反应停的抗新生血管形成及抗肿瘤作用研究

目的 研究反应停的抗新生血管形成及抗肿瘤作用。方法 在HUVECs中MTT法检测细胞活性,电镜观察细胞死亡类型,流式细胞仪定量细胞凋亡率;用鸡胚尿囊膜模型观察新生血管形成;肉瘤S180小鼠体内模型观察反应停的抗肿瘤作用,并通过免疫组化观察反应停对肿瘤组织微血管数的影响。结果 反应停对HUVECs有直接抑制作用,IC50为(22 .91±1. 74) μmol·L-1;经反应停作用48h后的HU VECs,随剂量增加,电镜下可见核不规则,染色体浓集,空泡状内质网及凋亡小体等不同时期细胞凋亡现象;流式细胞检测显示反应停可依剂量诱导HUVECs凋亡或坏死;鸡胚尿囊膜新生血管形成模型中,反应停抑制新生血管形成的阳性率随剂量而增加;小鼠S180肿瘤移植模型中,反应停单独使用,虽可明显减少肿瘤血管密度, 无抑制肿瘤生长作用;与环磷酰胺联合使用,可减少环磷酰胺用量,与环磷酰胺有协同抗肿瘤作用。结论 反应停有抗新生血管形成作用,单独应用对小鼠S180肿瘤无抑制作用,但与环磷酰胺有协同作用。

北五味子的镇静、催眠作用

目的对北五味子水提取物镇静、催眠药理作用进行初探。方法采用镇静、催眠实验观察北五味子水提取物对小鼠自主活动的影响 ,协同戊巴比妥钠对小鼠的催眠作用。结果北五味子水提取物能明显减少小鼠自主活动次数 ,增加阈下剂量戊巴比妥钠致小鼠睡眠只数 ,延长阈上剂量戊巴比妥钠致小鼠睡眠时间。结论北五味子水提取物有明显的镇静、催眠作用。

血竭素高氯酸盐诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的机制

目的 研究血竭素高氯酸盐诱导HeLa细胞凋亡机制。方法 MTT法测定血竭素高氯酸盐对HeLa细胞 的细胞毒作用。通过显微镜,荧光染色观察细胞形态学变化,用琼脂糖凝胶电泳检测DNA片断化。用Western印迹 法分析药物对蛋白质表达的影响。结果 血竭素高氯酸盐明显抑制HeLa等细胞的增殖,诱导HeLa细胞调亡。 Caspase 1, 3, 8, 9及家族抑制剂可明显抑制血竭素高氯酸盐诱导的凋亡。Western印迹结果显示血竭素高氯酸盐 作用12h后Bax及Bcl XL的表达明显改变,caspase 3, 8前体及caspase 3底物ICAD和PARP发生降解。结论 血 竭素高氯酸盐(60μmol·L-1)通过改变Bax/Bcl XL的表达激活caspase途径诱导HeLa细胞凋亡。

白英总苷抗肿瘤作用初步研究

目的研究白英总苷体内外抗肿瘤作用。方法采用MTT法考察白英总苷体外对人肝癌BEL-7402细胞及人胃腺癌SGC-7901细胞的增殖抑制作用;以小鼠S180肉瘤及H22肝癌为模型,考察白英总苷体内对肿瘤生长的抑制作用。结果白英总苷对人肝癌BEL-7402细胞及人胃腺癌SGC-7901细胞有显著地增殖抑制作用,且均呈现良好的浓度-效应依赖关系,作用48h的IC50值分别为(180.22±6.32)μg/ml和(114.89±4.89)μg/ml;白英总苷对小鼠S180肉瘤有显著的抑制作用,且呈现良好的剂量-效应关系,三次重复实验,高剂量组的抑瘤率达到33.76%±3.24%;白英总苷各剂量对小鼠H22肝癌抑制作用均不显著。结论白英总苷体内外有一定的抗肿瘤作用。

保妇康体外抗病原微生物活性的研究

目的 :体外检测纯中药制剂保妇康栓 (主要成分莪术油 )对需氧菌、厌氧菌、真菌、支原体 (解脲脲原体 )的MIC90 、MIC50 、MBC90 、MBC50 及阴道毛滴虫的 MCC。方法 :与阳性对照药双唑泰栓 (内含甲硝唑、克霉唑及洗必泰等化学药物 )进行比较 ,以比较保妇康栓的抗菌活性。结果 :与阳性对照药双唑泰栓相比 ,保妇康栓 (含基质 )对需氧菌作用优于阳性对照药 ;对厌氧菌及真菌作用略弱于阳性对照药 ;对支原体有一定抑杀作用 ,优于阳性对照药 ;具有抗阴道毛滴虫作用 ,弱于含甲硝唑 (灭滴灵 )的双唑泰栓制剂。结论 :保妇康栓对需氧菌、厌氧菌及真菌均有不同程度的抗菌活性 ,具有抗菌谱广、抗菌活性强等特点 ;具有一定的抗支原体活性 ,优于双唑泰栓 ;对阴道毛滴虫具有较好的抑杀活性 。

胡椒碱及其衍生物3,4-次甲二氧桂皮酰哌啶的抗抑郁作用

目的研究胡椒碱及其衍生物3,4次甲二氧桂皮酰哌啶的抗抑郁作用,并对其作用机理进行初步探讨。方法利用小鼠强制游泳实验、悬尾实验等考察胡椒碱和3,4次甲二氧桂皮酰哌啶的抗抑郁作用,并通过测定不同脑区内单胺类神经递质质量浓度以及全脑单胺氧化酶活性变化,探讨作用机制。结果胡椒碱和3,4次甲二氧桂皮酰哌啶(10、20 mg.kg-1)长期给药后,能明显缩短小鼠在行为学实验中的不动状态时间,并且该作用随剂量增大效应逐渐降低,高剂量(80 mg.kg-1)表现出明显的中枢神经抑制作用;能显著提高脑内5羟色胺水平,而对脑内肾上腺素递质水平未见明显影响;具有较弱的单胺氧化酶抑制作用。结论胡椒碱和3,4次甲二氧桂皮酰哌啶具有较好的抗抑郁作用,其作用是通过上调中枢神经系统5羟色胺或多巴胺水平实现的。

竹叶提取物对犬实验性心肌梗死的保护作用

目的研究竹叶提取物对犬实验性心肌梗死的保护作用 ,以便为竹叶提取物的临床新用途提供实验依据。方法采用麻醉开胸犬 ,通过结扎左冠状动脉前降支 (LAD)产生急性心肌梗死模型 ,从心肌梗死面积 (MIS) ,心肌梗死程度及血清酶学变化观察竹叶提取物的抗心肌缺血作用 ,并从心肌氧代谢及自由基损伤等角度分析其可能的作用机制。结果竹叶提取物 (5、10、2 0mg·kg-1)可降低血清肌酸磷酸激酶 (CK)、乳酸脱氢酶 (LDH)、天冬氨酸转移酶 (AST)活性 ,并能提高超氧化物歧化酶 (SOD)活性 ,显著降低心肌梗死面积。结论竹叶提取物对急性缺血心肌产生明显保护作用 ,作用机制可能与其对抗自由基损伤 ,增强体内抗氧化酶活性 ,减少心肌耗氧量 ,减少心肌梗死面积有关。

吴茱萸汤醇提各组分止呕活性的研究

目的 :对吴茱萸汤醇提各组分止呕活性的研究和机制初步探讨。方法 :采用硫酸铜诱导家鸽呕吐实验 ,小鼠胃排空实验 ,ACh和 5 HT作用的离体大鼠胃条实验来确定其中具有止呕活性的组分 ,并观察有效组分对ACh ,5 HT ,组胺累积浓度 效应曲线的影响。结果 :5 0 %醇洗脱液和 70 %醇洗脱液有十分显著性的止呕效应 ,且副作用较小 ,对ACh ,5 HT ,组胺累积浓度 效应曲线均有一定的作用。结论 :5 0 %醇洗脱液和 70 %醇洗脱液含有的止呕活性成分较多 ,5 0 %和 70 %醇可以从吴茱萸汤中提取较多止呕活性成分 ,止呕作用可能与拮抗ACh ,5 HT ,组胺受体有关。

去甲斑蝥素通过半胱氨酸天冬氨酸酶诱导HeLa细胞凋亡

目的 :研究去甲斑蝥素 (NCTD)通过半胱氨酸天冬氨酸酶 (caspase)途径诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的机制。方法 :采用MTT法、形态学观察、DNA凝胶电泳、乳酸脱氢酶 (LDH)检测及Westernblot检测法。结果 :去甲斑蝥素能显著诱导HeLa细胞发生凋亡 ,caspase -家族、caspase - 3、- 8、- 10抑制剂可以部分地抑制NCTD诱导的细胞死亡。细胞凋亡时caspase - 3、- 8、- 9酶活力升高 ,而且caspase - 3的作用底物 -caspase - 3激活的DNA酶抑制物 (ICAD)蛋白表达下降。结论 :去甲斑蝥素通过激活caspase途径诱导HeLa细胞凋亡。

白英乙醇提取物抗肿瘤作用初步研究

目的:研究白英乙醇提取物体内外抗肿瘤作用。方法:采用MTT法观察白英乙醇提取物体外对人肝癌BEL-7402细胞及人胃腺癌SGC-7901细胞的增殖抑制作用;以小鼠S180肉瘤及H22肝癌为模型,观察白英乙醇提取物在体内对肿瘤生长的抑制作用。结果:白英乙醇提取物对人肝癌BEL-7402细胞及人胃腺癌SGC-7901细胞有增殖抑制作用,且均呈现良好的浓度-效应依赖关系,作用48 h的IC50值分别为(287.40±5.84),(176.14±5.18)μg.mL-1;白英乙醇提取物在体内对小鼠S180肉瘤和H22肝癌肿瘤的生长均有显著的抑制作用,且呈现良好的剂量-效应关系,高剂量组的抑瘤率分别达到(41.15±4.54)%和(45.00±7.37)%。结论:白英乙醇提取物具有抗肿瘤作用。

土槿皮乙酸体外诱导A375-S2细胞凋亡

目的 :研究土槿皮乙酸 (pseudolaricacidB)诱导A375 S2细胞凋亡的作用 ,探讨其抗癌作用机制。方法 :采用噻唑蓝 (MTT)法、形态学观察、DNA凝胶电泳及Westernblot检测法。结果 :土槿皮乙酸可剂量 时间依赖性的诱导A375 S2细胞凋亡 ,5 μmol·L-1土槿皮乙酸处理 36h的细胞 ,Hoechst 332 5 8荧光染色后有明显的凋亡小体出现 ;凝胶电泳法显示有明显的DNAladder出现。细胞内抑制凋亡蛋白Bcl 2 ,Bcl xL和caspase激活的DNA酶抑制物(ICAD)表达量时间依赖性地减少 ,而促凋亡蛋白Bax表达量增加。结论 :土槿皮乙酸对A375 S2细胞的杀伤作用主要通过诱导细胞凋亡 ,降低Bcl 2 ,Bcl xL和ICAD蛋白的表达 ,增加Bax蛋白表达为其诱发A375

陆英颗粒对急性实验性肝损伤的保护作用研究

目的:研究陆英颗粒灌胃给药对急性实验性肝损伤的保护作用。方法:采用急性CCl4肝损伤模型、D-半乳糖胺盐酸盐大鼠急性肝损伤模型、ConA致小鼠急性肝损伤模型研究陆英颗粒灌胃给药对急性实验性肝损伤的保护作用。结果:陆英颗粒对CCl4致小鼠急性肝损伤有明显的保护作用,其保肝作用可能与对抗脂质过氧化以及提高肝细胞膜和微粒体膜钙泵的活性有关;对D-半乳糖胺盐酸盐致大鼠急性肝损伤和ConA所致小鼠急性肝损伤亦有明显的保护作用。结论:陆英颗粒对多种急性实验性肝损伤有较明显的保护作用。

瓜蒌提取物对缺血缺氧及缺血后再灌注损伤心肌的保护作用

以异丙肾上腺素致小鼠常压缺氧模型、垂体后叶素致大鼠急性心肌缺血模型及大鼠心肌缺血再灌注模型 ,对瓜蒌提取物抗心肌缺氧缺血及缺血后再灌注损伤的作用进行探讨 .实验结果表明瓜蒌提取物能延长异丙肾上腺素作用的小鼠常压缺氧存活时间 ,对抗垂体后叶素所致的大鼠急性心肌缺血作用 ,并能显著保护缺血后再灌注损伤的大鼠 .

去甲斑蝥素诱导小鼠肺纤维瘤L929细胞凋亡

目的:研究去甲斑蝥素 (norcantharidin,NCTD)抑制小鼠肺纤维瘤 (L929)细胞的作用机制。方法:用MTT法测定细胞生长抑制率。采用Hoechst33258染色、DNA凝胶电泳和乳酸脱氢酶 (LDH)活力检测细胞凋亡。用免疫印迹法(Westernblot)分析了细胞外信号调节激酶 (extracellularsignal regulatedkinase, ERK)和磷酸化ERK、c JunN 末端激酶 (C JunN terminalkinase, JNK)和磷酸化JNK蛋白表达的变化。结果:NCTD诱导L929细胞凋亡。JNK抑制剂 (SP600125)与ERK抑制剂(PD98059),可明显抑制NCTD对细胞的杀伤作用。同时磷酸化ERK和磷酸化JNK表达增加。结论:NCTD对L929细胞的细胞毒作用是通过诱导其凋亡而发生的,且呈时间剂量依赖性。这种作用可能与JNK,ERK通路激活有关。

不同制备工艺的瓜蒌薤白提取物药效学比较

目的 :对不同工艺制备的瓜蒌薤白提取物 (分别简称为水提物WE及醇提物EE)进行药效学比较研究。方法 :采用小鼠常压耐心肌缺氧模型 ,豚鼠离体心脏冠脉流量及体外抗血小板聚集等药效学试验。结果 :EE可明显延长小鼠在常压缺氧情况下的存活时间 ,而相同剂量的WE则无效 ;相同剂量的EE及WE对离体豚鼠心脏均具有明显的扩冠作用 ,并均可抑制由ADP诱导的血小板聚集。结论 :相同剂量的EE的药理作用略优于WE。

瓜蒌提取物对离体家兔胸主动脉条收缩的影响

以兔离体主动脉条为实验材料，观察ＥＦＴ对去甲肾上腺素（ＮＥ）、氯化钾（ＫＣｌ）和氯化钙（ＣａＣｌ２）的剂量－效应曲线的影响及主动脉条的α受体及β受体的作用．观察了ＥＦＴ对ＮＥ引起的兔主动脉条２种收缩成分的影响．结果ＥＦＴ能舒张已被氯化钙、高钾和去甲肾上腺素收缩的兔主动脉条，使ＮＥ、ＫＣｌ、ＣａＣｌ２的剂量－效应曲线非平行右移，最大效应降低．ＥＦＴ松驰血管平滑肌的作用不依赖于阻断α受体或β受体．而与戊脉安（Ｖｅｒ）相似，是通过阻断钙通道实现的．但它们阻断钙通道的方式不同．ＥＦＴ可能无选择性阻断电位依赖性钙通道和受体操纵性钙通道，而Ｖｅｒ则只选择性阻断．因此。

荭草苷对缺氧-复氧心肌细胞的保护作用

目的探讨荭草苷 (orientin)对缺氧 复氧损伤心肌细胞的保护作用及其机制。方法采用原代培养的新生大鼠心肌细胞建立缺氧 复氧损伤模型 ,实验分为正常细胞培养组、缺氧 复氧损伤模型组、缺氧 复氧损伤 +荭草苷 (3、10、30 μmol·L-1)组、缺氧 复氧损伤 +verapamil(5 μmol·L-1)组。用黄嘌呤氧化酶法测定SOD的活力 ,硫代巴比妥酸显色法测定MDA含量 ,MTT染色法测定线粒体脱氢酶活性改变并测定LDH含量变化 ,荧光法测定细胞内钙浓度的变化。结果荭草苷可显著提高缺氧 复氧损伤心肌细胞内SOD的活性及细胞内线粒体脱氢酶活性 ,并能显著抑制LDH的活性、MDA的生成以及细胞内钙浓度。结论荭草苷具有明显的抗缺氧 复氧损伤 。

薤白提取物对心肌缺氧缺血及缺血再灌注心肌损伤的保护作用

采用异丙肾上腺素致小鼠常压缺氧模型、垂体后叶素致大鼠急性心肌缺血模型及大鼠心肌缺血再灌注模型 ,考察薤白提取物抗心肌缺氧缺血及缺血后再灌注损伤的保护作用。结果表明薤白提取物能延长异丙肾上腺素作用的小鼠常压缺氧存活时间 ,对抗垂体后叶素所致的大鼠急性心肌缺血作用 。

去甲斑蝥素诱导人黑色素瘤A375S2细胞凋亡

目的:研究去甲斑蝥素(NCTD)诱导人黑色素瘤A375-S2细胞凋亡的机制。方法:采用MTT法、形态学观察、DNA凝胶电泳及Westernblot检测法。结果:去甲斑蝥素可诱导A375-S2细胞发生凋亡。半胱氨酸天冬氨酸酶(caspase)-3,-9抑制剂可以部分的抑制NCTD诱导的细胞死亡。细胞凋亡时caspase-3,8,-9酶活力升高,caspase3底物caspase-3激活的DNA酶抑制物(ICAD)蛋白表达下降,同时Bcl2/Bax、BclxL/Bax蛋白表达比率明显降低。结论:去甲斑蝥素通过激活caspase和Bcl-2家族诱导A375-S2细胞凋亡。