胃癌腹膜转移的基础研究及其应用的新进展

腹膜转移在胃癌转移和复发中较为常见。近年来国内外对胃癌腹膜转移进行了大量的基础研究。笔者就胃癌腹膜高转移细胞系的建立、癌细胞的异质性、癌细胞与腹膜的相互关系及其临床应用等方面综述。

小鼠骨髓来源树突状细胞对T细胞的活化作用

目的从小鼠骨髓中体外诱导、扩增树突状细胞(DCs),检测DCs对T细胞的活化作用。方法从小鼠骨髓中分离单个核细胞(MNCs),在重组鼠粒细胞-巨噬细胞集落因子(rmGM-CSF)、白细胞介素4(IL-4)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的诱导下培养扩增DCs。光学显微镜观察其形态特征,流式细胞仪分析其表型特征,混合淋巴细胞反应(MLR)检测DCs刺激同种异体T细胞增殖的能力。结果MNCs经过rmGM-CSF、IL-4和TNF-α诱导培养12d后,具有典型的DCs形态,高表达MHCⅡ类分子、CD11c、CD80、和CD86抗原。具有极强的激发刺激同种异体T细胞增殖的能力。结论体外诱导、扩增DCs具有极强的激发刺激同种异体T细胞增殖的能力。

实时RT-PCR及电化学技术检测胃癌术中腹腔灌洗液中游离癌细胞的比较

目的建立实时RT-PCR及电化学技术两种较敏感的检测胃癌术中腹腔灌洗液中游离癌细胞的方法,并对这两种检测方法进行比较。方法分别采用实时荧光RT-PCR和电化学发光方法检测65例胃癌术中腹腔灌洗液中CEAmRNA及CEA蛋白,同时进行腹腔冲洗细胞学方法(peritoneallavagecytology,PLC)涂片寻找癌细胞。收集5例良性胃疾病的术中腹腔灌洗液,5例健康志愿者血液为阴性对照。结果(1)RT-PCR方法检测游离癌细胞的阳性率为47.7%,电化学发光法的阳性检出率为35.4%,两者均无假阳性。而PLC的检出率仅12.3%。(2)电化学发光方法具有快速、试剂稳定、无污染和衰变、自动化程度高,且较经济等优点。(3)CEAmRNA、CEA蛋白阳性率在不同的病理分期组(+期和+期)中差异有显著性(P<0.05)。结论实时荧光RT-PCR方法和电化学发光方法检测游离癌细胞各有优势,游离癌细胞的存在与肿瘤病理状态有一定相关性。

鼻胃管注气对上消化道穿孔的诊断价值

对Ｘ线检查阴性的上消化道穿孔３７例，置鼻胃管注气后Ｘ线下再观察，结果３６例阳性，明确诊断率９７．２９％，较末注气组（１８／３１，５８．０６％）明显提高（Ｐ＜０．０１）。

围手术期部分肠内营养对胃癌病人术后营养状况及免疫功能的影响

目的:研究围手术期部分EN支持对胃癌病人术后营养状况、免疫功能及炎性反应的影响。方法:将60例胃癌病人随机分为围手术期部分EN组(研究组)和术后早期部分性EN组(对照组),分别按不同治疗方案进行营养支持至手术后第7天。所有病人均于术前、术后第1、8天测量体质量、皮皱厚度、上臂围、血白细胞计数、血小板、清蛋白、前清蛋白,C反应蛋白、IgG、IgM、IgA、CD4、CD8、CD4/CD8、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等。结果:研究组前清蛋白和IgG水平高于对照组,IL-6低于对照组。结论:对胃癌病人进行围手术期部分EN支持,不仅能更好地改善病人术后的营养状况和免疫功能,而且还能减轻病人手术创伤后的机体炎性反应。

低氮低热量肠外营养对胃癌术后病人免疫功能的影响

目的:探讨低氮低热量肠外营养对胃癌术后病人免疫功能的影响。方法:将87例胃癌病人双盲、随机分为全胃肠外营养组(TPN,44例)和低氮低热量肠外营养组(HHPN,43例)。病人于手术前1 d、术后第1和第8天分别检测外周血淋巴细胞计数(TLC)、免疫球蛋白(IgGI、gMI、gA)、T淋巴细胞亚群(CD4、CD8、CD4/CD8)和人类白细胞抗原DR(HLA-DR)水平,观察比较两组胃癌术后病人的营养状况、免疫功能和术后感染性并发症等指标的差异。结果:两组病人营养状况无明显差异,HHPN组病人术后第8天TLCI、gG、CD4、CD4/CD8和HLA-DR的表达与TPN组比显著升高(P<0.05)。术后感染性并发症的发生率低于TPN组。结论:使用低氮低热量肠外营养更有利于胃癌病人术后早期免疫功能的恢复和减少感染性并发症的发生率。

手术与非手术治疗直肠癌术后吻合口瘘患者的疗效比较

目的比较手术与非手术治疗直肠癌全直肠系膜切除术(TME)后吻合瘘患者的临床疗效。方法选择18例直肠癌术后吻合口瘘患者,根据瘘口大小、腹腔引流管引流量、临床表现、患者意愿等分为非手术组12例、手术组6例,比较两组的临床疗效。结果两组均治愈。与非手术组比较,手术组术后日均引流量少,拔管时间早,冲洗时间及禁食时间短(P均<0.05);两组住院费用、住院时间比较无统计学差异。结论对年龄<60岁且无其他脏器病变者,即使没达到手术标准也可行手术治疗;非手术治疗能治愈大部分吻合口瘘患者,主要适用于危重及合并其他脏器病变者。

围手术期肠内免疫营养对胃癌病人术后免疫功能和预后的影响

目的：观察围手术期肠内免疫营养（EIN）对胃癌病人术后免疫功能和预后的影响。方法：将46例胃癌病人随机分为围手术期EIN组（研究组，n=23）和术后EIN组（对照组，n=23）。研究组于术前7天和术后第2～8天接受EIN支持，对照组仅于术后第2～8天接受相同的EIN支持。于术前1天、术后第1天和第9天分别检测外周血淋巴细胞计数、免疫球蛋白（IgG、IgM、IgA）、T淋巴细胞亚群（CD4、CD8、CD4／CD8）和人类白细胞抗原·DR（HLA-DR）水平，观察两组病人术后感染性并发症和住院时间的差异。结果：研究组术后第9天淋巴细胞计数、IgG、CD4、CD4／CD8和HLA-DR的表达与对照组比显著升高（P〈0．05）。术后感染性并发症的发生率低于对照组（4．3％ vs 17．4％）。研究组术后平均住院时间比对照组缩短（10．8±1．0）d vs 5（11．8±1．2）d，P〈0．05。结论：围手术期应用EIN，更有利于病人术后免疫功能的恢复和预后改善。

胃癌术后胃瘫综合征的诊断和治疗

目的探讨胃癌术后胃瘫的临床特点,可能原因及治疗。方法对724例胃癌手术病例的临床资料进行回顾性分析。结果共发生胃瘫12例,其中1～2周内治愈3例,3～4周内治愈6例,5～8周内治愈2例,1例经综合治疗8周末愈行全胃切除后治愈。结论引起术后胃瘫综合征的主要原因是胃的正常运动功能被破坏,采用保守治疗为主的综合治疗效果较好。

胃癌术中腹腔灌洗液的CEA^(··)mRNA的检测及意义

目的 探索建立一种较敏感的检测胃癌手术时腹腔灌洗液中游离癌细胞的方法。方法 应用实时荧光逆转录 -多聚酶链反应 (RT PCR )方法定量检测 65例胃癌术中腹腔灌洗液的CEA mRNA ,同时用腹腔冲洗细胞学方法 (PLC )涂片寻找癌细胞。设 5例良性胃疾病的术中腹腔灌洗液及5例健康志愿者血液为阴性对照。结果 (1)良性胃病组和对照组CEA mRNA均为阴性 ;(2 )胃癌组中RT -PCR方法检测游离癌细胞的阳性率为 47.7% ,无假阳性 ;而PLC的检出率仅为 12 .3 %。胃癌组中CEA mRNA阳性率与肿瘤浸润深度、病理分期 (I +II和III +IV期 )、有无腹膜转移均有明显相关性 (均P 0 .0 5 )。结论 实时荧光RT PCR较PLC方法检测胃癌患者腹腔灌洗液中的游离癌细胞具有更高的敏感性及特异性 ;游离癌细胞的存在和肿瘤临床病理因素有一定的相关性。

术中定位前哨淋巴结在分析结肠癌淋巴结转移中的临床应用

目的探讨结肠癌术中定位前哨淋巴结(SLN)的可行性及在分析结肠癌淋巴结转移中的临床意义。方法对86例结肠癌患者进行术中异硫蓝定位检测SLN,术后常规病理检测所有淋巴结;对所有SLN进行连续切片病理检测和免疫组织化学检测。结果86例结肠癌中检出SLN82例,检出率为95.3%。SLN转移患者共39例,而常规病理检测淋巴结转移患者26例。82例结肠癌共检出SLN182枚,占全部区域淋巴结的16.4%(182/1107),平均每例(2.0±0.29)枚。SLN转移率明显高于其它区域淋巴结(P<0.01)。结论进行结肠癌术中定位SLN是可行的,且能明显提高结肠癌淋巴结检出阳性率。

双吻合器技术在低位直肠癌保肛手术中的应用

目的:探讨低位直肠癌用双吻合器技术行保肛手术的适应证、手术操作要点、常见并发症及原因分析。方法:回顾性分析我院2000年2月至2005年2月用双吻合器技术行低位直肠癌保肛手术108例资料。结果:108例无手术死亡。手术后并发吻合口漏3例,发生率2.8%;吻合口出血4例,发生率3.7%;病理切缘阳性2例,发生率1.9%;无吻合口狭窄发生。结论:双吻合器技术的应用提高了低位直肠癌保肛手术的成功率,充分了解吻合器的性能和正确的使用方法可以减少并发症的发生。

非手术方法综合治疗直肠癌术后吻合口瘘疗效分析

低位直肠癌在直肠癌中最多见，约占直肠癌的70%~75%。而且低位直肠癌手术是结直肠肿瘤治疗中的难点，由于肿瘤位置低，盆腔空间狭小，手术有一定难度。全直肠系膜切除术（TME）作为低位进展期直肠癌手术的标准规范，降低了局部复发率，减少了远处转移的发生[1]。而且随着全直肠系膜切除技术的推广及双吻合器技术的普及，很多以往需行腹会阴切除术的低位直肠癌患者获得保肛手术机会。但由于吻合口位置越低，术后发生吻合口瘘的风险越大[2]。吻合口瘘是直肠癌术后严重的并发症之一，不仅增加了患者的痛苦和心理负担，导致住院时间延长、医疗费用增加，还会影响肿瘤的进一步治疗（如放化疗等）[3-4]。目前，术后吻合口瘘的治疗包括经腹腔引流管冲洗引流、营养支持、扩肛等非手术方法和手术粪便改道两种方法，这需要根据发生吻合口瘘后瘘口大小、腹腔引流管引流量、临床表现、患者意愿等多方面因素综合选择。本文旨在探讨经腹腔管冲洗引流、抗感染、营养支持、扩肛等综合方法治疗直肠癌术后吻合瘘的疗效，现报道如下。

大肠癌组织中环氧化酶2基因表达的实时定量PCR检测

目的探讨环氧化酶2(COX-2)在大肠癌发生和发展中的意义。方法建立实时定量RT-PCR方法,采用LightCycler PCR仪检测了28例大肠癌COX-2 mRNA及内参GAPDH mRNA的表达,以COX-2N=(COX-2拷贝数/GAPDH拷贝数)×103表示COX-2 mRNA表达水平。结果肿瘤组织COX-2 mRNA与正常组织表达水平有极明显差异(P<0.05),转移组织较正常组织COX-2mRNA表达有明显差异(P<0.01)。结论COX-2参与了大肠癌的发生和发展,并起到了重要作用。

胃癌肿瘤浸润淋巴细胞CD8+CD28+的表达及其意义

目的通过研究CD8^+CD28^+在胃癌肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)上的表达及其与肿瘤生物学行为的关系和意义,探讨TIL功能受抑制的原因。方法采用流式细胞术检测胃癌TIL及胃癌患者和正常健康志愿者外周血淋巴细胞CD3、CD4、CD8、CD28的表达。结果胃癌TIL表面CD3^+、CD3^+CD4^+、CD3^+CD8^+、CD8^+CD28^+的表达均低于正常健康志愿者外周血和胃癌患者外周血中的表达,差异有统计学意义(P<0.05);胃癌TIL表面CD8^+CD28^+的表达与肿瘤浸润深度和肿瘤大小有关(P<0.05)。结论胃癌TIL的免疫抑制状态可能与CD8^+CD28^+低表达有关;CD8^+CD28^+在TIL上的表达可作为胃癌患者预后的一个参考指标。

围手术期结肠癌患者细胞免疫功能变化及意义

目的 探讨结肠癌患者围手术期细胞免疫功能变化及其临床意义.方法 采用流式细胞术法分别测定 40 例结肠癌患者手术前后外周血 T 细胞亚群CD4^＋、CD8^＋、CD4^ ＋/CD8^＋的水平,并与健康对照组比较分析.结果 结肠癌组治疗前外周血 T 细胞亚群 CD4＋和 CD4^＋/ CD8^＋均降低,而 CD8^＋增高,与对照组比较差异有显著性 （P〈0.05）;行根治性手术组术后 CD4^＋和 CD4^＋/ CD8^＋均有显著性增高 （P〈0.05）,CD8＋显著性降低 （P〈0.05）;行姑息性手术组术后 CD4＋、CD8^＋ 和 CD4^＋/ CD8＋均无显著性改变 （P〉0.05）.结论 检测结肠癌患者细胞免疫功能变化,有助于临床判断肿瘤发展、手术疗效和评估预后.