用tk基因突变试验评价长春新碱和秋水仙碱的遗传毒性

目的评价有丝分裂抑制剂长春新碱和秋水仙碱的遗传毒性,并比较短期和长期tk基因突变试验的检出灵敏度.方法用长春新碱和秋水仙碱对小鼠淋巴瘤细胞分别进行3h及24h染毒,用微孔板法进行tk基因突变试验,计算相对悬浮生长、接种效率、相对存活率、相对总生长及突变频率等指标,并比较短期和长期处理的结果.结果两种受试物3h处理均未出现明显的阳性反应,而24h连续处理后,两种受试物均能诱导tk基因突变频率增高,诱发突变频率分别为自发突变频率的1.6～4.8倍和2.1～6.2倍,呈阳性结果.结论长春新碱和秋水仙碱在长期处理试验中能诱导tk基因突变,而在短期处理试验中未发现明显诱变性,即长期处理能提高tk基因突变试验的检出灵敏度.

WTK1细胞tk基因突变的多重PCR分析

目的探讨WTK1细胞tk位点自发和诱发突变体的突变谱和突变热点。方法用甲磺酸甲酯、丝裂霉素C和叠氮钠染毒WTK1细胞后,筛选出tk基因突变集落,用多重PCR方法对WTK1细胞tk基因突变谱进行分析。结果三种受试物均能诱导WTK1细胞tk位点突变频率增高,且存在剂量-反应关系;所分析的突变体中绝大部分缺失tk基因外显子4和5-7。结论三种受试物对WTK1细胞均有致突变作用;tk位点的突变存在明显的突变热点。

TK6和WTK1细胞体外微核试验比较研究

目的:比较5种诱变剂诱导人类淋巴母细胞TK6和WTK1的微核反应。方法:用人的类淋巴母细胞TK6和WTK1进行体外微核试验,评价5种诱变剂的染色体损伤效应。结果:5种受试物均可诱导两种细胞微核率显著升高,但在大多数剂量和采样时间,受试物诱导的TK6细胞微核率均不同程度地高于WTK1细胞微核率。结论:TK6细胞对受试物诱导的染色体损伤更为敏感。

TK基因突变试验——琼脂平皿法与微孔平板法的比较

目的 TK(thymidinekinase)基因突变试验可采用琼脂平皿法或微孔平板法 ,本研究旨在比较两种方法的优劣 ,为选择一种适于在国内推广的方法提供依据。方法 同时使用琼脂平皿法和微孔平板法对四种化学物 (MMS、EMS、MMC、KCl)的致突变性进行检测与评价。结果 两种方法检出三种诱变剂的结果基本一致 ,但对KCl而言 ,琼脂平皿法检测结果为阴性 ,而微孔平板法检测结果为阳性。结论 就目前实验结果来看 ,宜推广琼脂平皿法在国内的应用。最终结论尚需增加更多受实物后才能确定。

L5178Y与TK6细胞的TK基因突变实验比较

目的 比较 L 5 178Y与 TK6细胞在 TK基因突变试验系统中的异同和优劣。方法 采用 L 5 178Y和TK6细胞做 TK基因突变试验微孔平板法 ,对四种受试物 (MMS、EMS、MMC、KCl)的致突变性进行检测与评价。结果 两种细胞对四种受试物的检测结果基本一致 ,但 TK6细胞对四种受试物的耐受性均低于 L 5 178Y细胞 ,且相对突变指数显著高于 L 5 178Y细胞。结论 两种细胞应用于本试验各有其优越性 ,但由于 TK6细胞来自于人类 ,实际应用意义大于 L 5 178Y细胞 ,建议推广 TK