文蛤(Meretrix petechialis)多种游离氨基酸含量的综合评价

为了明确文蛤游离氨基酸的组成、含量及其风味特性,本研究以文蛤的11个全同胞家系为研究对象,利用氨基酸自动分析仪测定文蛤足组织中游离氨基酸的种类和含量,通过主成分分析、TOPSIS分析进行综合评价。结果显示,文蛤家系游离氨基酸总量均在473~816mg/100g,均值为638mg/100g。呈鲜味氨基酸含量为270~570 mg/100g,占总含量的56.0%~70.8%,是最主要的呈味氨基酸。15种游离氨基酸通过主成分分析提取到2个主成分,其累积方差贡献率为89.54%,可代表文蛤中游离氨基酸的综合信息。游离氨基酸T值较高的家系依次是22A8、22A5、22A1和22A6,与TOPSIS分析结果一致。结果表明上述4个文蛤家系可作为游离氨基酸含量综合性状突出的优良种质资源用于文蛤的选育工作。

微卫星标记应用于凡纳滨对虾家系鉴别的研究

以人工选育建立的凡纳滨对虾(Litopenaeusvannamei)全同胞家系为实验材料,探讨了微卫星标记对混养家系进行亲权鉴定的可能性。Cervus模拟分析表明从10个微卫星基因座组合中选取的多态性信息含量最高的6个进行组合与原组合的累积排除概率均在0.99,多态性信息含量最高的6个基因座的组合判定正确率为0.97,置信度为95%。在家系混养的模拟实验中使用这6个高多态性的微卫星基因座从20个候选雌虾中找到真正母亲的概率为88%,从30个候选雄虾中找到真正父亲的概率为78%,低于理论预测值,分析可能与微卫星基因座中的无效等位基因、等位基因的突变以及PCR过程中Taq酶发生链滑移等因素有关。

应用微卫星标记分析野生中国明对虾的亲权关系

利用5个高度多态性的微卫星座位(Fc04、Fc06、Fc18、Fc24、Fc27),分析了不同年份中建立的10个野生中国明对虾家系中的雌性亲虾及其后代基因型分离的情况,表明每个家系中只有一个雄性野生中国明对虾对子代的遗传有贡献。从其中3个家系的雌性亲虾纳精囊中提取了雄虾精子DNA,微卫星标记显示各家系的子代个体均有一个等位基因与雄性亲虾的基因型相符,且符合孟德尔遗传规律,这为野生中国明对虾雌虾在繁殖季节一对一的繁殖行为提供了遗传学的证据。用UPMGA的方法随机对3个家系的40尾子代个体进行聚类分析,每个家系都能被单独聚成一类。上述工作表明微卫星标记在对虾育种中作为一种有效的亲子关系分析工具,在种群的遗传结构、亲缘关系、繁殖行为等方面具有广阔的应用前景。

凡纳滨对虾繁殖中不同亲本对子代遗传贡献率的差异

利用5个含有稀有等位基因的高度多态性微卫星位点比较了凡纳滨对虾繁殖中不同亲本对子代遗传贡献率的差异。通过稀有等位基因的5个微卫星位点能够对亲代和子代的谱系进行明确的鉴别。10个亲代个体中有8个个体对子代群体的基因库有贡献,不同个体之间的贡献率存在差别,最高为54.28%,最低为8.57%。在亲代和子代群体遗传结构的分析中,子代等位基因的数目与亲代相比降低了11.11%。子代的平均期望杂合度(He)、平均观测杂合度(Ho)和平均多态性信息含量(PIC)等指标均低于亲代。实验结果表明:亲本对子代基因库的贡献率的差异也是造成子代群体遗传变异水平降低的原因之一;微卫星标记可作为一种有效的工具用于对虾系谱的确认。

樱桃属种间杂种的早期分子鉴定

通过剥蕾反复授粉克服欧洲甜樱桃与毛樱桃种间杂交障碍,采用胚培养的方法克服了远缘杂种在自然状态下胚败育的情况发生,获得了以甜樱桃先锋为母本,以毛樱桃为父本的杂种G3.本实验利用AS-PCR技术将S等位基因作为樱桃砧木辅助育种中的分子标记,对获得的远缘杂种在苗期进行S基因型鉴定.结果表明,G3的确是远缘杂交的新种质,RAPD分析显示G3同时具有母本和父本的特征随机扩增DNA片段,进一步证实了AS-PCR方法的可靠性.通过远缘杂交的育种能够有效地扩展樱桃砧木的遗传背景,另一方面利用分子标记的手段在苗期即可进行预先选择和鉴定.

钾对苹果树水分利用效率及有关参数的影响

以2年生盆栽新红星／平邑甜菜苹果树为试材，初步探讨了土壤不同水分状况下钾对水分利用效率（WUE）及有关参数的影响，结果表明，充足供水时，施钾肥植株的气孔导度（Gs）为增大，光合速率（Pn）和蒸腾速率（Tr）同时被提高，但Tr的提高幅度更大，导致了WUE的降低；土壤干旱时，钾可明显提高植株的WUE，不同处理的WUE大小顺序为：高K＞中K＞低K＞CK，植株施钾肥后，Gs增大，Pn被提高，但Tr却下降，说明WUE的改善是通过提高光合和降低蒸腾两条途径实现的。

不同品种苹果树水分利用效率及有关参数的日变化

以１０年生苹果树为试材，探讨了几个品种的水分利用效率（ＷＵＥ）及有关参数的日变化，结果表明：①对ＷＵＥ而言，充足供水时，新红星＞富士＞红星；土壤干旱时，富士＞红星＞新红星。②土壤干旱时，富士的Ｐｎ和Ｐｎ／Ｃｉ较高，而Ｔｒ较低，说明富士对水分状况的反应较迟钝。③新红星的高Ｐｎ需以较高的Ｔｒ为代价。④无论是充足供水还是土壤干旱，富士的Ｇｓ始终远远小于新红星和红星，这对提高ＷＵＥ十分有利。

线粒体基因片段在梭子蟹系统发育及物种鉴定中的应用

测定三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)9个个体COI基因部分序列467 bp,7个个体16 S rRNA基因部分序列519 bp,同时测定样品蟹1个个体COI基因部分序列468 bp。结合GenBank中收集的梭子蟹科COI,16 S rRNA两个基因所有同源序列信息,使用Kimura双参数模型采用邻接法(NJ)、最大简约法(MP)构建梭子蟹科分子系统发育树;将样品蟹测得的COI基因序列和已知属的其他蟹同源序列(429 bp)进行比对分析。结果分析表明:两个基因片段序列平均碱基AT数量分数都明显高于GC数量分数;梭子蟹属与美青蟹属关系最近,属应为区别于梭子蟹属、美青蟹属、青蟹属的另一支,支持属应划分在短桨蟹亚科的观点;根据遗传距离以及转换/颠换(R)值分析,判定出样品为锐齿。本试验运用线粒体基因片段探讨了梭子蟹类的系统发育关系以及样品蟹的种类鉴定,为线粒体基因片段在梭子蟹的物种鉴定和系统发育重建中的开发和利用提供重要参考。

土壤干旱时苹果果实对叶片水分利用效率的影响

以盆栽新红星苹果树为试材 ,研究了土壤干旱条件下果实对水分利用效率(WUE)及有关参数日变化的影响。结果表明 :有果短枝叶的 WUE高于无果短枝叶 ,有果短枝叶的叶水势 (Ψ w)和相对含水量 (RWC)高于无果短枝叶。果实对

氮对苹果幼树水分利用效率的影响

以 2年生盆栽新红星 /平邑甜茶苹果树为试材 ,初步探讨了土壤不同水分状况下氮肥对植株水分利用效率 (WUE)及有关参数的影响 .结果表明 ,充足供水时 ,随施N量的增加 ,植株WUE降低 ,施N导致气孔导度(Gs)增大 ,对蒸腾 (Tr)的提高幅度大于光合 (Pn) ;供水不足时 ,施N植株的WUE明显高于对照 ,不同施N水平的WUE表现为 :高N >中N >低N ,WUE改善是由于叶肉羧化能力提高 ,导致光合增强 .

褐藻胶的酶法提取研究

采用纤维素酶、果胶酶和蛋白酶酶解法提取了海带褐藻胶,并对工艺进行了优化。试验结果表明:加入海带干重的2%纤维素酶,55℃(pH值4.5)水解20min,然后加入1%果胶酶60℃(pH值4.5)浸提1.5h,再加入1%蛋白酶,80℃(pH值8.0)水解3h,接着将浸提液加热至沸腾10min钝化酶活,最后加入1mol/L氯化钙(浸提液:氯化钙=4:1(v/v),离心沉淀后即得褐藻酸钙沉淀,加入次氯酸钠漂白后经盐酸酸化生成褐藻酸,干燥脱水后加入稀碳酸钠溶液即制得褐藻酸钠。

苹果树不同植株类型水分利用效率的日变化

以１０年生新红星苹果树为试材，探讨了旺长树、丰稳树和衰老树３种植株类型的水分利用效率（ＷＵＥ）及有关参数的日变化。结果表明：（１）无论是充足供水还是土壤干旱，ＷＵＥ顺序均为丰稳树＞衰弱树＞旺长树；（２）土壤干旱提高了旺长树的ＷＵＥ，而降低了丰稳树和衰弱树的ＷＵＥ；（３）土壤含水量的降低对光合的负影响旺长树最小、丰稳树次之，衰弱树最大。

甜樱桃S基因型PCR鉴定技术研究

绝大部分甜樱桃品种自交不亲和,因此自交不亲和基因型的鉴定对于生产具有重要的意义。以甜樱桃主栽品种为试材,建立基于PCR技术的甜樱桃品种S基因型鉴定技术。试验根据已发表的樱桃S基因序列设计了2对引物组合BFP73/74,BFP93/94,结合S1、S5基因的特异扩增引物,利用扩增片段长度的不同,就可以对樱桃品种的S基因型进行鉴定。通过对已知S基因型品种基因组的扩增,最终建立了基于PCR技术的甜樱桃品种S基因型鉴定技术。

HiPAC系统的分析与优化

在对HiPAC系统进行分析的基础上,提出了在规则管理器内添加全局事件探测器,用于探测全局事件历史的优化方法,同时对规则管理器内每一条规则的事件部分增添一个度量参数与之相对应.这种方法能够有效地探测复合事件,实现了在HiPAC系统内部复合事件的探测及控制.

基于COI和ITS-1基因对魁蚶野生群体和人工繁育子代的遗传分析

采用线粒体COI基因和核糖体第一内转录间隔区ITS-1基因,对荣成(RC)和即墨(JM)2个魁蚶(Scapharca broughtonii Schrenck)野生地理群体及一个人工繁育的即墨子代(JZ)群体,进行遗传多样性和遗传结构分析,探讨即墨人工繁育的子代作为荣成魁蚶底播增殖苗种的可行性。分子方差分析(AMOVA)结果表明,3个群体的遗传差异主要存在群体内。荣成野生群体和即墨野生群体间的Fst值,基于COI基因和ITS-1基因分别为0.1678和0.1193,表明荣成野生群体与即墨野生群体之间存在中等程度的遗传分化。单倍型多样性和核苷酸多样性分析结果表明,人工繁育的即墨子代群体的遗传多样性明显降低。荣成野生群体与即墨子代群体之间的遗传差异,较之与即墨野生群体间的遗传差异更大。如果采用即墨子代在荣成底播,可能会对荣成野生魁蚶野生群体的遗传结构产生一定影响,因此,采用即墨人工繁育子代作为荣成魁蚶底播增殖的苗种来源时必须十分慎重,并在苗种繁育时尽量采用大群体有效亲本。

文蛤早期发育阶段生长性状遗传参数的估计

采用部分因子设计构建了23个全同胞家系,应用单性状及两性状动物模型对文蛤（Meretrix meretrix）早期不同生长发育时期的生长性状进行遗传力和相关性估计。结果表明,文蛤附着变态期以及稚贝期生长性状的遗传力并无显著差别,在0.11～0.41范围内变化,属于中等遗传力。非遗传的共同环境效应随着年龄的增长而呈现上升趋势,由附着变态期的0.02逐渐增加到稚贝期的0.38,且稚贝期的共同环境效应显著大于其附着变态期（P〈0.01）。壳长与壳高表型相关和遗传相关的分析结果显示,从附着变态期到稚贝期,壳长与壳高之间的表型相关及遗传相关都存在极显著的正相关性,相关系数的范围分别为0.84～0.95、0.93～0.99。早期发育连续时间段生长性状之间的遗传相关均为正相关,但并不显著,且不同时期的遗传相关也不尽相同（0.34～0.71）。

副溶血弧菌攻毒过程中文蛤肝胰腺弧菌载量变化的分析

文蛤(Meretrix petechialis)是我国一种重要的海水养殖贝类,其养殖过程中病害导致的规模性死亡时有发生,已有的工作证实致病性弧菌是导致文蛤大规模死亡最为常见的病原。在本研究中,我们通过浸泡感染实验模拟了文蛤在自然条件下的弧菌胁迫环境,明确了攻毒水体中弧菌生长变化规律;攻毒过程中宿主载菌量分析显示,文蛤肝胰腺组织弧菌载量在攻毒后呈第1天急剧上升,第3天迅速下降的变化趋势,而且不同个体间载菌量差异较大;通过不同弧菌含量攻毒实验,发现在攻毒早期文蛤体内弧菌载量与水体环境的弧菌含量之间呈显著的正相关(Spearman’sρ=0.899,P=0.000),而在感染中后期不同攻毒强度组之间无显著差异,且呈现较低水平,为0~205CFU/mg,预示着宿主免疫系统和肝胰腺微生物群落可将致病菌的数量控制在一定的范围。上述研究为开展文蛤感染发病过程中弧菌载量和免疫抗性评价相关研究提供了参考。

在Win95下,Word、Excel的安全问题

文档的安全是每个使用计算机的人都关心的话题，如何在Ｗｉｎ９５下给文件目录加密，如何防止他人打开自己的文档，怎样防止他人改动，如何在编辑过程中最大限度地保护工作簿的数据安全，这些都是经常遇到的问题，笔者介绍一些这方面的经验和技巧，与同业探讨、交流。１在...

文蛤浮游期发病幼虫细菌群落分析和致病菌的分离鉴定

为研究文蛤育苗过程中幼虫病害及其主要致病菌,实验通过构建细菌16S rDNA克隆文库、病原菌分离纯化、人工感染和药敏实验等方法对育苗场发病的浮游期文蛤壳顶幼虫样品进行了系统分析。结果显示,发病的文蛤壳顶幼虫细菌群落多样性低,地中海弧菌占比高达75%以上,推断其可能为引发此次幼虫发病的主要致病菌。从发病幼虫的匀浆组织中分离获得该优势菌株,测序及系统发育鉴定为地中海弧菌。人工感染实验确定了其致病性,菌株US2-01在1.0×10^(6) CFU/mL的菌液浓度下浸泡感染文蛤浮游幼虫,96 h累计死亡率为84%。药敏实验表明,地中海弧菌菌株US2-01在12种抗生素的测试中对常用的青霉素、氨苄西林、红霉素等抗生素具有一定的耐药性,对四环素和多西环素中度敏感,对头孢他啶、庆大霉素、卡那霉素等其余7种抗生素呈现高度敏感。本研究首次报道了地中海弧菌为文蛤浮游期幼虫致病的一种潜在病原,研究结果可为文蛤幼虫疾病研究及贝类苗种培育过程中的病害防控提供科学依据。