正丁醇脱水制作肝组织石蜡切片

肝、脾组织的细胞成分较多,细胞间隙较大,纤维结缔组织较少,其质地较脆,在采用乙醇脱水、二甲苯透明、石蜡包埋组织块时,常因脱水和透明的时间略长,而造成肝脾组织的石蜡切片易碎或在光镜下出现大量的裂纹而影响形态学的观察.因此,我们采用不同浓度的正丁醇替代乙醇和二甲苯的脱水和透明作用,所制作的肝组织石蜡切片有效地避免了上述的缺陷.

大鼠心肌间质胶原的扫描电镜观察

目的 探讨大鼠心肌间质胶原网络的形态构筑及其功能意义。 方法 利用四氧化锇和氢氧化钠细胞浸渍方法 ,于扫描电镜下对大鼠心肌间质胶原进行观察。 结果 粗细不等的胶原纤维相互交织充填于心肌细胞及毛细血管间。粗胶原纤维平行或斜跨于细胞和血管表面 ,形成粗大的框架式结构 ;细胶原纤维卷曲蓬松 ,呈鞘状包裹心肌细胞和毛细血管 ,相邻的胶原鞘彼此融合形成间隔。 结论 心肌间质胶原网络由粗大的框架式结构和纤细的胶原网组合而成 。

四氯化碳诱导性肝硬化大鼠肝组织葡萄糖调节蛋白78表达的研究

目的研究四氯化碳(CCl4)诱导性肝硬化大鼠肝组织内葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达的变化。方法将健康雄性Wistar大鼠随机分为对照组(n=5)和肝硬化组(n=5),对照组皮下注射植物油0.12ml/100g体重,肝硬化组以0.3ml/100g体重皮下注射60%CCl4植物油。在实验第21周的第1d杀死鼠,右心室取血检测肝功能指标。鼠肝中叶取材,石蜡切片行苏木精-伊红(HE)染色和天狼猩红组织化学染色,光镜观察形态学改变,行GRP78免疫组织化学显色,无菌下取肝组织行Western blotting及RT-PCR检测肝组织GRP78的表达。结果肝硬化组的血清ALT含量(278.2±88.42)明显高于对照组(154.8±9.94,t=3.10,P<0.05);ALB含量(1.68±0.62)明显低于对照组(3.02±1.96,t=2.62,P<0.05)。对照组肝小叶结构和肝细胞状态正常,仅在中央静脉及汇管区可见少量胶原纤维。20周肝硬化组的肝细胞脂肪变性明显,胶原纤维大量增生,假小叶形成。GRP78免疫组织化学呈色显示,肝硬化组肝组织中阳性细胞数明显多于对照组,棕黄色着色定位于细胞质中。Western blotting和RT-PCR显示肝硬化组肝组织GRP78的表达明显增强。结论在CCl4诱导性肝硬化的肝组织中,GRP78表达明显增强,这可能与肝细胞的内质网应激有关。

人间充质干细胞移植改善四氯化碳诱导性肝硬化大鼠的肝纤维化

目的研究人间充质干细胞(MSCs)移植对四氯化碳诱导性肝硬化大鼠肝纤维化的影响。方法实验动物随机分为对照组和肝硬化组,肝硬化组采用60%的四氯化碳植物油皮下注射7周制成肝硬化大鼠模型,再随机分成肝硬化7周组、MSC对照组和MSC移植组。在MSC移植组,人胚胎脐带血源的MSCs鉴定后,经肠系膜上静脉注射移植入大鼠体内,3周后处死所有大鼠,行肝组织冰冻切片,抗人表皮生长因子受体(EGF-R)的免疫组织化学显色和天狼猩红染色。结果肝硬化7周组、MSC对照组和MSC移植组大鼠的血清碱性磷酸酶白蛋白(ALP)(、ALB)和胆固醇(CHO)含量出现了不同程度的异常。肝硬化7周组大鼠肝组织中有大量的胶原纤维增生并形成假小叶;MSC对白蛋白照组与肝硬化7周组相似;仅在MSC移植组的大鼠肝中观察到散在的棕黄色的抗人EGF-R阳性细胞,肝组织中胶原纤维的量明显小于MSC对照组。结论经肠系膜上静脉移植人MSC,可明显改善四氯化碳诱导性肝硬化大鼠的肝纤维化程度,为肝硬化的治疗提供实验依据。

四氯化碳诱导大鼠肾细胞凋亡的研究

目的观察四氯化碳(CCl4)诱导大鼠肾形态结构和肾细胞凋亡的变化。方法将健康雄性Wistar大鼠随机分为对照组、2周CCl4组和6周CCl4组,每组5只。对照组背部皮下注射橄榄油(0.12 ml/100 g鼠重),CCl4组以0.3 ml/100 g鼠重背部皮下注射60%CCl4橄榄油。2周CCl4组和6周CCl4组大鼠分别于实验的第3周和7周的第1 d处死。肾石蜡切片苏木精-伊红染色,光镜观察肾组织形态学,免疫组织化学显示Caspase-3、Bax、TUNEL观察肾细胞凋亡。结果对照组肾小球和肾小管结构均正常。2周和6周CCl4组的肾小球结构正常,2周CCl4组病变较、6周CCl4组肾皮质近端小管管腔狭小,上皮细胞浊肿,空泡变性,微绒毛脱失。对照组和2周CCl4组Caspase-3、Bax免疫组织化学显色未见阳性细胞表达;而6周CCl4组则在近髓质处的皮质内,近端小管上皮细胞的胞质呈现棕黄色阳性反应。TUNEL显色2周CCl4组可见肾皮质内近端小管上皮细胞核和少量的肾小球细胞核呈阳性表达,而6周CCl4组在大量的远曲小管及少量近端小管的上皮细胞核呈阳性表达。结论CCl4诱导性肾损伤大鼠,2周时肾组织的近端小管上皮及少量肾小球毛细血管内皮细胞发生凋亡,而损伤6周时,肾皮质近端小管受损,上皮细胞变性;远曲小管上皮细胞发生凋亡。

He-Ne激光照射大鼠心前区对心肌毛细血管开放率的影响

目的 探讨低强度He Ne激光照射大鼠心前区对心肌毛细血管开放情况的影响。方法 雌性Wistar大鼠 6只 ,随机等分为对照组和激光照射组。以 6 0 5J/cm2 的He Ne激光垂直照射激光照射组大鼠心前区 ,每天 1次 ,连续照射 10天。超薄切片透射电镜下观察左心室近心内膜侧、近心外膜侧心肌中直径 <10 μm微血管的开放情况。结果 照射组心肌内层毛细血管开放率 (70 3% )明显高于对照组 (5 5 6 % ) ,P <0 0 5。结论 以剂量为 6 0 5J/cm2 的He Ne激光照射心前区 。

四氯化碳对大鼠海马CA1区神经元低亲和力神经生长因子受体p75表达的影响

目的研究四氯化碳(CCl4)对大鼠脑海马CA1区神经元低亲和力神经生长因子受体p75的表达和凋亡的影响。方法将24只健康雄性Wistar大鼠随机分为对照组和CCl4组。对照组每周一、四背部皮下注射橄榄油(0.12ml/100g),CCl4组分别在每周一或/和周四背部皮下注射60%CCl4-橄榄油溶液(0.3ml/100g)1次(1d组)2、次(1周组)和4次(2周组),实验结束时处死大鼠。取脑后沿正中矢状面切开,右侧半脑石蜡切片,行Nissl染色,观察海马CA1区神经元的形态学改变;行p75、Bax免疫组织化学染色和Western blotting分析,检测海马CA1区神经元p75、Bax的表达,行原位缺口末端标记法(TUNEL)观察海马CA1区神经元的凋亡。结果Nissl染色显示对照组CA1区神经元染色较深,细胞数目较多,排列整齐,神经元内可见大量尼氏体;CCl4组CA1区神经元排列较对照组紊乱,部分锥体细胞体积缩小,核固缩,呈三角形,胞浆内尼氏体数目减少或消失。对照组海马CA1区可见少量表达p75和Bax的阳性细胞;CCl4组海马CA1区表达p75和Bax的阳性细胞数较对照组明显增多,以1周CCl4组增多最为明显;Western blotting结果与免疫组织化学染色结果一致。对照组海马CA1区未见TUNEL阳性细胞;CCl4组海马CA1区可见大量细胞核呈棕黄色着色的TUNEL阳性细胞,以1周CCl4组的阳性细胞数最多。结论注射CCl4后,大鼠脑海马CA1区p75的表达明显增强,Bax的表达也相应增强,凋亡的神经元明显增多。

He-Ne激光照射对大鼠心肌微动脉内皮细胞和心肌组织内皮型一氧化氮合酶表达的影响

目的 探讨He Ne激光照射大鼠心前区对心肌微动脉内皮细胞和心肌组织内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)表达的影响。方法 将 12只Wistar大鼠随机分为对照组和激光照射组 ,每组 6只。激光照射组的照射剂量为 6 0 5J cm2 ,每天照射 1次 ,连续 10天。最后一次激光照射后 ,两组大鼠均于左心室前壁取材 ,采用免疫组织化学染色方法 ,观察心肌组织各层eNOS表达的变化。结果 激光照射组eNOS表达的平均光密度值为 0 2 6 3± 0 0 15 ,高于对照组的 0 2 2 7± 0 0 16 (t=17 35 ,P <0 0 1) ;并且在各级心肌微动脉内皮细胞核的一端可见eNOS表达的阳性颗粒 ,而对照组不明显。结论 以剂量为 6 0 5J cm2 的He Ne激光照射大鼠心前区 ,可使心肌微动脉内皮细胞中eNOS的表达增强 ,为阐明He Ne激光照射扩张微血管、改善微循环的作用机制 。

实验性肝纤维化大鼠胶原网络构筑的扫描电镜观察

目的 探讨肝纤维化大鼠胶原网络的三维形态构筑的变化。 方法 采用健康雄性Wistar大鼠 ,随机分为对照组和肝纤维化组 ,后者采用 6 0 %的四氯化碳植物油皮下注射 ,造成肝纤维化大鼠模型 ,分别于实验的第10周和 12周末取材 ,作为 10周和 12周肝纤维化组 ,行天狼猩红显色 ,光镜下观察和氢氧化钠浸渍 ,扫描电镜下观察胶原网络的构筑。 结果 扫描电镜下 ,随着肝纤维化程度的加重 ,增生的胶原纤维交织成网 ,分隔包裹正常肝组织 ,形成大小不等圆形或椭圆型肝组织团块 ,近似于“蜂窝状”囊性的假小叶结构 ;相邻假小叶之间的胶原纤维沉积明显 ,并与包裹门管区和血管的纤维鞘相延续为间隔。与对照组相比 ,10周肝纤维化组形成了尚不完整的假小叶囊 ,12周组的小叶囊致密完整。 结论 肝纤维化时胶原纤维超微构筑发生了改变 ,增生的胶原网络主要由粗、细纤维构成。

He-Ne激光照射对大鼠心肌毛细血管通透性影响的实验研究

目的 探讨He Ne激光照射大鼠心前区对心肌毛细血管通透性及毛细血管内皮细胞血管内皮生长因子 (VEGF)表达的影响。方法 Wistar大鼠随机分为对照组和激光照射组 ,每组各 8只 ,其中照射组He Ne激光照射剂量为 60 5J cm2 ,垂直照射大鼠心前区 ,每日 1次 ,共 1 0次。采用铁蛋白大鼠静脉灌注示踪 ,心肌标本于透射电镜下观察和免疫组织化学染色图像分析的方法 ,观察心肌毛细血管通透性及VEGF变化。结果 电镜下 ,激光照射组心肌内层毛细血管管壁内、外以及心肌细胞的线粒体内均可见大量的高密度铁蛋白颗粒 ,较对照组明显增多 ;免疫组化染色示照射组心肌内层毛细血管内皮细胞的着色明显加重 ,其平均光密度值为 0 2 63± 0 0 1 5 ,明显高于对照组的 0 2 2 7± 0 0 1 6 (P <0 .0 1 )。结论 以剂量为 60 5J cm2 的He Ne激光照射大鼠心前区 ,可使心肌毛细血管的通透性和VEGF的表达明显增强 ,为He Ne激光照射能改善心肌微循环提供了实验形态学依据。

动力载荷在胫骨骨折愈合中对微血管形成影响的图像分析

在４只羊的双侧胫骨制成实验性骨折。一侧施加动力载荷者为实验组，另一侧未施加载荷者为对照组。采用血管灌注墨汁、组织切片法和图像分析评估动力载荷对骨折愈合微血管的影响。动力载荷可促进干骺部骨皮质血管扩张，增生。干骺部髓内微血管密度：实验组（３３．６±４．７％）高于对照组（３１．８±５．９％）。骨良质微血管密度实验组（７．５±３．５％）也高于对照组（５．４±４．１％）。动力载荷能促进骨痂内新生血管的形成和血管扩张。骨痂微血管密度：实验组（３１．１±７．４％）高于对照组（２６．８±６．５％）。提示动力载荷可促进侧支循环的建立，时骨折部具有增加血液供应，促进骨折修复的作用。

脊髓血管胚胎发生发育的解剖学研究

目的 :观察人胚胎脊髓血管的发生发育过程 ;分析胚胎脊髓血管的结构特征以及与成人脊髓血管结构的关系。方法 :采用胎龄 30d～ 2 8周的胚胎及胎儿、新生儿和成人尸体标本 ,进行解剖学观察。结果 :对脊髓血管胚胎各期的发育特征进行了描述。神经管未闭合时 ,周围的间充质内已出现了毛细血管网 ,逐渐向基板和翼板集中 ,并沿神经根走行 ,进出椎管 ,每一节段均有两对 ,左右对称。表面的毛细血管垂直向脊髓内发出分支 ,部分分化成各级动、静脉 ,并在髓内发出分支 ,构成毛细血管网。原基板外周的毛细血管网随脊髓的生长 ,形成了脊髓前动脉纵轴。颈髓前动脉多保持双干结构。脊髓后动脉为双干 ,在外侧方。胎龄 3个月以上的胎儿脊髓血管已与成人大致相仿。结论 :脊髓前动脉在胎龄 8周时 ,胸腰段就已经融合为一条。颈髓的脊髓前动脉多为双干 ,有相互靠近的趋势。胎龄 3个月以上的胎儿脊髓表面血管形态已经与成人大致相仿。脊髓血管是神经管周围间充质中的毛细血管网随着脊髓的生长 ,通过相互融合和不均衡退化等机制 。

四氯化碳大鼠肝硬化形成早期的血液流变学改变

目的 :探查大鼠四氯化碳肝硬化形成早期红细胞变形指数、全血粘度等多项血液流变学指数的变化。方法 :将Wistar大鼠随机分组 ,肝组织HE和天狼猩红染色 ,下腔静脉取血检测红细胞变形指数、全血粘度等血液流变学参数。结果 :肝硬化 7w鼠的肝组织中有大量胶原纤维增生并开始形成假小叶。对照组和肝硬化组间红细胞数和全血粘度的差异不明显 ;实验 4～ 5w后 ,肝硬化组的红细胞变形指数、血浆纤维蛋白原和红细胞血红蛋白含量明显较对照组降低。结论 :四氯化碳大鼠肝硬化模型的红细胞变形指数等多项血液流变学参数在第 5w后出现明显异常 ,比形态学上出现典型肝硬化表现约提前了 2～ 3w时间 ,为临床肝硬化的早期诊断治疗提供了实验依据。

几种微血管形态学观测方法间的比较分析

目的 :通过对 6种微血管形态学观测方法的比较 ,使研究者能够选择出最适宜的实验方法。方法 :针对每一种方法 ,进行实验方法的简介和分析。结果 :6种方法间各有所长。结论 :研究者应根据实验的要求和条件 ,选择出一种方法或几种方法相结合 ,以达到研究的目的。

低能量氦氖激光照射增加大鼠心肌血管内皮生长因子的表达

目的 探求低能量氦氖激光照射大鼠心前区 ,对心肌血管内皮生长因子 (VEGF)表达的影响。 方法 采用RT PCR和免疫组织化学染色图像分析的方法 ,实验动物分对照组和激光照射组 ,每组 8只 ,照射组的照射剂量为 6 0 5J cm2 。 结果 VEGF免疫组织化学染色示照射组心肌微血管内皮细胞的着色较重 ,其平均光密度值为 0 2 4 6± 0 0 15 ,明显高于对照组的 0 2 18± 0 0 12 (t=9 0 5 ,P <0 0 5 ) ;心肌组织VEGF16 5的RT PCR产物表达显示 ,激光照射组的VEGF16 5mRNA表达为对照组的 2 79倍。 结论 以剂量为 6 0 5J cm2 的He Ne激光照射大鼠心前区 ,心肌微血管及心肌组织VEGF的表达明显增强。

唇部动脉构型与唇瓣血液供应的关系

目的 :阐明唇部动脉的配布类型、微血管构筑 ,为唇瓣移转提供血管解剖学基础。方法 :用血管造影、解剖、铸型方法研究 31例 ( 6 2侧 )尸体头部的唇动脉 ;另 1例 ( 2侧 )灌注墨汁对微血管构筑进行组织学观察。结果 :( 1)上唇动脉出现率为 81.1%。它与对侧上唇动脉吻合 ,或一侧动脉占优势而另侧缺失。 ( 2 )下唇动脉出现率为6 3 .8% ,其余由副下唇动脉参与下唇血供。 ( 3)唇动脉弓恒定存在 ,弯曲行于唇部近红唇缘。按上唇动脉弓的构成 ,分为 3型 :Ⅰ型由两侧上唇动脉吻合而成 ,均衡分布或一侧占优势 ( 12 / 31) ;Ⅱ型一侧上唇动脉缺失 ,仅由另一侧上唇动脉单独构成 ( 10 / 31) ;Ⅲ型上、下唇动脉共干发出 ( 9/ 31) ,上唇外侧部分由绕行于口角附近的下唇动脉分布。按下唇动脉弓的构成分为 6种类型 :Ⅰ型由两侧下唇动脉吻合构成 ( 6 / 31) ;Ⅱ型由一侧下唇动脉与另侧下唇动脉、副下唇动脉吻合而成 ( 6 / 31) ;Ⅲ型由一侧下唇动脉单独构成 ( 2 / 31) ;Ⅳ型由一侧下唇动脉和另一侧副下唇动脉共同组成 ( 11/ 31) ;Ⅴ型由一侧副下唇动脉行向下唇缘中线附近呈T型分支构成 ( 3/ 31) ;Ⅵ型由两侧下唇动脉、副下唇动脉共同组成 ( 3/ 31)。 ( 4)微血管构筑 :唇动脉发出分支分别组成唇黏膜、皮肤致密血管网。结论 :由?

自发性高血压大鼠心肌间质胶原的扫描电镜观察

目的 探讨自发性高血压大鼠 (SHR)心肌间质胶原的形态变化及对心功能的影响。 方法 取左心室壁 ,经四氧化锇细胞浸渍和氢氧化钠细胞浸渍方法处理 ,在扫描电镜下观察。 结果 正常大鼠 (WKY)心肌细胞周围主要存在有粗细两种胶原纤维并互相交织成网。在自发性高血压大鼠 ,粗纤维呈腱样增宽增厚 ,在心肌细胞周围排列呈栅栏状 ;胶原网变得致密 ,在血管周围呈毡片样增厚。 结论 高血压心肌肥厚时 ,心肌胶原粗纤维的变化可能是心壁僵硬度改变的主要原因 ,胶原网的形态变化可能影响心肌细胞功能。

氦-氖激光照射对大鼠心肌毛细血管影响的研究

目的 探求氦 氖 (He Ne)激光照射大鼠心前区 ,对心肌毛细血管的内径和密度以及毛细血管管壁内皮细胞胞饮小泡数量的影响。 方法 实验采用了墨汁灌注软蜡切片和透射电镜观察的方法 ,实验动物分对照组和激光照射组 ,其中照射组采用能量密度为 6 0 5J cm2 的He Ne照射 ,连续照射 10d ,1次 d。每组大鼠 10只。 结果 激光照射组的左心室前壁心肌内层毛细血管的内径 (7 2 8± 1 79) μm和毛细血管密度 (136 0± 16 1)支 mm均明显大于对照组 (P <0 0 5 )。电镜下 ,照射组心肌内层毛细血管的管壁内皮细胞内胞饮小泡数量明显增多 ,与对照组之间存在显著差异 (t=6 2 1,P <0 0 1)。 结论 以能量密度为 6 0 5J cm2 的He Ne激光照射大鼠心前区 ,可使心肌毛细血管的内径和密度增加、血管内皮细胞的物质转运能力增强 ,为He Ne激光照射能改善心肌微循环提供了形态学依据。