一例鸡肾型传染性支气管炎的诊断与遗传分析

2023年山东省临沂市某肉鸡场白羽肉鸡出现精神沉郁、呼吸湿啰音、腹泻拉白痢等症状,随着病程延长,出现死亡病例,但死亡率较低。剖检可见肾脏肿大,输尿管扩张,管内充满白色尿酸盐结晶,荧光定量RT-PCR检测结果显示IBV强阳性。通过发病鸡的临床病变、剖检变化,并结合实验室检测,确诊为鸡传染性支气管炎。通过序列分析发现该鸡场感染的IBV序列与分离株CK/CH/ZJ/HZ12株(GI-19基因型;GenBank登录号为KJ524621)亲缘关系最近,最终确诊为鸡肾型IBV。建议该养殖场加强饲养管理措施,提高自身生物安全管理水平,同时为IBV的诊断思路提供技术参考。

山东部分地区禽传染性支气管炎流行病学调查

为了解近年来山东省流行的禽传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)S1基因遗传特性,试验于2020-2023年从山东14个地市的肉鸡养殖场及蛋鸡养殖场共收集462份病料(包含组织器官、泄殖腔拭子和咽拭子),采用RT-qPCR和RT-PCR对病料进行IBV检测。结果显示:山东省2020-2023年肉鸡和蛋鸡养殖场IBV阳性检出率为27%(125/462),并在3年试验期间IBV感染率呈现逐年上升趋势,在初春、秋末及冬季感染率较高,以济南(49%)、泰安(33%)和东营(28.9%)地区IBV阳性检出率最高,肉鸡的IBV感染率略高于蛋鸡。试验成功分离37株IBV分离株,其S1基因核苷酸同源性为74.8%~99.8%,分属GⅠ-22、GⅠ-13、GⅠ-7、GⅠ-1、GⅠ-28(LZ05型)和GⅠ-19(QX型)6种基因型,其中QX型为分离株优势基因型(83.7%,31/37)。31株QX型IBV分离株S1基因在第68、116、208、261、333和369位的碱基突变、替换最为频繁。研究提示:山东部分地区IBV感染率呈现逐年上升趋势,多发于寒冷季节且肉鸡发病较为严重,流行毒株仍以QX基因型为主,并且LZ05型首次在鲁中地区被检出。

鸡毒支原体病的传染病学、发病机制及防控措施

家禽的支原体病是由软膜体纲(Mollicutes)支原体目(Mycoplasmatales)支原体科(Mycoplasmataceac)支原体属(Mycoplasm)的鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)和鸡滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)引起,其中MG是分布最广泛的致病性支原体,具有广泛的宿主易感性和毒力。MG主要感染家禽的呼吸系统、生殖系统和肌肉骨骼系统,导致死胚、雏鸡生长性能差、降低产蛋鸡生产性能,对肉、种禽养殖业危害巨大,行业内对其净化的呼声越来越高。鸡毒支原体病的预防主要依赖于农场和鸡群的生物安全、管理策略、早期诊断、抗菌剂的使用和疫苗接种。本文综述了鸡毒支原体病的传染病学、感染的发病机制以及防控措施,以期为鸡毒支原体的净化防治提供理论支撑。

猪流行性腹泻病的流行特点及防控概述

猪流行性腹泻(Porcine Epidemic Diarrhea,PED)是一种由猪流行性腹泻病毒(PorcineEpidemicDiarrheaVirus,PEDV)引起的一种急性接触性肠道传染病。该病毒主要通过粪-口途径传播,猪感染后会引起严重的腹泻、呕吐和脱水,致死率极高,可达100%。即使有仔猪能够侥幸存活,相比健康仔猪,幸存仔猪的日增重等生长性能远远达不到生猪养殖生产指标,只能淘汰处理,给养猪业造成了巨大的经济损失。自20世纪80年代初在欧洲首次发现以来,猪流行性腹泻已经成为全球猪业面临的重要问题之一。该文旨在综述猪流行性腹泻的病原特征、流行特征、致病机制、疫苗研发等方面进行综述,以期为养猪业提供参考。

经纬度对中国野生狗牙根土壤养分的影响

对沿N 34°纬度线以及E 113°经度线的27个不同地区的狗牙根(Cynodon dactylon)土壤进行取样,测定了全氮、有机质、碱解氮、速效钾、交换性钙、交换性镁、有效磷和pH指标,研究不同经纬度对野生狗牙根土壤养分的影响。结果表明:(1)无论在经度还是在纬度梯度上,土壤养分含量之间都有显著的空间异质性。在经度梯度上,所有的土壤养分指标的变异系数均在27%以上,在纬度梯度上,其土壤养分指标的变异系数均在33%以上;(2)经度与狗牙根土壤交换性钙含量(P<0.01)以及土壤pH(P<0.01)呈显著负相关关系,沿经度梯度的气候因素对当地土壤碱解氮(P<0.01)、交换性钙(P<0.01)的含量以及pH值(P<0.01)有显著的影响,纬度与狗牙根土壤交换性钙(P<0.01)与交换性镁的含量(P<0.01)呈显著正相关关系,沿纬度梯度的气候因素也会显著影响这两种土壤养分的含量;(3)狗牙根土壤养分综合质量沿经度梯度的平均值大于沿纬度梯度的平均值,纬度以及气候因素会显著影响狗牙根土壤养分综合质量,而经度则对其无显著的影响。由此可见,狗牙根土壤养分会随经度与纬度的不同表现作出明显的差异,经度的降低显著增加狗牙根土壤交换性钙含量以及pH,而纬度的降低会显著降低土壤交换性钙与交换性镁的含量。

感染A型产气荚膜梭菌小鼠体内α毒素的分布及定位

为了研究α毒素在感染A型产气荚膜梭菌动物的体内的分布情况,自制了高效价的兔抗α毒素多克隆抗体作为一抗,HRP和FITC分别标记的羊抗兔IgG作为二抗,通过免疫组化法对α毒素进行了定位检测。结果表明,在小鼠延髓、肠、肾、肺、胃的间充质细胞胞浆中发现了阳性颗粒,在脾、肝的间充质细胞中未发现毒素分布。结果提示,首次在延髓的细胞胞浆中发现了α毒素,表明α毒素能突破血脑屏障进入延髓损坏生命中枢,这可能是引起动物死亡的一个重要原因。

生物发酵法处理病死猪后堆体温度及微生物含量的跟踪监测

[目的]研究利用生物发酵技术对病死猪进行无害化处理后发酵堆体的温度及其微生物含量的变化情况。[方法]本试验利用温度探头分层埋堆全程记录、细菌学计数和荧光RT_PcR／RT-PCR检测等方法对临沂市沂水县某猪场的病死猪生物发酵无害化处理技术效果进行跟踪监测和评估。[结果】经21天监测发现，发酵温度最高达70℃；试验病毒均已被杀灭；细菌含量（CFU）也分别由A组的1．33×10^8下降至1．37×10^3、B组的3．26×10^7下降至1．62×10^3。[结论]研究结果表明，此场生物发酵堆体上、中、下三层中层的温度最高，最高温度出现在第3天～9天之间，达到70℃左右，堆体发酵温度受环境温度的影响较大；发酵法对病毒和细菌的杀灭效果显著。

2015年山东省某鸭场腺病毒病的暴发调查

2015年11月30日,山东省西北地区某鸭场报告其饲养的17 600只鸭子在1个多月内陆续发生不明原因的大规模死亡。经初步调查发现,鸭在死亡之前没有明显的临床症状,大多仅表现精神萎靡,多次用药后均无明显效果。截至调查时,已累计死亡约3 600只。为详细了解该鸭场的发病情况,分析该病的风险因素,以便及时提出防控建议,通过现场调查和实验室检测相结合的方式,开展了本次疫情暴发调查。调查结果显示,该鸭场暴发了腺病毒病;起因是鸭苗在引进前已感染了腺病毒,引入后又遇雨雪天气,气温骤降,同时场内饲养管理不合理,卫生条件差,防控措施不当,导致多种细菌继发感染,从而加剧了疫情。针对鸭场存在的病原,对症用药,对可能的相关风险因素进行了控制,随后疫情得到了有效控制。

鸭胚大肠杆菌和肺炎克雷伯菌的分离鉴定与药敏分析

2015年4月,滨州市无棣县某鸭场最近出现鸭胚孵化率下降,死胚率达到30%。实验室对送检的3枚鸭胚进行了细菌分离、生化鉴定及药敏分析。通过对鸭胚的细菌分离纯化,得到两种细菌,均为革兰氏阴性杆菌;通过对两种细菌生化鉴定,结果为大肠杆菌和肺炎克雷伯菌;对两种菌进行药敏分析,根据药敏结果对鸭场进行科学用药,降低滥用药、过度用药对鸭场带来的危害。

养殖场常用消毒剂对非洲猪瘟病毒核酸的影响

为评估不同消毒剂对非洲猪瘟病毒核酸降解能力,选择醛类(戊二醛、戊二醛癸甲溴铵)、季铵盐类(癸甲溴铵)、过氧化物类(过硫酸氢钾、过氧乙酸)、酶制剂(莱芙酶)、含氯类(月苄三甲氯铵、二氯异氰脲酸钠、次氯酸)、含碘类(聚维酮碘)等6类9种消毒剂,各消毒剂在选定稀释度下与不同浓度的非洲猪瘟病毒在室温条件下作用30min后,与1.7×104copies非洲猪瘟病毒在室温(20~25℃)下作用不同时间后和在不同温度作用30min后,采用微滴式数字PCR进行检测病毒核酸浓度。结果表明,二氯异氰尿酸钠、戊二醛、过硫酸氢钾这3种消毒剂相对于其他消毒剂对病毒核酸降解量最大;戊二醛与非洲猪瘟病毒作用时间不同,对病毒的核酸降解量变化最大;环境温度对过硫酸氢钾和戊二醛癸甲溴铵的非洲猪瘟病毒核酸降解能力影响最大,温度较高时,核酸降解能力增强。因此,养殖场如若消除病毒核酸污染,可选择二氯异氰尿酸钠、戊二醛、过硫酸氢钾这3种消毒剂,且在使用过程中,戊二醛尽可能增加消毒作用时间,过硫酸氢钾适当提高消毒作用温度,来加强对病毒核酸降解能力。

一例肉鸭细菌病混合感染的诊断与治疗

龋齿岁氏菌（Rothia dentocariosa）为需氧或微需氧、不形成芽孢、无动力、多形态的革兰氏阳性菌，是人类口咽部的共生菌群，也是引起龋齿和牙周病的病原菌。通常认为，龋齿罗氏菌对人类具有低毒力，但现在已公认为成年人的机会致病菌，常与感染性心内膜炎有关，

生物发酵法处理病死鸡微生物含量变化的追踪监测

本试验旨在研究利用生物发酵技术对病死鸡进行无害化处理后对发酵堆中微生物含量变化的影响。利用细菌学计数和荧光RT-PCR/RT-PCR检测方法对烟台莱山区某鸡场的病死鸡生物发酵无害化处理技术进行了效果追踪监测和评估。结果在28d的追踪监测后,发现3组试验中病毒均已被杀灭,细菌含量(CFU/g)在发酵21d后达到最低值,分别由A组的5.34×1008下降为3.66×1006、B组的4.26×1010下降为2.44×1006、C组的3.57×1011下降为2.48×1006。结果表明,烟台莱山区某种鸡场采取的生物发酵法无害化处理病死鸡的对微生物含量影响明显,杀灭效果显著。

核内不均一性核糖核蛋白H2抑制流感病毒复制机制初步研究

本研究前期发现核内不均一性核糖核蛋白H2能够抑制流感病毒复制,为进一步探究该蛋白抑制流感病毒机制,本研究通过过表达hnRNP H2后,利用双荧光素酶报告基因试验检测hnRNP H2对流感病毒聚合酶活性的影响,利用免疫共沉淀试验检测hnRNP H2与流感病毒RNA相互作用。结果显示:过表达hnRNP H2能够显著抑制流感病毒聚合酶活性,hnRNP H2能够与流感病毒m RNA和v RNA发生相互作用。以上结果表明:hnRNP H2可能通过与流感病毒RNA结合抑制核酸出核发挥抑制流感病毒复制作用。

山东省某规模鸡场传染性支气管炎病毒诊断及细菌分离鉴定与药敏分析

2018年7月,山东省诸城市某规模肉鸡场出现个别鸡瘫痪,稀便,采食量略微偏低,生长速度偏慢。大群无呼吸道症状。20日龄后发病数量居多,约占到大群的千分之五。实验室对送检的8只鸡病料进行了病毒pcr鉴定、细菌分离鉴定及药敏分析。鉴定得出传染性支气管炎病毒阳性,分离到革兰氏阴性杆菌;通过生化鉴定结果为大肠杆菌;根据药敏结果及病毒检测结果对该肉鸡场进行科学用药,降低了滥用药、过度用药对鸡场带来的危害。

生物发酵法处理病死猪后肺炎克雷伯菌效果的监测

本试验利用细菌分离、培养、生化鉴定方法对临沂沂水县某猪场的病死猪生物发酵无害化处理堆的肺炎克雷伯菌进行了追踪监测,结果表明,在21d的追踪监测后,2组试验中的肺炎克雷伯菌均已在7d后被杀灭,之后直至第21d均未再检测到肺炎克雷伯菌。表明临沂沂水县某猪场采取的生物发酵法无害化处理病死猪对肺炎克雷伯菌的杀灭效果显著。

山东省2012年～2016年猪流行性腹泻病毒分子流行病学调查及对其ORF3基因分析

为了解山东省猪流行性腹泻病毒(PEDV)流行情况,本研究采用RT-PCR的方法对2012年1月~2016年12月山东省13个地市采集的258份疑似PEDV感染样品进行检测,并设计引物扩增PEDV ORF3基因片段,通过生物信息学软件对26个具有代表性的完整的PEDV ORF3基因序列进行遗传进化分析。结果显示PEDV平均每年检出率达72.1%,表明PEDV是当前山东地区仔猪腹泻的主要致病病原。遗传进化分析显示,26株PEDV ORF3基因序列属于G2基因型,与其它参考PEDV病毒株同源性较高(93.8%~100%),相对保守。其中3株PEDV流行株位于2a亚型中,这在华北地区属首次报道。PEDV 2a亚型基因序列具有特异位点突变,可作为鉴别2a亚型与其它亚型的分子标记。本研究揭示了山东省PEDV流行株ORF3基因的主要基因型,为该省PEDV的防控提供依据。

30个紫花苜蓿品种对苜蓿花叶病毒病的田间抗性初步研究

为了比较不同紫花苜蓿品种对病毒病的抗性,对30个紫花苜蓿品种的病毒病发病情况进行了田间调查,利用小RNA深度测序技术结合RT-PCR技术检测鉴定各紫花苜蓿品种中的病毒种类,并测定了各紫花苜蓿品种的发病率、病情指数、相对株高、相对单株干重、相对茎秆直径、相对叶面积、相对叶长和相对叶宽,综合比较各紫花苜蓿品种的抗性,并对部分指标进行系统聚类分析。结果表明:30个紫花苜蓿品种均只受到苜蓿花叶病毒(alfalfa mosaic virus, AMV)的侵染,所有紫花苜蓿品种的田间发病率均超过94%,病情指数范围为31.53～55.50;30个紫花苜蓿品种中,抗性较强的品种有1个,为射手2号,抗性一般的品种有6个,其余23个品种的抗性较差,分别占供试品种的3.33%,20.00%和76.67%;聚类分析结果表明,抗性较强的射手2号与其他紫花苜蓿品种的亲缘关系较远,与其杂交有可能产生较大的杂种优势。

2019年山东省兽医系统实验室检测能力比对

2019年山东省动物疫病预防控制中心组织全省98个兽医系统实验室开展检测能力比对工作,比对项目包括非洲猪瘟病毒核酸检测、禽流感病毒核酸检测、H5亚型禽流感病毒抗体检测和口蹄疫非结构蛋白抗体检测。比对结果显示:总体实验室正确率为70.41%(69/98),其中市级兽医系统实验室正确率为93.75%(15/16),国家动物疫情测报站正确率为68.75%(11/16),县级兽医系统实验室正确率为65.15%(43/66);非洲猪瘟病毒核酸检测、禽流感病毒核酸检测、H5亚型禽流感病毒抗体检测以及口蹄疫非结构蛋白抗体检测结果正确率分别为87.76%、85.71%、93.88%和97.96%。比对结果提示基层兽医系统实验室应提升检验人员的素质,加大实验室设施设备的投入和管理,结合开展社会化服务来推进实验室建设,确保检测结果客观准确。

郑州地区3种冷季型草坪草根部入侵真菌鉴定

研究不同草坪草根部入侵真菌的种类对草坪病害鉴定与防治具有重要意义。本试验以河南省郑州市内8个公共草坪上的3种冷季型草坪草高羊茅(Festuca arundinacea),草地早熟禾(Poa pratensis)和多年生黑麦草(Lolium perenne)为研究材料,于2013年春季,在8个混播草坪上采用"Z"字形法随机进行根部取样,每种草在各采样地内分别取12株根样,并在实验室内分离鉴定其根部入侵真菌种类。结果表明:从288株根样中共分离到13种真菌,其中6种真菌为3种草根部共同的入侵真菌,包括:细交链孢(Alternaria alternata)、尖孢镰孢(Fusarium oxysporum)、柱孢(Cylindrocarpon destructuns)、枝孢(Cladosporium herbarum)、多隔镰孢(F.decemcellulare)、德氏霉(Drechslera sp.)。郑州地区冷季型草坪草根部入侵的主要病原真菌是细交链孢、尖孢镰孢和枝孢,不同地点和草种根部主要的入侵真菌种类有明显的不同,根部带菌率最高的是多年生黑麦草。

2011—2014年山东省兽医实验室检测能力比对结果分析

2011至2014年,山东省组织全省兽医系统部分实验室开展了检测能力比对工作。结果发现,2011至2014年,所有参加检测能力比对项目的合格率分别为86.00%(172/200)、93.90%(200/213)、96.35%(211/219)、98.53%(269/273),表明山东省兽医实验室体系的检测能力逐步得到提升。