8年生马尾松二代种子园控制授粉子代生长性状和形质性状的遗传变异与选择

为揭示马尾松Pinus massoniana三代选择群体生长性状的遗传变异规律,为高阶遗传改良筛选优良种质,为育种亲本评价奠定基础,本研究以营建在浙江省淳安县十八坞林场的8年生马尾松二代种子园控制授粉子代家系林为试验材料,测定其树高、胸径、单株材积等主要性状,分析其遗传变异、遗传力和性状间的相关性。结果表明,8年生马尾松二代种子园控制授粉子代的生长性状(树高、胸径和单株材积)以及形质性状(冠幅和干形)在家系间均存在极显著差异,材积的表型变异系数和遗传变异系数均最大,表明材积在遗传水平和表型水平上均存在一定程度的变异潜力;各生长性状的单株遗传力变幅为0.15~0.62,家系遗传力变幅为0.52~0.82,说明在优树选择时主要以家系选择联合家系内单株选择为主。按照20%入选率,筛选出8个优良家系,单株材积的遗传增益为22.05%~36.60%,现实遗传增益为28.60%~43.48%,均值较CK1(当地普通种)增加128.26%~152.25%,较CK2(种子园混系种)增加9.13%~19.33%;按照5%入选率筛选出91株优良单株,分布在26个家系中,与群体均值相比单株材积的遗传增益均值达80.12%。综上,8年生马尾松二代种子园控制授粉子代林具有较高的遗传变异潜力,通过遗传评价有助于种子园建园亲本的再选择,同时,选择的优良种质可作为高阶遗传改良的育种亲本进入下一育种阶段。

钢包加盖技术在鞍钢的应用

钢包加盖能够有效减少钢包运输过程的热量损失,降低炼钢过程的能源消耗。鞍钢股份有限公司炼钢总厂四分厂在转炉、LF、RH、钢包整备区域采取钢包加盖技术后,转炉出钢温度平均降低27℃,LF升温时间平均降低了约3 min,年节约成本约9100万元。

截顶与磷肥施用对马尾松结实能力和养分吸收分配的影响

【目的】研究截顶配合施用磷肥对马尾松(Pinus massoniana)雌球花密度、枝梢发育与碳(C)、氮(N)、磷(P)元素吸收与分配的影响,为提高种园管理水平和效益提供理论依据。【方法】以马尾松高产209号和低产225号无性系为材料,布置^(15)N标记的盆栽控制试验,分别在未截顶和截顶小区内,设计施钙镁磷肥0 g/plant(P0)、200 g/plant(P_(200))和400 g/plant(P_(400))处理,在花原基形成期分析了树体自下而上的第一层轮枝(H_(1))、第二层轮枝(H_(2))和顶梢(H_(3))处的针叶C、N、P含量和^(15)N贡献率(Ndff),在盛花期分析了各器官的N、P分配率。【结果】与未截顶相比,截顶处理小区209号的H_(1)处平均枝长、枝粗和雌球花密度分别增加11.06%、40.14%和9.18%,H_(2)处分别增加7.75%、65.81%和65.27%,225号H_(1)处的枝长和枝粗分别增加21.94%和28.99%,H_(2)处分别增加了17.03%和41.01%,且仅有极少量雌球花产生。无论截顶与否,施用磷肥对雌球花密度、枝长和枝粗增长量无显著影响,而品种影响显著。与未截顶相比,截顶处理增加了两个无性系幼苗的C、N、P含量和Ndff值,209号H_(1)处的C、N、P含量和Ndff值分别增加25.05%、9.15%、4.12%和37.72%,H_(2)处分别增加20.57%、8.37%、3.96%和17.09%;225无性系H_(1)处C、N、P含量和Ndff值分别增加2.51%、19.87%、8.84%和30.09%,H_(2)处分别增加20.82%、12.40%、4.39%和19.85%;209号H_(1)处的C:N增加了7.91%。在未截顶处理小区,施磷显著提高针叶C、N、P含量,以P_(400)处理增效最高,而在截顶小区,磷肥施用量只对针叶C和P含量有显著影响。无论截顶与否,施磷处理的针叶Ndff值均高于P0处理,说明磷肥提高了对^(15)N的征调能力。截顶配合施用磷肥提高了针叶的C:N和C:P值。在盛花期,N、P主要分配在老叶和主干中,截顶后209号雌球花的氮、磷分配比例较225号显著增加。【结论】截顶增加了马尾松下层针叶C、N、P素含量,促进下层枝梢生长发育,结实层下移,尤其对高产无性系马尾松的雌球花形成具有积极作用。施用磷肥可提高截顶马尾松对氮素的征调能力,并促进了氮素向雌花球的分配,有利于提高种子产量。

悬空定向侧钻技术在页岩气水平井的研究和应用

页岩气水平井逐渐成为国内外页岩气开发的主力井型,部署在川东高陡褶皱带万县复向斜江东带的一口页岩气水平井,在钻至井深5525m,水平段长1419m,发生螺杆落井事故,被迫裸眼侧钻。面对水平段注水泥浆风险高、水泥塞质量难保证、井底温度高等难点,充分调研类似井处理方案,优选悬空定向侧钻技术,主要依靠钻具组合自然下降的趋势,具有施工周期短、成本低的特点。通过对轨迹设计、侧钻点的选择、工具优化、施工工序和后期作业等方面分析论证。在该井中运用双扶正器和1.25°弯螺杆钻具组合,配合LWD测量系统,从侧钻点5430m进行控时钻进,达到降斜和摆方位的目的,两趟钻钻至完钻井深6118m,并顺利完成通井下套管作业,为今后悬空定向侧钻技术运用提供了宝贵经验。

00Cr13Ni5Mo不锈钢四钨极耦合电弧双丝增材制造工艺

为解决现有基于GTA热源增材制造工艺存在的熔覆效率较低、焊接效率较低的突出问题,该文提出一种四钨极耦合电弧双丝增材制造工艺,并通过控制变量的试验方法研究熔覆电流、行走速度与送丝速度对单层单道沉积层成形质量的影响。结果表明,熔池面积的波动与电弧压力是四钨极热源单道沉积层出现单道沉积层不连续、咬边等缺陷的主要原因,在保证成形质量的前提下,四钨极热源最大行走速度为400 mm/min、最大送丝速度为12 m/min、熔覆效率为6.24 kg/h,沉积件微观组织由回火索氏体、逆变奥氏体及碳化物组成,沉积件冲击吸收能量达到208 J,为MAG热源的2.5倍。综上所述,四钨极耦合电弧双丝增材制造工艺可以在保证优良冲击性能的前提下显著解决GTA热源增材制造工艺存在的熔覆效率较低、焊接效率较低的问题。

市政桥梁现浇混凝土箱梁预应力张拉施工技术研究

近年来,市政基础设施建设日渐完善,尤其在公共交通运输领域,做出了不少的研究实践,涌现出诸多先进施工工艺,以满足复杂地形特征和功能建设所需。而在桥梁工程建设中,现浇混凝土施工较为普遍,但容易受外界因素影响,出现不同程度的开裂问题,影响桥梁稳定性和使用寿命。为有效解决这一问题,积极引入预应力,张拉施工技术成为主要研究方向。本文将以具体工程建设为例,剖析现浇混凝土桥梁预应力张拉关键技术环节与施工要点,以供参考。

基于生长与木材性状的柏木优良家系选择

研究达主伐年龄的柏木Cupressus funebris优树子代生长与材性性状的遗传变异规律,可为选育速生优质家系及其推广应用奠定基础。以浙江省淳安县林业总场有限公司姥山分场45个32年生柏木优树子代家系试验林为试材,以淳安当地普通种(CK1)和一代种子园优树混合种(CK2)为对照,测定生长性状(树高、胸径和冠幅)、木材基本密度和树干碳含量,分析变异系数,估算遗传力参数及性状间的相关性。结果表明,柏木树高、胸径、木材基本密度和树干碳含量皆存在显著的家系差异,其中单株材积和树干碳含量变异相对较大,而木材基本密度和碳密度的变异较小,变异系数在5%以下;各性状的家系遗传力在0.21~0.63,说明除冠幅外,其余性状受中等程度以上的遗传控制。相关分析结果显示,选择速生家系可同时改良树干碳含量,但对木材基本密度和碳密度影响不大。基于速生优质和高固碳的育种目标,综合选择出5个优良家系,其单株材积、木材基本密度和树干碳分别高出种子园混系种(CK2)97.93%、2.17%和132.36%。

皮肤电活动在空军青少年航空学校学生晕动病评估中的应用

目的探讨皮肤电活动(electrodermal activity,EDA)是否可以作为一种客观评价晕动病的指标,以期提高飞行学员的精准医学选拔水平。方法随机抽取350名参加飞行学员医学选拔的青少年航空学校学生,在进行90 s科里奥利(Coriolis)加速度耐力检测时,采用可穿戴监测设备实时同步记录EDA,并通过Graybiel评分评价自主神经症状,按照Graybiel得分,分为A组(Graybiel得0分)、B组(Graybiel得1~2分)和C组(Graybiel得≥3分),共3组。分析EDA与Graybiel评分之间的关系。结果剔除指标不完整的受试者,共有301名受试者纳入研究。晕动病学生EDA呈现明显升高的变化趋势。按照Graybiel得分,A组173名,B组102名,C组26名,其中B组和C组学生后测皮肤电活动反应(skin conductance reaction,SCR)、皮肤电活动水平(skin conductance level,SCL)较A组均升高(H=-5.408、-6.781、-3.002、-2.772,P<0.001、<0.001、=0.008、=0.017),B组学生的前测SCL与较A组高(H=-3.019,P=0.008)。结论EDA可用来客观评价晕动病。采用实时EDA检测联合Graybiel评分的评价方法,可以在招飞医学选拔中更加客观地检出晕动病。

基于内参的大肠埃希氏菌O157∶H7实时荧光定量PCR快速检测方法的建立

针对大肠埃希氏菌O157∶H7 rfb E和Flic靶基因保守序列,设计特异性引物和探针,优化反应体系,并加入内参(internal amplification control,IAC),建立能够实时监控反应过程的荧光定量聚合酶链式反应(polymease chain reaction,PCR)检测方法。结果表明,该方法对E.coli O157∶H7基因组DNA的最低检测限为1 pg/μL;对含有靶基因质粒的最低检测限为103 copies/μL;对细菌的最低检测限为5×103 CFM/m L;Ct值与模板拷贝数均呈良好的线性关系(R2=0.999)。人工污染实验结果表明,在初始菌量为7 CFM/25 g时,采用水洗加试剂盒法提取DNA,E.coli O157∶H7在增菌6 h后即可检出;而采用水煮法提取DNA,则在增菌10 h后方可检出。建立的E.coli O157∶H7实时荧光定量PCR方法,既能有效检测食品中O157∶H7,又能实时监测PCR反应过程,有效防止"假阴性"的发生。

非洲猪瘟病毒RPA等温检测方法的建立

为建立一种简单、快速的非洲猪瘟病毒（ASFV）分子检测方法,基于ASFV P72基因保守序列,设计并合成引物,建立了一种ASFV重组酶聚合酶扩增（RPA）等温检测方法。结果表明,所建立的RPA方法在38℃水浴锅中恒温反应30 min,即可实现对目的片段的有效扩增;以包含ASFV P72基因的ORF质粒为模板,RPA的检测限达到10～2 copies,同世界动物卫生组织（OIE）推荐的实时荧光PCR方法检测限一致,但比OIE推荐方法的检测限高10倍;RPA仅特异性扩增ASFV P72基因,对FMDV、CSFV、PRRSV、PRV和PCV-2基因组c DNA或DNA没有扩增。本研究所建立的RPA方法操作简单、反应快速、检测成本低、结果确实可靠,为非洲猪瘟的一线防控提供了一种新的、可靠的技术支持。

老年人和中青年人首发急性左心衰竭诱因和病因的对比研究

目的对比老年人和中青年人初发急性左心衰竭的病因和诱因。寻找从基础病因到诱因的预防措施，指导老年人多病因心衰的救治。方法近5年住院初发心衰患者396例，老年组295例，年龄（73．9±8．9）岁，中青年组101例，年龄（45．2±13．5）岁。NYHA分级诊断标准，均为Ⅲ-Ⅳ级，其中急性肺水肿375例，心源性休克21例。进行病因和诱发因素比较分析。结累老年患者病因中冠心病（89．0％）、高血压（51．9％）为常见病因。风湿性心脏病、心肌病和退行性瓣膜病等病因少见，而中青年患者冠心病（38．2％）、心肌病（25．5％）、高血压性心脏病（25．5％）、风湿性心脏病（8．8％）为相对常见病因；老年人两种病因以上病例58．7％，而中青年患者单病因87．1％；从诱发因素分析老年和中青年患者肺部感染分别49．5％和51．5％，其次是心肌供血不足和劳累。但是心律失常、情绪激动等也应该受到重视，肺部感染和心肌供血不足是各年龄段诱因预防的重点。结论老年人心衰病因以防治冠心病和高血压为主，对中青年则同时重视瓣膜病和心肌病，中老年心衰病因以冠心病为主，但老年退行性瓣膜病也应该得到重视；老年人以多病因心衰更常见，提示在老年人心衰的救治中要注意处理多病因之间的矛盾，采取个性化综合治疗；肺部感染和心肌缺血是重要的心衰诱因。

鸭坦布苏病毒一步法RT-PCR与荧光定量RT-PCR检测方法的建立

为建立鸭坦布苏病毒(DTMUV)的检测方法,本研究根据GenBank中登录的DTMUV E基因保守区域设计引物和探针,建立了检测DTMUV的一步法RT-PCR和荧光定量RT-PCR方法,并比较了两种方法的敏感性和特异性。结果显示,荧光定量RT-PCR标准曲线的相关系数(R^2)为0.999,DTMUV RNA在10~2拷贝/μL^10~7拷贝/μL范围内与Ct值呈现良好的线性关系;两种方法均仅对DTMUV RNA具有特异性扩增,而对其他常见鸭病原核酸的扩增均为阴性,具有较强的特异性;一步法RT-PCR对鸭胚纯培养病毒RNA的检测下限为10~3拷贝/μL,而荧光定量RT-PCR的检测下限为10~2拷贝/μL;重复性试验的变异系数均小于1.5%。对20份模拟临床样品的检测结果表明,一步法RT-PCR的阳性率为75%(15/20),而荧光定量RT-PCR的阳性率为90%(18/20)。本研究表明所建立的DTMUV荧光定量RT-PCR特异性强、重复性好、敏感性更高,更适用于DTMUV的临床诊断和流行病学调查。

4种分离培养基检测志贺氏菌效果比较

志贺氏菌是一类具有高度传染性的肠道致病菌。文中基于GB 4789.5—2012《志贺氏菌检验》标准,比较了4种分离培养基检测志贺氏菌的效果。通过4种分离培养基对福氏志贺氏菌、宋内氏志贺氏菌的回收率、最低检出限及对不同样品检测效果的比较,对不同培养基的检测效果进行评价。结果显示4种分离培养基最低检出限相近,显色培养基01检测特异性优于其他3种;针对实际检测样品,应灵活选择培养条件,以提高检测的准确性及效率。

绵羊肺炎支原体Y-98株外膜蛋白成分分析及其免疫原性研究

采用TritonX-100裂解和0．6％KI提取的方法制备绵羊肺炎支原体Y-98株外膜蛋白，经12％SDS-PAGE分析，表明其分子量范围在14．4—125．9KD之间；分别制备抗Y-98株全细胞抗原和外膜蛋白高免血清，经Western-blotting分析，表明外膜蛋白为绵羊肺炎支原体的主要保护性抗原，而在外膜蛋白，67．6、39．3和28．8KD多肽为其主要保护性抗原。利用间接ELISA方法和MTT法对外膜蛋白引起的体液免疫和细胞免疫功能进行了测定，结果表明膜蛋白能够诱导机体产生高效价的抗体，免疫后7、14和28d效价分别达到了1：2^4.25、1：2^7.75和1：2^8.75;膜蛋白具有非特异性和特异性致有丝分裂作用，在免疫前0d及免疫后28d对T淋巴细胞刺激的转化率分别为8．46％和18．3％。

猪源性bla_(NDM-1)阴性雷氏普罗威登斯菌的分离鉴定

为了解美国进口种猪人畜共患性致病菌的携带情况,本研究采集种猪新鲜粪便样品,进行常见致病菌的分离。结果在120份样品中分离到1株普罗威登斯菌,命名为HBA13。通过不同选择性培养基、常规生化鉴定及16S rRNA基因序列同源性比对分析,鉴定HBA13为雷氏普罗威登斯菌(Providencia rettgeri)。鉴于雷氏普罗威登斯菌在细菌耐药性方面的重要意义,进行了NDM-1表型检测,并利用PCR方法进行blaNDM-1耐药基因的检测,结果表明所分离雷氏普罗威登斯菌blaNDM-1耐药基因为阴性。猪源性blaNDM-1阴性雷氏普罗威登斯菌的分离,为今后相关研究奠定了基础。

相变材料在建筑节能领域的应用

相变材料可以与传统建材复合成具有蓄热和调温功能的新型建筑材料,它具有储能密度大以及近似恒温下的吸放热等优点,能有效维持室内环境的舒适度,并降低建筑采暖制冷所需的能耗和费用。针对当前建筑节能的要点,指出相变储能技术是实现建筑节能的重要措施。在此基础上,总结了相变材料的分类、表征以及制备方法,分析了相变材料在建筑节能领域中的应用以及存在的问题。

RGD肽类似物RGDPe抑制血小板活性的体外实验

目的为寻找活性高的肽类血小板聚集抑制剂，我们合成了ＲＧＤ（Ａｒｇ－Ｇｌｙ－Ａｓｐ）肽类似物－ＲＧＤＰｅ（Ａｃ－Ａｒｇ－Ｇｌｙ－Ａｓｐ－ＮＨＣＨ２ＣＨ２Ｃ６Ｈ５），以验证其体外抗血小板聚集活性。方法以人血为标本，采用比浊法测定血小板聚集和同位素标记方法测定其竞争性抑制１２５Ｉ标记的纤维蛋白原（Ｆｇｎ）与血小板糖蛋白（ＧＰ）Ⅱｂ／Ⅲａ结合的能力，并与Ｓｉｇｍａ公司合成的ＲＧＤＳ（阳性对照）和生理盐水（阴性对照）比较。结果ＲＧＤＰｅ抑制１２５Ｉ－Ｆｇｎ与活化血小板ＧＰⅡｂ／Ⅲａ结合的ＩＣ５０＝３．６４±０．５５×１０－５Ｍ（ＲＧＤＳ：６．０３±１．２４×１０－５Ｍ），抗ＡＤＰ诱导的血小板聚集ＩＣ５０＝７６．４２±５５．４２μＭ（ＲＧＤＳ：１１４．６７±４０．５５μＭ）。结论ＲＧＤＰｅ有较强的抑制血小板聚集活性，可能在体内有预防血栓形成功效。

志贺氏菌实时荧光单引物等温扩增方法的建立及应用

以志贺氏菌ipa H基因特异序列为靶序列,设计RNA-DNA组合引物和链终止序列,优化反应体系,建立实时荧光单引物等温扩增检测志贺氏菌的方法,反应时间为44 min。通过对4株不同群志贺氏菌和12株其他食源性致病菌进行实时荧光单引物等温扩增检测,结果表明,除4株志贺氏菌外,其他细菌均未扩增出荧光曲线。进一步研究表明,采用普通热裂解法提取DNA,实时荧光检测福氏志贺氏菌DNA的灵敏度为1.16 fg/μL,纯培养菌液的灵敏度为1.3 CFU/m L;对牛奶模拟样品中福氏志贺氏菌的检出限是1.8 CFU/m L。研究结果表明,实时荧光单引物等温扩增检测志贺氏菌灵敏度高、特异性强、耗时短、方法简便。

鸭肉冒充牛羊肉的分子生物学检测

针对送检牛肉和羊肉样品,设计合成检测动物源性成分的通用引物,并对PCR产物测序后在NCBI数据库中进行比对;根据牛、羊、鸭源性成分检测的相关标准,合成引物和探针,进行送检样品中牛、羊和鸭源性成分的实时荧光PCR检测。结果表明:在7份送检样品中4份检测到鸭源性成分,2份检测到牛源性成分,1份检测到羊源性成分。实时荧光PCR方法灵敏性更高、特异性更强、结果判定更为迅速。

半胱氨酰-精氨酰-甘氨酰-天冬氨酰-色氨酰-青霉胺对血小板聚集和血栓形成的抑制作用

目的探讨自行合成的半胱氨酰-精氨酰-甘氨酰-天冬氨酰-色氨酰-青霉胺(Cys-Arg-Gly-Asp-Trp-Pen,W2003;即Arg-Gly-Mp肽类血小板抑制剂)抗人血小板聚集和动物体内预防血栓形成的活性,并与以前报道的N^a-乙酰-精氨酰-甘氨酰-天冬氨酰-苯乙胺(AcArg-Gly-Asp- NHCH_2CH_2C_6H_5,W2001)和N^a-乙酰-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-对甲氧基苯乙胺(N^a-Ac-Arg-Gly-Asp-p-methoxyl phenylethylamine,W2002)比较。方法用比浊法和血小板计效的方法测定二磷酸腺苷(ADP)诱导的血小板聚集;用放射性配体分析法测定W2003竞争性抑制[^(125)I]纤维蛋白原(FGN)与血小板糖蛋白(GP)Ⅱb/Ⅲa的结合;用20%FeCl_3刺激Wistar大鼠的颈总动脉产生动脉血栓动物模型,以被刺激动脉段形成的血栓湿重和干重评价该化合物预防血栓形成的作用。结果W2003有明显的抑制ADP诱导血小板聚集的活性.各浓度点(150,100,50,10,1μmol/L)间与生理盐水对照组比较差异均非常显著(P<0.01);抑制[^(125)I]FGN与血小板结合的IC50值为(31.5±7.0)μmol/L;W2003与以前报道的W2001和W2002比较.预防血栓形成作用的强弱顺序为:W2003>W2001>W2002,与生理盐水比较差异显著(P<0.01)。结论W2003通过抑制FGN与GPⅡb/Ⅲa的结合而发挥抗血小板聚集和预防血栓形成的生物活性。