当归对大鼠缺血再灌注心肌HSP70和NF-κB的影响

目的 :观察当归注射液对缺血再灌注 (I/R)过程心肌热休克蛋白 70 (HSP70 )和核转录因子κB(NF κB)表达的影响 ,探讨当归抗心肌缺血再灌注损伤的可能作用机理。方法 :4 5只SD大鼠随机分成 3组 (每组n =15 ) :假手术组 (Ⅰ组 ) ,缺血再灌注组 (Ⅱ组 ) ,当归治疗组 (Ⅲ组 ) ,建立在体心肌缺血再灌注动物模型。每组 5只动物再灌注 4 0min用化学扩增法测定SOD活性 ,TBA法测定MDA含量 ;10只动物再灌注 12 0min测定HSP70免疫组化SP法观察心肌细胞HSP70蛋白表达 ,用ESMA法观察NF κB的变化 ,在电镜下观察心肌细胞的超微结构。结果 :再灌注前注射当归注射液显著降低了再灌注心肌MDA水平 (P <0 .0 1) ,增强了SOD活性 (P <0 .0 1)和HSP70的表达 (P <0 .0 1) ,减低NF κB的活性 ,同时减轻了心肌的超微结构损伤。结论 :当归注射液可通过抗氧化作用、增加HSP70的表达和减低NF κB的活性发挥抗心肌缺血再灌注损伤 ,对心肌有明显的保护作用。

当归注射液、三七总皂甙和外源性环磷酸腺苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的:观察当归注射液、三七总皂甙(PNS)和外源性环磷酸腺苷(cAMP)对缺血再灌注(IR)过程心肌的保护作用,研究上述3种药物抗心肌缺血再灌注损伤的作用机制。方法:80只SD大鼠随机数字表法分成5组(每组n=16):空白组,IR组,当归治疗组,PNS组和cAMP组,建立在体心肌缺血再灌注动物模型。用化学扩增法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性,TBA法测定丙二醛(MDA)含量,免疫组化SP法观察心肌细胞热休克蛋白70(HSP70)、蛋白激酶C(PKC)的表达和Fas,Bcl-2的含量,原位末端TUNEL法检测细胞凋亡指数,在电镜下观察心肌细胞的超微结构。结果:当归注射液和PNS均显著降低了再灌注心肌MDA水平(P<0.01),增强了SOD活性(P<0.01)和HSP70的表达(P<0.01),同时改善了心肌的超微结构。当归注射液明显增加了PKC的含量(P<0.05),并使PKC从细胞核转移到细胞膜。PNS组PKC的含量高于IR组,(P<0.01),但比正常心肌明显减少(P<0.05)。cAMP使凋亡指数和Fas含量明显减少(P<0.01),Bcl-2含量明显增多(P<0.01)。结论:当归注射液可通过抗氧化作用、增加HSP70的表达和调节PKC的表达发挥抗心肌缺血再灌注损伤,对心肌有明显的保护作用。PNS长时间处理可促进HSP70的表达,对心肌再灌注损伤有良好的保护效应。cAMP具有抗心肌缺血再灌注损伤的作用。

血浆稳态氧化氮产物和S-100β蛋白与老年前列腺电切术后认知功能障碍的关系

目的:观察全身麻醉经尿道前列腺电切术后老年患者认知功能障碍(POCD)的发病率,研究血浆S-100β蛋白和稳态氧化氮产物浓度与POCD的关系。方法:选择40例ASAⅠ-Ⅱ级年龄68-82岁患者,择期进行经尿道前列腺电切术。在术前1 d,术后4 d和6周进行神经心理学测试,一个或多个认知功能缺陷被确定为认知功能障碍。并在术前和术后不同的时间点测定血浆S-100β蛋白和稳态氧化氮产物浓度。结果:术后4 d,有16例患者发生POCD(40%),术后6周有20例患者发生POCD(50%)。与没有认知功能障碍的患者比较,术后4 d发生POCD患者围术期各时间点血浆稳态氧化氮产物浓度明显增强(P<0.05),而血清S-100β蛋白浓度没有差异。结论:经尿道前列腺电切术老年患者术后POCD发生率为40%-50%,POCD的发生与血浆稳态氧化氮产物浓度相关,与血浆S-100β蛋白浓度无关。

银杏叶提取物预处理对大鼠术后认知功能的影响

目的探讨银杏叶提取物预处理对大鼠术后认知功能的影响及可能机制。方法雄性无特定病原体（SPF）级SD大鼠54只,体重600~700g,月龄12月左右,按随机数字表法分为三组：空白对照组（C组）、手术组（O组）和Egb干预＋手术组（E组）,每组18只。E组于手术前连续5d腹腔注射Egb 100mg/kg,C组和O组分别腹腔注射等量生理盐水。行肝叶部分切除术建立大鼠术后认知功能障碍（POCD）模型。采用Morris水迷宫测试观察各组大鼠认知功能变化。三组大鼠于术前5d行定位航行实验训练,记录大鼠逃避潜伏期。于术后第3、5、7天行空间探索实验测试,记录目标象限停留时间和穿台次数。应用透射电镜观察大鼠海马CA1区缝隙连接结构,Western blot法测定大鼠海马缝隙连接蛋白Cx36的表达水平。结果大鼠术前定位航行实验第1天到第5天各组逃避潜伏期均逐渐缩短,但三组差异无统计学意义。术后第3、5、7天E组和O组大鼠目标象限停留时间明显短于C组（P〈0.05）,穿台次数明显少于C组（P〈0.05）;E组大鼠目标象限停留时间明显长于O组（P〈0.05）,穿台次数明显多于O组（P〈0.05）。C组大鼠海马CA1区神经元之间的缝隙连接部分正常;O组大鼠术后3、5、7天海马CA1区神经元之间缝隙连接细胞膜结构不连续,通道间距不规则增宽,中间有空泡状结构。E组海马CA1区神经元之间细胞膜密度较高,至第7天基本恢复正常,与C组相似。术后第3、5、7天O组大鼠海马Cx36蛋白的表达水平明显低于C组（P〈0.05）,E组大鼠海马Cx36蛋白的表达水平明显高于O组（P〈0.05）。术后第3、5天E组大鼠海马Cx36蛋白的表达水平明显低于C组（P〈0.05）;术后第7天E组大鼠海马Cx36蛋白的表达水平低于C组,但差异无统计学意义。结论银杏叶提取物预处理可改善大鼠术后的认知功能,其机制可能与影响海马缝隙连接结构及Cx36蛋白的表达有关。

静注缩宫素对丙泊酚无痛人流患者循环系统的影响

目的观察应用丙泊酚无痛人流时静脉注射缩宫素对患者的血压和心率的影响。方法200例ASAⅠ级早期妊娠人流患者,年龄19～45岁,体重40～75kg,随机分成五组(每组40例):A组,有痛人流组;B组,有痛人流加肌肉注射缩宫素10单位组;C组,单纯丙泊酚组;D组,丙泊酚加静脉注射缩宫素10单位组;E组,丙泊酚加肌肉注射缩宫素10单位组。应用惠普78352C多功能监护仪进行ECG、MAP、HR、SpO2监测,经鼻导管给氧2.0L/min。C、D和E组患者经静脉缓慢推注丙泊酚1.5～2.0mg/kg,待患者入睡后进行手术,术中麻醉维持用微量泵输注丙泊酚1.0mg·kg-1·h-1。手术进行至胎囊吸出时,D组患者经静脉缓慢推注缩宫素10单位,B和E组患者肌肉注射缩宫素10单位。分别于注射缩宫素前和注射缩宫素后1、2、3、4和5min记录MAP和HR。结果D组在注射缩宫素后MAP开始下降,1、2min下降明显(P<0.01),HR有显著增快的趋势,在4min内MAP和HR恢复到注射缩宫素前水平。E组MAP有下降的趋势,HR呈上升的趋势,但无显著性差异。A、B和C组HR和MAP变化不明显。结论丙泊酚无痛人流时静脉注射缩宫素可导致患者的MAP短暂严重波动。

几种药物对大鼠心肌缺血／再灌注损伤保护作用的研究

目的：观察当归注射液，三七总皂甙（PNS）和外源性环磷酸腺苷（CAMP）对缺血/再灌注（I/R）过程心肌的保护作用，研究上述三种药物抗心肌缺血/再灌注损伤的作用机理。方法：80只SD大鼠随机分成五组（每组n=16）；空白组（A），I/R组（B）。当归治疗组件(C)、PNS组(D)和cAMP组(E)，建立在体心肌缺血再灌注动物模型。用化学扩增法测定SOD活性，TBA法测定MDA含量，免疫组化SP法现察心肌细胞HSP70、蛋白激酶C(PKC)的表达和Fas、Bcl—2的含量，原位末端TUNEL法检测细胞凋亡指数，在电镀下现察心肌细胞的超微结构。结果：当归注射液和三七总皂苷均显菌降低再灌注心肌MDA水平(P<0.01)．增强加活性(P<0．01)和HSP70的表达(P<0．01)，同时改善心肌的超微结构。当归注射液明显增加PKC的含量(P<0．05)，并使PKC从细胞核转移到细胞膜PNS组PKC的含量高于I／P组(P<0．01)．但比正常心肌明显减少(P<0．05)。外源性环磷腺苷(cAMP)使凋亡指数和Fas含量明显减少(P<0．01)，Bcl—2的含量明显增多(P<0．01)。结论：当归注射液可通可通过记过抗氧化作用、增加HSP70的表达和调节PKC的表达发挥抗心肌缺血再灌注损伤，对心肌有明显的保护作用。三七总成长时间处理可促进HP70的表达，对心肌再灌注损伤有良好的保护效应。cAIP具有抗心肌缺血／再灌注损伤的作用，其作用机制可能是通过调节Fas和Bc1—2介导的心肌缺血／再灌注细胞凋亡而实现。

硫喷妥钠对内毒素诱导的小鼠肺组织NF-κB表达及TNF-α、IL-1β释放的影响

目的 研究硫喷妥钠对内毒素(LPS)诱导的小鼠肺组织核转录因子(NF κB)表达及肿瘤坏死因子α(TNF α)、白细胞介素1β(IL 1β)的影响。方法 雄性昆明小鼠24只,随机分为4 组:对照组(C组)、LPS组(L组)、硫喷妥钠处理组(L+T组)、单纯硫喷妥钠处理组(T组)。注射LPS或生理盐水3 h后放血处死动物,免疫蛋白印迹法检测肺组织NF κB p65的表达;酶联免疫吸附法检测肺组织炎性细胞因子TNF α、IL 1β水平的变化。结果 L组小鼠肺组织中NF κB p65 表达和TNF α、IL 1β水平与C组相比均显著增高(P<0.05),经硫喷妥钠处理后,此作用得到部分逆转(P<0.05)。结论 硫喷妥钠能抑制内毒素诱导的小鼠肺组织NF κB表达增加以及TNF α、IL 1β水平上升。

盐酸戊乙奎醚对腹腔感染脓毒症小鼠肺损伤的保护作用

脓毒症／感染性休克是造成多器官功能障碍乃至死亡的重要原因。在脓毒症并发的多器官损伤中，肺脏往往是受累最早也是最严重的器官。抗胆碱药用于治疗微循环障碍性疾病取得了很好的效果，文献报道山莨菪碱（654—2）能将脓毒症的病死率降至14％，但其具体机制还不十分清楚。盐酸戊乙奎醚（PHC）为新型选择性抗胆碱药，但其用于脓毒症／感染性休克治疗的研究尚未见报道。本研究利用盲肠结扎穿孔术（CLP）复制脓毒症／感染性休克动物模型，观察PHC对肺组织超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量和诱生型一氧化氮合酶（iNOS）mRNA表达的影响，并探讨其可能的机制。

氢化泼尼松联合帕瑞昔布钠对双腔支气管插管术后咽喉痛的影响

目的探讨氢化泼尼松联合帕瑞昔布钠对双腔支气管插管术后咽喉痛(postoperative sore throat,POST)的影响。方法拟行双腔支气管插管胸科手术患者160例,年龄18～65岁,随机分为四组,气管插管后分别静注生理盐水20ml(C组)、氢化泼尼松20mg(H组)、帕瑞昔布钠40mg(P组)或氢化泼尼松20mg+帕瑞昔布钠40mg(HP组)。记录拔管后1、6、12、24hPOST的发生率及严重程度。结果拔管后6h四组POST发生率达高峰,但H组(35%)、P组(40%)与HP组(20%)发生率明显低于C组(65%)(P<0.05),且HP组明显低于H组和P组(P<0.05)。各组未见与注射药物相关的不良反应。结论氢化泼尼松联合帕瑞昔布钠能有效降低POST的发生率及严重程度,且安全性高。

参附注射液对大鼠急性缺血/再灌注损伤心肌核转录因子-κB的影响

目的:探讨参附注射液保护大鼠心肌缺血 再灌注损伤作用与机理。方法:采用大鼠心脏左冠状动脉前降支缺血 再灌注模型,缺血30min ,再灌注6 0min。2 4只SD大鼠随机分为3组:假手术组;缺血 再灌注组;参附注射液组。酶联免疫吸附实验法检测血浆中肿瘤坏死因子 -α(TNF- α)、白细胞介素- 6(IL- 6 )浓度,免疫印记法测心肌核转录因子- κB(NF -κB)活性水平,电镜观察心肌超微结构。结果:缺血 再灌注组心肌NF -κB的活性,血浆TNF- a、IL -6浓度较假手术组明显上升(P <0 .0 1)。参附注射液组中上述指标与缺血 再灌注组比较均显著下降(P <0 .0 1) ,电镜下参附注射液组中心肌超微结构较缺血再灌注组明显减轻并接近正常。结论:参附注射液通过抑制缺血心肌中NF- κB的活性,降低促炎因子水平,对心肌起保护作用。

双管型喉罩通气在腹腔镜胆道手术中对血流动力学和通气的影响

目的:观察腹腔镜胆道手术中运用双管型喉罩通气对血流动力学和通气功能的影响。方法:择期行腹腔镜胆囊切除术或腹腔镜胆总管探查术患者48例,年龄25-62岁,ASAⅠ-Ⅱ级,随机分为气管导管组(T组)和喉罩组(L组),每组24例。记录患者入室安静5 min时(T0),插管前即刻(T1)、插管后即刻(T2)、插管后3 min(T3)、拔管时(T4)和拔管后3 min(T5)的平均动脉压(MAP)和心率(HR),并于上述时间点采静脉血检测肾上腺素(E)、去甲肾上腺素(NE)水平;记录间歇通气10 min时(T6)、气腹10 min时(T7)和气腹20 min时(T8)的气道峰压(Ppeak)、潮气量(VT)和呼气末二氧化碳分压(PETCO2)。结果:两组的插管时、间歇通气10 min时和气腹10 min时Ppeak、VT、PETCO2差异无统计学意义(P>0.05)。L组插管后即刻、插管后3 min、拔管时和拔管后3 min的MAP和HR较T组降低(P<0.05)。T组在插管后3 min、拔管时和拔管后3 min的肾上腺素、去甲肾上腺素水平高于L组,且T组在拔管后3 min的肾上腺素、去甲肾上腺素水平高于T0时的基础值(P<0.05)。而L组的肾上腺素、去甲肾上腺素水平在拔管后3 min与T0时的基础值无差别(P>0.05)。结论:双腔型喉罩操作简便,对心血管系统刺激性小,通气可靠。

人巨细胞病毒感染与动脉粥样硬化的相关性研究

目的从病理学角度寻找证据,研究人巨细胞病毒感染与动脉粥样硬化的相关性,探讨其发病机制中病毒病因之可能。方法收集行血管手术的15例动脉粥样硬化患者的外周动脉标本,制作石蜡切片,采用原位杂交及免疫组织化学染色的方法,定性及定位检测外周动脉中人巨细胞病毒核酸及抗原的表达情况。结果原位杂交结果为人巨细胞病毒核酸在15例动脉粥样硬化患者的外周动脉中均为阴性表达。免疫组织化学染色结果为人巨细胞病毒抗原pp65在15例标本中14例为阳性表达,1例为阴性表达;人巨细胞病毒抗原IE1 72在15例标本中为阴性表达。结论动脉粥样硬化动脉标本中存在人巨细胞病毒感染的证据。

丙泊酚麻醉对颅脑外伤手术患者血清NSE含量和术后6个月简易智能量表评分的影响

目的:观察丙泊酚对颅脑外伤患者手术期间血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)的影响及与术后6个月时简易智能量表(MMSE)评分的相关性。方法:30例颅脑外伤患者随机分为2组各15例,均于手术时分别采用丙泊酚(A组)和异氟醚(B组)麻醉。于手术前及手术开始2h、手术结束时测定血清NSE含量;6个月后以MMSE量表对2组接受随访的患者进行评分。结果:手术2h和手术结束时与手术前比较,2组NSE均升高,手术结束时2组间比较A组NSE低于B组(P<0.05);2组手术结束时NSE含量与6个月后MMSE评分呈显著负相关(r=-0.469,P<0.05),A组MMSE评分高于B组,但差异无显著性意义。结论:血清NSE含量的高低可作为判断患者预后的重要指标,临床麻醉剂量的丙泊酚可以降低手术期间NSE的升高,改善预后,具有脑保护作用。

急性颅脑外伤手术患者血清NSE的测定及意义

目的:测定急性颅脑外伤手术患者血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)的含量,探讨其与患者格拉斯哥(Glasgow)评分和6个月后简易智能量表(MMSE)评分的相关性。方法:10例泌尿系统手术的非颅脑外伤患者为对照组,测定术前及手术结束时血清NSE含量。另30例急性颅脑外伤手术患者为脑外伤组,术前行Glasgow评分,并术前及手术结束时测定血清NSE含量,6个月后随访时,以MMSE量表对其中23例患者进行评分。结果:脑外伤组术前NSE含量显著高于对照组(P<0.01),Glasgow评分越低的患者术前NSE含量越高(P<0.05);手术结束时患者NSE含量较术前升高,其浓度与6个月后患者MMSE评分呈显著负相关(P<0.05)。结论:急性颅脑外伤患者血清NSE含量升高;外伤越严重,其含量也越高,手术结束时患者血清NSE含量可用作判断患者预后的重要指标。

氯沙坦对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响

目的:观察血管紧张肽II1型受体阻断剂 氯沙坦对大鼠缺血再灌注心肌的梗死面积、心肌结 构、肿瘤坏死因子α(TNF α)、白细胞介素6(IL 6) 的影响。方法:雄性Sprague Dawley(SD)大鼠42只 随机分为4组:对照组、缺血再灌注组、氯沙坦 5mg·kg-1组和氯沙坦10mg·kg-1组。除对照组 外,余3组建立心肌缺血再灌注模型,2个氯沙坦组 分别于缺血前15min静脉注射氯沙坦5,10mg· kg-1。计算心肌梗死范围,观察心肌细胞超微结构, 检测再灌注后血浆TNF α和IL 6的浓度。结果:与 缺血再灌注组相比,2氯沙坦组梗死面积减小(P< 0.01),心肌超微结构改善。缺血再灌注组TNF α 和IL 6的浓度均明显高于对照组(P<0.01);2个 氯沙坦组TNF α和IL 6的浓度均低于缺血再灌注 组(P<0.01),其中氯沙坦10mg·kg-1组较 5mg·kg-1组的浓度低(P<0.05,P<0.01)。结 论:氯沙坦具有抗大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用, 高剂量氯沙坦的效果明显,其机制可能与从受体水 平阻断肾素 血管紧张肽系统,减少炎性因子TNF α和IL 6的产生有关。

携带血红素加氧酶1基因的重组腺相关病毒的制备

目的:制备携带大鼠血红素加氧酶1(rHO-1)基因的重组腺相关病毒(AAV)。方法:通过RT-PCR的方法,从大鼠脾脏组织中扩增rHO-1基因,克隆入通用型AAV载体质粒pSNAV中构建重组质粒pSNAV-rHO-1,通过酶切和测序鉴定。利用Lipofectamine将pSNAV-rHO-1转染BHK-21细胞,G418筛选得到表达外源基因的细胞系BHK/rHO-1。用具有能表达Rap和Cap及包装重组AAV功能的一种重组单纯疱疹病毒HSV1-rc/△UL2分别感染这株细胞系后收获并纯化病毒,DNA斑点杂交检测重组病毒滴度。结果:扩增了rHO-1基因,测序证实与GenBank中的一致,病毒滴度为1.5×1015v.g/L。结论:成功获得了高滴度、高纯度的重组AAV-rHO-1,这为以后心血管系统疾病的基因治疗研究奠定了基础。

缺血后处理对心肌缺血/再灌注大鼠血红素加氧酶-1表达的影响

目的:探讨缺血后处理对心肌缺血/再灌注大鼠血红素加氧酶-1(HO-1)表达的影响。方法:56只雄性SD大鼠随机分为4组:假手术组(Sham组)(n=8)、缺血再灌注组(I/R组)(n=16)、缺血后处理组(IPo组)(n=16)和血红素加氧酶抑制剂锌原卟啉组(ZnPP组)(n=16)。采用结扎心脏左冠状动脉前降支30 min,再灌注2 h制备心肌缺血再灌注损伤模型。IPo组在结扎心脏左冠状动脉前降支30 min,再灌注10 s,缺血10 s,重复3次后,完全恢复心肌血流。再灌注2 h后开胸,每组8只取心尖部缺血心肌,测定超氧化物歧化酶(SOD)活性、心肌组织中丙二醛(MDA)含量和心肌中HO-1蛋白表达。I/R组I、Po组和ZnPP组另取8只大鼠测定心梗面积。结果:与S组比较,I/R组缺血心肌中MDA含量增加,SOD活性降低(P<0.01),I/R组HO-1表达无统计学差异(P>0.05)。与I/R组比较,IPo组缺血心肌中MDA降低,SOD活性升高且心梗面积明显减小(P<0.01),HO-1蛋白表达显著增强(P<0.01)。与IPo组比较,ZnPP组MDA含量升高,SOD活性降低(P<0.01),HO-1表达明显减少(P<0.01)。结论:缺血后处理能减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,其机制与增强心肌抗氧化能力和增加血红素加氧酶(HO-1)的表达有关。