周围神经损伤与轴突诱向因子

神经系统生长发育以及损伤修复过程中,有两类因子调节轴突的生长方向,即轴突吸引性和排斥性诱向因子。此两类因子在轴突生长过程中,互相作用促进轴突沿着特定的方向生长,最终精确致靶。

骨内高压与骨性关节炎关系研究的历史与现状

骨性关节炎(Osteoarthritis,OA)是人体能动关节的一种退行性疾病,以关节疼痛、活动受限等为主要临床特点,老年人多见。尽管对其进行了许多实验及临床方面的研究,但病因和发病机理仍不清楚。目前仍无有效的防治方法。自1938年Larsen首次提出骨内压的概念以后。

足底内侧岛状皮瓣转移修复跟部溃疡7例报告

足跟部是最主要的负重区,局部组织缺损后易形成久治不愈的溃疡.跟部皮肤结构特殊,只有用与跟部结构相似,有感觉的皮瓣修复,才能长久保持其良好的功能.据此在总结以往经验教训的基础上,自1993年3月采用带神经血管蒂的足底内侧皮瓣修复跟部溃疡7例,效果非常满意,总结如下.

椎体后缘切除椎体间植骨融合术治疗腰椎滑脱5例报告

椎体后缘切除椎体间植骨融合术治疗腰椎滑脱５例报告王栓科，张祥生１９９２年以来，采用后外侧入路椎体后缘切除椎体间植骨融合术治疗腰椎滑脱５例，经１～２．５年随访观察，疗效优良。本组男２例，女３例，平均年龄４６．４岁。Ｌ４滑脱２例，Ｌ５滑脱３例；Ⅰ度滑脱１...

后路椎间盘镜与显微镜下手术治疗腰椎间盘突出症中期疗效分析

目的探讨后路椎间盘镜腰椎间盘切除术(MED)与显微镜下腰椎间盘切除术(MSLD)治疗腰椎间盘突出症(LDH)的中期临床疗效。方法将2009年3月至2010年4月于兰州大学第二医院骨科接受手术治疗的98例单节段LDH患者随机分为两组,其中接受MED治疗的患者44例(MED组),接受MSLD治疗的患者54例(MSLD组)。采用视觉疼痛模拟评分(VAS)、JOA评分和Oswestry功能障碍指数(ODI)评价两组患者手术疗效。结果 MED组创伤小、出血少,术后恢复快。两组患者手术切口长度、出血量、恢复工作时间比较,均差异有统计学意义(P<0.01);手术时间、住院时间、并发症发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。MED组和MSLD组患者术后平均随访时间为49.13个月和47.24个月,末次随访时两组患者术后腰腿痛VAS评分、JOA评分、ODI指数较术前均明显改善(P<0.01),组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论MED与MSLD均是治疗单节段LDH的有效方法,但MED创伤小、术后患者可早期下地活动,是理想的微创手术。

老年骨性关节炎与关节软骨酶降解

骨性关节炎是老年人常见的关节退行性疾病,近年来通过动物实验及临床研究,发现骨性关节炎关节软骨的破坏与软骨中或滑膜中中性蛋白酶及胶元酶降解软骨中的主要成份有关。对实验动物给予酶拮抗剂能显著减轻实验动物关节软骨的破坏,如果通过进一步研究应用于临床,将为治疗及预防骨性关节炎这一顽疾开辟一个新的途径。

Pemberton截骨术联合软组织松解及股骨上段截骨治疗发育性髋关节脱位

[目的]总结Pemberton截骨术治疗发育性髋关节脱位的临床经验,强调联合化及个体化原则。[方法]选择1996年2月～2007年4月期间3～10岁CDH患儿26例,计28髋,均行Pemberton截骨术辅以广泛软组织松解、股骨上段矫形截骨等联合手术治疗,测定并对比其术前、术后AI角、CE角、髋臼的深度等指标,并以Severin影像学及Mckay临床疗效评价标准加以评价。[结果]本组26例均得到随访,平均43个月。根据Severin影像学评价标准,优64.3%,良28.6%,可7.1%,而根据McKay临床疗效评价标准,优50.0%,良35.8%,可7.1%,差7.1%。总体上影像学评价优于临床疗效。[结论]Pemberton截骨手术治疗发育性髋关节脱位是安全、有效的,联合化是提高成功率、减少并发症的必要条件,同时也必须强调治疗的个体化原则。

Ⅰ期关节镜辅助下修复重建膝关节后外侧脱位合并多发韧带损伤的疗效观察

目的：评估采用Ⅰ期关节镜辅助下重建前后交叉韧带（ACL/PCL）及修复膝后内侧韧带结构的方法,治疗膝关节后外侧脱位的临床效果.方法：自2008年3月至2012年8月,收治膝关节后外侧脱位22例.男16例,女6例;年龄20～53岁,平均30.5岁;运动伤8例,车祸伤5例,摔伤9例.前交叉韧带重建均使用自体半腱肌、股薄肌肌腱;后交叉韧带重建使用LARS人工韧带14例,自体半腱肌、股薄肌肌腱8例;膝后内侧韧带结构损伤行缝合修复17例,行自体半腱肌加强术5例;手术均为Ⅰ期完成.术后早期行CPM及主动活动训练.采用国际膝关节文献委员会IKDC分级及Lysholm评分评估疗效.结果：术后患者均获随访,时间11～56个月,平均39个月.术后膝关节IKDC评定：A级9例,B级10例,C级3例;末次随访IKDC评分89.6±3.1.末次随访Lysholm评分90.7±1.8,术后较术前评分改善.结论：关节镜下Ⅰ期重建前后交叉韧带及修复其他膝后内侧韧带结构,并辅以积极功能锻炼,能较好恢复关节稳定性,临床效果满意,是治疗膝后外侧脱位的一种有效方法.

关节软骨脱细胞支架材料的制备

目的:探讨脱细胞关节软骨支架材料的制备方法,制备软骨理想的组织工程支架材料。方法:实验于2005-12/2006-08在兰州大学第二医院骨科研究所实验室完成。实验方法:利用冷冻干燥、化学去污剂等方法制备脱细胞的兔关节软骨。在无菌状态下取青紫蓝兔的新鲜兔关节软骨,剪成3.5mm×3.5mm,厚度0.2～2.0mm,在冷冻干燥器中冻干12h。在10g/L Triton X-100、Tris-HCl液内加入蛋白酶抑制剂-苯甲基黄酰氟,持续振荡48h后标本以双蒸馏水连续冲洗后置于DNase I酶和RNase A酶混合液中消化。置于10g/L Triton X-100、Tris-HCl液中洗脱。实验评估:①大体观察:肉眼观察脱细胞后关节软骨的外观形态。②组织学观察:将制备的脱细胞关节软骨行石蜡包埋切片,行苏木精-伊红染色、Massion三色染色并在光镜下观察。③扫描电镜观察:将制备的脱细胞关节软骨以戊二醛-锇酸双固定后,行扫描电镜观察。结果:①脱细胞后关节软骨外观形态:肉眼下可见正常关节软骨呈白色或淡黄色,脱细胞后关节软骨色呈灰白,半透明状,无光泽,外形与软骨相似并且仍维持了关节软骨的结构。②脱细胞后关节软骨的组织学变化:苏木精-伊红染色显示,软骨细胞消失,软骨巢分辨不清,在巢内没有蓝染的核物质,核细胞碎屑,只有红染为残留的细胞外基质。Massion三色染色显示,脱细胞后关节软骨内主要含有胶原纤维。③脱细胞后关节软骨的超微结构:扫描电镜下显示,脱细胞后关节软骨陷窝呈蜂窝状,未见到残余的细胞核、细胞器,残余的空穴高低不平。结论:经冷冻干燥、化学去污剂等方法可完整去除软骨中的细胞成分,保留胶原纤维等细胞外基质。

骨髓间充质干细胞复合消旋聚乳酸/明胶修复兔关节软骨缺损的实验研究

目的 研究骨髓间充质干细胞（marrow mesenchymal stem cells，MSCs）复合消旋聚乳酸（poly-L-lacticacid，PLLA）／明胶修复兔膝关节全层软骨缺损的效果。方法 4～6月龄青紫兰兔36只，体重2．5～3．5kg，雌雄不拘。体外分离培养MSCs，取第2代MSCs种植于PLLA／明胶支架体外复合培养。将36只青紫兰兔制备双侧膝关节全层软骨缺损模型，根据修复方法不同随机分为A、B、C3组（n=12）。A组，将MSCs与PLLA／明胶支架材料复合物植入兔双膝缺损处；B组，将单纯PLLA／明胶支架材料植入兔双膝缺损处；C组，缺损处不作任何处理，作为对照。A、B组在植入时均加入25μg／L转化生长因子β（transforming growth factorp1，TGF-β1）0．4ml。分别于术后4、8和12周，取材行大体、组织学及免疫组织化学染色观察，并将12周大体及组织学标本按照O’driscoll等评分标准进行评分。结果大体观察：术后12周，A组修复组织与正常软骨结合处完整，表面光滑，界限模糊；B、C组缺损处修复组织呈纤维组织或无修复，表面不平整或呈虫蚀样改变。组织学观察：A组术后4周，细胞数较多，呈梭形、圆形或椭圆形；8周修复组织与周围软骨大部分结合，细胞呈圆形，以透明软骨样细胞为主，有软骨陷窝，表层有梭形纤维样细胞；12周修复组织细胞为透明软骨样细胞，柱状排列，与周围软骨及软骨下骨整合良好；B组，术后4～8周细胞数较少，细胞层次排列差；12周修复组织菲薄，呈纤维软骨样，基质染色接近正常；C组，术后4～8周缺损组织由薄层纤维组织覆盖；12周缺损区纤维组织进一步增厚，与周围软骨未结合。免疫组织化学染色显示，A组修复组织Ⅱ型胶原染色呈阳性，B组呈弱阳性，C组无表达。术后12周大体观察总评分，A、B及C组分别为2．75±0．89、4．88±1．25和7．38±1．18，A组优于B、C组，B组优于C组，且差异均有统计学意义（P〈0．05）；组织学观察总评分，A、B及C组分别为3．88±1．36、8．38±1．06和13．13±1．96，A组与B、C组以及B组与C组差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论 应用软骨组织工程原理，以PLLA／明胶为支架材料复合自体MSCs移植是一种修复软骨缺损行之有效的方法。

人骨肉瘤细胞株中类肿瘤干细胞的分离培养及鉴定

目的:从人骨肉瘤株U2-OS中分离并鉴定类肿瘤干细胞。方法:用无血清培养法从骨肉瘤细胞株中分离出肿瘤细胞球,流式细胞术检测骨肉瘤细胞株中Stro-1的阳性表达率,MTT法检测其增殖能力,免疫磁珠分选Stro-1阳性细胞,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法研究Stro-1阳性细胞中Stro-1 mRNA的表达,并将Stro-1阳性细胞和阴性细胞分别接种于NOD/SCID小鼠。结果:U2-OS中CD44的阳性百分率为5.67%,Stro-1阳性细胞形成的细胞球具有增殖和分化的能力,Stro-1阳性细胞中呈现Stro-1 mRNA的高表达,Stro-1阳性细胞能形成骨肉瘤。结论:骨肉瘤细胞株中存在类骨肉瘤干细胞,并具有自我更新和多向分化的能力。

神经肽Y在突出腰椎间盘组织中的表达及意义

目的:探讨突出的腰椎间盘髓核组织中神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)的表达及表达的意义。方法:收集30例有症状的腰椎间盘突出症患者,其中L4/5或L5/S1需行腰椎间盘髓核摘除术,取出腰椎间盘髓核组织作为实验组,同时收集20例尸体L4/5椎间盘组织作为对照组。将取出标本固定后切片染色,观察正常和病变椎间盘组织学改变。采用免疫组化方法对标本内NPY染色阳性的神经纤维进行定性和定量分析。结果:突出椎间盘的髓核组织中,少数细胞位于丰富的基质中。细胞膜不清楚,可见胞质内圆形细胞核及胞质内空泡。髓核中透明软骨细胞核大而胞浆深染,多聚集成团。突出的髓核组织中NPY的表达高于正常髓核组织,有显著性差异(t=17.617,P<0.05)。结论:在突出腰椎间盘的髓核组织中有大量的NPY表达。这说明交感神经纤维已经侵入到中央的髓核组织,释放出NPY递质,可能是椎间盘突出患者早期下腰痛的机制之一。

唑来膦酸与帕米膦酸二钠治疗恶性肿瘤骨转移疼痛:疗效与安全性对比的Meta分析

背景:肿瘤骨转移是癌性疼痛的主要原因之一,第三代双磷酸盐的唑来磷酸与第二代的帕米膦酸二钠对治疗恶性肿瘤骨转移引起的疼痛有着给药时间短、给药剂量小、作用时间长的临床特点。目的:评价唑来膦酸和帕米膦酸二钠治疗恶性肿瘤骨转移引起的骨痛所产生的不良反应和安全疗效。方法:计算机检索CochraneLibrary,PubMed,EMBase,中国生物医学文献数据库(CBM)中文期刊全文数据库和中文科技期刊全文数据库等数据库,手工检索所有纳入文献的参考文献。纳入唑来膦酸与帕米磷酸钠治疗恶性肿瘤骨转移引起的骨痛的随机对照试验。评价纳入研究的方法学质量并进行资料提取后,采用RevMan5.0软件进行Meta分析。结果与结论:共10个随机对照试验2731例患者纳入研究,其中3个随机对照研究来自美国,另7个来自中国;且10篇RCT存在偏倚的可能性均为中等程度。唑来膦酸组与帕米膦酸二钠组治疗恶性肿瘤骨转移疼痛在完全缓解率,部分缓解率和总的有效率方面差异均无显著性意义(RR=1.59,95%CI:0.91～2.80;RR=0.95,95%CI:0.81～1.12;RR=1.04,95%CI:0.97～1.12)。在不良反应方面也无显著性意义,除了头痛外,其RR值和95%CI为(RR=0.82,95%CI:0.70～0.96)。综上,唑来膦酸有效率及不良反应发生率与帕米膦酸二钠相当。

信号转导通路在神经干细胞分化及其修复脊髓损伤过程中的作用

近年来神经干细胞的研究给中枢神经系统损伤患者带来了新的希望,但神经干细胞的分化诱导仍然是医学界的一大难题。文章试对神经干细胞分化发育过程的基因信号转导通路Notch信号途径、螺旋-环-螺旋转录因子家族信号途径及Wnt信号途径等作以综合分析。探讨这些基因信号转导通路对神经干细胞分化的作用及其修复脊髓损伤的前景。神经干细胞的分化发育受多种途径的共同作用,基因水平的调控,局部微环境以及各种生长因子的作用都对其分化发育有重要影响;其对脊髓损伤的修复具有重要作用。

大鼠脊髓损伤后MAP-2的表达及与运动功能恢复的相关性

目的研究大鼠脊髓损伤后MAP-2表达的变化及与运动功能恢复的相关性。方法健康成年Wistar大鼠36只,随机取6只作为正常对照组,余30只制作成脊髓打击伤动物模型,随机分为5组,每组6只。伤后1、3、7、14、28d取材,应用免疫组织化学方法观察MAP-2的表达,采用计算机图像分析系统,进行定量分析;用改良的Tarlov评分、斜板试验观察大鼠脊髓损伤后运动功能的恢复情况及MAP-2的表达和二者的相关程度。结果大鼠脊髓损伤后MAP-2的表达在损伤后1-14d呈进行性升高,并在损伤后14d达到高峰,损伤后28d较损伤后14d明显下降(P<0.01),但仍明显高于正常对照组(P<0.01),呈高水平表达;大鼠脊髓损伤后1-28d改良的Tarlov评分、斜板试验进行性升高,并在损伤后28d达到高峰,但仍明显低于正常对照组(P<0.01)。MAP-2的表达和改良的Tarlov评分、斜板试验在损伤后呈正相关(|r1|=0.81,P<0.01;|r2|=0.79,P<0.01)。结论大鼠脊髓损伤后MAP-2的表达和运动功能的恢复呈正相关,MAP-2很可能参与了大鼠脊髓损伤后运动功能的恢复。

神经肽Y/降钙素基因相关肽在腰椎间盘中的分布与共表达

背景:研究发现,神经肽Y与降钙素基因相关肽在交感神经节中有共存现象。目的:观察神经肽Y/降钙素基因相关肽在正常腰椎间盘的共分布及在突出腰椎间盘髓核组织中的共表达。方法:从10例尸体中收集完整的腰椎间盘,在另10例尸体中收集腰椎间盘髓核组织作为对照组。收集30例有症状的腰椎间盘突出症患者,其中L4/5或L5/S1需行腰椎间盘髓核摘除,取出髓核组织作为实验组。结果与结论:①正常椎间盘组织中神经肽Y/降钙素基因相关肽荧光双标染色阳性的神经纤维较多的分布于椎间盘纤维环外1/3,但在椎间盘内2/3及髓核中未见或少量分布。②髓核的共表达,神经肽Y/降钙素基因相关肽荧光双标染色神经纤维的阳性率实验组均高于对照组(P<0.05)。提示在正常腰椎间盘组织中神经肽Y/降钙素基因相关肽分布于纤维环外1/3部分,在纤维环内2/3部分及髓核组织未分布,但在突出椎间盘髓核组织中有大量的神经肽Y/降钙素基因相关肽共表达。

人骨肉瘤细胞株U2-OS中分离并鉴定肿瘤干细胞

目的:采用无血清培养法从人骨肉瘤细胞株U2-OS中分离肿瘤干细胞,检测肿瘤干细胞特异性标志物Stro-1的表达。方法:实验于2006-02/2007-02在兰州大学第二医院骨科研究所完成。①实验材料:人骨肉瘤细胞株U2-OS由中国科学院细胞库提供;DMEM/F12(1∶1)培养基(Gibco公司);胎牛血清(杭州四季青公司);PCR引物由上海生物工程公司合成。②实验方法:取原代培养的骨肉瘤细胞经胰蛋白酶消化制备单细胞悬液,用含表皮生长因子20μg/L、碱性成纤维细胞生长因子20μg/L、L-谷氨酰胺2mmol/L、胰岛素4U/L、青霉素100U/mL和链霉素100U/mL,pH7.2～7.5的无血清DMEM/F12培养基重悬细胞,常规培养5～7d,待培养基中悬浮的肉瘤细胞球体积较大后,用无血清培养基重新吹打成单细胞悬液,按1∶2或1∶3比例传代。③实验评估:从上述骨肉瘤细胞株中分离出的肿瘤细胞球,用MTT法检测其增殖能力,免疫磁珠分选Stro-1阳性细胞,反转录-聚合酶链法检测Stro-1阳性细胞中Stro-1 mRNA的表达,免疫细胞化学染色的方法检测分化后成骨细胞特异性抗原的表达。结果:①肿瘤干细胞增殖活性:增殖潜伏期约为24h,传代后1～2d即可见肿瘤干细胞形成,以后体积逐渐增大。第7天吸光度值最高,与0d吸光度值比较差异有显著性意义(P<0.01)。②免疫磁珠法分选Stro-1阳性细胞:分选的Stro-1+细胞接种于无血清培养基后,24～48h即可形成和原代肿瘤干细胞球形态一样的干细胞球,而Stro-1-细胞却不能形成肿瘤细胞球。③骨肉瘤干细胞中Stro-1mRNA的表达:Stro-1+细胞和Stro-1-细胞mRNA扩增产物的吸光度值二者比较差异有显著性意义(P<0.05)。④肿瘤干细胞分化:分化2周的肿瘤干细胞骨形态蛋白及Ⅰ型胶原酶均呈阳性表达。结论:骨肉瘤细胞株中存在骨肉瘤干细胞,并具有自我更新和多向分化的能力。

骨髓间充质干细胞复合脱钙骨基质修复兔膝关节全层软骨缺损的实验

目的 :研究骨髓间充质干细胞 (mesenchymalstemcells,MSCs)复合脱钙骨基质 (deminerizedbonematrix ,DBM)修复兔膝关节全层软骨缺损的疗效 .方法 :MSCs取自 4～ 6mo龄 2 .5～ 3.5kg的青紫兰兔 ,体外分离培养后种植于DBM支架上体外培养 ,再移植于兔膝关节全层软骨缺损模型处 .实验动物选用健康的青紫兰兔 36只 ,随机分成A ,B ,C 3个处理组各 1 2只 ,A处理组 (MSCs/DBM )双侧股骨髁间窝软骨缺损处植入DBM吸附体外分离培养的自体MSCs复合物 ;B处理组 (DBM )单纯植入DBM ;C处理组 (对照 )不作任何植入 .分别于术后 4 ,8和 1 2wk各处死 4只兔子 ,取材进行大体、组织学及免疫组化染色观察 ,根据关节软骨组织学计分标准进行评分 ,数据输入SPSS 1 0 .0软件统计分析 ,比较各组的评分差异是否具有统计学意义 .结果 :MSCs复合DBM所修复组织为透明软骨样修复 ;而单纯DBM移植组和对照组为纤维性修复 .对术后 1 2wk大体及组织学形态进行评分 .按完全随机设计进行方差分析和SNK q检验 ,结果显示 ,SMCs/DBM组明显优于DBM植入组和对照组 (P <0 .0 5 ) ;DBM组优于对照组 (P <0 .0 5 ) .结论 :运用软骨组织工程的原理 。

Notch信号转导通路在神经修复与再生中的激活效应

背景:近年来发现神经干细胞可以通过对等分裂方式分化为功能神经细胞,从而使损伤的神经细胞功能得到恢复,而Notch信号转导通路对神经细胞发育成一系列的神经元和胶质细胞具有允许和决定作用。目的:文章主要对Notch的结构、调节机制、影响因素及对神经细胞的作用与影响进行了综合分析。方法:应用计算机检索CNKI和PubMed数据库中有关信号途径与神将干细胞分化发育和脊髓损伤有关的文章,检索关键词"Notch,神经细胞,神经修复,神经再生"或"signal transduction,NSC,SCI,Notch"。初检得到430篇文献,最终纳入有代表性的31篇文章进行综述。结果与结论:文章主要讨论了Notch在神经修复与再生中的重要地位,它可以选择性激活体外的多能神经干细胞和体内胚胎前脑的放射状神经胶质,而且,在神经胶质发生过程中激活是星形神经胶质发育所必需的,并对其他功能细胞的发育、生长及凋亡起着重要的调控作用。

不同类型青少年脊柱侧弯支具治疗疗效观察

[目的]回顾性分析青少年脊柱侧弯支具治疗疗效,探讨不同类型青少年脊柱侧弯的支具选择及治疗措施。[方法]通过总结本科自2003年1月～2006年6月间接受支具治疗的青少年脊柱侧弯患者26例,男9例,女17例;年龄9～15岁(平均12.4岁),其中King-MoeⅠ型3例,Ⅱ型4例,Ⅲ型8例,Ⅳ型6例,Ⅴ型2例,半椎体畸形2例,胸段脊柱分节不良1例。分别采用胸腰骶支具外固定,支具固定前Cobb’s角平均29.9°,支具治疗后Cobb’s角平均20.8°。[结果]侧弯Cobb’s角平均矫正9.1°,矫正率35%。KingⅠ型、Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型支具治疗后有改善,Ⅴ型支具治疗后无改善,其中3例先天性侧弯支具治疗后加重。26例观察0.5～2.5年,Cobb’s角逐渐加大,失去支具治疗指征而采取手术者8例。[结论]支具治疗轻、中度I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型特发性脊柱侧弯效果良好;参与侧弯椎体数越多支具治疗疗效越好;柔韧度好者支具治疗疗效良好;复杂脊柱侧弯及先天性脊柱侧弯支具固定可以预防术前快速加重。