黑斑蛤蚧对过敏性哮喘模型小鼠治疗的药效评价

目的探讨黑斑蛤蚧对过敏性哮喘的治疗作用。方法以卵清蛋白致敏方法建立BALB/c小鼠过敏性哮喘模型,给予黑斑蛤蚧粉干预治疗。观察肺组织病理变化;检测肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸性粒细胞占白细胞总数的百分比,以及IgE水平,评价黑斑蛤蚧的药效。结果肺组织炎症改变不明显;嗜酸性粒细胞占白细胞总数百分比以及IgE水平显著低于实验对照(P<0.05)。结论黑斑蛤蚧对哮喘具有较好的治疗作用。

纤维蛋白原平板法测定水蛭素活性

目的:报告一种新的水蛭素活性测定方法——纤维蛋白原平板法。方法:以纤维蛋白原作为底物,在纤维蛋白原平板上进行免疫扩散反应,精确测量沉淀圈直径,绘制标准凝血酶活力标准曲线。在标准曲线上查出凝血酶与水蛭素反应后的剩余凝血酶活力,计算出水蛭素活性。结果:系列活力浓度10、5.0、2.5、1.25、0.625、0.3125NIH/ml的标准凝血酶其免疫扩散沉淀圈直径与酶活力呈良好的线性关系(r=0.9959)。结论:采用系列活力浓度的标准凝血酶与被水蛭素抑制后的剩余凝血酶同在一块纤维蛋白原平板上进行免疫扩散反应的方法,实验成本低,操作简便,结果客观,准确度较好。

α-银环毒素-转铁蛋白偶联物镇痛作用的研究

目的研究α-银环毒素 -转铁蛋白偶联物镇痛作用。方法应用生物素 -亲和素桥联作用 ,使α-银环毒素 (α-BGT)与转铁蛋白 ( transferrin)偶联 ,形成偶联物 ( Tf- α- BGT)。采用小鼠热板法测定 Tf- α- BGT的镇痛作用以及阿托品、甲基阿托品对其镇痛作用的影响。用荧光示踪实验观察其在中枢神经系统 ( CNS)中的结合位点。结果 Tf- α- BGT可通过血脑屏障产生中枢镇痛作用 ,阿托品能部分拮抗其镇痛作用 ,甲基阿托品对其镇痛作用的影响无显著差异。结论 Tf-α- BGT经受体转运透过血脑屏障产生中枢性镇痛作用 ,该镇痛作用可能与 Ach

眼镜蛇神经毒素低分子量水解物的镇痛研究

眼镜蛇神经毒素（αｃｏｂｒｏｔｏｘｉｎ 或 Ｎ Ｔ） 经胃液水解后超滤得分子量＜ ３ ０００ ｕ 低分子量αｃｏｂｒｏｔｏｘｉｎ 胃液水解物 （αｃｏｂｒｏｔｏｘｉｎ ｆｒａｇｍ ｅｎｔ， Ｎ Ｔ Ｆ）。该低分子量产物在小鼠热板及大鼠电尾嘶叫测痛实验， 都显示出明显的镇痛作用，并有剂量—效应关系。 Ｎ Ｔ Ｆ毒性比 Ｎ Ｔ 明显降低， Ｎ Ｔ Ｆ的镇痛显效时间比 Ｎ Ｔ 提前， 维持时间长，不产生耐受现象。

眼镜蛇神经毒素中枢性镇痛作用脑内受体的研究

目的 :探讨纯化的眼镜蛇神经毒素 (α- Cobrotoxin,α- CBT)中枢性镇痛作用的有关受体 ,为研究α- CBT的中枢镇痛作用机理提供依据。方法 :给大鼠腹腔注射阿托品 1m g.kg- 1或纳洛酮 3m g.kg- 1后 ,再向大鼠中脑导水管周围灰质 ( PeriaqueductalGray,PAG)微量注射 2 g/ L的α- CBT生理盐水溶液 0 .5μl (相当于 5μg.kg- 1 ) ,用光辐射甩尾法观察大鼠的痛阈变化。结果 :阿托品能明显拮抗 α- CBT的中枢镇痛作用 ,其痛阈提高抑制率为 91%。纳洛酮仅能轻度降低 α- CBT的中枢镇痛作用 ,痛阈提高抑制率为 18%。结论 :α- CBT的中枢性镇痛作用与中枢乙酰胆碱能系统密切相关 。

眼镜蛇神经毒素中枢性镇痛作用的研究

研究眼镜蛇神经毒素 α- Cobrotoxin的中枢性镇痛作用。方法 :给大鼠中脑导水管周围灰质 (Periaqueductal Gray,PAG)注射微量 α- Cobrotoxin,采用热辐射甩尾法观察中枢性镇痛作用。结果 :给予大鼠 PAG分别匀速注射 0 .5、1和 2 g/ L 3个浓度的 α- Cobrotoxin生理盐水溶液各 0 .5 μl(相当于 1.2 5～ 5 μg/ kg) ,出现痛阈明显升高 ,2 0 m in达峰值 (痛阈最大提高2 47.5 %以上 ) ,与对照组比较有显著性差异 (P <0 .0 1)。结论 :α- Cobrotoxin具有很强的中枢性镇痛作用。

蝮蛇毒中纤溶组分Ⅱ对血小板聚集的影响

目的 :研究蝮蛇毒纤溶组分 水解纤维蛋白原的作用方式以及对家兔血小板聚集的影响。方法 :采用 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS- PAGE)方法检测纤溶组分 水解纤维蛋白原的作用方式。用比浊法测定血小板聚集率。结果 :纤溶组分 能快速水解纤维蛋白原的 Aα-链和 Bβ-链 ,对γ-链无影响。 5 0 mg/ L PRP、2 5 mg/ L PRP和 12 .5 mg/ L PRP3个不同剂量的纤溶组分 对家兔血小板聚集均有抑制作用 ,并存在一定的量效关系。结论 :蝮蛇毒纤溶组分 是一种 α-纤维蛋白 (原 )酶 ,对 ADP诱导的兔血小板聚集有抑制作用。

眼镜蛇毒因子对豚鼠-大鼠异种心脏移植的影响

目的 :研究眼镜蛇毒因子 (CVF)对豚鼠 -大鼠非协调性异种心脏移植的影响 ,探讨其应用的可能性。方法 :给受者大鼠进行 CVF (16 0 μg/ kg)、CVF+ CYP(16 0 μg/ kg+ 2 0 m g/ kg)、CYP(2 0 mg/ kg)腹腔注射处理 ,耗竭其体内补体 ,随后对耗竭体内补体的受者大鼠进行颈部豚鼠 -大鼠异种心脏移植。测定移植供心的存活时间。结果 :经 CVF处理后移植供心存活时间获得延长至 (36 .3± 5 .1) m in。加用环磷酰胺 (CYP)延长尤为明显 [(5 3.4± 7.4) m in],CYP对移植供心存活时间也有一定的延长作用 [(31.7± 6 .0 ) min]。结论 :CVF可延长供心的存活时间 ,对非协调性异种心脏移植具有一定的应用价值。

眼镜蛇毒因子与中性白细胞吞噬功能的量效关系

目的：探讨眼镜蛇毒因子与中性白细胞吞噬功能的量效关系。方法：蛇毒抗补体因子（ＣＶＦ）的分离、纯化及活力测定分别参照舒雨雁和Ｔａｋａｈａｃｈｉ等报道的方法，中性白细胞吞噬功能的测定参照张明安的方法。结果：眼镜蛇毒中分离纯化的抗补体因子相对分子质量为２２５～２３０ｋｕ，抗补体活力为８１．９６Ｕ／ｍｇ，五个不同剂量ＣＶＦ对豚鼠中性白细胞吞噬率均有不同的下降。结论：ＣＶＦ消除补体后，使豚鼠中性白细胞的体外吞噬功能下降，并存在一定的量效关系。

广西菲牛蛭消化液中抗凝物质的分离纯化

目的从广西菲牛蛭中分离纯化抗凝物质,并对其生化性质进行测定。方法用三氯醋酸沉析、离子交换、凝胶过滤和高效液相色谱法分离纯化广西菲牛蛭消化液中的抗凝物质,用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定其蛋白质的相对分子质量(Mr),用等电聚焦法测定蛋白质的等电点。结果从广西菲牛蛭中分离出2种抗凝物质———菲牛蛭素A(BDA)和菲牛蛭素B(BDB),BDAMr约为15 200,等电点为3.97;BDBMr为14 600,等电点为4.61。每1 000 mL菲牛蛭消化液(含抗凝活性10 ATU/mg)可分离出BDA 630μg,收率约为0.303%,比活为2 777.8 ATU/mg,活性收率约为27.8%;BDB 615μg,收率约为0.300%,比活为2 845.5 ATU/mg,活性收率约为28.4%。结论从广西菲牛蛭消化液中分离出的BDA,BDB对凝血酶具有极强的抑制作用,具有广阔的运用前景。

菲牛蛭素体内外抗凝实验研究

目的:研究广西菲牛蛭中提取的两种菲牛蛭素———菲牛蛭素A(BufrudinA,BA)和菲牛蛭素B(BufrudinB,BB)在人体外及动物体内的抗凝作用。方法:观察菲牛蛭素在人体外及动物体内对部分活化凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)的影响。结果:在体内外实验中,BA、BB均能明显延长活化部分APTT、PT及TT,但两者的三个指标有明显差异性,其中BA对TT的作用最显著,BB则对PT的作用更强。结论:广西菲牛蛭中的抗凝物质BA、BB在体内外均有较强的抗凝活性。

广西眼镜蛇毒细胞毒素-1对人肝星状细胞LX2的选择性抑制作用

肝纤维化是肝硬化、肝癌和肝功能衰竭的共同病理基础和必经阶段,特征是肝内细胞外基质(extracellular matrix,ECM)过度沉积。肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)是合成ECM的关键细胞,因此抑制其增殖并诱导其凋亡是抗肝纤维化的关键[1]。细胞毒素(cytotoxin,CTX)是眼镜蛇毒的主要活性成分,生物活性多样,对多种细胞均具有细胞毒性[2],在抗肿瘤研究中具有广阔的应用前景[3]。

牡蛎活性肽对人舌鳞癌Tca8113细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨牡蛎活性肽BPO G50-Ⅱ对人舌鳞癌Tca8113细胞增殖和凋亡的影响。方法不同浓度BPOG50-Ⅱ作用于体外培养的人舌鳞癌Tca8113细胞,作用24、48、72 h时计数拒染活细胞数,计算生长抑制率(IR)和IC50。采用光镜、电镜观察48 h后细胞形态及超微结构变化;荧光染色法观察BPO G50-Ⅱ作用后的凋亡情况。结果BPO G50-Ⅱ作用后IR明显降低,呈剂量与时间依赖性;24、48、72 h的IC50分别为1.50、0.57、0.20 g/L;电镜观察细胞出现明显凋亡,荧光显微镜下见细胞出现凋亡改变。结论牡蛎活性肽对人舌鳞癌细胞株Tca8113体外增殖具有抑制作用,可引起细胞形态学改变并能诱导其发生凋亡。

一种检测凝血酶、类凝血酶的新方法——纤维蛋白原平板法

目的:创建一种定量检测凝血酶(Thrombin)、类凝血酶(Thrombin-likeenzymes)活性的新方法——纤维蛋白原平板法。方法:采用纤维蛋白原作为底物,用琼脂糖与纤维蛋白原制作成纤维蛋白原平板,以凝血酶、类凝血酶标准品分别在该平板上的扩散反应,制作相应的标准曲线及回归曲线,并对凝血酶、类凝血酶活性作定量测定。结果:本法制作的凝血酶、类凝血酶检测标准曲线具有良好的线性关系(r=0.9994、r=0.9997)。结论:纤维蛋白原平板法可用于凝血酶、类凝血酶定量测定。具有操作简便、直观、稳定、敏感度高,不受检品浊度或颜色干扰且成本低廉等特点。

神经生长因子的提取及其对MGC-803细胞的凋亡作用

目的:从广西眼镜蛇蛇毒中提取神经生长因子(nerve growth factor,NGF)并探讨其对人胃癌MGC-803细胞的生长抑制作用。方法:①粗毒采用Sephadex G75凝胶过滤及CM Sepharose CL-6B阳离子交换柱进行分离纯化,洗脱峰用大鼠嗜铬神经瘤细胞(PC12细胞)测定活性,通过SDS-PAGE测定纯度和相对分子质量;②采用MTT法,以NGF浓度分别为7.5、15、30、60、120mg/L处理人胃癌MGC-803细胞24h,观察不同浓度NGF对MGC-803细胞的毒性和生长抑制率;③采用AO/EB双重染色法,NGF浓度分别为25、50、75mg/L,观察不同浓度NGF作用后细胞染色及形态的变化,计算细胞凋亡率;④An-nexin V-FITC/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡率变化。结果:①所得NGF为单一组分,SDS-PAGE结果为一条带,相对分子质量约为23000,对PC12细胞有良好的促进分化作用;②NGF对MGC-803细胞的生长有抑制作用且呈剂量依赖关系,作用24h的IC50值为49.9mg/L;荧光显微镜下可观察到凋亡细胞主要特点为:细胞体积缩小,染色质固缩,橘红色荧光增强,各浓度组与对照组的细胞凋亡率比较有明显差异(P<0.01);流式细胞仪检测到早期细胞凋亡率随NGF浓度的增高而增加,各浓度组与对照组的细胞凋亡率比较有明显差异(P<0.01)。结论:采用Sephadex G75凝胶过滤及CM Sepharose CL-6B阳离子交换柱提取得到的眼镜蛇毒NGF能诱导人胃癌MGC-803细胞凋亡且呈剂量依赖关系。

电子音乐在影视配乐中的运用——以Hans Zimmer的作品为例

随着科技的迅速发展,各种新兴的电子音乐技术不断地被运用到音乐创作中,极大地丰富和拓展了已有的音乐风格和类型,使得音乐创作得到了空前的发展。电子音乐可以在音域、音色、声场等方面弥补传统音乐的不足,而传统音乐可以在人性化和感染力等方面填补电子音乐的缺点。与此同时,随着影视行业的不断发展,以及观众审美水平的不断提高,已有的影视配乐形式已不能满足行业发展和观众的视听需要。因此,在影视作品中,电子音乐的应用为影视配乐增添了新的动力。

蛇毒神经生长因子诱导PC12细胞分化超微结构的观察

目的观察蛇毒神经生长因子(Nerve growth factor,NGF)诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞系(Pheo-chromocytoma cells,PC12)细胞分化后,细胞超微结构的改变。方法取对数生长期PC12细胞接种24孔板,设200 ng/ml NGF实验组和对照组。培养72 h,离心,分别收集细胞制成电镜标本,镜下观察各组细胞超微结构的改变。结果与对照组细胞相比,实验组细胞长出大量突起,并且胞质的细胞器逐渐消失,出现较多的脂滴。结论广西眼镜蛇毒神经生长因子可以促进PC12细胞增殖,并诱导其向神经样细胞分化,长出突触。

K锉初步预备和扭矩对机用ProTaper抗折性能的影响

目的探讨K锉初步预备和扭矩对机用ProTaper抗折性能的影响。方法分别计算各组机用ProTaper器械折断或变形前所预备的S型树脂模拟根管的数目。结果 A1组(模拟根管未经K锉初步预备)S1预备了13个模拟根管;B1组(模拟根管经K锉初步预备)S1预备了36个模拟根管;A2组(低扭矩组)S2预备了17个模拟根管;B2组(高扭矩组)S2预备了18个模拟根管;A3组(低扭矩组)F1预备了14个模拟根管;B3组(高扭矩组)F1预备了14个模拟根管;A4组(低扭矩组)F2预备了6个模拟根管;B4组(高扭矩组)F2预备了6个模拟根管。结论根管经K锉初步预备可降低机用ProTaper器械折断的发生;扭矩的高低对机用ProTaper器械的抗折性能没有明显影响。

IL-2基因修饰的肿瘤细胞对小鼠体内巨噬细胞数量和功能的影响

目的 探讨IL - 2基因修饰的肿瘤细胞对小鼠体内巨噬细胞 (M)数量和功能的影响 .方法 应用腺病毒载体介导的小鼠IL - 2基因 (Ad -mIL - 2 )修饰CT2 6小鼠结肠腺癌细胞 (CT2 6 -mIL - 2 )后皮下接种小鼠 ,计数小鼠腹腔M的数量 ,观察其吞噬功能 ,混合淋巴细胞反应法 (MLR)测定其抗原提呈能力 ,MTT法检测其杀伤活性 .结果 mIL - 2基因修饰的CT2 6细胞 (CT2 6 -mIL - 2细胞 )皮下接种后 ,小鼠腹腔M数量显著增加 ,吞噬能力明显增强 ,抗原提呈能力提高 ,并具有较强的杀伤活性 .结论 CT2 6 -mIL - 2细胞分泌的IL - 2能有效地激活M ,这可能是CT2 6 -mIL - 2细胞体内致瘤性下降的原因之一 .

IL-2基因转染的肿瘤细胞增强机体免疫功能的实验研究

目的:探讨小鼠接种腺病毒介导的IL-2基因转移的CT26小鼠结肠腺癌细胞后机体免疫功能的变化(包括CTL、LAK细胞、NK细胞、巨噬细胞的杀伤活性变化)。方法:体外将腺病毒介导的小鼠IL-2基因转染CT26细胞(CT26-mIL-2),然后将CT26-mIL2细胞接种于小鼠皮下。采用4h乳酸脱氢酸释放法检测荷瘤小鼠CTL、LAK、NK细胞的杀伤活性,MTT法检测巨噬细胞的杀伤活性。结果:接种CT26-mlL-2后第14d,小鼠脾细胞NK活性和诱导后的LAK活性和CTL活性均显著高于对照组(P<0.01);小鼠腹腔巨噬细胞数量显著增加,杀伤活性显著增强(P<0.01)。结论:IL-2基因转染的肿瘤细胞能诱导机体的特异性和非特异性免疫功能参与机体的抗肿瘤作用。