慢性尼古丁处理增强大鼠场景性恐惧记忆的研究

目的:检测慢性尼古丁处理对大鼠场景性恐惧记忆的影响。方法:以递增剂量法连续皮下注射尼古丁14 d建立尼古丁依赖模型,并随机将大鼠分为尼古丁组和生理盐水对照组。在戒断后第1天和第14天进行戒断症状评估;在第13天行自发活动检测;第14天进行场景性恐惧条件化训练,训练分为习惯化、条件化与检测三阶段,以大鼠僵直时间作为评价恐惧记忆指标。检测完成后,进行足底电击敏感性测试。结果:在戒断后第1天,尼古丁组大鼠戒断症状明显强于生理盐水组,而在第14天2组之间无明显差异。在场景性恐惧条件化任务中,2组大鼠在条件化阶段其僵直时间百分比无明显差异;在检测阶段,尼古丁组大鼠僵直时间百分比明显高于生理盐水组。此外,2组大鼠自发活动与足底电击敏感性无明显组间差异。结论:慢性尼古丁处理增强大鼠场景性恐惧记忆,该效应并非由戒断症状、自发活动或足底电击敏感性改变所引起。

Neu-P11减少大鼠睡眠潜伏期增加睡眠时间

目的基于多次睡眠潜伏期测试方法,检测一种新颖的褪黑素受体激动剂Neu-P11对大鼠睡眠潜伏期和睡眠时间的影响。方法大鼠多次睡眠潜伏期测试包括习惯化与检测两个阶段,两者间隔24 h。检测阶段包括总共3 h内的6个单个测试,单个测试时间是30 min;在每个单个测试中,先呈现5 min的干扰声刺激,之后25 min不呈现干扰声刺激。根据视频录像分析大鼠在25 min内入睡所需的时间（睡眠潜伏期）和睡眠时间。在检测之前6~8 min腹腔注射Neu-P11（5、10、20和50 mg/kg）或等体积溶媒。结果与溶媒组大鼠比较,Neu-P11（20和50 mg/kg）处理组大鼠其睡眠潜伏期显著性减少而睡眠时间显著性增加。结论在大鼠多次睡眠潜伏期测试中,Neu-P11可通过减少睡眠潜伏期增加睡眠时间,最终改善睡眠。

吗啡对大鼠前额叶与海马γ振荡活动的差异性影响

目的评估吗啡对大鼠前额叶与海马部位γ振荡活动的影响。方法大鼠吗啡腹腔给药,连续6天;同时在自由活动的大鼠上进行电生理信号记录与分析技术,动态记录吗啡给药时大鼠前额叶皮质与海马γ振荡活动的变化;采用γ振荡功率作为评价指标。结果在前额叶,吗啡组大鼠γ振荡功率显著性低于生理盐水对照组;在海马,吗啡组大鼠γ振荡功率亦显著性低于生理盐水对照组。此外,吗啡组大鼠前额叶γ振荡功率显著性低于海马部位。结论吗啡可引起大鼠前额叶与海马部位γ振荡活动降低,且该效应存在脑区差异性。

槟榔碱对泡沫细胞胆固醇流出和ABCA1表达的影响

目的探讨槟榔碱对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的鼠源性巨噬细胞性泡沫细胞形成的影响及可能机制。方法采用体外培养的鼠源性巨噬细胞株作为研究对象,加入ox-LDL(50 mg/L)诱导泡沫细胞,同时加入不同浓度的槟榔碱处理,油红O染色进行形态学观察,高效液相色谱法测定细胞内总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)和胆固醇酯(CE)的水平,3H标记的胆固醇测定胆固醇流出率。采用实时定量PCR和蛋白印迹法分别检测细胞中三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)的表达。结果 ox-LDL处理48 h后,与正常巨噬细胞相比,油红O染色阳性细胞显著增加,细胞体积明显增大,形态多呈圆形或不规则形;槟榔碱(10-6、10-5和10-4mol/L)组油红O染色阳性细胞数比泡沫细胞模型组显著减少,细胞体积明显缩小。与泡沫细胞模型组相比,槟榔碱(10-5和10-4mol/L)显著性降低细胞内TC、FC、CE水平及CE/TC,显著性增加细胞胆固醇流出率和ABCA1的表达。结论槟榔碱抑制ox-LDL诱导的鼠源性巨噬细胞性泡沫细胞形成,上调泡沫细胞中ABCA1的表达。

17β-雌二醇对去卵巢胰岛素抵抗大鼠主动脉舒缩功能损伤的保护作用

为观察17β-雌二醇(17beta-estradiol,17β-E2)对去卵巢胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)大鼠主动脉结构和舒缩功能的 影响及其可能机制,成年雌性Sprague-Dawley大鼠卵巢切除后,高果糖喂养8周诱导IR,同时给予生理剂量的17β-E2(30 μg／kg),每天皮下注射一次,并检测IR相关指标。大鼠胸主动脉石蜡切片,HE染色,图像分析系统测定其结构。采用 血管环灌流法,观察各组大鼠胸主动脉环对新福林(L-phenylephrine,PE)的收缩反应和对ACh、硝普钠(sodium nitroprusside, SNP)的舒张反应以及一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲脂(N-nitrl-L-arginine methyl ester,L- NAME)对卵巢切除+果糖喂养+17β-E2组大鼠胸主动脉Ach的舒张反应的影响;检测各组大鼠一氧化氮(nitric oxide,NO) 含量。结果显示:(1)17β-E2能防止高果糖诱导的去卵巢IR大鼠收缩压升高、高胰岛素血症和胰岛素敏感性下降:(2)各 组大鼠胸丰动脉的结构无显著性差异;(3)卵巢切除+果糖喂养组大鼠与卵巢切除组或果糖喂养组相比,血清NO显著降低, 胸主动脉对PE的收缩反应显著增强,对ACh的舒张反应显著降低,17β-E2能逆转上述改变,L-NAME可部分阻断17β-E2 的这种作用;(4)各组大鼠胸主动脉对SNP的舒张反应和去内皮后对PE的收缩反应均无显著差异。以上结果表明,17β-E2能 抑制高果糖诱导的去卵巢IP大鼠血管舒缩功能的紊乱,其机制一方向可能是部分通过血管内皮细胞NOS途径促进N0的释放, 保护内皮细胞;另一方面可能是通过降低血压,血清胰岛素水平,改善IR所致。

坏死性凋亡介导化学性缺氧引起的HT22海马神经元损伤和炎症

目的探讨坏死性凋亡(necroptosis)是否参与化学性缺氧诱导的小鼠HT22海马细胞损伤和炎症。方法采用化学性缺氧模拟剂氯化钴(CoCl_2)作用HT22细胞建立化学性缺氧损伤的细胞模型。蛋白质免疫印迹法测定受体相互作用蛋白3(receptor interacting protein 3,RIP3)的水平;应用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)测定海马细胞的存活率;乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)试剂盒检测细胞培养液中的LDH活性;罗丹明123染色荧光显微镜照相法检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP);双氯荧光素染色荧光显微镜照相法测定胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)生成水平;ELISA法检测细胞培养液中白介素-1β(IL^(-1)β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平。结果 600μmol·L^(-1)CoCl_2作用HT22细胞36 h可产生明显的细胞毒性作用,使细胞存活率降至(52.0±2.65)%,成功建立化学性缺氧损伤的海马细胞模型;此外,CoCl_2可引起HT22细胞的多种损伤和炎症,表现为培养液中LDH活性升高,ROS过度生成,MMP丢失以及炎症因子(IL^(-1)β和TNF-α)分泌均增多。40~100μmol·L^(-1)坏死性凋亡抑制剂necrostatin-1(Nec-1)共处理可抑制CoCl_2引起的HT22细胞存活率降低,其中80μmol·L^(-1)时对细胞毒性的抑制作用最明显。同时,80μmol·L^(-1)Nec-1可对抗CoCl_2可引起HT22细胞的上述多种损伤和炎症。此外,CoCl_2处理HT22细胞6~48 h可促进RIP3的表达水平,Nec-1可明显抑制CoCl_2对RIP3表达的上调作用。结论坏死性凋亡介导化学性缺氧诱导的HT22海马神经元损伤和炎症。

帕瑞昔布钠的作用机制及最新进展

帕瑞昔布钠是一种新型的COX-2特异性的抑制剂,现已广泛用于临床上预防和治疗中重度疼痛。但近年来发现,帕瑞昔布钠除了具有镇痛作用外还存在其他的一些非镇痛效应。帕瑞昔布钠具有减少脑缺血时神经元的损伤、保护/恶化缺血器官、抗肿瘤以及抗新生血管的形成作用等。这些非镇痛效应为临床上扩大帕瑞昔布钠的应用范围,提供了理论依据。本文对帕瑞昔布钠近年来的作用机制以及最新进展进行综述。

神经炎症在神经退行性疾病和精神疾病中的病理生理作用

阿尔茨海默病、帕金森病、抑郁症、精神分裂症、自闭症和成瘾症等中枢神经系统疾病,会由于其异常的思维模式、认知、情绪状态和行为导致生活品质下降。目前,上述疾病致病机制仍不十分清楚;近来临床与动物研究表明神经炎症可能与这些疾病的发生发展密切相关。在中枢神经系统,过度的炎症反应能激活小胶质细胞,从而导致促炎症因子包括白介素1β(IL-1β)、白介素6(IL-6)以及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的释放。反过来,促炎症因子亦能加剧神经炎症反应、神经元退化以及大脑功能损伤。本文主要就小胶质细胞介导的神经炎症在神经退行性疾病和精神疾病中的病理生理作用做一综述。

多媒体结合案例教学法在生理学理论教学中的应用

多媒体结合案例教学法是理论联系实际的有效教学方法,在此究将此法运用于生理学理论教学中并进行评价。大多数学生肯定了这种教学方法。期末考试中学生的成绩显示实验班平均分明显高于对照班(P<0.05),主观题正答率高于对照班(P<0.05)。说明此法值得进一步推广。

17-β雌二醇抑制去卵巢大鼠实验性胰岛素抵抗的形成

目的观察17-β雌二醇对果糖诱导的去卵巢大鼠胰岛素抵抗的影响。方法36只雌性大鼠卵巢切除后用高果糖饲料喂养8周,诱导胰岛素抵抗产生,然后随机分为模型组、雌激素替代组和溶媒对照组,另设立正常对照组大鼠12只,用普通饲料喂养8周。检测各组大鼠的体重、动脉收缩压、血脂、血清雌二醇、糖耐量、空腹血糖和空腹血清胰岛素水平,并计算胰岛素敏感指数。结果与正常对照组相比,模型组大鼠体重增加(P<0.05),收缩压升高(P<0.05),血清甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇和空腹血糖均升高(均P<0.05),空腹血清胰岛素水平升高(P<0.01),高密度脂蛋白胆固醇降低(P<0.05),胰岛素敏感指数降低(P<0.05),产生了胰岛素抵抗,葡萄糖耐量减低(P<0.05),胰岛β细胞受损;17-β雌二醇替代组逆转上述变化,胰岛素敏感指数增加(P<0.05),抑制胰岛素抵抗的产生。结论17-β雌二醇能够抑制高果糖饮食诱导的去卵巢大鼠胰岛素抵抗的产生、胰岛β细胞的损伤和血脂的异常,这说明雌性大鼠体内的雌二醇可能是其在高果糖诱导胰岛素抵抗的过程中受到保护的决定因素。

米非司酮对大鼠恐惧条件化及消退的影响

目的:研究米非司酮(RU486)对大鼠恐惧条件化及消退的影响。方法:大鼠连续4天给药(或生理盐水)后开始行为学实验,1 d适应环境;2 d进行恐惧条件化;3 d恐惧消退训练(也是条件化恐惧的表达检测阶段);4 d进行消退记忆再现检测。结果:在恐惧表达阶段,两处理组与各自对照组大鼠的僵直水平组间差异都无显著性;在消退再现检测阶段,高剂量RU486组大鼠的僵直水平显著高于对照组,低剂量RU486组与对照组大鼠的僵直水平组间差异无显著性。结论:米非司酮损害消退记忆的再现,且这种损害与剂量有关。

快速眼动睡眠剥夺对大鼠恐惧消退再现的影响

目的：研究两种实验范式AAA和ABA（A、B表示不同场景）中快速眼动睡眠剥夺（RSD）对大鼠恐惧消退再现的影响。方法：1d大鼠适应环境；2d进行恐惧条件化；3d恐惧消退训练并进行RSD；4d进行恐惧消退再现检测。结果：AAA实验范式中，在恐惧消退再现检测阶段，0～6hRSD组大鼠的僵直水平显著高于对照组（P〈0．05），其他阶段处理组与对照组大鼠的僵直水平都无显著性；ABA实验范式中，各阶段处理组与对照组大鼠的僵直水平都无显著性。结论：不同实验范式中RSD对恐惧消退影响不同，并且这种影响依赖于睡眠剥夺的时段。

快速眼动睡眠剥夺对大鼠线索性恐惧消退再现的影响

目的:研究RSD对大鼠线索性恐惧消退再现的影响。方法:1d大鼠适应环境;2d进行恐惧条件化;3d恐惧消退训练并进行RSD;4d进行恐惧消退再现检测。结果:在恐惧条件化及消退训练阶段,0-6hRSD组、6-12hRSD组与各自对照组大鼠的僵直水平组间差异都无显著性;在恐惧消退再现检测阶段,0-6hRSD组大鼠的僵直水平显著高于对照组,6-12hRSD组与对照组大鼠的僵直水平组间差异无显著性。结论:RSD损害消退记忆的再现,并且依赖于睡眠剥夺的时段。

成年海马神经发生与阿尔茨海默病的关系

阿尔茨海默病(Alzheimers disease,AD)即老年性痴呆,是一种呈渐进性恶化的致死性神经退行性疾病,其发病与年龄相关。成年海马神经发生是海马齿状回颗粒下区终身形成新生神经元的过程,近年来有大量研究表明,AD发生时成年海马神经发生也出现了改变,许多AD相关的分子同时也影响着成年海马神经发生,本文就AD中成年海马神经发生的改变和它们之间共同相关病理学机制进行了综述。

生理学教学引入循证医学的探讨

生理学是基础医学的一门重要课程,其内容复杂,学习难度大。在生理学教学过程中引入循证医学的理念,可提高医学生的学习兴趣,改变学生的学习方法,变被动学习为主动学习,从而提高教学质量。

17-β-雌二醇抑制去卵巢胰岛素抵抗大鼠血管重构的发生

目的观察17-β-雌二醇对高果糖诱导的去卵巢胰岛素抵抗大鼠血管重构的影响。方法将48只成年雌性SD(Sprague-Daw ley)大鼠随机分为正常对照组、模型组、17-β-雌二醇替代组、溶媒对照组,每组12只。正常对照组大鼠普通饲料喂养8周;模型组大鼠卵巢切除后,高果糖饲料喂养8周诱导胰岛素抵抗的产生;17-β-雌二醇替代组大鼠卵巢切除后,高果糖饲料喂养同时给予17-β-雌二醇(30μg/kg体重)每天皮下注射;溶煤对照组大鼠卵巢切除后高果糖饲料喂养8周,同时每天给予30μL/kg体重的无水乙醇皮下注射。实验8周末检测各组大鼠收缩压、血清雌二醇,空腹血糖和血清胰岛素水平,计算胰岛素敏感指数。大鼠放血处死后甲醛固定主动脉和肠系膜小动脉,石蜡包埋,切片,HE染色,病理图像分析系统测量主动脉和肠系膜小动脉重构的指标:内径、中膜、中膜/内径、中膜横截面积。结果与正常对照组相比,模型组大鼠收缩压、空腹血糖和血清胰岛素显著性升高,胰岛素敏感指数显著性降低,肠系膜小动脉内径减小,中膜和中膜/内径比值增加,而主动脉未见明显改变;17-β-雌二醇替代逆转上述改变。结论17-β-雌二醇能抑制高果糖诱导的去卵巢大鼠胰岛素抵抗和肠系膜小动脉重构的产生。

NOS抑制剂L-NAME对线索性恐惧消退的影响

目的探讨一氧化氮合酶(NOS)抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)对大鼠线索性恐惧消退的影响。方法采用足底电击结合声音建立恐惧条件化,然后只呈现声音而无电击进行消退,建立恐惧条件化与消退模型,在消退前注射L-NAME,观察大鼠的恐惧消退学习记忆能力。结果注射L-NAME大鼠,恐惧消退学习能力明显下降。结论NOS抑制剂L-NAME损伤了大鼠的恐惧消退学习。

替米沙坦对2型糖尿病大鼠胰腺β细胞的影响

目的观察替米沙坦(Tel)对高脂高果糖饲料(HFFD)喂养诱导的糖尿病SD大鼠胰岛结构和功能的影响,探讨其对糖尿病大鼠胰腺β细胞的作用。方法正常SD大鼠随机分为3组:标准饲料组(SCD)、HFFD组和HFFD+Tel组,每2周末测定空腹血糖(FSG)和空腹血胰岛素(FSI),第12周末测量体重,腹腔注射葡萄糖耐量试验(IGTT),处死大鼠,取胰腺组织称重,部分组织HE染色、免疫组织化学观察胰腺结构,另一部分胰腺组织RT-PCR检测胰腺组织中葡萄糖转运体2(Glut 2)mRNA的表达。结果HFFD组与SCD组比较,FSG和FSI水平升高,葡萄糖耐量受损,胰岛素分泌第一时相缺失,β细胞数目减少,胰腺组织Glut 2 mRNA表达降低。HFFD+Tel组与HFFD组比较,FSG和FSI显著降低,葡萄糖清除率得到明显改善,胰岛素分泌第一时相存在,β细胞数目增加,胰腺组织Glut 2 mRNA表达升高。结论Tel对糖尿病大鼠具有降低FSG和FSI、减轻胰岛素抵抗、保护胰腺β细胞的作用。

戒断对尼古丁依赖大鼠自发活动的影响

目的研究尼古丁慢性给药后不同戒断期对大鼠自发活动的影响。方法以递增剂量法连续皮下注射尼古丁酒石酸氢盐14天建立尼古丁依赖模型,并随机分为尼古丁组和生理盐水对照组。采用旷场实验检测戒断1天、14天大鼠自发活动(水平活动距离、直立次数、理毛时间、中央区和外周区的时间)。结果与对照组相比,尼古丁组戒断1天时的水平活动距离(P<0.05)、直立次数(P<0.001)明显下降,理毛时间(P<0.001)显著增加,中央区和外周区时间没有变化;戒断14天两组间各指标均无差异。结论尼古丁戒断初期降低大鼠活动度,随着戒断期延长逐渐恢复到正常水平。

前额叶与杏仁核在条件化恐惧消退中的作用

经典恐惧条件化是研究情绪学习记忆的重要动物模型;条件化恐惧消退是一主动的、新的学习过程而非原有恐惧记忆的简单遗忘。目前,对于恐惧消退神经机制的了解还远滞后于恐惧条件化本身。本文综述了近年来条件化恐惧消退神经机制研究的主要成果,对前额叶与杏仁核等相关脑区在恐惧消退中的作用进行了讨论。