急性白血病患者中ICAM-1和VCAM-1的表达及意义

目的探讨细胞间黏附分子1(ICAM-1)和血管细胞间黏附分子1(VCAM-1)在急性白血病(AL)中的表达及临床意义。方法39例初诊AL患者,其中27例经治疗后达完全缓解(CR)。采用逆转录-PCR法检测AL骨髓单个核细胞ICAM-1和VCAM-1的 mRNA表达水平。对照组12例均为骨髓像正常的门诊患者。结果ICAM-1和VCAM-1水平在初诊AL者明显高于CR组及对照组(P<0.01),且CR组和对照组之间无显著差异(P>0.05);高白细胞(WBC>100×109/L)组和死亡组的ICAM-1和VCAM-1水平明显增高(P<0.05)。髓外浸润组仅ICAM-1高于非髓外浸润组(P<0.01);非淋巴细胞AL(ANLL)具有良好核型者ICAM-1水平低于其他患者(P<0.05)。结论AL表达ICAM-1和VCAM-1明显增高,其检测对疗效及预后判断有重要意义。

以免疫性血小板减少性紫癜为突出表现的淋巴结结核1例(附文献复习)

目的探讨结核病导致的免疫性血小板减少性紫癜(ITP)的临床特点。方法回顾性分析1例以广泛出血点和散发紫癜为表现的淋巴结结核患者临床资料并复习相关文献。结果患者的临床特征为男性,48岁,表现为皮肤广泛出血点和散发紫癜以及盗汗、体重下降,血常规显示血小板计数6×109/L,锁骨上淋巴结活检病理为淋巴结结核,临床诊断为淋巴结结核合并ITP。结论ITP可以作为结核病导致血液学异常的表现之一,在诊断ITP的时候应该考虑到结核病。糖皮质激素加抗结核治疗可使血小板短期内回复正常。

急性白血病血清可溶性细胞间黏附分子-1和血管细胞间黏附分子-1表达异常的初步研究

目的:观察急性白血病(AL)血清中可溶性细胞间黏附分子-(1sICAM-1)和可溶性血管细胞间黏附分子-(1sVCAM-1)的表达水平及其临床意义。方法:在60例初诊AL,以及治疗后达到完全缓解(CR)的16例患者中采集外周血分离出血清。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测sICAM-1和sVCAM-1的水平,并探讨其与临床特征之间的关系。结果:在初诊AL患者中sICAM-1和sVCAM-1的水平明显高于CR组和正常对照组,CR组sICAM-1与sVCAM-1水平和正常对照组无显著差异(P<0.01,P<0.01)。在初诊AL中,能够达到CR的患者其sICAM-1与sVCAM-1水平要低于未达到CR患者(P<0.05,P<0.05)。在高白细胞白血病(WBC>100×109/L)中,sICAM-1和sVCAM-1的水平和其他非高白细胞白血病无差异(P=0.059,P=0.146)。具有良好核型组和其对应组之间sICAM-1和sVCAM-1无统计学差异(P=0.262,P=0.558)。sICAM-1和sVCAM-1不同水平的患者生存期无差异。结论:AL血清sICAM-1和sVCAM-1表达水平异常且影响疗效,但无预后意义。

蛋白酶体抑制剂硼替佐米对K562细胞株NF-κB活性及ICAM-1表达的影响

为了研究蛋白酶体抑制剂硼替佐米对急性白血病K562细胞株核因子κB(NF-κB)及细胞间黏附分子(ICAM-1)表达的影响,用含10%小牛血清的RPMI1640培养液体外培养K562细胞,用0、10、20、30、50、100nmol/L的硼替佐米干预K562细胞6小时后收集细胞。用SP免疫组织化学法测各组细胞NF-κB活性,并以反转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析K562细胞ICAM-1表达的变化。结果表明:各药物处理组K562细胞NF-κB的活性和ICAM-1的表达均明显受抑制,与对照组相比,存在显著性差异(p<0.05),且各组NF-κB活性与ICAM-1表达成正相关。结论:蛋白酶体抑制剂硼替佐米可能通过抑制NF-κB活性下调细胞间黏附分子ICAM-1的表达,这为白血病靶向治疗提供了一个新的途径。

三氧化二砷、地塞米松和沙利度胺对骨髓瘤细胞U266凋亡及胞浆内Ca^(2+)浓度的影响

为了探讨三氧化二砷(As2O3)、地塞米松(dexamethasone,Dex)和沙利度胺(thalidomide,Thal)诱导骨髓瘤细胞株U266细胞凋亡时对胞浆内Ca2+浓度([Ca2+]i)的影响,用含15%FBS的RPMI1640培养液培养U266细胞并按5×105/(ml.well)接种于24孔板中,分别用不同浓度的As2O3、Dex和Thal干预8小时后收集U266细胞,用荧光显微镜观察细胞凋亡,以AnnexinV-FITC/PI双参数流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡,负载Fluo-3/AM荧光素FCM检测[Ca2+]i。结果显示:①随As2O3、Dex和Thal浓度增加,荧光显微镜下带有荧光信号的凋亡细胞逐渐增多;②As2O3、Dex和Thal作用U266细胞后FCM测得凋亡细胞比例从对照组的0.56%分别升至31.54%、28.35%、21.97%;③As2O3、Dex诱导U266细胞凋亡时[Ca2+]i升高,升高的程度与药物浓度成正比关系;④Thal诱导细胞凋亡时未观察到[Ca2+]i有明显改变。结论:[Ca2+]i的升高是As2O3、Dex诱导U266细胞凋亡的机制之一,Thal诱导U266细胞凋亡与[Ca2+]i的变化无明显关系。

白血病c-FLIP mRNA表达的初步研究

目的:探讨c-FLIP mRNA在白血病中的表达及其意义。方法:应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测37例白血病骨髓单个核细胞c-FLIP mRNA的表达。包括急性白血病(AL)27例,其中初治21例及复发和完全缓解(CR)后AL各3例、慢性粒细胞性白血病(CML)5例、慢性中性粒细胞性白血病(CNL)1例和慢性淋巴细胞性白血病(CLL)4例。结果:在初治和复发AL、初治CML、CNL、CLL中c-FLIP mRNA均呈异常增高表达,初治AL中c-FLIP mRNA的表达与复发AL比较差异无统计学意义(P>0.05),其FAB各亚型之间的表达差异亦无统计学意义(P>0.05)。初治AL与CLLc-FLIP mRNA的表达显著高于初治CML(P<0.001),但初治AL与初治CLL比较差异无统计学意义(P>0.05)。对照组和CR后AL均为阴性表达。c-FLIP mRNA的表达与初治AL患者年龄、性别、初诊白细胞数、LDH以及核型、免疫表型无关。初治未达CR的AL患者其c-FLIP mRNA表达高于CR者,但并无统计学意义(P>0.05)。结论:白血病c-FLIP mRNA的表达异常增高。c-FLIP mRNA能反映白血病细胞的凋亡抑制情况,并与白血病的类型、疾病状态、临床疗效和预后密切相关。

全国04方案治疗儿童急性淋巴细胞白血病回顾性研究

目的:分析140例儿童急性淋巴细胞白血病临床特点及预后,评估2004年全国儿童急性淋巴细胞白血病诊疗建议(04方案)的疗效。方法:回顾性分析2006年6月～2009年12月初诊儿童急性淋巴细胞白血病140例诊断、危险度分组及疗效,采用Kaplan-Meier法评估患儿5年无事生存率(event-free survival,EFS)。结果:本组140例总完全缓解率95.7%。5年总体EFS为72.9%;其中低危组为85.9%,中危组为78.3%,高危组为50.0%。全组复发29例(20.5%),其中骨髓复发26例(18.5%),中枢神经系统复发2例(1.4%),睾丸白血病1例(0.7%)。结论:全国04方案治疗儿童急性淋巴细胞白血病可以取得较好的疗效。

蛋白酶体抑制剂PS-341对多发性骨髓瘤间充质干细胞IL-1β表达的影响

目的初步探讨蛋白酶体抑制剂PS341在治疗多发性骨髓瘤(MM)时对间充质干细胞(MSC)细胞因子白介素(IL1β)分泌的影响。方法10%胎牛血清(FBS)的1640培养液培养MSC,细胞数达0.5～1.0×106时以终浓度50nmol/L的PS341作用4h,RTPCR检测细胞因子IL1β表达。结果PS341作用后MSC分泌的IL1β表达有显著下降,完全缓解及经PS341治疗后患者的IL1β未见表达;与难治复发组比较,PS341对完全缓解患者MSCIL1β的表达抑制更明显。结论PS341抑制MM患者MSC细胞因子IL1β的表达。

靶向干预多发性骨髓瘤骨髓间充质干细胞的实验研究

目的:间充质干细胞(MSCs)对维持多发性骨髓瘤(MM)骨髓微环境的稳定有重要作用,靶向干预MSCs有望成为MM治疗新的途径,本实验通过分析沙利度胺(Thalidomide,Thal)和地塞米松(dexamethasone,Dex)对MM患者MSCs凋亡及其IL-6、IL-1β、SCF表达的影响,探讨上述药物可能新的作用机制和MSCs作为治疗靶点的可行性。方法:含10%FBS的1640培养液培养MSCs,以终浓度分别为0μmol/L、1.0μmol/L、3.0μmol/L、5.0μmol/L、7.0μmol/L的Thal,0μmol/L、0.1μmol/L、1.0μmol/L、5.0μmol/L、10.0μmol/L的Dex作用MSCs8h,倒置光学显微镜和AnnexinV/FITC-PI双染法荧光显微镜下观察细胞凋亡,RT-PCR检测分析IL-6、IL-1β和SCF细胞因子表达的变化。结果:Thal、Dex均以浓度依赖方式诱导MM患者MSCs凋亡;Thal下调MSCs三种细胞因子的表达(P<0.05),对IL-6的抑制随药物浓度增加而加重,对IL-1β和SCF表达的下调与药物浓度无明显关系(P>0.05);Dex明显抑制MSCsIL-6、IL-1β、SCF的表达(P<0.05),对3种细胞因子的抑制呈药物浓度依赖性。结论:Thal、Dex能诱导MM患者MSCs的凋亡,抑制其IL-6、IL-1β、SCF的表达,是有效治疗MM的靶点和机制之一。

蛋白酶体抑制剂PS-341诱导U266细胞凋亡与胞浆内[Ca^(2+)]变化的关系

目的探讨蛋白酶体抑制剂PS-341(Bortezomib)诱导骨髓瘤细胞株U266细胞凋亡时对其胞浆内[Ca2+]([Ca2+]i)的影响。方法以浓度梯度的PS-341干预U266细胞4h后收集,荧光显微镜观察细胞凋亡,AnnexinV-FITC/PI双参数流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡,Fluo-3/AM荧光素标记FCM检测[Ca2+]i。结果(1)PS-341作用U266细胞4h后荧光显微镜观察到凋亡细胞数随浓度增加而增多;(2)FCM检测凋亡细胞的比例分别为0.56%、7.71%、19.84%、31.10%、40.72%,与PS-341浓度成正比;(3)PS-341作用后U266细胞[Ca2+]i均值分别为403.65nmol/L、418.20nmol/L、378.65nmol/L、356.36nmol/L、349.21nmol/L;(4)PS-341诱导U266细胞凋亡时伴随[Ca2+]i的改变,浓度>50nmol/L时诱导的细胞凋亡伴随[Ca2+]i下降。结论蛋白酶体抑制剂PS-341诱导骨髓瘤细胞凋亡呈浓度依赖性;PS-341浓度>50nmol/L时下调[Ca2+]i,并由此发挥抗骨髓瘤细胞作用。

唐氏综合征合并儿童血液病的临床分析

目的 :了解唐氏综合征(Down’s syndrome,DS)患儿发生血液系统疾病的临床特点,提高DS患儿合并血液病的诊断与治疗水平。方法:回顾性分析4例DS合并恶性血液病患儿资料并复习文献,了解DS患儿合并恶性血液病的临床特点及治疗反应。结果:4例合并血液病的DS患儿中,1例为急性淋巴细胞白血病,1例为急性巨核细胞白血病,2例为巨核细胞系的病态造血。急性淋巴细胞白血病患儿表现出了对甲氨蝶呤的明显毒性,而急性巨核细胞白血病显示了对化疗的良好反应。结论:DS患儿特殊基因背景决定了其生后特征性血液病表现及治疗反应。

17例伴有肺部改变的朗格汉斯细胞组织细胞增生症的临床观察

目的探讨儿童伴肺部改变的朗格汉斯细胞组织细胞增生症(PLCH)的临床表现、CT特征性表现、诊断及治疗特点,并分析其与预后的关系,为PLCH患者临床方案的制定提供依据。方法回顾性分析本院2008年1月至2014年1月经病理确诊的17例PLCH患儿的临床特征、影像学资料及接受Ⅲ型化疗方案(诱导阶段6周+维持阶段52周)化疗后的疗效和预后。结果 17例PLCH患儿起病时伴有肺部弥漫性改变为主的多脏器损害,在疾病发展过程中,胸部CT表现出特征性变化。17例均接受Ⅲ型方案化疗,其中8例完全缓解,预后良好;4例化疗后复发,其中1例预后良好,3例死亡;3例化疗中疾病进展放弃治疗,死亡;1例化疗中疾病进展再诱导化疗,目前持续化疗中,存活;1例化疗维持治疗中,目前持续随访。结论儿童伴肺部改变的LCH多为婴幼儿起病,伴多脏器损害,早期高强度化疗可改善预后,但部分病例肺部进展明显,预后不良。

桥本氏甲状腺炎合并甲状腺黏膜相关淋巴瘤(附1例报道及相关文献复习)

目的:探讨桥本氏甲状腺炎合并甲状腺黏膜相关淋巴瘤(mucosa-associatedlymphoidtissuelymphoma,MALT-L)的病因发病机制、病理学、生物学及临床特点。方法:报道1例桥本氏甲状腺炎合并甲状腺MALT-L并文献复习。结果:桥本氏甲状腺炎合并甲状腺MALT-L的临床发病率低,易被忽视,导致延误诊断和治疗,随病程发展,可进一步向中高度恶性淋巴瘤演变。结论:桥本氏甲状腺炎合并甲状腺MALT-L是一组有独特临床、病理和生物学特点的疾病,深入认识该组疾病有助于提高该病的临床诊疗。

高效液相色谱法测定人血浆中伏立康唑的浓度

目的:建立检测血浆中伏立康唑浓度的高效液相色谱(HPLC)法。方法:采用Kromasil 100-5 C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.02 mol/L四丁基硫酸氢铵溶液(50∶50),流速1.0 mL/min,柱温30℃。结果:伏立康唑在0.1~8.0μg/mL血药浓度范围内与峰面积线性关系良好,回归方程为R=1.077 9C-0.040 7,r^2=0.999 5。日内和日间精密度的RSD均不超过10%,定量限为0.066μg/mL。结论:该方法完全满足临床实验的需要和相关指导原则的要求,可为临床伏立康唑血浆浓度检测和药动学研究提供参考。

蛋白酶体抑制剂PS-341对U266细胞凋亡和多种细胞因子表达影响的研究

目的：探讨蛋白酶体抑制剂PS-341（bortezomib）诱导多发性骨髓瘤细胞株U266细胞凋亡时对IL-6、IL-1β和SCF细胞因子表达的影响。方法：用含15％FBS的RPM11640培养液体外培养U266细胞，分别用0、50、100、150、200nmol／L的PS-341干预U266细胞4h后收集，荧光显微镜观察细胞凋亡，Annexin V-FITC／PI双染法流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡率的变化，反转录聚合酶链反应（RT-PCR）分析U266细胞IL-6、IL-1β和SCF三种细胞因子表达的改变。结果：荧光显微镜和FCM发现PS-341以浓度依赖方式诱导U266细胞凋亡；PS-341明显抑制U266细胞IL-6、IL-1β和SCF的表达（P〈0．05）；对IL-6和SCF的抑制与PS-341浓度成正相关，对IL-1β的抑制在PS341浓度为0～150nmol／L时成正比关系，当浓度大于150nmol／L时差异无显著性。结论：蛋白酶体抑制剂PS-341诱导U266细胞凋亡时明显抑制其IL6、IL-1β和SCF的表达，是有效治疗MM的机制之一。

硼替佐米对K562细胞株粘附分子ICAM-1表达的影响

目的:探讨蛋白酶体抑制剂硼替佐米(万珂,Valcade)对白血病K562细胞株细胞问粘附分子(ICAM-1)表达的影响。方法:用含10%FBS的RPMI1640培养液体外培养K562细胞,分别用0、10、20、30、50、100 nmol/L的硼替佐米干预K562细胞6h后收集,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析K562细胞ICAM-1表达的变化。并用20 nmol/L浓度硼替佐米作用K562细胞株不同时间(0,6,12,24,48h)分析K562细胞ICAM-1表达的变化。结果:硼替佐米明显抑制K562细胞ICAM-1的表达(P<0.05),在硼替佐米浓度为0～20 nmol/L时成正比关系,当浓度>20 nmol/L各组差异无显著性。以20 nmol/L浓度作用K562细胞株不同时间后,ICAM-1的表达较作用前明显下降.并且这种效应持续存在。结论:K562细胞株ICAM-1基因表达异常增高,硼替佐米可抑制其表达量。

继发于重症肌无力的免疫性血小板减少性紫癜1例报告并文献复习

目的:探讨继发于重症肌无力的免疫性血小板减少性紫癜(ITP)的起病特点及临床表现。方法:对1例以重症肌无力为首发表现的ITP患者的资料进行分析,并复习国内外文献。结果:患者先出现重症肌无力,随后发生ITP,本患者有球后视神经炎病史。结论:免疫系统潜在缺陷的患者易发生自身免疫性疾病,发生重症肌无力的患者若出现血小板减少或出血症状时要警惕免疫性血小板减少性紫癜的可能。

130例多发性骨髓瘤临床特点与细胞形态学分析

目的:探讨多发性骨髓瘤(MM)的主要临床特点以及骨髓细胞形态学在MM诊断中的作用。方法:回顾分析130例MM患者临床特点并分析其骨髓及外周血涂片,观察骨髓瘤细胞的比例和形态特征。结果:130例MM患者临床表现中主要有贫血99例(76.2%)、骨痛81例(62.3%)、骨质破坏83例(63.8%)、肾功能损害70例(53.8%)、出血6例(4.6%)等。骨髓涂片中骨髓瘤细胞比例≥10%的126例(96.9%),骨髓瘤细胞比例在6.0%～10.0%的3例(2.3%),骨髓瘤细胞比例不增高的1例(0.7%)。结论:MM的诊断中,骨髓细胞形态学是非常重要的方法,但同时需结合临床表现及影像学、生化等方法。

伴有恶性成分的儿童副神经节瘤1例报告并文献复习

目的探讨儿童肾上腺外嗜铬细胞瘤或副神经节瘤(PGL)的诊断、治疗及遗传特征。方法回顾分析1例经临床和基因分析明确诊断的PGL患儿的临床资料,并复习国内外肾上腺外嗜铬细胞瘤病例。结果男性患儿,10岁9个月,因腹部包块入院,血压正常。尿儿茶酚胺代谢产物正常,3-甲基-4羟苦杏仁酸(VMA)和高香草酸(HVA)未见升高。术后病理提示肿瘤伴有恶性成分;颈、胸、腹CT平扫加增强未见异常,头颅加全脊柱核磁平扫加增强未见异常;家系基因检测结果提示SBHB基因有变异。确诊为良性无功能型PGL。仅手术治疗,未行化疗,仍在门诊随访。结论 PGL诊断依赖于病理结果,其分型需要根据血尿儿茶酚胺代谢产物、影像学表现、基因测序和病理分析,是否化疗取决于有无转移及复发。