转基因技术在畜牧兽医中的发展前景

通过简要叙述转基因动物研究的发展简史、研究现状和存在问题 ,对转基因动物育种、药物生物反应器、组织器官移植 ,以及基因治疗和免疫等前景进行了综述。在此基础上 ,从畜牧兽医角度出发提出了追踪发展趋势的几点思考。

山羊的生殖内分泌研究

山羊的生殖内分泌研究王建辰，黄群山，张家骅，段恩奎（西北农业大学家畜生殖内分泌与胚胎工程实验室陕西杨陵７１２１００）西北农业大学的家畜生殖内分泌与胚胎工程实验室是农业部重点开放性实验室，８０年代以来，对多种家畜的生殖内分泌进行了研究，而研究的重点是山...

提高学位课程教学质量的体会

兽医产科学硕士研究生的学位课程,除公共学位课外,我校还有三门,即家畜胚胎学、家畜生殖内分泌和高级兽医产科学。前二者属于专业基础课,后者为专业课。现就后二门课程的教学谈一点体会。上下衔接进展为主这是选择教材内容的指导思想。研究生已学习过本科生的教材,因而到了研究生阶段,就应该在此基础上,学习高一层次的内容。这一原则既适用于专业基础课,也适用于专业课。

山羊甘肃棘豆中毒睾丸、附睾的病理学研究

山羊甘肃棘豆中毒睾丸、附睾的病理学研究丁伯良，王建辰，薛登民，贾维真，王淑娥（西北农业大学兽医系，杨陵７１２１００）马远莉（陕西省农科院农业测试中心）摘要对６只１０月龄西农莎能奶山羊公羊每日按１０ｇ／ｋｇ剂量单笼饲喂甘肃棘豆粉，４只同龄公羊作对照。１...

山羊胚胎分割及同卵双生试验

选择山羊晚期桑椹胚、囊胚、孵出囊胚和孵出增大胚泡,用简化分割法二分。将19对裸半胚移植于18只受体羊,结果有12只妊娠,其中两只胚胎消失,两只流产,其余8只足月分娩,共产半胚羔11只。晚期桑椹胚、囊胚、孵出囊胚和孵出增大胚泡各组的半胚发育为羔羊的发育率分别为12.5％(1/8)、20％(2/10)、25％(3/12)和62.5％(5/8)。前三组均未获得同卵双生羔羊。在第四组,将4对裸半胚移植于4只受体,有3只妊娠,足月分娩半胚羔5只,其中两对为同卵双生。本研究证明,对称分割山羊孵出增大胚泡,不仅其半胚在体内仍可继续发育形成正常胎儿,而且不装透明带移植其裸半胚,仍能获得较高的同卵双生率。山羊孵出增大胚泡更适宜用简化分割法分割。

奶山羊甘肃棘豆中毒卵巢、胎盘的病理学研究

为阐明甘肃棘豆（ＯｘｙｔｒｏｐｉｓｋａｎｓｕｅｎｓｉｓＢｕｎｇｅ）引起山羊流产的机理，对９只怀孕关中奶山羊，每日按１０ｇ／ｋｇ体重剂量喂给甘肃棘豆粉。孕羊于第１０～４３ｄ陆续全部流产，流产的为弱羔、死胎、畸胎或腐败胎。流产羊子宫粘膜水肿、出血或腐败；母体胎盘整片出血或呈豆腐花状。光镜观察，卵巢黄体细胞、卵泡细胞和胎盘滋养层细胞胞浆广泛性空泡变性。透射电镜观察，卵母细胞、黄体细胞、合体滋养细胞的核仁和线粒体空泡变性；黄体细胞和合体滋养细胞核内出现不同形态的假包涵体。扫描电镜观察，卵巢、母体胎盘表面细胞排列不齐，微绒毛稀疏。研究认为，卵巢和胎盘受损是引起孕羊流产的主要原因。

Reproductive Endocrinology of Goat

In this paper the authers reviewed briefly their achievements in reproductive endoductine in goat.

抑制素主动免疫提高山羊排卵率

将８只关中奶山羊（白羊）和８只山东青山羊（青羊）分为２组，每组含有白羊和青羊各４只。试验组山羊以抑制素α亚单位１～３２片段人血清白蛋白偶合物为抗原进行主动免疫，对照组山羊则以人血清白蛋白为抗原进行免疫。３次免疫注射时间间隔分别为２０ｄ和３０ｄ。在末次免疫注射后１个月和２个月时，用腹腔镜检查试验羊卵巢上的黄体数。试验组白羊和青羊平均每只羊分别有１．８个黄体和２．４个黄体，对照组分别有１．６个黄体和２．２个黄体，说明抑制素主动免疫可以提高山羊的排卵率。

山羊胚胎简易冷冻试验

用RPE冷冻器冷冻20枚山羊桑椹胚和囊胚。冷冻液为1M甘油杜氏磷酸盐缓冲液(PBS)。胚胎装于0.25ml塑料细管内,0℃时置入冷冻器。以1℃/分降温,-6.5～-7℃诱发结晶,再以0.5℃/分(0.3～0.8℃/分)降温至-30℃,然后投入液氮保存5～12天。35℃水浴解冻。20枚胚胎冻后形态正常率为65％(13/20)。将13枝形态基本正常的胚胎移植给5只受体羊,结果4只受体羊妊娠,产羔7只,冻胚存活率为35％(7/20)。除1只冻胚羔产下后90分钟死亡外,另6只冻胚羔生长发育正常。

山羊GnRH和促性腺激素的释放特点

通过外科手术分别连续收集活体山羊中黄体期及早卵泡期的垂体门脉血样和外周血样，经放射免疫测定，山羊中黄体期和早卵泡期的促性腺激素释放激素（ＧｎＲＨ）、促黄体生成素（ＬＨ）和促卵泡素（ＦＳＨ）均呈波动式释放。在早卵泡期，ＦＳＨ单位时间内波动次数和血浆平均水平显著高于中黄体期；ＧｎＲＨ与ＬＨ的波动型基本一致，ＦＳＨ的变化不太规则。表明山羊垂体促性腺激素的释放受丘脑下部ＧｎＲＨ的调节，但ＦＳＨ似乎还存在其他调节机理。

甘肃棘豆及中毒奶山羊尿液、胎水、胎儿胎盘中苦马豆素的检验

通过气相色气谱—质谱联用仪，从甘肃棘豆中检出有毒成分苦马豆素和新的多羟基吲哚兹啶生物碱斑荚素。应用薄层色谱、气相色谱和高压液相色谱法，首次从中毒孕羊尿液、胎水和胎儿胎盘中检出苦马豆素。由此证明，苦马豆素能损害胎盘并通过胎盘屏障直接作用胎儿。本研究为甘肃棘豆引起山羊流产的机理研究提供了重要依据。

IGF-Ⅰ对山羊睾丸间质细胞分泌睾酮的调节机理

以３０～４０日龄山羊的睾丸间质细胞为研究对象，采用体外细胞培养的方法，用胰岛素样生长因子－Ⅰ（ＩＧＦ－Ⅰ）和ｈＣＧ进行不同的处理，用放射免疫分析法（ＲＩＡ）测定了睾酮和ｃＡＭＰ的含量，用荧光分光光度分析法测定了ＤＮＡ含量。结果表明，ＩＧＦ－Ⅰ能促进体外培养的山羊睾丸间质细胞ｃＡＭＰ生成、睾酮分泌及ＤＮＡ合成，以上作用随ＩＧＦ－Ⅰ剂量的增大而加强，并且与ｈＣＧ有协同作用。根据以上结果首次提出ＩＧＦ－Ⅰ调节山羊睾丸间质细胞分泌睾酮机理的假设：ＩＧＦ－Ⅰ与其膜受体结合引起ｃＡＭＰ增多，ｃＡＭＰ通过激活一系列合成ＤＮＡ和睾酮所需酶类而使ＤＮＡ和睾酮的合成增加。这与催乳素（ＰＲＬ）和白细胞介素－１α（ＩＬ－１α）等含氮激素（因子）调节间质细胞分泌睾酮的机理不同，而与ＦＳＨ、ＬＨ等含氮激素调节性腺分泌类固醇激素的作用机理相似。

山羊黄体孕酮分泌的特点

在山羊发情周期的第１０ｄ和第１７ｄ，分别给２只和１只山羊安置颈静脉导管和后腔静脉导管，以２０ｍｉｎ间隔连续采样２４ｈ。然后，将１只黄体中期羊卵巢摘除；给另１只黄体中期羊经静脉导管注射１５－甲基ＰＧＦ２ａ，每小时注射１次，每次２４０μｇ，连续７次。３只羊都继续采样。每次都同时采取颈静脉和后腔静脉血样，用ＲＩＡ法测定血浆孕酮（Ｐ４）水平。结果表明，山羊血浆Ｐ４水平没有昼夜节律；后腔静脉血浆Ｐ４水平有明显的波动，并高于颈静脉血浆Ｐ４水平（Ｐ＜０．０ｌ）；黄体溶解和卵巢摘除后，颈静脉和后腔静脉血浆的Ｐ４水平先后降到１ｎｇ／ｍＬ以下。由此证明，山羊Ｐ４是由黄体波动性地分泌的。

麻醉和手术对母山羊垂体内分泌功能的影响

在给母山羊注射８４６麻醉注射液或实施外科手术前后收集颈静脉血样，监测８４６麻醉注射液或外科手术对垂体促性腺激素分泌的影响。结果表明，８４６麻醉注射液对山羊垂体ＬＨ和ＦＳＨ分泌无显著影响（Ｐ＞０．０５）；但外科手术对ＬＨ和ＦＳＨ分泌影响显著（Ｐ＜０．０５），在手术期间血浆ＬＨ和ＦＳＨ水平较手术前显著降低（Ｐ＜０．０５），而在手术结束后，血浆ＬＨ和ＦＳＨ水平又升高，与手术前差异不显著（Ｐ＞０．０５）。

小鼠输卵管卵母细胞的形态学研究

应用光、电镜技术研究发现:新排卵母细胞的纺锤体位于动物极质膜下,长轴与质膜平行,卵周隙狭窄,除纺锤体区外,微绒毛呈倒伏状遍布于卵细胞表面,皮质颗粒排列于质膜下,线粒体多分布于卵母细胞近中区及染色体旁;排卵后2～4h,纺锤体在质膜下旋转90°,卵周隙增宽,微绒毛逐渐竖起,少数皮质颗粒提前外排,线粒体趋于分散,排卵后8h,纺锤体内移,微绒毛趋于融合,皮质颗粒减少,线粒体退化。

关中奶山羊超数排卵的研究

用FSH恒量法、FSH减量法、FSH和LH混合法及PMSG法处理获得头均可用胚数分别为5.5,5.8,4.0和3.2枚;从情期的6～8,9～11,12～15和16～18d开始超排获得的头均可用胚数分别为3.4,5.7,5.5和4.1枚;对2,3,4,5和6岁以上供体超排获得的头均可用胚数分别为3.2,4.7,5.1,5.7和2.9枚;在9,10,11,12月和次年1月超排获得的头均可用胚数分别为2.8,4.7,5.8,5.3和3.2枚。结果证明,在10～12月,从情期的9～15d开始,采用FSH恒量法或FSH减量法对3～5岁的关中奶山羊进行超排可获得更好效果。

转基因动物研究进展

转基因动物技术始于 2 0世纪 80年代 ,近 3 0年来 ,随着研究的深入 ,转基因动物的制作技术得到了突破性的发展。最初的原核注射法是应用最普遍、最可靠、效果最稳定的一种方法。但该方法存在价格昂贵 ,整合率低及不能定点整合的问题 ,所以近几年来转基因动物技术已出现了胚胎干细胞法 ,精子载体法 ,体细胞核移植法和人工酵母染色体法等一系列新方法。随着这些技术的不断发展 ,转基因动物技术应用正以其突出的优越性指导着多个领域的工作。目前 ,它的应用已渗透到基础理论、疾病动物模型、人异种器官移植、制药、畜牧兽医等领域。转基因动物应用正走向产业化的道路 ,具有十分广阔的前景。但作为一个新兴的技术 。

安哥拉山羊胚胎的手术回收和移植

对３５只安哥拉山羊超排处理，配种后第３天放置阴道海绵栓，第６日由子宫手术回收胚胎。３１只发情配种的供体，共回收胚胎２０４枚，平均每只供体获可用胚４．３±３．９６枚。其中卵巢有功能黄体无大卵泡的６只供体，回收胚胎５１枚，回收率为８７．１５％±１５．９８％，平均每只获可用胚８．１±２．９６枚。卵巢上有大卵泡、或子宫及输卵管有病变者可使回收率和可用胚胎数严重降低。由于配种后放置了阴道栓，８只有黄体退化倾向的供体，平均每只仍获得可用胚４．６枚。移植桑椹胚和囊胚的５１只受体，３６只妊娠，妊娠率为７０．６％．移植４～１６细胞胚胎的对照组，妊娠率为５１．６％．本研究还证明。

锌对绵羊睾丸组织细胞和血浆激素水平的影响

研究了锌对公绵羊睾丸支持细胞、间质细胞大小以及血浆睾酮（Ｔ）和促黄体激素（ＬＨ）水平的影响。在公绵羊日粮中添加一定量锌后，试验组与对照组比较，睾丸支持细胞核和质间细胞核（长径×宽径）分别增大２３．３８μｍ２和１２．０５μｍ２（Ｐ＜０．０１）；血浆Ｔ和ＬＨ水平分别升高１５．０１％和３２．６５％（Ｐ＜０．０１）。结果表明，锌对于公绵羊睾丸组织细胞的发育以及ＬＨ和Ｔ的分泌起着重要调节作用。

西农萨能奶山羊妊娠期外周血浆孕酮、17β──雌二醇和皮质醇的变化

采用放射免疫分析法测定了１４只西在萨能奶山羊妊娠期外周血浆孕酮（Ｐ４）、１７β－雌二醇（１７β－Ｅ２）和皮质醇（Ｆ）水平。血浆Ｐ４水平在配种当日为０．５ｎｇ／ｍｌ，以后升高，妊娠２０天时为４．７ｎｇ／ｍｌ。在妊娠３０－５０天，Ｐ４水平有所下降，最低值在４０天，为３２ｎｇ／ｍｌ，Ｐ４水平从６０天开始一直维持在６．２ｎｇ／ｍｌ左右，到妊娠结束时降低到０．６ｎｇ／ｍｌ。血浆１７ｐ－Ｅ２水平在配种后保持稳定，从妊娠４０天开始稳定上升，在妊娠结束时达到峰值７９．８ｐｇ／ｍｌ，血浆下水平在配种后呈波动式下降，到妊娠６０天变为波动式升高，并在妊娠结束时达到峰值１７ｎｇ／ｍｌ。前言西农萨能奶山羊是经过数１０年选育的高产品种，在国内享有盛名。关于西农萨能奶山羊初情期［１］、发情周期［２，３］、分娩期［４］以及非繁殖季节［５］的内分泌状况已有研究报告，但对其妊娠期的内分泌变化迄今尚无资料。为了研究西农萨能奶山羊妊娠期主要生殖激素的变化情况，给奶山羊妊娠生理学及妊娠病理学提供基础资料，我们应用放射免疫分析法（ＲＩＡ）分析了西农萨能奶山羊妊娠期外周血浆孕酮（Ｐ４）、１７β－雌二醇（１７β－Ｅ２）和皮质醇（Ｆ）的水平。材料和方法在西?