基于化学模式识别和网络药理学的河南生地黄潜在质量标志物预测

目的:基于高效液相色谱法(HPLC)指纹图谱、化学模式识别、质量标志物(Q-marker)“五原则”和网络药理学方法,分析预测河南产生地黄潜在Q-marker。方法:采用HPLC建立16批河南产生地黄的指纹图谱;运用正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)筛选组间主要差异成分,运用网络药理学方法构建差异成分的活性成分-靶点-通路网络,并进行定量分析。结果:建立了16批河南产生地黄的指纹图谱,标定了20个共有峰,指认了7个成分;OPLS-DA筛选得到10个差异成分,指认了其中5个成分。结合中药Q-marker“五原则”和网络药理学分析,筛选出梓醇、桃叶珊瑚苷、地黄苷D、益母草苷、京尼平苷酸、毛蕊花糖苷、异类叶升麻苷为河南产生地黄的潜在Q-marker。结论:建立的HPLC指纹图谱方法准确稳定,筛选得到的7个差异成分可作为河南产生地黄的潜在Q-marker,为河南产生地黄质量评价和药效机制研究提供参考。

鲜地黄中环烯醚萜甙的分离鉴定

目的分离鉴定鲜地黄化学成分。方法反复硅胶柱层析色谱分离,理化性质和光谱分析鉴定化合物结构。结果从鲜地黄乙醇提取物中,分离鉴定了8个化合物,分别为地黄甙A;地黄甙D;地黄甙E;梓醇等。

正交试验法优选乳结消颗粒混合挥发油提取及包合工艺

目的:优选乳结消颗粒中混合挥发油的提取及包合工艺。方法:采用正交试验,以提油量为指标,考察加水量、蒸馏时间、药材粉碎度对挥发油提取率的影响;以挥发油包合率和包合物得率综合评分,考察挥发油与β-环糊精(β-CD)投料比、加水量和搅拌时间对包合工艺影响,并对挥发油包合物进行TLC及UV鉴别。结果:挥发油提取最佳工艺为加水10倍量,蒸馏提取3 h;最佳包合工艺采用水饱和法,β-CD:挥发油8∶1,10倍量水,包合温度40℃,搅拌包合1 h。结论:挥发油被β-CD包合形成稳定的包合物,包合工艺稳定可行,为工业化生产提供参考。

前列栓质量标准的研究

目的建立中药复方制剂前列栓的质量标准。方法采用薄层法(TLC)对制剂中的黄芩,黄柏,血蝎进行定性鉴别,用高效液相色谱法(HPLC)对制剂中的黄芩苷进行定量分析。结果在TLC色谱中能检出黄芩,黄柏,血蝎;含量限度含黄芩苷不少于18mg/粒。结论建立的方法可对本制剂进行准确、快速的定性定量分析。

不同产地的地黄中梓醇含量比较

目的 采用薄层扫描法测定了不同产地的地黄中梓醇的含量。方法 以氯仿 -甲醇 -水 ( 7∶ 4∶ 0 .5 )为展开剂 ,10 %硫酸 -乙醇为显示剂 ,4 13 nm为扫描波长 ,反射法扫描。结果 河南温县产地黄中梓醇含量较高 ,山东嘉祥产地黄中梓醇含量较低。

不同产地的地黄中梓醇含量比较

目的 :测定不同产地地黄中梓醇含量。方法 :薄层扫描法 ,展开剂为氯仿 甲醇 水 (7∶4∶0 .5 ) ,显色剂为 10 %硫酸 乙醇 ,扫描波长为 4 13nm。结果 :回归方程 :Y =6 2 1.76X +118.6 9,r =0 .996 6 ,平均回收率为 99.10 % ,RSD =2 .5 0 %。结论 :河南温县产地黄中梓醇含量较高 。

生地黄与熟地黄中地黄苷A、D的比较分析

目的：建立生地黄和熟地黄中地黄苷A、D的分析方法，比较不同来源药材之间的差异。方法：采用TLC法对生地黄和熟地黄药材进行定性鉴别；用高效液相色谱法测定地黄苷A和D的含量。结果：在TLC色谱中生地黄和熟地黄斑点清晰；地黄苷A和地黄苷D范围进样量分别在0．192-0．160mg／mL，0．132-0．660mg／mL范围内线性关系良好，r值分别为0．9993和0．9999，平均加样回收率分别为96．1％和97．4％。结论：所建立的方法可准确地进行定性、定量检测，生地黄中的地黄苷A、D的含量比熟地黄高。

茯苓-泽泻药对配伍研究及其标准煎液对肾病模型大鼠的影响

目的:根据古代医典茯苓泽泻药对经方配伍规律开展肾病综合征药效筛选,为相关病症的中医临床方案和新药开发提供理论和实验参考。方法:查阅同时含有茯苓和泽泻的祛湿类经方信息,量化表达后分析“茯苓-泽泻”药对配伍规律。按《医疗机构中药煎药室管理规范》制备其经典比例标准煎液。将不同组别大鼠分别连续灌胃21 d后,采用代谢笼测定各组大鼠24 h尿量,采用酶标仪和全自动生化分析仪测定24 h尿蛋白(UP)、血清白蛋白(Alb)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、血尿素氮(BUN)和血清肌酐(SCr)指标,采用苏木精-伊红(HE)染色观察肾脏组织病理变化。结果:茯苓和泽泻在祛湿类经典方剂中配伍出现频次最高比例为1∶1,3∶5,2∶1;与模型对照组比较,给药3周后盐酸贝那普利组和不同配伍药对组24 h尿蛋白量均显著降低,血清Alb水平明显升高(P<0.01);不同药对组均有显著降TG作用,且以药对1∶1和3∶5组为最优;1∶1给药组较其他配伍组更显著降低SCr和BUN(P<0.05),并对肾组织病理损伤有一定的修复作用。结论:茯苓-泽泻药对配伍各给药组均能够显著减少多柔比星肾病大鼠24 h尿蛋白量,升高血清Alb水平,降低TC、TG水平,改善BUN、SCr,以茯苓-泽泻1∶1混煎为佳。

液相层析法分离制备地黄活性成分梓醇

用液相层析法分离制备了地黄活性糖成分梓醇，低压柱层析：流量为20～22ml／min，洗脱剂为石油醚，乙酸乙酯-乙醇-水（8：2：1），高压柱层析：吸附剂ODSC18（10—40μm）以甲醇／水（10％）为洗脱剂，流速20～25ml／min，Φ40×300min，第10～12流份得到纯品梓醇，经测定含量达97％。本法方便、易行。

HPLC法测定地黄中地黄苷D含量

目的 建立地黄中地黄苷 D的 HPLC测定方法 ,提出地黄苷 D的含量限度。方法 Hypersil C1 8分析柱(2 5 0 mm× 4.6mm,5μm) ,流动相为乙腈 -水 (4∶ 96) ,流速为 1m L /m in,柱温为室温 ,检测波长为 2 0 5 nm。结果 地黄苷 D回收率为 10 0 .6% ,RSD为 2 .1% ,8个产地的 16份完整药材中地黄苷 D的含量为 0 .13 7%～ 0 .691%。结论 方法快速、简便、准确 ,可用于地黄质量控制 ,建议地黄苷 D的含量应不低于 0 .15 %。

防风不同极性部位对腹泻大鼠的止泻作用和结肠不同亚型AQP的调控

为了观察防风不同极性部位对腹泻大鼠止泻作用和对结肠不同亚型水通道蛋白(aquaporin,AQP)影响的比较,将80只SD大鼠随机分为正常组、模型组、地芬诺酯组、防风石油醚萃取部位组、乙酸乙酯萃取部位组、正丁醇萃取部位组、水溶性部位组和总提取物组,每组10只、除正常组外其余各组每天灌胃番泻叶水煎液,连续7天,于第8天开始各组大鼠上午灌胃番泻叶,下午灌胃相应药物,正常组与模型组给予等体积的2%吐温-80溶液,连续给药7天。观察大鼠排便情况,检测大鼠血清中电解质含量和二胺氧化酶(diamine oxidase,DAO)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、Na^(+)-K^(+)-ATPase水平,苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察结肠病理形态学变化,Western blot分析结肠中不同亚型AQP的表达情况。结果显示防风石油醚萃取部位、正丁醇萃取部位和总提取物组可降低大鼠的腹泻指数,增加血清中Na^(+)和K^(+)浓度及结肠组织中Na^(+)-K^(+)-ATPase的活性,降低血清DAO和TNF-α的水平,改善结肠黏膜损伤,上调结肠组织中AQP-3、AQP-4和AQP-8的蛋白表达;防风石油醚部位还可下调结肠组织中AQP-9的蛋白表达水平。综上表明,防风具有较好的止泻作用,石油醚部位和正丁醇部位是其止泻的活性部位,且二者对肠道不同亚型的AQP调控具有差异。

熟地黄药材质量标准的研究

目的:建立熟地黄药材的质量标准。方法:采用 TLC 法对熟地黄药材进行定性鉴别;用高效液相色谱法测定地黄苷 A和地黄苷 D 的含量。薄层色谱使用硅胶 G 薄层板,以三氯甲烷-甲醇-水(12:8:1)为展开剂,以5%香草醛浓硫酸溶液为显色剂;液相色谱采用 Inertsil NH_2色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-水(75:25),流速1 mL·min^(-1),检测波长203 nm,柱温40℃。结果:TLC 色谱系统中,地黄苷 A 和地黄苷 D 分离效果良好,可以用于熟地黄药材的鉴别;HPLC 中地黄苷 A 和地黄苷 D 进样浓度分别在0.064～0.320 mg·mL^(-1)和0.044～0.220 mg·mL^(-1)范围内线性关系良好,r 值分别为0.9999和0.9995,平均加样回收率(n=6)分别为97.3%和98.0%。结论:所建立的方法可准确地进行定性、定量分析,可用于熟地黄药材的质量控制。

HPD-300型大孔吸附树脂分离纯化连翘中连翘酯苷A的工艺研究

目的优化HPD-300型大孔吸附树脂分离纯化连翘酯苷A的工艺条件。方法以连翘酯苷A含量为指标,采用高效液相法,考察D-101型,D-201型,HPD-100型,HPD-300型等8种大孔吸附树脂对连翘中连翘酯苷A吸附纯化工艺条件。结果 HPD-300型大孔吸附树脂具有最佳的吸附洗脱参数,其动态饱和吸附-洗脱量达3.57%。其吸附分离连翘酯苷A的工艺条件为:上样浓度为0.3g(生药)/ml,吸附流速为1BV/h,以5倍柱体积水洗脱,继以7倍柱体积50%乙醇洗脱。结论该技术适用于连翘中连翘酯苷A粗提取的工业化生产,连翘酯苷A纯度可达50%左右。

清开灵分散片质量标准研究

目的:建立清开灵分散片的质量标准。方法:采用TLC法对制剂中胆酸、猪去氧胆酸、栀子、金银花、黄芩苷进行鉴别;用HPLC法考察了溶出度并对制剂主要成分黄芩苷进行含量测定。结果:TLC色谱中均能检出胆酸、猪去氧胆酸、栀子苷、绿原酸、黄芩苷且斑点清晰,分离度好,易于识别;黄芩苷的含量限度规定为不得少于9.0mg片/。结论:本法简便,快速,灵敏度高,重现性好,可作为该制剂的质量控制标准。

地黄化学成分血清药物化学的初步研究

目的:应用血清药物化学的方法,对地黄血中移行成分进行分析,为地黄药效物质基础研究奠定基础。方法:通过比较对照品、含药血清、空白血清的HPLC指纹图谱,确定地黄的入血成分。结果:在给药血清中发现梓醇、地黄苷D均以原型入血。结论:从血清药化的角度确定这两种化学成分为地黄的药效物质。

地黄中环烯醚萜苷类化学成分的研究

目的:分离鉴定地黄中环烯醚萜苷类化学成分。方法:药材粉碎浸提,大孔吸附树脂、反复硅胶柱、Sephadex LH-20层析色谱分离纯化,理化和光谱分析鉴定化合物结构。结果:从地黄乙醇提取物中,分离得到18个化合物,分别鉴定了12个化合物,分别为地黄苷A、地黄苷D、地黄苷E、梓醇及益母草苷等。结论:分离得到18个化合物,鉴定了12个化合物,其中地黄苷D、密力特苷、地黄苷A、地黄苷E及益母草苷为首次得到,并提供了13CNMR1、HNMR数据。

地黄药材炮制过程中环烯醚萜苷类成分动态变化的研究

目的:考察地黄在加工炮制过程中环烯醚萜苷类成分的变化规律。方法:采用高效液相色谱法,测定不同炮制阶段样品中梓醇、地黄苷A和地黄苷D3种主要环烯醚萜苷类成分的含量。结果:地黄从鲜品加工成生地黄及熟地黄过程中,颜色从淡黄色变成黑色,梓醇的含量约降低至原来的1/7,而地黄苷A和地黄苷D的含量变化不显著。结论:地黄环烯醚萜苷类成分地黄苷A和地黄苷D比较稳定,其中生地黄中的含量比熟地黄中含量高。