改良QuEChERS技术结合超高效液相色谱-串联质谱法测定水产品中扑草净及其代谢物残留

采用改良QuEChERS技术作为前处理方法,建立了水产品中扑草净及其代谢物残留的超高效液相色谱-串联质谱分析方法。样品用乙腈提取,经增强型脂质去除吸附剂与Cleanert LipoNo组合净化,采用选择反应监测正离子模式测定,内标法定量。结果表明:扑草净及其代谢物在1.0~500 ng/mL质量浓度范围内线性关系良好,确定系数R2大于0.992,方法检出限和定量限分别低至0.20μg/kg和0.50μg/kg,在草鱼、克氏原螯虾和中华绒螯蟹等基质的加标实验中呈现良好的准确度与精密度,平均加标回收率和相对标准偏差分别为74.4%~113.7%和3.17%~11.47%。经内标法校正,5种扑草净及其代谢物在不同水产品中的基质效应不明显。方法实现了水产品中扑草净及其代谢物的识别与定量分析,并通过检测药浴扑草净的克氏原螯虾阳性样品验证了方法的适用性。

低盐和淡水养殖模式下草鱼肌肉营养和风味品质评价

为探究低盐养殖草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肌肉的品质特征,以淡水养殖草鱼(体质量为1.83 kg±0.13 kg)和低盐养殖草鱼(体质量为1.37 kg±0.21 kg)为研究对象,分析了两组草鱼肌肉营养成分(水分、脂肪、蛋白质、氨基酸与脂肪酸组成及含量)、挥发性风味物质和质构特性的差异,并进行了品质比较与评价。结果表明:低盐养殖(低盐组)草鱼肌肉中蛋白质、脂肪、必需氨基酸总量、多不饱和脂肪酸总量、EPA+DHA含量极显著高于淡水养殖(淡水组)草鱼(P<0.01),且具有较高的营养价值;1-辛烯-3-醇对两种养殖模式下草鱼的总体风味贡献最大,低盐组草鱼肌肉中呈异味的1-辛烯-3-醇、辛醛、(E,E)-2,4-癸二烯醛含量显著低于淡水组(P<0.05),具有较好的风味;低盐组草鱼肌肉的硬度和咀嚼性均显著高于淡水组草鱼(P<0.05),具有较好的口感。研究表明,低盐养殖草鱼的营养和风味品质均优于淡水养殖草鱼,具有更高的食用价值。

改良QuEChERS技术测定水产品中甲胺磷残留及不确定度评定

【目的】准确评估全国稻渔共生体系水产品的质量安全水平,保障水产品食用安全,维护渔业的健康可持续发展。【方法】选取稻田水产品克氏原螯虾(Procambarus clarkii)、鲤(Cyprinus carpio)和中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)为样品基质,有机磷类杀虫剂甲胺磷为研究对象,以甲胺磷良好的色谱分离效果及质谱响应强度筛选适宜的仪器测定条件,基于改良的QuEChERS技术,通过对比分析乙腈、乙酸乙酯、酸化乙腈、酸化乙酸乙酯等不同提取溶剂,PSA、C18、无水硫酸镁、Cleanert LipoNo等不同净化试剂组合,以及不同氮吹温度对甲胺磷加标回收率的影响,优选最佳的前处理方法,建立超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法,以准确测定水产品中甲胺磷的残留量,并评估其样品前处理及仪器分析等不同药物残留测定环节引入的测量不确定度,为下一步优化测定步骤、提升检测数据的准确性提供依据。【结果】试样优选乙腈提取,Cleanert LipoNo净化,40℃氮吹浓缩,Waters Acquity UPLC BEH C18色谱柱分离,外标法定量。甲胺磷在0.1~50.0µg·L^(−1)范围内线性关系良好(R 2=0.9992),检出限和定量限分别低至0.25、0.5µg·kg^(−1),平均回收率为82.1%~96.5%,相对标准偏差小于11%。水产品中甲胺磷残留测量不确定度的主要来源为标准曲线拟合和回收率;其次为标准系列溶液配制、样品重复测定、样品称量和样品前处理过程;定容体积产生的误差最小。【结论】本研究建立的UPLC-MS/MS法基质干扰小,灵敏度优于现有文献报道,能够满足水产品中甲胺磷痕量残留的检测需求。检测过程中需重点关注和控制标准曲线拟合与回收率对结果准确性的影响,以便科学评估水产品中甲胺磷残留浓度及膳食风险。

盐碱水对鲌鲂“先锋2号”营养品质的影响

[目的]探究水体盐碱度对鲌鲂“先锋2号”肌肉营养品质的影响,为淡水鱼在盐碱水环境中养殖提供科学依据。[方法]通过在盐碱水(5‰NaCl、1‰NaHCO_(3))中暂养鲌鲂“先锋2号”0 d(对照组)、8、16、30 d,分别对其肌肉中常规营养成分、氨基酸和脂肪酸含量和组成以及肌肉质构特性进行测定。[结果]试验组8 d、16 d和30 d的鱼肉蛋白质、脂肪含量均显著高于对照组0 d(P<0.05)。肌肉中氨基酸总量、必需氨基酸总量和非必需氨基酸总量随暂养时间延长呈先升后降的趋势,在16 d时含量达到最高值。在检测到的19种脂肪酸中,16种脂肪酸含量随着暂养时间延长而显著上升(P<0.05)。盐碱水暂养30 d时,肌肉硬度和弹性显著高于对照组0 d(P<0.05),8 d时回复性显著高于对照组(P<0.05)。[结论]鲌鲂“先锋2号”可以适应盐碱环境,且盐碱水可有效提高其肌肉营养品质,改善肌肉质地,具有较高的食用价值和经济价值。根据本研究结果与实际养殖情况综合考虑,建议鲌鲂“先锋2号”在盐碱水中暂养16 d。

大口黑鲈形态特征、染色体核型及眼晶状体乳酸脱氢酶的电泳分析

旨在了解大口黑鲈(Micropterus salmoides)的种质特性,为其种质鉴定提供理论依据。采用传统形态学方法观测样品形态特征,借助肾细胞滴片空气干燥法制备染色体标本并进行核型分析,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳法研究大口黑鲈眼晶状体乳酸脱氢酶(LDH)。结果表明:大口黑鲈体呈纺锤形,口裂大,斜裂;背部黑绿色,体侧青绿;吻端至尾鳍基部有排列成带状的黑斑。鳃盖上有3条呈放射状的黑斑;背鳍鳍式D.VIII~XI-11~14;臀鳍鳍式A.III-9~12;左侧第一鳃弓外侧鳃耙数为6~7,鳔1室,脊椎骨总数30~32。染色体数目2n=46,核型公式为2m+2st+42t,臂数NF=48,未发现带有随体、次缢痕的染色体和异型性染色体,大口黑鲈进化上符合高位类群核型特征;眼晶状体中的LDH酶带5条,观察到LDHA、LDHB和LDHC 3个基因位点。综上所述,在对大口黑鲈进行种质鉴定时,建议采用多种种质鉴定技术手段系统化地考察和评价其种质状况。

基于罗氏沼虾染色体核型、同工酶及遗传多样性分析

为保护、评估及合理利用罗氏沼虾种质资源,为今后指导育种及养殖提供理论依据,以采自广西及江苏数丰良种场的罗氏沼虾为材料,采用PHA和秋水仙素肌肉注射、精巢或卵巢细胞直接制片法,对罗氏沼虾染色体核型进行了研究。采用聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳技术,分析了罗氏沼虾肌肉或鳃组织乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)、酯酶(EST)、醇脱氢酶(ADH)4种同工酶的组织表达模式,并初步分析了其生化遗传学特性及遗传结构。结果表明:罗氏沼虾为二倍体,2N=118=56M+24SM+10ST+28T,臂数(NF)为198。未发现带有随体或次缢痕的染色体及性染色体。4种酶共记录出22个等位基因15个基因位点,位点平均有效等位基因数(Ne)为1.47;4种酶有7个基因频率为0.1500~0.8500的多态位点;多态位点比例P为46.7%;平均期望杂合度(He)值为0.1917,平均观测杂合度(Ho)值为0.2611,Hardy-Weinberg遗传偏离指数(D)值为0.3797,表明其杂合子过剩及缺失现象并存,但杂合子过剩现象更突出,说明该群体遗传变异范围较宽,变异程度较大,群体遗传多样性高,可为今后的人工育种提供良好的亲本。

新疆裸重唇鱼3种同工酶的电泳分析

为了解新疆裸重唇鱼的生化遗传特性,丰富新疆裸重唇鱼种质资源研究的内容,借助聚丙烯胺凝胶对新疆裸重唇鱼5种组织(心脏、眼睛晶状体、肝脏、肾脏和脾脏)中的乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)以及酯酶(EST)进行了电泳分析。结果表明:新疆裸重唇鱼的LDH、MDH和EST同工酶系统具有个体差异性和组织特异性。组织特异性主要表现在同工酶位点表达及其表达活性程度不同两方面,可能受遗传和代谢双重调控,与各组织执行生理功能密切相关。LDH-C基因只在肝脏中表达,酶谱图上靠近阴极附近,为典型“肝带”。新疆裸重唇鱼同工酶个体差异性可能是其在漫长的进化过程中为了能适应特殊生境的需要。新疆裸重唇鱼心脏中上清液型苹果酸脱氢酶(s-MDH)最多表达出6条酶带,可能是新疆裸重唇鱼在进化过程中四倍体化使基因重复的结果。研究结果可从生化遗传角度为新疆裸重唇鱼种质资源保护利用提供一定理论依据。

克氏原螯虾生态健康养殖全程质量控制技术要点研究

随着消费者对克氏原螯虾需求量的与日俱增,其市场价值不断提升,从而为其养殖业的发展提供了前所未有的机遇和挑战。本文总结了克氏原螯虾生态健康养殖全程质量控制技术要点,围绕养殖场地建设、生态养殖环境构建、苗种选择、养殖投入品控制、优良养殖环境保持以及疾病防控等环节,针对其养殖全过程存在的安全隐患和质量控制手段进行了全面的分析,规范了克氏原螯虾生态健康养殖技术,建立健全了克氏原螯虾全程质量控制技术体系,为克氏原螯虾产业的可持续发展和消费者的食用安全提供了技术支撑。

血常规红细胞参数对地中海贫血的诊断效能分析

目的分析地中海贫血鉴别诊断中应用血常规红细胞参数检验的效能。方法研究对象为2021年1月至2023年1月在我院就诊的116例地中海贫血患者,根据所用检查方式分为观察组和研究组,将54例健康体检者纳入至对照组,观察组及研究组患者分别接受外送电泳检查及血常规红细胞参数检验,对照组体检者同时采用外送电泳检查及血常规红细胞参数检验,以基因检测为金标准,比较对照组与观察组血红蛋白电泳检查结果;比较对照组与研究组血常规红细胞参数检验结果;对比和分析血红蛋白电泳及红细胞参数检验在地中海贫血中的诊断效能。结果观察组血红蛋白F(HbF)高于对照组,血红蛋白A2(HbA2)及血红蛋白A(HbA)均低于对照组(P<0.05)。相比于对照组,研究组红细胞体积分布宽度(RDW)、红细胞平均体积(MCV)、红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)、红细胞平均血红蛋白量(MCH)、红细胞计数(RBC)及血红蛋白(Hb)水平均更低(P<0.05)。与血红蛋白电泳检查相比,血常规红细胞参数检验的灵敏度及准确度均更高(P<0.05),两种检验方法诊断特异度差异无统计学意义(P>0.05)。结论血常规红细胞参数检验在地中海贫血诊断中的敏感度和准确度均较高,操作便捷、快速,具有较高的应用价值。

7例难度较大水生动物染色体体外快速制备方法的建立

本研究介绍了7例难度较大水生动物采用活体短期注射法快速制备染色体的技术。以7例难度较大水生动物为材料,采用活体注射植物血球凝集素(PHA)和秋水仙素,空气干燥法制备染色体。结果表明:不同类的水生动物,注射部位、注射浓度、间隔时间不同,获得较多分裂相的组织(部位)不同。本研究列出适合7类水生动物体外染色体快速制备方法。该方法具有组织特异性,不需无菌操作,设备简单、操作简便;快速(2~4 h);易于掌握;稳定性好、重复性高;效果良好,可供水生动物染色体快速制备参考。制备的染色体具备进行核型分析、染色体显带处理、性别鉴定及荧光原位杂交(FISH)分析实验分析等优点。

强力霉素人工抗原的合成与抗体制备

采用改进的碳二亚胺两步法将强力霉素半抗原与载体蛋白BSA连接制备强力霉素-牛血清白蛋白(BSA-DC)人工免疫抗原,并用同样方法将强力霉素与载体蛋白OVA连接制备人强力霉素-卵清白蛋白(OVA-DC)人工包被抗原。经紫外扫描分析和动物免疫试验证实:强力霉素人工抗原合成成功,强力霉素与BSA的结合比为3∶1,经动物免疫试验所得抗血清效价为2.048×106,完全能够满足强力霉素残留的ELISA检测要求。

铜胁迫对两种不同来源长萼鸡眼草生长及氮代谢的影响

采用苗期水培的方法,研究铜胁迫和营养缺失及二者的复合作用对矿区和非矿区长萼鸡眼草生长及氮代谢的影响差异。结果表明,植物吸收的Cu绝大部分分配在植物的根部。Cu胁迫使植物组织中硝态氮(NO-3)含量和硝酸还原酶(NR)活性降低,使植物叶中铵态氮(NH+4)含量和谷氨酰胺合成酶(GS)活性升高,植物生物量减少。Cu胁迫下矿区植物叶中Cu含量、根中GS活性比非矿区的低,矿区植物叶生物量、组织中NR活性比非矿区的高。营养缺失使植物组织中NH+4含量、NO-3含量、NR活性、GS活性显著降低,根生物量显著增加,且矿区植物叶中GS活性的变化比非矿区的少。Cu胁迫营养缺失复合作用使植物组织中Cu含量、叶中GS活性显著升高,使根生物量、根中NR活性显著降低,且矿区植物叶中Cu含量增加的比非矿区的少。低营养胁迫可促进长萼鸡眼草对外源Cu的吸收,同时也刺激了植物根的生长,Cu胁迫和营养缺失环境下非矿区植物氮代谢的紊乱程度要比矿区的高,来源于矿区的植物对贫瘠和高Cu环境表现出更强的适应性。Cu及营养缺失对植物氮代谢的影响是非常复杂的,与植物组织中可利用氮和碳的改变有关,也与植物组织中酶活性的直接改变有关。

氟化物对酸浸取沸腾炉渣中铝的影响

采用酸浸取法、加入助溶剂浸取沸腾炉渣中的铝,考察了各种因素对铝浸出率的影响。实验结果表明:在球磨时间为30min、固液比(沸腾炉渣质量与酸体积之比)为1∶7、硫酸浓度为4mol/L、浸取温度为107℃、浸取时间为120min的条件下,铝浸出率最高(为29.72%);KF,NH4F,NaF,CaF2等作助溶剂可明显提高铝浸出率,且助溶剂为CaF2时的铝浸出率最高,CaF2与沸腾炉渣的质量比为0.08时的铝浸出率大于75%。

护理风险管理在重症急性胰腺炎患者连续性血液净化中的应用

目的探讨护理风险管理在重症急性胰腺炎患者连续性血液净化中的应用效果。方法选取2020年1月至2021年12月收治在成都市第二人民医院ICU的82例重症急性胰腺炎患者为研究对象,按照随机数表法分为对照组和观察组,每组各41例,两组均行连续性肾脏代替治疗(CRRT),对照组给予CRRT常规护理管理,观察组在此基础上行护理风险管理干预,比较两组患者治疗时间、效果、C反应蛋白、血淀粉酶、满意度和风险发生率的情况。结果观察组治疗时间明显短于对照组,观察组C反应蛋白明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),血淀粉酶低于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。观察组患者治疗有效率、护理满意度显著高于对照组,风险发生率明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论护理风险管理在重症急性胰腺炎患者CRRT中可以增强CRRT治疗稳定性及治疗效果,降低护理风险发生率,提高患者满意度。

分散固相萃取-液质联用法测定稻渔综合种养环境中四种农药残留

建立了液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)同时测定稻渔综合种养环境中苄嘧磺隆、双草醚、吡蚜酮和氯虫苯甲酰胺的分析方法.水样过滤后直接进样,土壤和水产品经乙腈匀浆提取,C18吸附剂净化.结果表明,在不同基质中,4种农药在各自的线性范围内线性关系良好(R2≥0. 995);水中氯虫苯甲酰胺的检出限为0.10μg·kg^-1,其它3种为0.05μg·kg^-1;土壤和水产品中氯虫苯甲酰胺的检出限(LOD)为0.20μg·kg^-1,其它3种为0.10μg·kg^-1;在不同添加水平下,4种农药的平均回收率为77.52%-93.86%,相对标准偏差(RSD)为3.73%-11.09%.

中华绒螯蟹中内源性氨基脲的产生途径研究

为探究中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)中内源性氨基脲的产生途径,以雄性及雌性个体的背部蟹壳和腹部蟹壳为研究对象,测定氨基脲在上述组织中的残留水平,分析不同部位蟹壳中的主要成分甲壳素、蛋白质及其水解氨基酸的分布规律,评估并验证其与氨基脲残留的相关性。结果显示:不同部位蟹壳中甲壳素含量与其氨基脲残留水平呈明显的正相关性,蛋白质含量及氨基酸组成与氨基脲残留水平呈负相关性,结果表明,蟹壳中的甲壳素和蛋白质及其水解氨基酸可能是导致氨基脲检出的重要因素。验证实验表明,甲壳素和氨基酸在前处理过程中能产生氨基脲,这一途径可能是导致中华绒螯蟹中内源性氨基脲残留的原因。

中华绒螯蟹中氨基脲的分布及产生机理分析

选取不同性别、重量规格为30～100 g中华绒螯蟹（Ericocheir sinensis），分别测定其不同组织中氨基脲含量，并以蟹壳中主要成分为待测物，验证氨基脲的产生与其相关性，从而探究中华绒螯蟹中氨基脲产生机理。结果表明：中华绒螯蟹肌肉、肝脏、腮、性腺等组织中均未检出氨基脲，而蟹壳中均有氨基脲检出，进一步验证氨基脲作为内源性物质普遍存在于蟹壳中；壳中氨基脲并不是由甲壳素产生，究其来源可能与壳中结合蛋白水解氨基酸的变化有关。

超高效液相色谱-串联质谱法测定稻田水产品中毒死蜱残留

以QuEChERS作为样品前处理手段,采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测技术,建立了稻田水产品中毒死蜱残留的检测方法。样品经乙腈提取,由0.2 g乙二胺- N -丙基硅烷(PSA)和1.2 g无水硫酸镁分散萃取净化,采用Hypersil GOLD C 18 色谱柱(100 mm×2.1 mm, 5 μm)进行分离,用加热大气压电喷雾电离源、正离子模式进行扫描,在选择反应监测模式下检测,基质匹配标准曲线外标法定量。结果表明,毒死蜱在0.5~100.0 μg/L 范围内线性关系良好,相关系数大于0.999;毒死蜱的加标回收率为86.2%~103.6%,相对标准偏差为3.5%~7.6%( n =6),检出限为0.25 μg/kg ,定量限为0.5 μg/kg 。该方法简单、快速、灵敏,能够满足稻田水产品中毒死蜱残留的检测需求。

大口鲇(♀)×怀头鲇(♂)杂种F_1的形态学及遗传学研究

观察了大口鲇(Silurus meridionalis)(♀)×怀头鲇(S.soldatovi)(♂)的杂交后代F1(简称杂交鲇)的形态特征,分析了其染色体核型和同工酶组织特异性。结果显示,杂交鲇形态学可数性状为背鳍D.i-6,胸鳍P.i-14～15,臀鳍A.i-76～85,须3对;染色体数目(2n)为58,核型公式为2n=24m+16sm+14st+4t,臂数(NF)为98;乳酸脱氢酶(LDH)、过氧化物酶(POD)两种同工酶在杂交鲇中具有明显的组织特异性,其中肌肉的LDH同工酶可作为鉴别杂交鲇的生化遗传标记。

长江宜昌江段几种鱼类体中六六六、滴滴涕的残留水平

利用毛细管电子捕获气相色谱法测定了长江宜昌江段采集的几种鱼样组织内六六六（HCHs）、滴滴涕（DDTs）的残留量。结果表明，在鱼体肌肉、脂肪和肝脏这三种组织中，HCHs、DDTs主要蓄积在鱼体肝脏，其次是脂肪组织，肌肉组织中残留量较低。鱼体肌肉组织中HCHs残留量低于0．5ng／g，肝脏中的HCHs是其脂肪组织的2倍，最高为27．6ng／g，主要为γ-HCH所贡献，pHCH和δ-HCH未检出。DDTs在鱼体肌肉、脂肪和肝脏组织中的残留量分别为0．4～14．8、12．5～147、33．4～286ng／g。鱼体组织中DDTs主要以p，p′DDE的形式存在，p，p′-DDE残留量占∑DDTs的70％左右。与国内外不同水域的鱼体中HCHs、DDTs残留量相比较，长江宜昌江段鱼体肌肉中HCHs和DDTs残留水平较低。