青蒿琥酯诱导肿瘤细胞凋亡与抑制存活蛋白表达有关

目的 :探讨青蒿琥酯 (artesunate ,Art)诱导肿瘤细胞凋亡与存活蛋白 (survivinprotein)表达的关系。方法 :采用细胞荧光染色、流式细胞术、琼脂糖凝胶电泳法和测定细胞浆Caspase 3的活性等手段检测肿瘤细胞暴露于不同浓度的Art时 ,对肿瘤细胞凋亡的诱导作用 ;用RT PCR、WesternBlotting法 ,检测不同浓度的Art作用于肿瘤细胞时 ,对survivinmRNA和survivin蛋白表达的影响。结果 :HL6 0细胞暴露于Art时 ,呈现典型细胞凋亡特征 ,如 :胞核固缩、形成凋亡小体 ;凋亡细胞的比例呈浓度依赖性增高 ;琼脂糖电泳出现明显的“梯状”条带 ;细胞浆Caspase 3的活性呈浓度依赖性增高等。RT PCR检测表明 ,A5 49细胞暴露于Art 10和 5 0g·L-172h后 ,survivinmRNA的表达呈浓度依赖性降低 ,对照组、10和 5 0mg·L-1处理组的survivin条带和内标GAPDH条带灰度的比值分别为 1.74 5、0 .390和0 .0 2 3;WesternBlotting法也检测到Art抑制Survivin蛋白的表达。结论 :Art诱导肿瘤细胞发生凋亡 ,激活Caspase 3途径 。

Livin mRNA的反义核酸诱导MCF-7乳癌细胞凋亡作用(英文)

目的 :以livinmRNA为靶点设计反义硫代脱氧寡核苷酸 (PS ODNs) ,探讨其体外抗肿瘤效应及其机制。方法 :设计以livinmRNA为靶点的反义核酸并作用于MCF 7乳癌细胞 ,用MTT、RT PCR和流式细胞仪检测等方法对其进行评价研究。结果 :在设计的一些反义核酸中 ,YMZ0 5能够有效地抑制livin基因的表达 ,增加caspase 3的活性 ,诱导MCF 7细胞凋亡 ,明显抑制其生长 ,结论 :通过抑制livin基因的表达能够抑制MCF 7乳癌细胞生长、诱导其凋亡 ,livin可能会成为抗肿瘤的新靶点。

冬凌草甲素抑制BGC823细胞的生长及MMP-2MMP-9的表达

目的探讨冬凌草甲素(oridonin,Ori)在体内、外对胃癌BGC823细胞生长的影响,及对BGC823移植瘤MMP-2、MMP-9表达的影响。方法MTT法检测Ori对BGC823细胞生长的抑制作用,流式细胞术检测其对BGC823细胞周期的影响,体内抑瘤实验观察其对BGC823移植瘤生长的影响,免疫组织化学染色法观察Ori对移植瘤组织中MMP-2、MMP-9表达的影响。结果Ori在体外显著抑制细胞的增殖,引起细胞G2/M期阻滞;体内实验表明,Ori显著抑制肿瘤组织的生长,抑制率达70.7%;免疫组化染色结果显示,Ori显著抑制移植瘤MMP-2及MMP-9的表达。结论Ori在体内、外显著抑制胃癌BGC823细胞的生长,减少移植瘤MMP-2、MMP-9的表达,提示Ori可能具有抑制肿瘤侵袭转移及血管生成的作用。

青蒿素衍生物抗癌机制探讨

目的探讨青蒿素衍生物诱导肿瘤细胞产生自由基,引导肿瘤细胞死亡的机制。方法测定小鼠肿瘤动物模型的瘤体铁含量、观察青蒿素衍生物诱导肿瘤细胞产生自由基、采用单细胞彗星电泳法观察自由基对肿瘤细胞DNA杀伤的效应。结果小鼠的H22瘤体的铁含量显著高于血和肌肉、肺组织铁含量,Lewis肺癌的实验结果相同。K562细胞经青蒿素衍生物作用,能测出微量的自由基。青蒿素衍生物作用K562细胞可引起DNA损伤并溢出细胞。结论青蒿素衍生物可在含铁量较高的肿瘤细胞内产生自由基,导致肿瘤细胞死亡。

双氢青蒿素对肿瘤细胞及肿瘤动物模型的抑制作用

目的:观察双氢青蒿素对多种肿瘤细胞和动物移植瘤模型的抑制作用,分析其抗癌作用的特异性。方法:用MTT法、SRB法观察和比较双氢青蒿素对多种肿瘤细胞和正常人体细胞的抑制作用,采用小鼠的B16-BL6、H22和Lewis等肿瘤模型分析双氢青蒿素对肿瘤生长的抑制作用以及铁对双氢青蒿素抗肿瘤效应的药物协同作用。结果:双氢青蒿素对小鼠的B16-BL6、H22和Lewis肿瘤模型的肿瘤生长有较强的抑制作用;提前6h口服少量硫酸亚铁,可明显增强双氢青蒿素对B16-BL6、H22的抗肿瘤效应;双氢青蒿素对K562、KB、HCT、SGC7901、Hela、HepG、BGC823、KCC853、Bel7402、A549、B16-BL6细胞均有抑制作用。IC50(μg/mL)分别为4.12、10.21、11.02、11.77、13.03、18.36、26.47、28.02、44.55、46.28、54.46。在17.5～35μg/mL药物浓度作用下,正常细胞(HELF)有3%～5%生长,而肿瘤细胞没有增长,并有部分死亡。结论:双氢青蒿素对多种肿瘤细胞和动物移植瘤模型具有一定的选择性抑制作用,铁剂有抗癌协同作用。

DNA微矩阵芯片检测沙利度胺对HepG2细胞基因表达谱的影响

目的 从整个细胞基因组表达变化的角度 ,研究沙利度胺 (Tha)对基因表达谱的影响 ,揭示发育毒性药物的致畸机制。方法 用载有 8192条基因的DNA微矩阵芯片 ,检测在 11.6μmol·L- 1的Tha作用4 2h后 ,HepG2细胞基因表达谱的变化。结果有 19条基因的表达有明显变化 ,其中 17条基因表达下调 ,2条基因表达上调。下调基因中有多条为转录调控和胚胎发育相关基因 ,上调的基因中有DNA修复相关基因和线粒体功能相关的基因。结论 Tha能影响若干基因转录和胚胎发育基因的表达 ,可能与其发育毒性机制相关 。

一种测定香烟烟气或尼古丁气雾环境中大鼠体内尼古丁摄入量的简单方法

目的:探讨大鼠暴露于香烟烟气或尼古丁雾化环境中,体内尼古丁实际摄入量的测定方法。方法:考察氰化钾-巴比妥酸法测定尿中尼古丁代谢产物柯廷宁的可靠性。给大鼠缓慢恒速静脉输注不同浓度的尼古丁溶液1h,作为大鼠体内摄入尼古丁量的参照,收集大鼠60h的全部尿液并测定柯廷宁(cotinine)含量作为尼古丁的排出量,两者之间建立标准曲线。将大鼠置于香烟烟气或尼古丁气雾暴露箱中1h,收集大鼠60h的全部尿液并测定柯廷宁含量,根据建立的标准曲线推算大鼠体内尼古丁的实际摄入量。结果:给大鼠缓慢恒速输注不同浓度的尼古丁溶液和大鼠的柯廷宁排出量之间有良好的线性关系,能够根据柯廷宁的排出量推算尼古丁的摄入量。结论:用氰化钾-巴比妥法测定柯廷宁尿中含量能达到药物代谢技术要求。

Bax反义硫代脱氧寡核苷酸的体外抗辐射效应研究

目的 :Bcl_2 Bax蛋白比值降低是辐射所致细胞凋亡启动的检查点。本研究拟用Bax反义核酸干预Bax基因的表达 ,提高Bcl_2 Bax蛋白比值 ,抑制辐射所致凋亡 ,促进细胞存活。方法 :人胚肺成纤维细胞 (HELF)和小鼠受γ射线照射后 ,立即用Bax反义脱氧寡核苷酸处理HELF细胞和小鼠骨髓细胞 6h(终浓度均为 10 0nmol L) ,用MTT法、SRB法和小鼠骨髓中性粒细胞_巨噬细胞系祖细胞 (CFU_GM)集落形成法 ,确定细胞的存活状况。用RT_PCR方法和流式细胞仪检测BaxmRNA的表达状况、细胞周期的变化 ,分析其作用机制。结果 :HELF细胞的存活率分别增加 2 4 .4 % (MTT法 ,P <0 .0 1)和 12 .8% (SRB法 ,P <0 .0 1) ;骨髓细胞处理组CFU_GM集落形成数量远高于照射对照(72± 17vs 13± 6 ,P <0 .0 1) ;RT_PCR检测显示 ,处理组的目标条带和内标条带的灰度比值 (Bax β_actin)低于对照组(分别为 4 3.9%和 6 8.6 % ) ;流式细胞仪检测表明 ,处理组总S期细胞的比例高于对照组 ,分别为 2 4 .2 %和 7.7% ,提示处理组细胞内BaxmRNA拷贝数量低于对照组 ,细胞增殖活动较强。结论 :靶向BaxmRNA的反义硫代脱氧寡核苷酸 ,能够促进γ射线辐射后细胞的存活 ,其机制与破坏靶mRNA分子 ,继而造成Bax蛋白表达减少 ,抑制凋亡启动并促进细胞增殖活动有关。