仲景“针足阳明”探析

《伤寒论》第8条中“若欲作再经者,针足阳明,使经不传则愈”延伸了《内经》“治未病”思想,为后世疾病诊治提供了“既病防变”的实例。通过梳理历代有关该条文注解,发现“针足阳明”的针刺部位多为足阳明胃经上特定穴中单个穴位或多个穴位的组合;各代医家应用补泻手法的差异,缘于对“针足阳明”治疗目的理解以及选穴的不同;结合现代医学临床实践和基础研究成果分析,除前人所述外感病外,“针足阳明”思想还可为脑病、精神、神经疾患等疾病诊治提供相关治疗思路。深入探究临床典型病例和医案,加强现代医学相关研究是今后“针足阳明”的研究重点。综上,通过分析《伤寒论》针灸条文,可进一步挖掘针灸学思想,对针灸临床辨证论治的应用具有指导意义。

耳针治疗老年髋关节置换术患者全麻术后认知功能障碍的疗效观察

目的观察耳针治疗老年髋关节置换术患者全身麻醉(全麻)术后认知功能障碍(POCD)的疗效。方法选择60例全麻下行髋关节置换术出现POCD的老年患者,按照随机分组的方法分为对照组(30例)和治疗组(30例)。对照组给予常规治疗,治疗组在对照组的基础上给予耳针治疗。比较两组治疗前及治疗后1、3、7 d简易智力状态检查量表(MMSE)评分及画钟试验(CDT)评分。结果两组治疗前和治疗后1 d的MMSE评分比较无统计学差异(P>0.05);两组治疗后3 d和治疗后7 d的MMSE评分显著高于治疗前和治疗后1 d(P<0.05);两组治疗后7 d的MMSE评分显著高于治疗后3 d(P<0.05);治疗组治疗后3 d和治疗后7 d的MMSE评分分别为(25.40±0.97)、(27.40±0.97)分,均显著高于同期对照组的(24.23±1.14)、(25.33±1.06)分(P<0.05)。两组治疗前和治疗后1 d的CDT评分比较无统计学差异(P>0.05);两组治疗后3 d和治疗后7 d的CDT评分显著高于治疗前和治疗后1 d(P<0.05);两组治疗后7 d的CDT评分显著高于治疗后3 d(P<0.05);治疗组治疗后3 d和治疗后7 d的CDT评分分别为(3.50±0.51)、(3.77±0.43)分,均显著高于同期对照组的(3.03±0.43)、(3.30±0.47)分(P<0.05)。结论耳针治疗全麻下行髋关节置换术出现POCD的老年患者,可有效提高患者MMSE评分和CDT评分,临床疗效较为显著。

关于阿片类物质使用相关障碍的中医药研究可视化分析

目的:利用文献计量学方法,对中医药领域关于阿片类物质使用相关障碍(Opioid Use Disorder,OUD)的研究进展进行可视化分析,并探讨其中的研究热点,以期为进一步开展相关研究提供参考和借鉴。方法:以CNKI、SinoMed、Wanfang、web of science核心合集数据库中近30年关于OUD的中医药研究文献为对象,运用CiteSpace和VOSviewer软件进行可视化分析。结果:共纳入相关文献653篇,以莫志贤、宋小鸽、徐平等为代表的研究团队成果最多;统计出的134位核心作者中最高发文量为28篇;主要研究机构有南方医科大学、北京大学等;高频关键词围绕OUD分型、中医药诊疗方法、动物实验中治疗机制三方面;共形成12个中文关键词聚类、8个英文关键词聚类。基本研究路径为:“动物疗效实验→临床随机对照研究→治疗作用机制研究”。结论:中医药诊治OUD的研究现仍处于发展阶段。建议研究团队与机构加强合作;可结合科技发展前沿进一步研究;相关临床研究质量尚有待进一步提高;建立一套全面系统高效的中医药诊治OUD体系;加强科研成果的转化。尽管近年来相关研究发文量呈下降趋势,但仍然可以深入研究,为解决这一国际公共卫生领域的重要问题提供中国方案。

基于加速康复外科理念经皮穴位电刺激在围手术期应用进展

加速康复外科(enhanced recovery after surgery,ERAS)理念现已成为国内围术期医疗管理的一种新模式,以降低患者围手术期应激反应为首要原则,通过优化围术期的各种防治措施,从而实现减少住院周期,促进患者康复的目的。这与中医理论体系中“未病先防”“既病防变”的治未病思想不谋而合。经皮穴位电刺激(transcutaneous electrical acupoint stimulation,TEAS)作为传统中医理论的重要组成部分,是一种安全无创、简便易行的新型穴位刺激方法,在预防与治疗疾病、促进机体功能恢复等方面具有独特疗效。近年来,TEAS在围术期中的应用研究引起了越来越多的国内外相关学者和临床医生的关注。文章查阅国内外相关文献,对TEAS在术前预康复、术中麻醉以及术后恢复等方面的应用研究进展进行综述,为构建具有中医特色的ERAS围手术期临床管理方案提供参考依据。

电针对阿片类药物耐受大鼠海马G蛋白偶联受体及cAMP、CREB表达的影响

目的观察电针对阿片类药物耐受大鼠机械刺激缩足反应阈值(Paw withdrawal mechanical thresh⁃old,PWMT))、海马组织G蛋白偶联受体(G Protein-Coupled Receptors,GPCRs)及环磷酸腺苷(cyclic AMP,cAMP)、cAMP反应元件结合蛋白(cyclic-AMP response binding protein,CREB)表达的影响,探索G蛋白-谷氨酸受体-cAMP通路是否为电针治疗阿片类药物耐受的可能机制。方法选取60只SPF级SD大鼠,雌雄各半,按随机数字表法分为生理盐水对照组、药物耐受组、谷氨酸受体抑制剂+药物耐受组、电针+药物耐受组及电针+谷氨酸受体抑制剂+药物耐受组,每组各12只。通过对药物耐受组、谷氨酸受体抑制剂+药物耐受组、电针+药物耐受组及电针+谷氨酸受体抑制剂+药物耐受组正常大鼠连续腹腔注射吗啡9 d,2次/d,制备吗啡耐受(Mor⁃phine tolerance,MT)模型,建模成功后,4组继续给予连续7 d腹腔注射吗啡,谷氨酸受体抑制剂+药物耐受组在予腹腔吗啡注射前0.5 h,予腹腔注射谷氨酸受体抑制剂;电针+药物耐受组在予腹腔吗啡注射后0.5 h,予双侧“合谷”“内关”“三阴交”及“足三里”穴位电针干预,断续波,频率2 Hz,2次/d,每次干预时间为10 min,连续7 d;电针+谷氨酸受体抑制剂+药物耐受组给予谷氨酸受体抑制剂和吗啡后,再进行同电针+药物耐受组相同的电针干预。各组分别于造模前、造模第1天、3天、6天、9天和建模成功后第1天、3天、5天、7天检测左足PWMT;采用蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)法检测大鼠海马组织GPCRss、cAMP、CREB蛋白表达,采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血浆β-内啡肽(β-EP)含量。结果与生理盐水对照组比较,药物耐受组、谷氨酸受体抑制剂+药物耐受组、电针+药物耐受组及电针+谷氨酸受体抑制剂+药物耐受组大鼠注射吗啡后第1天、3天、6天PWMT明显升高,差异有统计学意义(P<0.01),但注射吗啡9 d后降低至基础水平,与生理盐水对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05),说明MT模型造模成功;与药物耐受组比较,谷氨酸受体抑制剂+药物耐受组、电针+药物耐受组、电针+谷氨酸受体抑制剂+药物耐受组大鼠在第3天、5天、7天的PWMT升高,差异有统计学意义(P<0.01);与电针+谷氨酸受体抑制剂+药物耐受组比较,电针+药物耐受组大鼠在第3天、5天、7天的PWMT明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。与生理盐水对照组比较,药物耐受组、谷氨酸受体抑制剂+药物耐受组、电针+谷氨酸受体抑制剂+药物耐受组大鼠海马组织中CREB、cAMP的相对表达均升高,GPCRss的表达相对下降,差异有统计学意义(P<0.01);与药物耐受组比较,谷氨酸受体抑制剂+药物耐受组、电针+药物耐受组和电针+谷氨酸受体抑制剂+药物耐受组大鼠海马组织中CREB、cAMP的相对表达均有所下降,差异有统计学意义(P<0.01),电针+药物耐受组大鼠海马组织中GPCRss的表达相对升高,差异有统计学意义(P<0.01);与电针+谷氨酸受体抑制剂+药物耐受组比较,电针+药物耐受组大鼠海马组织中CREB、cAMP的相对表达均降低,GPCRs的表达相对升高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论电针可明显改善MT模型大鼠阿片类药物耐受效应,其机制可能与下调大鼠海马组织中cAMP、CREB蛋白表达,促进β-EP表达,进而减弱G蛋白-谷氨酸受体-cAMP通路上调有关。

经皮穴位电刺激预防混合痔术后尿潴留30例临床观察

目的:观察混合痔切除术的患者通过经皮穴位电刺激的方法预防尿潴留的疗效。方法:按照排除标准和纳入标准,收集60例门诊或者住院的混合痔患者,采用随机抽样法分成两组,对照组A(n=30)不运用经皮穴位电刺激疗法,当作空白对照组,观察组B(n=30)采取经皮穴位电刺激的方法治疗,比较两组手术后患者的尿潴留的发生率和首次的术后患者自主的排尿时间。结果:观察组B的首次术后自主排尿时间[(104.20±15.194)min]明显少于对照组A的首次术后自主排尿时间[(167.80±21.479)min],并且统计学分析两组比较具有统计学差异(P<0.01);观察组B的尿潴留发生率(20%)明显小于对照组A的尿潴留发生率(43.3%),两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:经皮穴位电刺激不仅可以预防混合痔术后患者尿潴留的发生率,而且还大大缩短了术后患者自主排尿的时间,具有临床价值,值得推广。

狂犬病病毒口服疫苗株SRV_9基因组全长cDNA的克隆及特性分析

为了解狂犬病病毒口服疫苗株SRV9的基因序列与生物学特性的关系,明确其作为疫苗株的分子基础,通过反转录聚合酶链式反应(RT-PCR),获得了贯穿全基因组的3个重叠的cDNA片段。将获得的cDNA片段分别克隆至pMD-18T载体上并进行序列测定,对测序结果进行拼接得到全长cDNA序列(GenBank登录号:AF499686)。SRV9株与亲本株SADB19全序列比较分析显示,二者同源性为99.8%,SRV9的变异主要发生在糖蛋白的编码区域,共有5个碱基发生改变,在转录酶蛋白编码区出现2个碱基的改变,其他蛋白编码基因均未出现突变;氨基酸比较分析显示,在转录酶蛋白氨基酸序列发生2个改变;糖蛋白成熟肽的第34位、292位、333位和338位氨基酸分别发生了Gly→Glu,Ala→Thr,Arg→Ser,Ile→Val的改变,其中第34位氨基酸位于第抗原区,第333位和338位氨基酸位于第抗原区。这些抗原位点的突变可能是引起病毒蚀斑特性改变、毒力降低和免疫原性及安全性提高的重要原因。

质粒载体表达抑制猪瘟病毒shRNA在猪胚胎成纤维细胞上的复制

以质粒pSilencer3.1 Hygro为基础,构建了针对猪瘟病毒Npro基因和NS4A基因mRNA的siRNA双表达载体,转染猪胚胎成纤维细胞后,在潮霉素B的筛选压力下,获得5株稳定整合shRNA表达盒的猪胚胎成纤维细胞克隆。以100TCID50的CSFV分别感染96孔板内的上述细胞克隆,72 h后对感染细胞克隆进行间接免疫荧光分析及子代病毒滴度检测,结果显示,在所获得的5株细胞克隆中,有3株细胞上猪瘟病毒的增殖明显降低,表明所构建siRNA双表达载体转录产生的siRNA可以有效抑制CSFV的复制。本试验为研究猪瘟病毒的防治和通过RNAi建立猪的抗病育种提供了新的方法。

逆转录病毒载体RNAi技术抑制猪瘟病毒在猪胚胎成纤维细胞的增殖

利用针对猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)石门株Npro基因mRNA的shRNA逆转录病毒表达载体,转导猪胚胎成纤维细胞,在G418的筛选压力下,获得7个稳定整合shRNA表达构件的猪胚胎成纤维细胞株。以100TCID50的CSFV分别感染96孔板内的上述细胞克隆,72h后以对感染细胞克隆进行间接免疫荧光分析及子代病毒滴度检测,结果显示,在所获得的7个抗性细胞株中,有3株细胞上猪瘟病毒的增殖显著降低,表明所构建的针对猪瘟病毒Npro基因mRNA的shRNA逆转录病毒整合细胞基因组后转录产生的siRNA可以有效抑制CSFV的复制。

附子对神经病理性疼痛大鼠的影响

目的:观察附子对大鼠坐骨神经分支选择性损伤(SNI)模型神经病理性疼痛的镇痛作用。方法:成年雄性SD大鼠60只随机分为5组(n=12),建立SNI模型,于术后第5天分别给予生理盐水1mL(组Ⅰ),附子0.5g/kg(组Ⅱ),1g/kg(组Ⅲ),2g/kg(组Ⅳ),4g/kg(组Ⅴ)溶于1mL生理盐水中灌胃,观察给药前和给药后0.5、1、2、3h不同时间点各组大鼠机械性缩足反射阈值(MWT)及热缩足反射维持时间(TWD)的测定值,各组大鼠分别于术后7、14、21天处死大鼠,并取大鼠腰段脊髓采用双抗体夹心ELISA法测定细胞因子的含量。结果:与组Ⅰ比较,给药1h后组Ⅲ,Ⅳ,Ⅴ的MWT升高,且TWD缩短;组Ⅱ的MWT及TWD差异无统计学意义。组Ⅲ,Ⅳ,Ⅴ于术后7、14、21天的细胞因子TNF-α,IL-1β和IL-6的含量明显低于组Ⅰ,组Ⅱ术后21天的细胞因子含量低于组Ⅰ。结论:附子能明显缓解SNI大鼠的机械和热痛觉过敏现象,达到镇痛效果,同时能使脊髓细胞因子的表达减少。

抗菌肽天蚕素B基因的克隆及其在山羊乳腺中的暂态表达

根据已发表的天蚕素B的cDNA序列化学合成4条引物,以重叠延伸PCR的方法合成了真核细胞偏爱密码子编码的抗菌肽天蚕素B基因,将其克隆于pMD18-T载体,DNA序列分析证实合成的抗菌肽基因的碱基序列与设计的序列完全一致。利用山羊-β酪蛋白基因5′侧翼调控序列和真核基因表达载体pIRES1-neo,构建抗菌肽天蚕素B的乳腺组织特异性表达载体pbCP-cpin,将该载体溶于生理盐水,注入处于泌乳期的成年母山羊乳腺组织进行暂时表达。通过对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑菌试验确定了抗菌肽天蚕素B基因在山羊乳腺中的表达和抗菌活性。本试验建立了抗菌肽天蚕素B的乳腺瞬时表达系统,为验证各调控元件以及抗菌肽基因在转基因动物乳汁中分泌表达的有效性和可行性提供了一个快速检测系统。

丙戊茶碱对神经病理性疼痛大鼠的镇痛作用及机制

目的观察丙戊茶碱对大鼠坐骨神经分支选择性损伤(SNI)致神经病理性疼痛的镇痛作用。方法将96只雄性SD大鼠随机分4组:假手术组(Sh)、模型组(S)、鞘内注射丙戊茶碱组(P1)及腹腔内注射丙戊茶碱组(P2)。其中S组和P1组造模后分别单次鞘内注射盐水20μl和丙戊茶碱20μ(l0.05μg/μl);P2组造模后单次腹腔内注射丙戊茶碱1ml(1mg/kg)。记录全组动物术前1d及术后1,3,7,14,21d的机械缩足反射阈值(MWT)和热缩足反射维持时间(TWD),并在术后各时点随机选6只大鼠,取脊髓腰膨大,用免疫印迹法检测腺苷A1受体(A1-AR)蛋白量的变化,用ELISA法检测TNF-α和IL-1β含量的变化。结果S组术后出现明显的MWT下降和TWD延长,与术前及Sh组术后各时点比较有显著性差异(P<0.05)。与S组比较P1、P2组行为学指标的变化幅度大(P<0.05),且P1组行为学指标的变化幅度大于P2组。S组TNF-α和IL-1β的含量术后均增加,与Sh组比较差异有统计学意义(P<0.01);P1和P2组TNF-α和IL-1β的含量升高的幅度小,与S组比较有统计学差异(P<0.05);P1、P2组腺苷A1受体的表达量升高明显,与S组比较有统计学差异(P<0.05)。结论丙戊茶碱能抑制SNI大鼠炎性介质的释放,且在脊髓水平增强A1-AR的激活,对SNI大鼠神经病理性疼痛的抑制发挥重要的作用。

牛气管抗菌肽在山羊乳腺组织中的表达

根据已经发表的牛气管抗菌肽(bTAP)cDNA序列设计4条短的寡核苷酸片段,以重叠延伸PCR的方法合成bTAP基因,将其克隆至pMD-18T载体,序列测定正确后,构建bTAP基因的乳腺组织特异性表达载体pBcp-bTAP,将其溶于生理盐水后直接注射山羊乳腺小叶,使bTAP基因在乳腺组织内表达,收集注射质粒前后的奶样,测试奶样对金黄色葡萄球菌,大肠杆菌的抑制能力,结果显示注射pBcp-bTAP后的奶样表现出对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌具有明显的抑制作用,这种抑制活性可以持续至20h以上。

逆转录病毒介导的天蚕抗菌肽B在奶牛乳腺中的表达

为了研究天蚕抗菌肽在奶牛乳腺组织长期表达的可行性以及对大肠杆菌的抑制作用,将天蚕抗菌肽B(cecropin B,CB)的基因序列以哺乳动物偏爱的密码子优化后,合成了四条相互重叠的DNA片段,通过重叠延伸PCR法获得了天蚕抗菌肽B的基因,将其亚克隆至T载体,测序正确后构建逆转录病毒载体pLNCX-bCP-cecB,经过包装细胞的包装,获得含有天蚕抗菌肽B表达框的逆转录病毒,注射入奶牛乳腺组织,通过琼脂板孔穴扩散法检测基因的表达及活性;实验结果表明,克隆的抗菌肽基因在乳腺中获得了表达,表达产物对大肠杆菌具有抑制作用,抑制效果可以持续至13天以上。

欧洲鳗鲡外周血细胞的显微和超微结构

利用光镜和透射电镜技术研究了欧洲鳗鲡 (Anguillaanguilla)外周血细胞的显微和亚显微结构。结果表明 :在外周血细胞中可区分出红细胞、单核细胞、大淋巴细胞、小淋巴细胞、嗜中性粒细胞和血栓细胞 ;嗜中性粒细胞内的特殊颗粒包括A、B、C三型 ;嗜中性粒细胞分为Ⅰ型粒细胞 (内含A、B、C三种特殊颗粒 )、Ⅱ型粒细胞 (内含A型和C型两种特殊颗粒 )和Ⅲ型粒细胞 (内含C型特殊颗粒 )。还见到幼稚的和正在分裂的红细胞和单核细胞 ,提示幼稚的红细胞能直接进入外周血流中。嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞无论在血涂片上或超薄切片上均未见到。描述了上述各种血细胞在光镜和电镜观察下的形态和细微结构。血栓细胞体积最小 ,嗜中性粒细胞体积最大 ;淋巴细胞数目最多 ,嗜中性粒细胞数目最少。

猎豹与虎猫杯状病毒的分离及其超变区基因比较研究

用F8 1细胞从上海某动物园患口腔溃疡的猎豹和虎的唾液病料中分离获得两株杯状病毒 ,经形态学、理化学、生物学鉴定和病毒核酸超变区基因RT_PCR扩增与序列测定证明两株病毒均为猫杯状病毒 (FCV) ,分别命名为FCV/cheetah/Shanghai/ 0 2 / 2 0 0 2与FCV/tiger/Shanghai/ 0 3/ 2 0 0 2。人工感染猫可引起体温升高 ,口腔溃疡 ,食欲下降等症状。两株病毒的超变区序列 5 2 0bp长片段间的同源性为 99.2 % ,与国内桂林虎分离株 (TFCV9710 )的同源性为 74 .0 % ,与国外分离株的总体同源性为 5 8.1% ,说明不同宿主或同种不同个体间杯状病毒分离株超变区核酸差异十分显著 。

经皮穴位电刺激预防老年患者术后谵妄的研究进展

术后谵妄(POD)是一种术后发生的急性波动性脑功能障碍综合征,主要表现出意识、注意力、记忆力、思维能力、情绪、认知和睡眠周期障碍,是老年患者最常见的且危害较大的术后并发症。目前临床防治POD的药物多以抗精神病药物和右美托咪定为主,但使用时需要警惕其潜在的心血管并发症和死亡风险。欧洲麻醉学会(ESA)提出POD的预防和治疗重在针对其危险因素进行非药物干预,而非药物治疗。经皮穴位电刺激(TEAS)作为一种新型针灸疗法,其在围手术期的应用已成为国内外研究热点。本文将总结并阐述POD危险因素、作用机制及TEAS防治术后谵妄的相关研究,为具有发生POD风险的患者提供一种新的预防措施。

乳铁蛋白肽基因的合成及其在动物乳腺中的表达

根据已发表的编码牛乳铁蛋白肽（LfcinB）25个氨基酸的mRNA序列，设计了4条用于合成牛乳铁蛋白肽全基因的引物，用重叠延伸PCR法合成149bp的牛乳铁蛋白肽基因（包括牛乳铁蛋白信号肽序列、上下游酶切位点和终止密码子），并将此基因克隆到载体pI-B，获得了乳腺特异性表达质粒pI-BL，该质粒经生理盐水稀释后直接注入稳定泌乳期奶山羊和奶牛乳腺组织（注射量为400μg），以琼脂板溶圈法检测奶样抑菌活性。结果显示，注射后3～48h，奶样有明显抑菌活性，其中3～9h抑菌活性最高。

欧盟REACH法规对中国纺织工业的挑战及应对措施

REACH法规将于2007年6月1日实施,并替代欧盟现有的40多项有关化学品的指令和法规,成为欧盟一个庞大繁冗的新化学品管理体系。据初步估算,我国仅纺织行业所受的影响将达到几十亿,甚至上百亿美元,由此将改变我国纺织工业在国际贸易市场竞争中的地位和格局。本期编发此文,旨在介绍REACH法规产生的背景、目的、特点和主要内容,分析研究该法规对我国纺织工业的挑战及应对措施。