单核细胞趋化蛋白1对肺癌A549细胞迁移和侵袭的影响及其机制

目的:探讨单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)对肺癌A549细胞迁移和侵袭的影响,并阐明其作用机制。方法:采用免疫组织化学法检测80例非小细胞肺癌(NSCLC)及癌旁正常肺组织中MCP-1蛋白表达情况。体外培养人肺癌A549细胞,MCP-1-小干扰RNA(siRNA)实验分为空白组、阴性对照组(si-NC组)、MCP-1-siRNA-1组和MCP-1-siRNA-2组;MCP-1过表达实验分为对照组、空载对照组(OE-NC组,转染MCP-1过表达空载质粒)、过表达MCP-1组(OE-MCP-1组,转染MCP-1过表达质粒)、过表达MCP-1+细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路抑制剂PD98059组(OE-MCP-1+PD98059组,共转染MCP-1过表达质粒和PD98059)和PD98059组(转染PD98059)。分别将MCP-1-siRNA和质粒转染至肺癌A549细胞,Western blotting法验证各组A549细胞转染效率。细胞划痕实验和Transwell小室实验观察各组A549细胞迁移率和侵袭细胞数,Western blotting法检测各组A549细胞中磷酸化ERK(p-ERK)、总ERK(t-ERK)和上皮-间质转化(EMT)相关蛋白表达水平。结果:与癌旁组织比较,NSCLC组织中MCP-1蛋白阳性表达率明显升高(P<0.05);NSCLC组织中MCP-1蛋白表达水平与TNM分期和淋巴结转移有关联(P<0.05)。与si-NC组比较,MCP-1-siRNA-1组和MCP-1-siRNA-2组A549细胞中MCP-1蛋白表达水平均明显降低(P<0.01);与对照组和OE-NC组比较,OE-MCP-1组A549细胞中MCP-1蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。细胞划痕实验,与si-NC组比较,MCP-1-siRNA-1组和MCP-1-siRNA-2组细胞迁移率均明显降低(P<0.01);与OE-NC组比较,OE-MCP-1组细胞迁移率明显升高(P<0.01);与OE-MCP-1组比较,OE-MCP-1+PD98059组细胞迁移率明显降低(P<0.01);与OE-MCP-1+PD98059组比较,PD98059组细胞迁移率明显降低(P<0.01)。Transwell小室实验,与si-NC组比较,MCP-1-siRNA-1组和MCP-1-siRNA-2组侵袭细胞数明显减少(P<0.01);与OE-NC组比较,OE-MCP-1组侵袭细胞数明显增加(P<0.01);与OE-MCP-1组比较,OE-MCP-1+PD98059组侵袭细胞数明显减少(P<0.01);与OE-MCP-1+PD98059组比较,PD98059组侵袭细胞数明显减少(P<0.01)。Western blotting法,与si-NC组比较,MCP-1-siRNA-1组和MCP-1-siRNA-2组A549细胞中p-ERK、波形蛋白(Vimentin)和N-钙黏蛋白(N-cadherin)表达水平均明显降低(P<0.05或P<0.01),E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平均明显升高(P<0.01);与OE-NC组比较,OE-MCP-1组A549细胞中p-ERK、Vimentin和N-cadherin蛋白表达水平均明显升高(P<0.01),E-cadherin蛋白表达水平均明显降低(P<0.01);与OE-MCP-1组比较,OE-MCP-1+PD98059组A549细胞中p-ERK、Vimentin和N-cadherin蛋白表达水平均明显降低(P<0.01),E-cadherin蛋白表达水平均明显升高(P<0.05);与OE-MCP-1+PD98059组比较,PD98059组A549细胞中p-ERK、 Vimentin和N-cadherin蛋白表达水平均明显降低(P<0.05或P<0.01),E-cadherin蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。结论:MCP-1蛋白可上调肺癌A549细胞中EMT相关蛋白表达,促进肺癌A549细胞的迁移和侵袭,其作用机制与激活ERK信号通路有关。

非染色体结构维护凝集素Ⅰ复合物亚基G通过Akt信号通路促进卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭

目的探讨非染色体结构维护凝集素Ⅰ复合物亚基G(NCAPG)调控卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭的机制。方法生物信息学GEPIA数据库分析NCAPG在卵巢癌组织中的差异表达。Western blotting检测正常卵巢上皮细胞IOSE80、卵巢癌A2780和SKOV3细胞中NCAPG的蛋白表达。NCAPG siRNA沉默实验分为空白组、对照组、siNCAPG-1组和siNCAPG-2组。NCAPG过表达实验分为空白组、对照组、NCAPG组、NCAPG+MK2206组和MK2206组。MTT实验检测细胞增殖活性;细胞划痕实验和Transwell实验评估细胞的迁移和侵袭能力;Western blotting检测细胞的磷酸化Akt(p-Akt)、总Akt(t-Akt)、增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、波形蛋白(vimentin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达水平。结果NCAPG在卵巢癌组织和卵巢癌细胞中高表达。沉默NCAPG可明显抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖、迁移和侵袭,p-Akt、PCNA、MMP-9、vimentin和N-cadherin表达减少,E-cadherin表达增多。过表达NCAPG质粒可促进卵巢癌A2780细胞增殖、迁移和侵袭,p-Akt、PCNA、MMP-9、vimentin和N-cadherin表达增多,E-cadherin表达降低。Akt抑制剂MK2206可明显抑制NCAPG的上述作用。结论NCAPG激活Akt信号通路,调控PCNA、MMP-9和上皮细胞-间充质转化(EMT)相关蛋白的表达,促进卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭。

基于复合置信度的不确定条件下循环水系统优化

当前循环水系统的优化,主要基于确定的外部条件展开,但在实际中有许多参数有着明显的动态性。因此,本文引入不确定性参数描述系统参数的动态波动,同时,考虑到不同热物流的冷却要求及波动幅度,分别对10股工艺物流设置了不同的置信度,从而得到不确定条件下的最优网络配置。本工作采用机会约束规划建立模型,以最小化总费用为目标函数,采用复合置信度的模式描述不同物流违背约束的概率分布,实现系统成本的最小化并获得最佳的冷却网络配置。采用蒙特卡罗算法,利用Gams软件对混合整数非线性规划模型求解。经实例结果表明,基于复合置信度的不确定条件下成本可以降低10.0%,并得到经济性和稳定性更高的循环水系统。

微课在初中历史教学中运用的探析——以《唐代的中外文化交流》教学为例

微课既是教师利用简短视频，对学科知识点或教学内容实施教学活动的总和，也是学生在特定学习情境中，根据自身的学习目标，利用简短视频所开展的网络学习活动的总和。由于微课教学具有主题突出、短小精悍、情境真实、易于交互等多方面优势，因此被广泛应用于当前的初中历史教学中。结合实践教学经验，以《唐代的中外文化交流》这一历史课程教学为例，就微课在初中历史教学中的运用进行了分析与探讨。

碳审计问题思考

环境恶化对世界气候的影响不断加大,我国面临着巨大的减排压力,低碳经济是未来发展趋势。而碳审计在减排过程中起到监督和推动的作用。目前我国仍处于碳审计的起步阶段,后续仍需要探索和推动,并且在此过程中产生诸多的问题。通过对碳审计推广的必要性和面临的现实问题提出对策,从而使我国碳审计领域全面快速地发展。

外周血象检查对常见白血病诊断的价值研究

分析外周血象检查的方式在常见白血病诊断中的应用价值。方法 调取2018.01~2021.01于本院收治的148例白血病患者作为观察对象,按照具体疾病将其分为慢性粒细胞白血病组(CGL)、急性早幼粒细胞白血病组(APL)、慢性淋巴细胞白血病组(CLL)、不伴成熟型急性髓细胞白血病组(AML)、慢性红白血病组(AEL)和急性淋巴细胞白血病组(ALL)。观察各组患者的外周血细胞形态学及WBC结果。结果 CGL WBC>50×109/L者占77.78%,APL WBC≤4×109/L者占63.16%,CLL WBC为(10-50)×109/L者占75.0%,AML、AEL WBC为(10-50)×109/L者占比均为50.0%,AEL WBC>50×109/L者占30%;不同疾病组对比白血病细胞数中血涂片>骨髓涂片WBC、WBC等对比差异显著(P<0.05)。结论 在诊断常见白血病中检查外周血象的价值较高,可对患者不同疾病类型加以区分,有利于诊断患者病情,并为临床治疗提供可靠指导依据。