卵巢多囊样改变合并不孕症患者AMH水平对卵母细胞发育潜能的影响

目的探讨卵巢多囊样改变(polycystic ovarian morphology,PCOM)合并不孕症患者体外受精-胚胎移植中抗苗勒管激素(anti-Müllerian hormone,AMH)水平对卵母细胞发育潜能的影响。方法选取符合纳入与排除标准的不孕症患者480例(对照组160例、PCOM组104例、PCOS组216例),比较不同组间AMH水平。PCOM及PCOS人群均按血清AMH水平(≤4.7ng/ml为正常值,>4.7ng/ml为高值)分为正常AMH组和高AMH组,分析PCOM及PCOS人群不同AMH水平组间的卵母细胞指标差异及其相关性。结果PCOS人群血清基础雄激素高于PCOM人群(P<0.01);血清AMH水平比较:对照组<PCOM组<PCOS组(P<0.001);实验室指标分析结果显示,PCOM及PCOS人群高AMH组成熟卵数、2PN数、受精数、D3卵裂数及胚胎总数较正常AMH组增多(P<0.05),且AMH水平与成熟卵数、2PN数、受精数、D3卵裂数、胚胎总数均呈正相关(P<0.05);PCOS人群高AMH组优势卵泡数、获卵数、优胚数及可利用胚胎数较正常AMH组增多(P<0.05),且AMH水平与优势卵泡数、获卵数、优胚数及可利用胚胎数均呈正相关(P<0.05),但PCOM人群中不同AMH水平组间的上述指标比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论PCOM合并不孕症人群血清AMH水平较对照组升高但低于PCOS人群,高AMH水平的PCOM患者可获得质量较好的卵母细胞及更多的胚胎,增加临床中反复移植失败患者移植次数,提高临床妊娠率。

衰老大鼠心肌组织中活性氮簇的改变及可能意义

目的测定衰老大鼠心肌组织凋亡程度,探讨及测定衰老大鼠心肌组织中活性氮簇的改变及其与心肌细胞凋亡的关系。方法分别选取雄性成年SD大鼠（4月龄-6月龄）和衰老SD大鼠（22月龄-24月龄）。采用Caspase-3活性测定法检测大鼠心肌组织中细胞凋亡发生情况,用Western-blot蛋白印记法检测大鼠心肌组织中血管舒张剂刺激的磷蛋白（VASP）和磷酸化VASP（pVASP）的表达水平;ELISA法检测心肌组织硝基酪氨酸含量。结果与成年大鼠相比,衰老大鼠的Caspase-3比活性显著增高（P〈0.01）,心肌组织pVASP水平明显降低（P〈0.01）,硝基酪氨酸明显升高（P〈0.05）,硝基酪氨酸含量与Caspase-3活性呈正相关。结论衰老大鼠心肌组织中一氧化氮生物利用度下降,生成大量毒性的过氧亚硝基,这可能是衰老心脏凋亡增加的原因之一。

诱导型一氧化氮合酶在衰老大鼠心肌对缺血再灌注损伤敏感性增加中的作用

目的探讨衰老大鼠心肌组织过氧亚硝基阴离子(ONOO-)的来源及其在衰老大鼠心肌对缺血再灌注损伤敏感性增加中的作用。方法选取雄性成年SD大鼠和衰老SD大鼠,随机分为3组,成年缺血再灌注组(缺血30 min,再灌注24 h)、衰老缺血再灌注组(缺血30 min,再灌注24 h),衰老缺血再灌注+1 400W组,缺血30 min,再灌注24 h,缺血前24 h及再灌注前25 h分别腹腔注射诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的特异性阻断剂1 400W。采用Evans blue和TTC双染法检测心梗面积;用ELISA法检测心肌组织硝基酪氨酸(NT)含量;用Western-blot蛋白印迹法检测大鼠心肌组织中iNOS的蛋白表达水平。结果与成年缺血再灌注组相比,衰老缺血再灌注组心梗面积增大(P<0.05);心肌组织NT含量较成年缺血再灌注组明显增高(7.29±0.1 vs 4.61±0.1,P<0.05);iNOS表达增高(P<0.05);与衰老缺血再灌注组比较,衰老缺血再灌注+1 400W组NT含量减少(3.2±0.1 vs 7.29±0.1,P<0.05);心肌梗死面积减小。结论衰老大鼠对心肌缺血再灌注损伤的敏感性增加可能与衰老大鼠心脏中iNOS表达升高有关,催化生成大量NO进而生成毒性的ONOO-,从而损伤心肌。

NO水平下降通过氧化应激引起人胎盘滋养细胞凋亡

目的探讨一氧化氮(NO)水平下降诱导人胎盘滋养细胞凋亡的可能机制。方法体外培养人胎盘滋养细胞株(HTR-8),分别加入10、100、500、1 000μmol·L-1L-NAME,并设置对照组(0μmol·L-1L-NAME),孵育48 h;四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测L-NAME对细胞存活率的影响;采用硝酸还原酶法测定细胞中NO的含量;利用透射电镜、流式细胞术和Annexin-V FITC染色检测L-NAME对HTR-8细胞凋亡的影响;Fe3+还原比色法检测总抗氧化能力(T-AOC)、黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性及硫代巴比妥酸比色法测定MDA含量。结果与对照组比较,100、500、1 000μmol·L-1L-NAME组细胞存活率及NO水平明显降低(P<0.05,P<0.01);Annexin-V FITC染色和流式分析均显示L-NAME能诱导细胞凋亡,并且呈剂量依赖性;NO水平与细胞凋亡数呈负相关(r=-0.5210);透射电镜结果显示:与对照组比较,实验组细胞核形态不规则,核膜固缩呈不规则状,染色质凝集或边集,线粒体肿胀或浓缩、嵴断裂或溶解,甚至消失,形成空泡,尤其在100μmol·L-1L-NAME组可见凋亡小体;同时,HTR-8细胞内T-AOC、SOD水平明显降低(P<0.05),MDA的含量明显升高(P<0.05);细胞凋亡数与T-AOC(r=-0.3212)、SOD(r=-0.2779)水平均呈负相关,与MDA(r=0.2807)含量呈正相关。结论氧化应激在NO水平降低引起的人胎盘滋养细胞凋亡中起重要作用。

吡格列酮对高脂血症大鼠血管内皮功能的保护作用

目的:用1种PPARγ激动剂吡格列酮,观察其能否逆转高脂血症大鼠的内皮功能障碍。方法:将36只健康雄性Wistar大鼠随机分为6组(每组6只):正常对照组(control),高脂血症组(HC,即溶剂对照组)及吡格列酮1.5mg·kg-1.d-1组、3mg·kg-1.d-1组、10mg·kg-1.d-1组、20mg·kg-1.d-1组(HC+PIO)。通过比较给予累积浓度的ACh(内皮依赖性舒血管物质)和酸化NaNO2(非内皮依赖性舒血管物质)后血管的舒张程度来反映血管内皮功能;使用MS2000生理信号记录分析系统记录的参数(包括±dp/dtmax)来判定心脏功能。结果:(1)高脂血症可以导致严重的血管内皮舒张功能障碍,给予10-9-10-5mol/L累积浓度的ACh后,高脂血症组血管张力与正常对照组相比有显著差异,血管最大舒张程度由99.78%±3.01%降低到50.51%±2.45%(P<0.01),而给予10-8-10-4mol/L累积浓度的酸化NaNO2后,2组间的血管张力无明显差别(P>0.05);(2)吡格列酮可以剂量依赖性地减轻高脂血症引起的血管内皮舒张功能失调,且10mg·kg-1.d-1剂量组作用最明显;(3)吡格列酮在减轻血管内皮舒张功能障碍的同时,也减轻了高脂血症大鼠心功能的损伤。结论:吡格列酮可以直接减轻高脂血症引起的血管内皮功能障碍,从而可能会有效预防随后发生的动脉粥样硬化及缺血性心脏病。

Necrostatin-1对大鼠慢性心肌缺血损伤的保护作用

目的观察Necrostatin-1(Nec-1)对大鼠慢性心肌缺血后心功能和心肌反应性纤维化的影响。方法成年雄性SD大鼠被随机分为Nec-1处理组(7例)、溶剂对照组(例)和伪手术组(5例)。通过结扎冠状动脉左前降支建立心肌缺血模型,并于结扎的同时,给予大鼠尾静脉Nec-1(0.6mg/kg)或相应溶剂对照。在缺血2周后,观察左心室功能的改变,并用Masson氏染色法观察心肌反应性纤维化后心肌反应性纤维化的程度并测定相应的心肌梗死面积。结果应用Nec-1后与溶剂对照组比较,各项心功能指标如左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP)、最大收缩速率(+dp/dtmax)以及最大舒张速率(-dp/dtmax)均有明显改善;心肌反应性纤维化及心梗面积也显著减少[(3.5±1.0)%比(13.2±0.5)%,P<0.01)]。结论Nec-1可以明显地抑制慢性心肌缺血大鼠的心肌反应性纤维化并改善心功能,具有显著的心肌保护作用。

高同型半胱氨酸血症经内质网途径影响ApoE-/-鼠肝细胞凋亡

目的观察高同型半胱氨酸血症(HHcy)对ApoE-/-鼠肝细胞凋亡的影响并探讨其可能机制。方法 36只ApoE-/-小鼠随机分为3组,每组12只:①ApoE-/-对照组(ApoE-/-group):普通饮食饲养;②蛋氨酸饮食组(methionine diet group):普通饮食+1.7%蛋氨酸饲养;③干预组(treatment group):普通饮食+1.7%蛋氨酸+0.006%叶酸及0.0004%VitB12饲养。另取12只正常C57 BL/6J小鼠给予普通饮食,作为正常对照组(normal control group)。饲养20周后,ELISA测定血清同型半胱氨酸(Hcy)浓度和肝组织Caspase-12含量;全自动生化分析仪测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性;DAPI染色法观察肝组织细胞核形态;电镜观察肝脏组织细胞超微结构。结果与正常对照组和ApoE-/-对照组相比,蛋氨酸饮食组Hcy浓度分别增高2.4倍(P<0.01)和2.5倍(P<0.01);ALT活性分别增高2.0倍(P<0.05)和1.2倍(P<0.05);各组AST活性无明显差异;肝组织切片DAPI染色及电镜结果显示,蛋氨酸饮食组小鼠肝细胞出现凋亡的形态学改变,蛋氨酸饮食组小鼠肝细胞线粒体肿胀、浓缩,内质网大量增生,可见细胞凋亡前体及凋亡小体;Caspase-12活性检测显示蛋氨酸饮食组较正常对照组增高(P<0.05)。与蛋氨酸饮食组比较,干预组小鼠血清Hcy浓度降低,Caspase-12活性下降,肝细胞病理变化减轻,血清ALT活性明显降低。结论 HHcy可能通过影响ApoE-/-鼠内质网功能改变,引起肝细胞凋亡。

同型半胱氨酸对肝细胞增殖及CyclinD1、ALT和AST表达的影响

目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)对肝细胞增殖及细胞周期素D1(CyclinD1)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)表达的影响。方法将HL-7702细胞体外常规培养,分别用0、50、100、200、500μmol/L Hcy刺激细胞,分别于刺激后6、12、24h采用MTT法检测肝细胞的增殖情况;采用荧光定量PCR(RT-qPCR)检测CyclinD1mRNA的表达;采用微板法检测各组细胞培养液中ALT和AST的变化。结果不同浓度Hcy刺激肝细胞不同时间后,细胞的增殖受到抑制,其中100、200、500μmol/L Hcy组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),24h作用最明显;不同浓度Hcy刺激肝细胞24h后,CyclinD1mRNA的表达显著下降(P<0.01),细胞培养液中ALT和AST水平显著升高(P<0.01)。结论 Hcy可以抑制肝细胞增殖,并引起CyclinD1的mRNA表达下降,ALT和AST释放增多。

血清SAM/SAH在Hcy引起动脉粥样硬化基因组DNA甲基化中的作用

目的探讨血清S-腺苷甲硫氨酸(SAM)/S-腺苷同型半胱氨酸(SAH)比值在同型半胱氨酸(Hcy)致载脂蛋白E基因敲除(Apo E―/―)小鼠血管动脉粥样硬化(As)B1重复序列DNA甲基化改变中的作用。方法 36只饲养4周龄Apo E―/―小鼠,随机分为三组:模型对照组、高蛋氨酸组、叶酸+Vit B12干预组,每组12只,分别给予不同饮食;另取健康4周龄雄鼠(SPF级C57BL/6J)12只作为正常对照组,饲以普通饮食。饲养15周后,HE染色观察血管内动脉斑块的形成,高效液相色谱检测血清中Hcy、SAM、SAH的水平改变,n MS-PCR检测各组小鼠动脉粥样硬化斑块中Bl重复序列DNA甲基化改变。结果高蛋氨酸组血清Hcy与正常对照组相比升高约2.39倍(P<0.01),HE染色可见高蛋氨酸组中有动脉斑块形成;与正常对照组相比,模型对照组、高蛋氨酸组SAM/SAH增加了1.68倍和2.75倍(P<0.01);高蛋氨酸组B1重复序列DNA甲基化水平降低11.8%(P<0.05),且与SAM/SAH比值呈明显负相关(r=-0.3638,P=0.0210)。结论 ApoE―/―小鼠中B1重复序列发生DNA低甲基化改变,且与SAM/SAH呈负相关,提示血清SAM/SAH可作为一个判断血管As的生物学指标。

凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1甲基化在同型半胱氨酸作用下对人内皮细胞存活的影响

目的 :探讨凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)甲基化在同型半胱氨酸(Hcy)对动脉粥样硬化过程中降低内皮细胞存活率的作用机制研究。方法 :按不同浓度的Hcy对人脐静脉内皮细胞作用分组:对照组(0μM Hcy)、50μM Hcy组、100μM Hcy组、200μM Hcy组和500μM Hcy组;②100μM Hcy+30μM维生素B12+30μM叶酸组(拮抗剂组),各组(n=5)培养液孵育72 h后,采用3-(4,5)-双甲基-2-噻唑-(2,5)-2苯基溴化四氮唑蓝试验检测Hcy对内皮细胞活性的影响;用分光光度比色法检测各组细胞中过氧化氢;酶免法检测氧化低密度脂蛋白、甲基转移酶-1(DNMT-1)含量;荧光定量聚合酶链式反应(PCR)测LOX-1和DNMT-1 mRNA的表达;蛋白免疫印迹法测LOX-1蛋白的表达;巢式降落式PCR法测LOX-1基因甲基化的改变。结果 :同型半胱氨酸对人脐静脉内皮细胞存活率的影响:拮抗剂组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。100、200、500μMHcy组与对照组比较:氧化低密度脂蛋白和过氧化氢的含量、LOX-1信使核糖核酸(mRNA)相对甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)表达量及LOX-1蛋白相对β-肌动蛋白表达量均增加;DNMT-1的含量和mRNA表达、LOX-1基因甲基化程度均降低,差异均有统计学意义(P<0.001)。结论 :LOX-1低甲基化可能是Hcy致内皮细胞损伤的重要机制之一,其中过氧化氢、氧化低密度脂蛋白和DNMT-1可能起了重要的作用。

抗β1肾上腺素受体细胞外第二环自身抗体长期存在对大鼠心肌组织钙调蛋白激酶Ⅱδ亚型表达的影响

目的 通过动物实验研究,观察抗β1肾上腺素受体细胞外第二环抗体(抗β1AR-ECⅡ抗体)长期持续存在对心肌组织钙调蛋白激酶Ⅱδ亚型(CaMK Ⅱδ)表达的影响.方法 采用酶联免疫吸附法(ELISA法)筛选血清抗β1AR-ECⅡ抗体阴性的健康成年雄性Wistar大鼠,通过背部皮下定期给人免疫佐剂和针对β1肾上腺素受体细胞外第二环(β1AR-ECⅡ)抗原多肽的混合物建立主动免疫模型,定期采用ELISA法检测免疫过程中大鼠血清中抗β1-AR-ECⅡ抗体水平及大鼠心功能的变化情况;利用荧光法检测心肌组织caspase-3活性;采用Western-blot法检测大鼠心肌组织中CaMK Ⅱδ的表达情况.结果 用β1AR-ECⅡ抗原肽段长期主动免疫大鼠可导致心功能下降及心肌组织凋亡的增加,同时伴随有大鼠心肌组织中CaMKⅡδ表达增加,并具有时间依赖性.结论 抗β1AR-ECⅡ抗体长期存在可导致大鼠心肌组织CaMKⅡδ表达的增加,CaMKⅡδ可能是抗β1AR-ECⅡ抗体诱发心肌细胞凋亡,进而导致心功能障碍过程中的关键信号分子.

双抗体夹心法检测3-硝基酪氨酸方法的建立及应用

目的:建立一种准确、快速的双抗体夹心酶免疫吸附的方法,以定量检测组织中过氧亚硝基阴离子的水平。方法:分别以小鼠源性抗3-硝基酪氨酸单克隆IgG抗体和兔源性抗3-硝基酪氨酸IgG抗体为包被抗体和检测抗体,采用正交设计方法摸索以上各抗体的浓度,建立定量检测3-硝基酪氨酸(3-NT)的双抗体夹心ELISA法。同时,测定心肌缺血再灌注大鼠心肌组织3-NT的含量。结果:本研究建立的双抗体夹心ELISA法检测3-NT的最低检测下限为0.10 ng.ml-1,具有良好线性关系的检测范围是(0.15～7.50)ng.ml-1(r2=0.995);心肌缺血再灌注组大鼠的心肌组织中的3-NT水平为(1022.42±97.35)ng.mg pro-1,明显高于假手术组(246.58±56.52 ng.mg pro-1,P<0.01)。结论:本研究建立的定量检测3-NT的双抗体夹心ELISA法能够方便、准确、快速地检测组织中3-NT的含量,为定量检测组织中ONOO-的水平提供了新的方法。

MMP-9/TIMP-1在HHcy致ApoE^(-/-)小鼠肾脏损伤中的作用机制

目的探讨高同型半胱氨酸血症(HHcy)导致Apo E-/-小鼠肾脏损伤的作用机制,为HHcy所致肾脏疾病的预防和治疗提供理论和实验依据,为肾病患者的疾病监测提供新的指标。方法将5周龄雄性纯合子Apo E-/-小鼠随机分组:Apo E-/-对照组饲以普通饮食,Apo E-/-高蛋氨酸组饲以高蛋氨酸饮食,Apo E-/-干预组饲以加叶酸和维生素B12的高蛋氨酸饮食,5周龄SPF级C57BL/6J雄鼠饲以普通饮食作为正常对照组,喂养14周后,生化分析仪测定血清同型半胱氨酸(Hcy)、肌酐及尿素浓度,透射电镜和PAS染色检测小鼠肾脏损伤情况,荧光定量PCR检测肾脏基质金属蛋白酶9(MMP-9)和组织型基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)m RNA表达水平,并以免疫组织化学染色法分析肾脏MMP-9蛋白表达,ELISA检测TIMP-1蛋白表达。结果与正常对照组相比,Apo E-/-高蛋氨酸组血清Hcy、肌酐及尿素浓度分别升高了3.66倍、1.1倍和1.6倍(P<0.01);透射电镜和PAS染色结果显示,Apo E-/-高蛋氨酸组较正常对照组肾脏损伤明显,荧光定量PCR结果显示MMP-9及TIMP-1 m RNA表达则分别升高了5.25倍和1.38倍(P<0.01);免疫组织化学结果显示Apo E-/-高蛋氨酸组MMP-9表达较正常对照组明显升高(P<0.01);ELISA结果显示Apo E-/-高蛋氨酸组TIMP-1蛋白表达比正常对照组明显升高(P<0.01)。与Apo E-/-高蛋氨酸组相比,Apo E-/-干预组血清Hcy浓度下降,且肌酐和尿素浓度均降低(P<0.01);透射电镜和PAS染色结果显示,Apo E-/-干预组肾脏损伤较Apo E-/-高蛋氨酸组减轻。血清Hcy浓度与其肌酐及尿素浓度呈正相关(r2=0.4344,P<0.0001;r2=0.4478,P<0.0001),与MMP-9/TIMP-1比值也呈正相关(r2=0.39309,P<0.001),且小鼠肾脏MMP-9/TIMP-1比值与肌酐及尿素浓度也成正相关(r2=0.1464,P<0.05;r2=0.3027,P<0.01)。结论 HHcy可能是经MMP-9/TIMP-1比例上调致细胞外基质降解,继而导致肾脏损伤。

动脉粥样硬化患者基质金属蛋白酶组织抑制剂1基因DNA高甲基化的研究

目的:探讨动脉粥样硬化(AS)患者基质金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP-1)基因DNA启动子区甲基化修饰的改变。方法:选择经颈部多普勒超声确诊AS患者40例以及正常者作为对照组40例,采用ELISA法测定血浆TIMP-1蛋白水平,荧光定量PCR检测外周血TIMP-1的mRNA表达,巢氏降落式甲基化特异性PCR(ntMSP)测定外周血TIMP-1基因DNA启动子区的甲基化程度。结果:AS组血浆TIMP-1含量明显降低,外周血TIMP-1的mRNA表达也显著低于对照组(P<0.05),TIMP-1基因启动子区DNA甲基化程度显著高于对照组(P<0.05)。结论:AS患者TIMP-1含量降低,其机制可能与TIMP-1基因启动子区高甲基化有关。

β_3肾上腺素受体自身抗体在扩张型心肌病患者中的检测及临床意义

[目的]检测扩张型心肌病(CDM)患者血清中β3肾上腺素受体(β3AR)自身抗体,并分析其类型和可能的医学意义。[方法]以合成的人β3AR细胞外第一、二、三环肽段作为抗原,应用酶联免疫吸附实验,检测临床甄选的60例CDM患者及103例正常对照者血清中β3AR自身抗体。[结果]DCM患者血清中β3AR细胞外第一环和第二环的IgG类自身抗体阳性率(30.0%和41.7%)及抗体水平(0.46±0.08和1.17±0.17)均显著高于正常对照者,且与心功能有关;β3AR细胞外第二环IgM类自身抗体阳性率(50.0%)也显著高于正常人,但与心功能无关。β3AR细胞外第二环的自身抗体水平明显高于第一环和第三环的自身抗体。而IgG类自身抗体水平明显高于IgM类。[结论]β3AR自身抗体,尤其是β3AR细胞外第二环的IgG类自身抗体可能作为重要的功能性抗体,参与DCM的病理生理过程。

干扰SULT2B1抑制人肝癌细胞BEL-7402的上皮间质化

目的研究羟基类固醇硫酸基转移酶SULT2B1与人肝癌细胞BEL-7402上皮间质转化的关系及其作用机制。方法细胞分为空白对照组(NC)、阴性对照组(control-siRNA)和SULT2B1干扰组(SULT2B1-siRNA),LipofectamineTM2000脂质体转染细胞,real-time PCR和Western blot检测干扰效果。Western blot检测紧密连接蛋白(ZO-1)、波形蛋白(vimentin)和转录因子ZEB1的表达。结果 SULT2B1干扰BEL-7402细胞后其mRNA与蛋白表达均显著降低(P<0.05),ZO-1表达水平升高(P<0.05),vimentin的表达及ZEB1的蛋白水平均降低(P<0.05)。结论干扰SULT2B1通过下调ZEB1的表达抑制人肝癌细胞BEL-7402的上皮间质化。

一种结合最短路径的运输问题求解方法

由出产地O到销地D的运输,必须在相应的交通网络上才能完成,运费不但与运量有关,而且与运输行走的线路相关。传统的运输问题没有考虑交通网络,在已知运价的条件下仅求出最优调运方案,即求解O点到D点的调运量(OD量),而没有求出最优行走路径。文中提出"网络上的运输问题",在未知运价的条件下,不但可求出OD量,而且可求出最优行走路径。

高温高压动水回路中A106Gr.B和A672Gr.B60耐冲蚀作用的研究

碳钢和低合金钢由于Cr含量较低,易发生流动加速腐蚀,对安全产生严重影响。现阶段最先进的第三代核电技术AP1000使用Cr含量较高的A672Gr.B60代替A106Gr.B作为供水管的材料来减小流动加速腐蚀(FAC)的影响。试验采用腐蚀失重、X射线光电子能谱(XPS)、扫描电镜(SEM)和X射线能量色散谱(EDS)等方法来分析流速、碱化剂以及物质组成对A672Gr.B60和A106Gr.B的影响。经336h的实验,结果显示A672Gr.B60较A106Gr.B具有更好的耐冲蚀性能,氧化膜更致密,不易脱落。使用乙醇胺(ETA)作为碱化剂相比于氨水能更好地降低FAC,也能使氧化膜更加致密。流速的变化会影响氧化物颗粒的分布、大小、形状,也会影响氧化膜的厚度。实验生成的氧化膜主要成分为Fe3O4。

D-半乳糖诱导的心肌细胞自噬下降与microRNA的表达变化有关

目的探讨microRNA(miRNA)和衰老心肌细胞自噬之间的关系。方法使用0、4、8、16、20 g/L D-半乳糖刺激大鼠心肌细胞H9c2衰老,刺激3、6、9天后,β-半乳糖苷酶染色法检测细胞衰老水平;电镜观察D-半乳糖刺激衰老大鼠心肌细胞自噬体形成;分别采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及蛋白质印迹法(Western blot)检测衰老大鼠心肌细胞与正常H9c2细胞中miRNA-30a、miRNA-126、miRNA-204及自噬蛋白LC3B II/LC3B I表达水平。结果与对照组比较,随着药物浓度的升高及刺激天数的增加,细胞染色逐渐加深,在D-半乳糖浓度为8 g/L刺激9天时,细胞染色最明显;电镜结果显示,D-半乳糖诱导衰老心肌细胞自噬体减少;Western blot结果显示,衰老心肌细胞LC3B II/LC3B I水平降低;实时荧光定量PCR结果显示,诱导衰老组心肌细胞中,miRNA-30a、miRNA-126表达水平明显下降,miRNA-204表达水平明显上升。结论 D-半乳糖诱导的衰老心肌细胞自噬水平降低的过程中,存在miRNA-30a、miRNA-126表达水平的降低以及miRNA-204表达水平的增加,miRNA的差异表达可能是衰老心肌细胞自噬水平变化的重要机制。