观察钙反应性反式激活因子(CREST)、MMP-2、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在不同TNM分期乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌侵袭、转移的关系。方法乳腺癌组织90例,苏木素-伊红(HE)染色确定组织学类型、组织学分级,结合临床资料确定TNM分期... 目的观察钙反应性反式激活因子(CREST)、MMP-2、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在不同TNM分期乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌侵袭、转移的关系。方法乳腺癌组织90例,苏木素-伊红(HE)染色确定组织学类型、组织学分级,结合临床资料确定TNM分期,分为乳腺癌TNMⅠ期20例,Ⅱ期40例,Ⅲ期30例,分别应用免疫组织化学SP法检测CREST、MMP-2、MMP-9蛋白在乳腺癌组织不同TNM分期的表达;RT-PCR和Western印迹检测CREST在mRNA和蛋白水平的变化,分析三者的相关性及其与TNM分期的关系。结果 CREST、MMP-2、MMP-9蛋白在TNMⅢ期乳腺癌中的阳性表达率明显高于TNMⅠ、Ⅱ期,且在TNMⅡ期乳腺癌中的阳性表达率明显高于TNMⅠ(P均<0.05),且三者的表达呈正相关(P均<0.05)。CREST mRNA在TNMⅢ期乳腺癌中的相对表达量明显高于TNMⅠ、Ⅱ期,在TNMⅡ期乳腺癌中的相对表达量明显高于TNMⅠ(P均<0.05)。CREST和MMP-2、MMP-9的高表达均与分化程度有关(P均<0.05),而与患者的年龄无关(P>0.05)。结论乳腺癌中CREST、MMP-2、MMP-9的高表达可能与其侵袭、转移有关,联合检测三者的表达,对乳腺癌预后判断可能有指导作用。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 CREST MMP-2 MMP-9 侵袭 转移
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PBL和TBL相结合的教学模式在护理专业人体解剖学教学中的应用 被引量:18
8
作者 王箐 王巧真 +4 位作者 刘永新 王孝文 刘清华 赵春艳 陈燕春 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2016年第4期378-381,共4页
人体解剖学是护理专业学生重要的基础医学课程。为突出护理专业特色,提高解剖学教学质量,本团队在我院2015级护理专业本科学生人体解剖学教学中试行了以问题为基础的学习(problem-based learning,PBL)和以团队为基础的学习(team-based l... 人体解剖学是护理专业学生重要的基础医学课程。为突出护理专业特色,提高解剖学教学质量,本团队在我院2015级护理专业本科学生人体解剖学教学中试行了以问题为基础的学习(problem-based learning,PBL)和以团队为基础的学习(team-based learning,TBL)相结合的教学模式。课程结束后比较教学效果,并收集学生的反馈意见进行分析。结果表明,科学应用PBL和TBL相结合的教学法是增强学生学习兴趣、使其牢固掌握解剖学基础内容及提高护理专业学生综合能力的重要环节。 展开更多
关键词 以问题为基础的学习 以团队为基础的学习 人体解剖学 护理专业
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“翻转课堂+对分课堂”教学模式运用于人体解剖学教学的可行性分析 被引量:23
9
作者 刘清华 李磊 +3 位作者 高香红 王巧真 蒋吉英 刘雨清 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2018年第1期92-95,共4页
本研究以提升医学专业学生的自主学习能力为目标,将"翻转课堂和对分课堂"两种教学模式相结合,并运用于人体解剖学教学中,可以使学生在课后,通过教学视频、音频、电子教材等数字电子资料补充学习,来提高自主选择学习的能力,增... 本研究以提升医学专业学生的自主学习能力为目标,将"翻转课堂和对分课堂"两种教学模式相结合,并运用于人体解剖学教学中,可以使学生在课后,通过教学视频、音频、电子教材等数字电子资料补充学习,来提高自主选择学习的能力,增加课堂中生生及师生互动时间,以解决学生学习基础层次不齐、讨论时间不够等问题,最终提高课堂讨论的实效性,实现学生的个性化发展。 展开更多
关键词 对分课堂 翻转课堂 人体解剖学教学
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自噬相关基因Atg4B及LC3-Ⅱ在肌萎缩侧索硬化症转基因鼠海马中的表达及意义 被引量:5
10
作者 周风华 刘焕彩 +5 位作者 陈燕春 鞠杰 蒲雷东 王巧真 接琳琳 丁昊宇 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期3216-3218,共3页
目的观察自噬相关基因Atg4B及LC3-Ⅱ在肌萎缩侧索硬化症(ALS)转基因鼠海马组织中的表达变化,探讨细胞自噬机制在ALS发病中的作用及意义。方法选择SOD1-G93A转基因鼠进行试验,分别于发病早、中、晚期,通过RT-PCR、免疫荧光检测小鼠海马... 目的观察自噬相关基因Atg4B及LC3-Ⅱ在肌萎缩侧索硬化症(ALS)转基因鼠海马组织中的表达变化,探讨细胞自噬机制在ALS发病中的作用及意义。方法选择SOD1-G93A转基因鼠进行试验,分别于发病早、中、晚期,通过RT-PCR、免疫荧光检测小鼠海马组织中Atg4B、LC3-Ⅱ在m RNA、蛋白水平的表达及变化。结果与野生型鼠相比较,转基因鼠的Atg4B在m RNA及蛋白水平表达均下调;LC3-Ⅱ在蛋白水平表达上调,在m RNA水平变化不明显。结论自噬相关基因Atg4B及LC3-Ⅱ参与了ALS发病,ALS海马组织的病变与自噬异常有关。 展开更多
关键词 自噬 ALS Atg4B LC3-Ⅱ
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DDX3和酪蛋白激酶1ε在肌萎缩侧索硬化症转基因鼠脑干中的表达变化 被引量:3
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作者 张雅雯 王箐 +5 位作者 原萌 刘焕彩 王巧真 丁昊宇 周风华 陈燕春 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期1-6,共6页
目的检测DDX3和酪蛋白激酶1ε(CK1ε)在肌萎缩侧索硬化症(ALS)转基因鼠脑干中的表达变化,探讨DDX3和CK1ε在ALS脑干运动神经元变性中的作用。方法选取ALS转基因鼠33只,分别于发病早期(95 d)、中期(108 d)和晚期(122 d)3个时间点剥离脑干... 目的检测DDX3和酪蛋白激酶1ε(CK1ε)在肌萎缩侧索硬化症(ALS)转基因鼠脑干中的表达变化,探讨DDX3和CK1ε在ALS脑干运动神经元变性中的作用。方法选取ALS转基因鼠33只,分别于发病早期(95 d)、中期(108 d)和晚期(122 d)3个时间点剥离脑干,应用RT-PCR、Western blotting和免疫荧光染色技术分别检测ALS转基因鼠脑干组织中DDX3和CK1ε的表达规律,在脑干运动核团舌下神经(12 N)和面神经(7 N)中阳性细胞的分布特点及细胞定位,每组均选择相同数量的同窝野生型鼠作为对照。结果 RT-PCR和Western blotting结果显示,与同窝野生型鼠相比,ALS转基因鼠脑干组织中DDX3和CK1εmRNA于95 d、108 d、122 d表达均无明显变化,DDX3和CK1ε蛋白在95 d和108 d表达上调,122 d表达下调(P<0.01,P<0.001)。免疫荧光结果显示,在ALS鼠和野生型鼠脑干的12 N和7N区域均可检测到DDX3和CK1ε阳性细胞,DDX3和CK1ε表达在神经元,在星形胶质细胞不表达。ALS鼠和野生型鼠DDX3和CK1ε免疫反应性具有差异。结论 DDX3和CK1ε在脑干中的表达异常与ALS发病密切相关。 展开更多
关键词 肌萎缩侧索硬化症 脑干 DDX3 酪蛋白激酶Ⅰε 免疫印迹法 反转录聚合酶链反应 小鼠
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自噬与骨肉瘤研究进展 被引量:5
12
作者 鞠杰 刘焕彩 +5 位作者 王巧真 刘永新 王箐 张雅雯 周风华 陈燕春 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第23期6024-6027,共4页
骨肉瘤是一种骨髓间充质来源的原发性恶性骨肿瘤,通常发生在长骨干骺端和膝关节周围,主要发生在青少年时期,成人呈现双峰年龄分布。通常采取多种方式联合治疗,包括辅助化疗、截肢与保肢重建手术。化疗联合手术治疗能够极大提高生存率,... 骨肉瘤是一种骨髓间充质来源的原发性恶性骨肿瘤,通常发生在长骨干骺端和膝关节周围,主要发生在青少年时期,成人呈现双峰年龄分布。通常采取多种方式联合治疗,包括辅助化疗、截肢与保肢重建手术。化疗联合手术治疗能够极大提高生存率,然而超过80%的手术治疗患者表现出转移,患者预后极差。此外,化疗所带来的毒性和副作用严重影响了患者的治疗效果。当前自噬上调被发现存在于多种肿瘤疾病中,降低自噬可限制肿瘤生长。 展开更多
关键词 自噬 骨肉瘤 自噬相关因子
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肌萎缩侧索硬化症转基因小鼠脊髓中自噬相关基因ATG5表达降低 被引量:5
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作者 刘永新 管英俊 +5 位作者 陈燕春 王巧真 接琳琳 周风华 张皓云 卢强 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2016年第2期107-111,共5页
目的明确自噬相关基因ATG5在肌萎缩侧索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)转基因鼠脊髓中的表达情况.方法取95d、108d和122d ALS转基因小鼠和野生型小鼠脊髓,应用免疫荧光、Western blot和RT-PCR技术,检测ATG5在脊髓中的表达.... 目的明确自噬相关基因ATG5在肌萎缩侧索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)转基因鼠脊髓中的表达情况.方法取95d、108d和122d ALS转基因小鼠和野生型小鼠脊髓,应用免疫荧光、Western blot和RT-PCR技术,检测ATG5在脊髓中的表达.结果免疫荧光染色检测显示,在脊髓内,ATG5免疫反应产物主要定位于神经元;与同窝野生型小鼠比较,脊髓内ATG5免疫反应性在95d转基因小鼠无明显差异,而在108d和122d转基因小鼠明显降低.Western blot和RT-PCR分析显示,与同窝野生型小鼠比较,脊髓内ATG5 mRNA和蛋白表达水平在95d无明显变化,但在108d和122d时,转基因小鼠脊髓内ATG5 mRNA和蛋白表达均显著低于同窝野生型小鼠.结论ATG5在ALS转基因鼠脊髓中表达降低,提示ATG5表达异常与ALS发生密切相关. 展开更多
关键词 肌萎缩侧索硬化症 转基因小鼠 自噬 ATG5 脊髓
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组织胚胎学考查课教学改革的实践与思考
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作者 王巧真 《学子(理论版)》 2014年第07S期136-136,共1页
对于部分专业,在我校组织胚胎学被定为考查课,考查课课时少而组织胚胎学内容多且复杂,学生学习难度较大。为了提高组织胚胎学教学质量,本教研室在组织胚胎学考查课教学实践中尝试采取了一系列的教学改革措施,包括教学内容、教学方法和... 对于部分专业,在我校组织胚胎学被定为考查课,考查课课时少而组织胚胎学内容多且复杂,学生学习难度较大。为了提高组织胚胎学教学质量,本教研室在组织胚胎学考查课教学实践中尝试采取了一系列的教学改革措施,包括教学内容、教学方法和考核方法的改进,取得了良好的教学效果。 展开更多
关键词 组织胚胎学 考查课 教学改革
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Cyclin D1在肌萎缩侧索硬化症转基因小鼠大脑皮层和海马中的表达 被引量:3
15
作者 刘焕彩 丁昊宇 +4 位作者 王箐 张雅雯 原萌 王巧真 陈燕春 《神经解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第4期423-429,共7页
目的:通过检测细胞周期相关蛋白D1(Cyclin D1)在肌萎缩侧索硬化症(ALS)转基因小鼠大脑皮层和海马中的表达变化,探讨Cyclin D1表达改变与ALS发病的关系。方法:选取成年ALS小鼠和同窝野生型小鼠,于发病早、中、晚期(95 d,108 d,122 d)取材... 目的:通过检测细胞周期相关蛋白D1(Cyclin D1)在肌萎缩侧索硬化症(ALS)转基因小鼠大脑皮层和海马中的表达变化,探讨Cyclin D1表达改变与ALS发病的关系。方法:选取成年ALS小鼠和同窝野生型小鼠,于发病早、中、晚期(95 d,108 d,122 d)取材,应用免疫荧光技术检测Cyclin D1在大脑皮层和海马的表达规律及与神经元和星形胶质细胞的共定位关系,应用RT-PCR检测Cyclin D1 mRNA表达情况,应用免疫印迹法检测蛋白表达量的改变。结果:ALS小鼠和野生型小鼠大脑皮层和海马中均可检测到Cyclin D1阳性细胞,且与神经元共表达。在发病早、中、晚期,ALS小鼠大脑皮层中Cyclin D1 mRNA和蛋白表达较野生型鼠增多(P<0.05,P<0.01,P<0.001);与同窝野生型小鼠相比,ALS小鼠海马中Cyclin D1 mRNA和蛋白在发病的早、中、晚期表达均降低(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。Cyclin D1阳性细胞主要分布在海马CA区(包括CA1、CA2和CA3),DG区仅散在表达。结论:Cyclin D1在ALS转基因小鼠大脑皮层和海马中表达异常,表明Cyclin D1调节的细胞周期改变与ALS大脑皮层和海马区病变密切相关。 展开更多
关键词 肌萎缩侧索硬化症 转基因鼠 大脑皮层 海马 细胞周期蛋白D1 小鼠
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与病理医师规范化培训相结合的病理学研究生应用型人才的培养 被引量:3
16
作者 刘清华 周风华 +3 位作者 蒋吉英 张宝刚 王巧真 刘雨清 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2016年第2期195-196,199,共3页
本研究以提升病理学硕士研究生职业能力为目标,通过研究生培养与病理学医师规范化培训的有机结合,增强研究生临床病理学实践能力,提高其临床职业能力,达到病理医师规范化培训的要求,使毕业后能尽快胜任病理科日常工作,成为真正意义上的... 本研究以提升病理学硕士研究生职业能力为目标,通过研究生培养与病理学医师规范化培训的有机结合,增强研究生临床病理学实践能力,提高其临床职业能力,达到病理医师规范化培训的要求,使毕业后能尽快胜任病理科日常工作,成为真正意义上的临床病理学应用型人才。 展开更多
关键词 病理医师规范化培训 研究生 实践能力
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DDX3和DDX5在环磷酰胺致大鼠神经管畸形神经上皮细胞中的表达变化 被引量:2
17
作者 王箐 王巧真 +5 位作者 刘永新 张雅雯 马晓君 赵春艳 杜红梅 陈燕春 《解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第4期369-372,411,共5页
目的:探讨RNA解旋酶DDX3和DDX5在环磷酰胺致大鼠神经管畸形神经上皮细胞中的表达及与神经管畸形发生之间的关系,为阐明神经管畸形发生的分子机制提供实验依据。方法:选取不同时间点环磷酰胺致神经管畸形模型组和对照组大鼠石蜡切片,应... 目的:探讨RNA解旋酶DDX3和DDX5在环磷酰胺致大鼠神经管畸形神经上皮细胞中的表达及与神经管畸形发生之间的关系,为阐明神经管畸形发生的分子机制提供实验依据。方法:选取不同时间点环磷酰胺致神经管畸形模型组和对照组大鼠石蜡切片,应用免疫荧光组织化学显色法检测神经上皮细胞中DDX3和DDX5的表达变化。结果:与对照组相比,模型组大鼠神经管神经上皮细胞中DDX3和DDX5阳性表达在环磷酸胺处理后4 h无改变,8、12、24 h均升高,48 h则降低,差异均有统计学意义。结论:环磷酰胺导致大鼠胚胎神经管神经上皮细胞中DDX3和DDX5表达异常,提示DDX3和DDX5可能参与了神经管畸形的发生。 展开更多
关键词 环磷酰胺 神经管畸形 RNA解旋酶 DDX3 DDX5 大鼠
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AKT-糖原合成激酶-3β信号通路对SOD1G93A突变N2a细胞的保护作用 被引量:1
18
作者 陈燕春 管英俊 +5 位作者 刘永新 周风华 刘焕彩 王巧真 马晓君 赵春艳 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期433-441,共9页
目的探讨AKT-糖原合成激酶-3β(GSK-3β)信号通路对SOD1G93A突变N2a细胞的作用及机制。方法选取小鼠成神经瘤细胞系N2a,分别转染p EGFP-WT-SOD1和p EGFP-G93A-SOD1质粒,应用Western blotting和免疫荧光染色方法检测AKT、GSK-3β和细胞... 目的探讨AKT-糖原合成激酶-3β(GSK-3β)信号通路对SOD1G93A突变N2a细胞的作用及机制。方法选取小鼠成神经瘤细胞系N2a,分别转染p EGFP-WT-SOD1和p EGFP-G93A-SOD1质粒,应用Western blotting和免疫荧光染色方法检测AKT、GSK-3β和细胞周期蛋白D1(cyclin D1)在细胞模型中的表达变化。应用RT-PCR和Western blotting技术检测siRNA沉默AKT后GSK-3β和cyclin D1在SOD1突变N2a细胞中的表达变化,通过MTS方法,检测细胞增殖和存活的改变。结果与p EGFP-WT-SOD1转染的N2a细胞比较,p EGFP-G93A-SOD1转染的N2a细胞中AKT及GSK-3β总蛋白在转染后24 h和48 h表达均无明显变化,p-AKT(Ser473)、p-GSK-3β(Ser9)和cyclin D1表达均升高。免疫荧光染色结果显示,转染后24 h和48 h,p-AKT(Ser473)、p-GSK-3β(Ser9)和cyclin D1在p EGFP-G93A-SOD1转染的N2a细胞中表达均升高。应用siRNA沉默AKT后与对照组相比,在转染后48 h和72h,AKT、p-AKT(Ser473)、GSK-3β、p-GSK-3β(Ser9)和cyclin D1蛋白均降低。MTS实验结果显示,在AKT沉默后72h、96 h、120 h,N2a细胞增殖和活力降低。结论 SOD1G93A突变影响N2a细胞中AKT、GSK-3β翻译后磷酸化修饰及cyclin D1的表达,AKT可能通过调控GSK-3β和cyclin D1影响SOD1G93A突变N2a细胞的增殖和存活。 展开更多
关键词 肌萎缩侧索硬化症 成神经瘤细胞N2a AKT 糖原合成激酶-3β 细胞周期蛋白D1 免疫印迹法 小鼠
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自噬相关基因4B在肌萎缩侧索硬化症转基因鼠动物模型及细胞模型中的表达 被引量:1
19
作者 陈燕春 刘焕彩 +5 位作者 周风华 王巧真 丁昊宇 接琳琳 杜红梅 赵春艳 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期520-520,封2,共5页
目的:检测自噬相关基因(Atg) 4B在肌萎缩侧索硬化症(ALS)转基因鼠动物模型、神经母细胞瘤与脊髓杂交细胞系34(NSC-34)运动神经元细胞模型中的表达变化,探讨Atg4B调节的自噬与ALS发病的关系.方法:通过RT-PCR、免疫印迹和免疫组织化学检测... 目的:检测自噬相关基因(Atg) 4B在肌萎缩侧索硬化症(ALS)转基因鼠动物模型、神经母细胞瘤与脊髓杂交细胞系34(NSC-34)运动神经元细胞模型中的表达变化,探讨Atg4B调节的自噬与ALS发病的关系.方法:通过RT-PCR、免疫印迹和免疫组织化学检测Atg4B在ALS转基因鼠发病不同时间点脊髓中的表达变化;应用pEGFP-G93A-SOD1和pEGFP-wt-SOD1转染NSC-34细胞,通过RT-PCR、免疫印迹和免疫荧光显色检测转染后24、48 h和72 h Atg4B在细胞模型中的表达变化.结果:与野生型鼠相比较,ALS鼠脊髓中Atg4B mRNA及蛋白在发病早期变化不明显,发病中期和晚期均下调;与转染pEGFP-wt-SOD1的NSC-34细胞相比,转染pEGFP-G93 A-SOD1的NSC-34细胞在转染后24 h Atg4B mRNA及蛋白无明显变化,转染后48 h和72 h均下调.结论:自噬基因Atg4B表达下调与ALS发病密切相关. 展开更多
关键词 肌萎缩侧索硬化症 自噬 自噬相关基因4B 转基因鼠 神经母细胞瘤与脊髓杂交细胞系-34
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地源热泵土壤源换热器的施工技术 被引量:3
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作者 程金明 王巧真 《探矿工程(岩土钻掘工程)》 2007年第7期25-27,共3页
地源热泵(G round Source Heat Pump,GSHP)作为最有发展潜力的热泵技术在各级政府的积极推介下发展迅速,但由于地源换热器施工安装成本高,技术的发展遇到了很大的阻力。探讨了土壤源换热器施工技术和土壤源换热器的热平衡问题,力图提高... 地源热泵(G round Source Heat Pump,GSHP)作为最有发展潜力的热泵技术在各级政府的积极推介下发展迅速,但由于地源换热器施工安装成本高,技术的发展遇到了很大的阻力。探讨了土壤源换热器施工技术和土壤源换热器的热平衡问题,力图提高土源换热器施工技术,降低地源热泵成本,促进该技术的推广应用。 展开更多
关键词 地源热泵 土壤源换热器 岩土钻掘 施工技术
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