全国名中医王辉武教授治疗郁病经验研究

心身疾病在中医属于郁病,其发病率逐年上升,因其易复发、难治愈的特点成为了医学界面临的难题,严重影响患者的生活质量。针对临床中“病郁交杂”但“重病轻郁”的现状,首届全国名中医王辉武教授在深入研究《黄帝内经》核心理念的基础上,创新性地提出了“郁乃心病”“久病皆郁”的学术思想,认为“郁”不应仅局限于肝,而是心神之病的实质表现,且久病之人往往生“郁”;治郁必须通畅心神,总结出以“三黄一桂,通心之最”为代表的用药经验,结合超药物疗法,为中医临床诊疗疑难久病提供了新的指导思想和治疗策略。

基于整合药理学和实验验证探讨健脾除痰解毒方干预肺癌的作用机制

基于整合药理学和实验验证探讨健脾除痰解毒方(Jianpi Chutan Jiedu Decoction,JCJD)干预肺癌的作用机制。采用中医药整合药理学研究平台(Integrative Pharmacology-based Research Platform of Traditional Chinese Medicine,TCMIP)V2.0,检索并获取健脾除痰解毒方靶标及功能信息,以及肺癌疾病靶标及功能信息,借助中医关联网络挖掘平台构建“疾病-方剂”关联网络,并通过网络拓扑特征计算、自定义多维关联网络可视化(方剂-中药材-核心靶标-通路-疾病)以及基因本体(GO)功能和依托Reactome数据库的Pathway信息进行富集分析,发现健脾除痰解毒方干预肺癌的关键网络靶标及其作用机制。最后通过动物实验进一步验证整合药理学结果。结果共获得健脾除痰解毒方干预肺癌的核心靶标53个;GO富集分析得到生物过程有20种条目,细胞组分有11种条目,分子功能有20种条目;Reactome Pathway富集分析得到11个条目,主要涉及呼吸电子传递、TP53调节代谢基因、细胞内受体的SUMO化、白细胞介素(IL)-4和IL-13通路等信号通路。动物实验结果显示与模型组比较,联合组肿瘤组织中乳酸含量明显下降(P<0.05),联合组可明显上调肿瘤组织中磷酸酯酶与张力蛋白同源物(PTEN)蛋白平均光密度值(P<0.05),降低丙酮酸激酶M2(PKM2)和己糖激酶2(HK2)蛋白平均光密度值(P<0.05);与模型组比较,联合组可明显上调肿瘤组织中肿瘤抑制蛋白(P53)、PTEN mRNA及蛋白表达(P<0.01,P<0.05),降低肿瘤组织中TP53诱导的糖酵解与凋亡调控因子(TIGAR)、葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)、PKM2、HK2 mRNA及蛋白表达(P<0.01)。综上,健脾除痰解毒方通过TP53调节代谢基因来下调葡萄糖代谢,从而抑制肺癌增殖。

基于薛立斋“滋化源”思想探讨慢性阻塞性肺疾病稳定期的治疗

慢阻肺是以慢性咳嗽、咯痰、呼吸困难、气短乏力等为临床症状的呼吸系统常见疾病。慢阻肺主要分为急性加重期和稳定期,《指南》表明[1]慢阻肺稳定期管理目标主要是减轻当前症状和降低未来风险,但由于慢阻肺病情迁延反复,患者运动耐力及生存质量进行性下降,目前暂无有效药物可改善患者肺功能的逐年下降。多数慢阻肺稳定期患者症状轻微,不易引起重视,往往错过最佳的诊疗时机,最终出现一系列并发症甚至危及生命,近年来诸多临床研究表明中医治疗慢阻肺疗效显著.

间接竞争酶联免疫分析用于薏苡仁中杂色曲霉毒素的快速检测研究

杂色曲霉毒素(Sterigmatocystin,ST)是一种主要由杂色曲霉和构巢曲霉等真菌产生的次级代谢产物,其结构与黄曲霉毒素相似,具有潜在的致癌性和毒性,严重危害人类生命健康。研究发现部分中药易ST污染,但目前针对中药中ST的快速检测研究相对较少。通过系统优化样品前处理条件及影响检测灵敏度的关键参数,建立了简便的间接竞争酶联免疫分析法(ic-ELISA),用于消费量较大的药食同源薏苡仁中ST的快速筛查。所建立ic-ELISA的半数抑制浓度(Half-Maximal Inhibitory Concentration,IC 50)为0.11 ng/mL,线性范围为6.25~100μg/kg,加标回收率在79.27%~99.95%之间,相对标准偏差(RSD)<12%。此外,该方法可抗基质干扰,只需利用溶剂标准曲线即可进行定量。用所建立的ic-ELISA对96批薏苡仁样品进行了检测,并用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)对阳性样品进行了确证。该ic-ELISA快速、准确、经济,可作为薏苡仁中ST高通量快筛的技术手段,同时为其他中药中ST的快速检测提供参考。

右心功能障碍对非小细胞肺癌肺切除术后患者预后的影响

目的探讨通过右心功能预测非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)肺切除术后患者预后的意义。方法采用回顾性分析,选取2020年8月至2023年8月于重庆市中医院就诊的285例NSCLC肺切除术后患者作为研究对象。使用经胸超声心动图衍生的三尖瓣环收缩期位移(tricuspid annulaRplane systolic excursion,TAPSE)和肺动脉收缩压(pulmonary artery systolic pressure,PASP)之比无创性评估右心室-肺动脉(right ventricular-pulmonary artery,RV-PA)耦合,利用RV-PA耦合评估右心功能。根据样条曲线分析得出的RV-PA解耦合截断值将患者分为两组,TAPSE/PASP≥0.66 mm/mmHg的患者为RV-PA耦合组(n=138),TAPSE/PASP<0.66 mm/mmHg的患者为RV-PA解耦合组(n=147)。采用Kaplan-Meier曲线分析两组患者的累积生存率,使用Cox回归分析与全因死亡率独立相关的危险因素。结果RV-PA解耦合组患者累积生存率显著降低(P<0.001)。临床分期Ⅳ期、三尖瓣反流峰值速度和RV-PA解耦合均与全因死亡率独立相关(P<0.005)。结论早期评估NSCLC患者肺切除术后的右心功能,对高危患者进行纠正性治疗进而改善患者预后具有重要意义。

脂质纳米粒递送IL-35 mRNA对脂多糖诱导小鼠急性肺损伤的保护作用

目的 探讨脂质纳米粒(LNP)递送白细胞介素35(IL-35)mRNA(IL-35 mRNA-LNP)对脂多糖(LPS)诱导小鼠急性肺损伤(ALI)的保护作用。方法 将56只小鼠随机分成7组,每组8只,分别为正常对照组、IL-35 mRNA-LNP(250μg·kg^(-1))组、LPS组、LPS+IL-35 mRNA-LNP(50,125和250μg·kg^(-1))组及LPS+地塞米松(DXM)组。IL-35 m RNA-LNP(250μg·kg^(-1))组、LPS+IL-35 m RNA-LNP(50,125和250μg·kg^(-1))组小鼠iv给予相应剂量的LNP包载IL-35 mRNA复合物,LPS+DXM组小鼠iv给予DXM(5 mg·kg^(-1)),随后除正常对照组和IL-35 mRNA-LNP(250μg·kg^(-1))组外,其他组均采用气管滴注LPS(5 mg·kg^(-1))建立ALI模型,造模24 h后处死小鼠,记录肺系数和肺组织湿/干重比(W/D);乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测肺组织LDH活性;实时荧光定量PCR检测肺组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-6和IL-1β mRNA水平;ELISA法检测肺组织IL-35,TNF-α,IL-6和IL-1β蛋白水平;苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织病理变化;免疫荧光法检测肺组织淋巴细胞抗原6G(Ly6G)表达水平。结果 与正常对照组、LPS组和LPS+DXM组相比,LPS+IL-35mRNA-LNP(50,125和250μg·kg^(-1))组肺组织均显著表达IL-35蛋白(P<0.01)。与正常对照组相比,LPS组肺系数、肺组织W/D、LDH活性及TNF-α,IL-6和IL-1β mRNA水平以及蛋白水平均显著升高(P<0.01),出现肺泡出血、肺泡壁增厚和中性粒细胞浸润。与LPS组相比,LPS+IL-35 m RNA-LNP(50,125和250μg·kg^(-1))组肺系数、肺组织W/D、LDH活性及TNF-α,IL-6和IL-1β mRNA水平以及蛋白水平均显著降低(P<0.01),同时肺泡出血、肺泡壁增厚和中性粒细胞浸润明显改善。结论 IL-35 mRNA-LNP可在小鼠肺组织中表达IL-35蛋白,并通过抑制促炎因子表达,有效改善LPS诱导的小鼠ALI。

26种活血化瘀中药对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响

目的:采用鸡胚绒毛尿囊膜(ChickChorioallantoicMembrane,CAM)法从26种活血化瘀中药中初筛血管生成抑制剂。方法:试验组分别为26种活血化瘀中药,所用片剂、胶囊剂、丸剂、散剂溶解成饱和溶液,汤剂制成含生药2g/ml的水煎醇沉液,注射液、口服液、膏剂用原药物浓度。种鸡蛋孵化7天,建立CAM模型,按20μl胚加药液于明胶海绵载体上,每日1次,连续3天。孵化第10天,计数CAM载体周围5mm的血管分支点。结果:15种活血化瘀中药CAM的血管分支点数量降低(P<0.05)。结论:榄香烯乳剂、莪术油葡萄糖注射液、磷酸川芎嗪注射液、注射用阿魏酸钠、雷公藤多苷片、火把花根片、祖师麻片、复方斑蝥胶囊、大黄广廿灬虫虫丸、大活络丸、复方丹参滴丸、七厘散、活血通脉片、三棱丸及桃红四物汤Ⅱ号具有抑制CAM血管生成的作用。

桃红四物汤及其拆方对血管生成的影响

目的观察桃红四物汤及其不同药物组合对血管生成的作用。方法种鸡蛋孵化7d建立鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)模型,加药于两条主干血管之间的相对无血管区。孵化第10d检测CAM载体周围5mm的血管数目(N)、血管面积(A)和血管面积相对比值(AA)。结果桃红四物汤Ⅰ号、Ⅱ号、四物汤Ⅱ号、桃仁红花、桃仁、当归、川芎、赤芍组CAM的细小血管N、A及AA显著减少,而四物汤Ⅰ号、熟地白芍、熟地组CAM的细小血管N、A及AA均显著增加。结论桃红四物汤及其拆方中活血组别,即桃红四物汤Ⅰ号、Ⅱ号、四物汤Ⅱ号、桃仁红花、桃仁、当归、川芎、赤芍组具有抗CAM血管生成作用;而补血组别,即四物汤Ⅰ号、熟地白芍、熟地组具有促CAM血管生成作用。

益气除痰方对肺癌系列基质金属蛋白酶表达的影响

目的研究益气除痰方对人肺腺癌A549细胞及LEWIS肺癌小鼠肿瘤组织基质金属蛋白酶MMP1、MMP2、MMP9、MMP14等促肿瘤转移因子表达的影响。方法 :培养A549细胞,20%益气除痰方含药血清干预,划痕实验分析细胞侵袭、转移能力的改变,RT-PCR检测其对A549肺癌细胞MMP1、MMP2、MMP9、MMP14 mRNA基因表达的影响。建立C57BL/6J小鼠Lewis肺癌模型,治疗组每日予益气除痰方3.0 g.kg-1处理,灌胃21 d后,处死,检测肿瘤体积、重量、肺转移灶,并用免疫组化法比较各组肿瘤组织MMP2、MMP14的表达。结果 :20%益气除痰方含药血清可抑制A549细胞的侵袭和转移能力,并能降低MMP2、MMP14转录水平基因的表达,与空白组比较差异有统计学意义(P<0.01),MMP1、MMP9 mRNA的表达差异无统计学意义(P>0.05);益气除痰方3.0 g.kg-1组LEWIS肺癌小鼠肿瘤体积、重量、肺转移灶数明显降低,肿瘤组织MMP2、MMP14的表达降低,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论 :益气除痰方能抑制肺腺癌A549细胞的侵袭和转移,降低MMP2、MMP14 mRNA转录水平的表达;能抑制LEWIS肺癌小鼠肿瘤肺转移,降低其肿瘤组织MMP2、MMP14的表达,抗转移可能是益气除痰方治疗肺癌的作用机制之一。

牛膝的rDNAITS序列分析

目的 探讨不同产地牛膝的 ITS的序列变异 ,为鉴别牛膝提供 DNA分子标记。方法 利用特异性 PCR技术对牛膝的 r DNA ITS区碱基序列进行测定 ,报道了牛膝的 r DNA ITS区的碱基序列。结果 得到核糖体 DNA中的 ITS及 5 .8S r DNA完全序列 ,18S和 2 6 S r DNA部分序列 ,共约 6 5 0 bp。牛膝与川牛膝及土牛膝碱基序列有明显差异 ,不同产地、不同栽培品种牛膝碱基序列无差异。结论 此法可用于牛膝种间及真伪品鉴别。

AB-8大孔吸附树脂纯化复方脑脉通有效部位的工艺研究

目的:确定大孔吸附树脂纯化脑脉通(大黄、川芎、葛根等)有效部位的最佳工艺。方法:采用AB-8型树脂纯化脑脉通,以分光光度法测定洗脱物中总蒽醌、总皂苷和总生物碱的含量,HPLC法测定葛根素的含量,并以此为指标综合评价,优化脑脉通纯化工艺条件。结果:脑脉通药液的上样浓度为120 mg/mL(生药量),树脂柱的径高比为1∶10,最大的吸附量与树脂体积比为1∶6,水洗脱体积为2B倍,洗脱剂为50%乙醇,用量为8B倍树脂体积,洗脱流速2 mL/min。结论:有效部位纯度达63%,AB-8大孔吸附树脂对脑脉通的纯化工艺可行。

脑脉通不同提取工艺中蒽醌类化学成分变化的研究

目的:比较脑脉通(大黄、川芎、人参、葛根等)不同提取工艺对蒽醌类化合物的含量变化。方法:采用反相高效液相色谱法,选用Hypersil ODS2 C18柱,流动相以甲醇-0.1磷酸水(75∶25)在254nm波长测定大黄5苷元。结果:乙醇提取工艺中蒽醌类化合物的提取率优于水煎煮提取,合煎液中蒽醌类化合物的提取率高于分煎液。结论:中药复方提取过程中存在动态变化,应根据化学成分不同的理化性质对样品进行适宜的处理。

GAP基地金银花产地加工方法的研究

目的优选出金银花最佳采收阶段和产地加工方法。方法用高效液相色谱(HPLC)法测定不同采收期和不同加工方法的金银花中绿原酸的动态变化。结果确定金银花的最佳采收期为三青、二白和大白阶段,产地加工可采用直接晒干和烘干等方法。结论此研究为道地药材封丘金银花的质量控制提供参考。

北京、广州中医名家论治肺癌的专家共识及南北用药特色

收集中国中医科学院广安门医院、广州中医药大学第一附属医院、广东省中医院8位中医肿瘤专家门诊治疗肺癌患者处方800张,从抗肿瘤中药的用药频次、配伍规律及用药归类等角度探析中医药治疗肺癌的专家共识和南北用药特点。结果显示,南北方专家在肺癌治疗中共识度最大的3味中药为薏苡仁、茯苓、半夏,表明健脾化痰法得到一致公认,为肺癌的基本治法。其次,养阴润肺方面也有一定共识,如白芍、太子参、麦冬等药频次较高。第三,清热解毒抗癌方面体现了一致性,南北共同用药有土茯苓、白花蛇舌草、半枝莲。南北相异及各具特色之处体现为,南方专家更重视热毒和瘀血,而北方用药更注重气阴双补。

桃红四物汤Ⅱ号抑制小鼠B16黑色素瘤生长及VEGF,KDR/FLK-1表达

目的:观察桃红四物汤Ⅱ号对小鼠B16黑色素瘤生长、血管内皮生长因子(VEGF)和血管内皮生长因子受体-2(KDR/FLK-1)表达及肿瘤微血管密度(MVD)值的影响。方法:采用C57BL/6J小鼠皮下接种B16黑色素瘤细胞建立模型,分别给予2.5,5,10 g.kg-1桃红四物汤Ⅱ号水煎剂、环磷酰胺0.05 g.kg-1及联合用药桃红四物汤Ⅱ号10 g.kg-1+环磷酰胺0.025 mg.kg-1,检测各组肿瘤体积、重量、VEGF和KDR/FLK-1表达及肿瘤MVD值。结果:桃红四物汤Ⅱ号5,10 g.kg-1及联合用药组肿瘤体积、重量、VEGF和KDR/FLK-1表达及肿瘤MVD值均较生理盐水组明显降低(P<0.01)。结论:桃红四物汤Ⅱ号能抑制小鼠B16黑色素瘤的生长,其抗肿瘤机制可能与抗血管生成作用有关。

胶束电动毛细管色谱法分离分析人参中人参皂苷Rg_1和人参皂苷Re

目的:测定人参中的人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的含量。方法:采用胶束电动毛细管色谱法分离,紫外检测器200 nm下检测。结果:通过对缓冲溶液的优化,得到最佳分离条件为20 mmol/L SDS、30 mmol/LNa2B4O7、60 mmol/L胆酸钠溶液,在此条件下,人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的分离度可达3.4。结论:该方法的重现性、精密度良好,满足分析的要求。

滋肾活血凉斑方加火把花根片对活动期系统性红斑狼疮患者生化指标的影响

目的:观察具有滋补肾阴、凉血活血、清热解毒、通络退斑功效的滋肾活血凉斑方加具有祛风除湿、舒筋活络、清热解毒功效的火把花根片对活动期系统性红斑狼疮患者疾病活动情况、血液流变学指标及阴虚热毒血瘀证候的影响。方法:①选择1998-01/2005-06重庆医科大学附属一院、重庆医科大学中医药学院附院中西医结合科诊治的中医辨证为“肾阴虚兼热毒血瘀”证的活动期系统性红斑狼疮门诊患者60例。男3例,女57例。患者均知情同意。患者被随机分为2组:治疗组(40例,男2例,女38例)和对照组(20例,男1例,女19例)。②治疗组:予滋肾活血凉斑方加火把花根片治疗(滋肾活血凉斑方基本组成:女贞子30g,旱莲草30g,知母15g,蚕砂15g,千里光30g,白花蛇舌草30g,银花藤30g,丹参30g,益母草15g,僵蚕15g等;火把花根片由重庆市中药研究院制药厂生产,国药准字Z20027411,0.18g/片)。滋肾活血凉斑方水煎服,1剂/d,分3次服用;火把花根片0.9g,3次/d,2个月后逐渐减量。共干预6个月。对照组:采用强的松标准疗程治疗。③治疗前及治疗6个月后分别对各组进行疾病活动评分(抽搐8分、精神异常8分、脑器质性症状8分、视力下降8分、颅神经受累8分、狼疮头痛8分、脑血管意外8分、血管炎8分、关节炎4分、肌炎4分、管型尿4分、血尿4分、蛋白尿4分、脓尿4分、新出皮疹2分、脱发2分、口腔溃疡2分、发热1分、血小板减少1分、白细胞减少1分。计总分)。治疗前和治疗6个月后检测疾病活动指标抗核抗体、抗双链DNA抗体、补体C3、血沉、尿常规、24h尿蛋白定量、肾功;采用全自动血液流变分析系统检测血液流变学指标。治疗6个月后进行阴虚热毒血瘀证疗效评估(显效:症状、体征明显改善,证候积分减少≥70%;有效:症状、体征均有好转,证候积分减少≥30%;无效:症状、体征无改善,证候积分减少<30%,甚或加重)。④组间计量资料比较采用配对t检验,计数资料比较采用χ2检验进行统计学分析。结果:系统性红斑狼疮疾病活动期患者60例均进入结果分析。①两组治疗6个月后疾病活动评分明显低于治疗前,治疗组治疗后疾病活动评分明显低于对照组(P<0.01)。②两组治疗6个月后疾病活动指标均明显好于治疗前(P<0.01)。治疗组治疗后对血尿、蛋白尿、肾功异常的疗效明显优于对照组(P<0.01)。③系统性红斑狼疮患者有不同程度的血液流变学指标升高,治疗组治疗后全血黏度、血浆黏度、红细胞聚集指数、红细胞电泳时间明显低于对照组和治疗前(P<0.01)。④治疗组治疗6个月后疗效明显优于对照组(P<0.01)。结论:滋肾活血凉斑方加火把花根片治疗活动期阴虚热毒血瘀证系统性红斑狼疮患者可控制疾病活动,降低其异常升高的血液流变学指标,改善阴虚热毒血瘀证候,其疗效优于强的松。

反相高效液相色谱法测定脑脉通有效部位中蒽醌类成分的含量

目的:建立脑脉通有效部位中的蒽醌类成分的反相高效液相色谱法含量测定方法。方法:采用大连依利特ODS色谱柱(250 mm×4．6 mm,5μm),流动相为甲醇-0．1％磷酸溶液(80:20,V/V),流速:1．0 mL·min^(-1);检测波长:254 nm。结果:芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚总含量为4％以上,平均回收率为100．54％,RSD:1．58％。结论:所建立的方法简便、准确,可作为有效部位的质量控制方法。

脑脉通有效部位中总蒽醌的含量测定

目的建立脑脉通中大黄总蒽醌含量测定方法。方法利用大黄蒽醌类化合物能与质量分数0.5%醋酸镁反应显色,在波长512 nm处产生吸收,采用可见分光光度法测定脑脉通复方中的以游离型蒽醌计的总蒽醌的含量。结果以1,8-二羟基蒽醌为对照品,测得脑脉通有效部位中总蒽醌的含量在10%以上,平均回收率为102.91%,RSD=0.97%。结论本方法简便、准确、重复性好,可作为脑脉通有效部位中大黄总蒽醌的含量测定方法。

芍药甘草汤加减治疗踝关节术后肌肉痉挛验案一则

1病例介绍邬某,男,27岁,2023年5月24日初诊。2天前无明显诱因出现左下肢踝部肌肉痉挛,阵发性发作,发作时局部刺痛不适,伴肌肉僵硬感,局部按揉无明显缓解,持续10min左右可逐渐缓解,无局部红肿,局部肤温正常,夜间疼痛发作频率较高,疼痛难以入眠,饮食可,睡眠差,二便调,舌淡红苔薄黄,脉细涩。既往8个月前因左侧踝部骨折行切开复位钢针内固定术,内固定物未取出,术后卧床恢复时间较长。