不同生长期蛋鸡的体脂水平和肝脏脂肪酸合成酶活性的关系

不同生长期蛋鸡的体脂水平和肝脏脂肪酸合成酶活性的关系田维熙，董妍，权晖，陈文峰（中国科学院研究生院生物教学部，北京１０００３９）动物体脂的控制是一个复杂过程．不同种类不同年龄的动物体脂水平有很大差异，控制机制是什么，哪些是关键的控制因素？不久前我们曾...

光合细菌在对虾养殖中应用的效果试验

光合细菌在对虾养殖中应用的效果试验中国科学院研究生院生物工程研究所田维熙，陈俊芹，黄莉莉河北省国营南大港农场张华北，张树杰山东省日照市董家滩对虾养殖场光合细菌是一类能进行光合作用的有益微生物，它含有丰富的优质蛋白质、多种维生素、磷、钙和多种微量元素等...

鸭肝脂肪酸合成酶的胍变性与失活

报道了鸭肝脂肪酸合成酶在胍变性过程中构象变化和活性变化的关系，首次验证了邹承鲁提出的酶活性部位柔性构象的理论适用于多功能复合酶，同时该酶变性及复性均可测定出多个阶段，且证明有无活性稳态酶存在。在低浓度盐酸胍溶液中该酶的全反应活性和其中两个还原部位单独活性被同步可逆抑制，随着胍浓度增高，出现不可逆失活且程度和速度均迅速提高，在０．５４ｍｏｌ／Ｌ胍中该酶全反应活性在１．５分钟内已有一半不可逆丧失，终态只余约５％活性。失活过程有快相和慢相。全反应的失活程度及速度均大大高于两个还原反应。全反应的快相失活中，还原反应仍保持大部分活性，此时稀释可恢复活性。慢相失活使全反应和两个还原反应均失活，此时简单稀释不能恢复活性。在０．７２ｍｏｌ／Ｌ胍中该酶的内源荧光开始出现峰位红移和峰强下降，紫外差光谱增大，约１至２ｍｏｌ／Ｌ胍处有一个台阶，２．１６ｍｏｌ／Ｌ以上胍中其内源荧光和紫外差光谱再次迅速变化，２．８８ｍｏｌ／Ｌ以上胍形成第二台阶，不再变化。ＣＤ谱的变化是类似的规律。该天然二聚体酶中的的２０％硫基可和ＤＴＮＢ极快反应，应为表面硫基。胍处理后表面巯基增加，至２．８８ｍｏｌ／Ｌ胍中全部ＳＨ均已可迅速和ＤＴＮＢ作用。该酶的多阶?

羧酸盐对鸭肝脂肪酸合成酶的抑制作用

本文研究了一系列羧酸盐对鸭肝脂肪酸合成酶的抑制规律,抑制动力学以及对几个含羧基的巯基试剂修饰该酶的保护动力学,并计算了相应的在酶上结合的平衡常数。提出羧酸盐结合于该酶缩合中心区域一个可结合羧基负离子的部位,该部位也是丙二酰基的结合部位,它可使携带了丙二酰基的活臂向缩合中心定向运动,并为缩合活性所必需。

动物的体脂水平和脂肪酸合成酶活性的调控

动物的体脂水平和脂肪酸合成酶活性的调控田维熙（中国科学院研究生院，北京１０００３９）关键词体脂调控，脂肪酸合成酶减肥降脂，现在已是一个世界范围的重大医学保健问题。对于肥胖机制，现在可以说是众说纷坛，莫衷一是。已可以肯定的是体脂水平控制是一个复杂过程，...

鸭肝脂肪酸合成酶的NADPH底物抑制及作用动力学

己知动物脂肪酸合成酶的底物乙酰辅酶Ａ和丙二酰辅酶Ａ具有竞争性双底物抑制的乒乓机制。实验发现鸭肝脂肪酸合成酶的第三个底物ＮＡＤＰＨ也具有底物抑制，并研究了它的规律及与ＮＡＤＰＨ有关的稳态动力学。发现对于该酶的全反应，增加丙二酰辅酶Ａ浓度，降低环境盐浓度，均使ＮＡＤＰＨ底物抑制减少。但以ＮＡＤＰＨ作底物的酮酰还原和烯酰还原二步单独反应以及包含四步单独反应的乙酰乙酰辅酶Ａ还原反应都无ＮＡＤＰＨ底物抑制现象。ＮＡＤＰＨ底物抑制对丙二酰辅酶Ａ为竞争性，丙二酰辅酶Ａ底物抑制对ＮＡＤＰＨ为非竞争性。在全反应中ＮＡＤＰＨ和丙二酰辅酶Ａ之间发现为乒乓机制，在乙酰乙酰辅酶Ａ还原反应中，两个底物ＮＡＤＰＨ和乙酰乙酰辅酶Ａ之间则表现为序列反应机制。降低环境盐浓度使ＮＡＤＰＨ和丙二酰辅酶Ａ之间的乒乓机制向序列机制转化。在全反应中，ＮＡＤＰ产物抑制相对ＮＡＤＰ为竞争性，对丙二酰辅酶Ａ为非竞争性。

何首乌提取物对脂肪酸合酶的抑制作用

最新报道脂肪酸合酶 (FAS)是治疗肥胖症的潜在靶部位 ,但目前已知的FAS抑制剂还很少 .测定表明 ,中药何首乌提取物对FAS同时具有很强的快结合可逆抑制和慢结合不可逆抑制作用 .萃取的最佳溶剂为 4 0 %乙醇水溶液 .该提取物对FAS全反应的半抑制浓度为 0 .0 0 5mg ml(以萃取时中药重量计 ) ;不可逆抑制过程为两相 ,在 0 4 6mg ml浓度下在 0 5min内快相失活超过 5 0 % ,慢相在 32min时失活达 90 % .该提取物对FAS中的酮酰还原反应有强抑制 ,半抑制浓度为 0 0 18mg ml,对烯酰还原反应有弱抑制作用 .抑制动力学分析表明 ,何首乌提取物对FAS的抑制和底物NADPH之间呈非竞争性关系 ,和丙二酰辅酶A接近竞争性关系 ,而与乙酰辅酶A为反竞争性关系 .推测何首乌还含有作用于FAS中的丙二酰转酰酶的抑制剂 .用何首乌提取物口服饲喂大鼠 ,可明显减低大鼠摄食量和降低大鼠体重 ;实验结束时实验组大鼠肝脏FAS活性低于对照组 .以上结果表明 ,中药何首乌提取物对FAS有很强的抑制作用 ,其抑制能力明显强于已知抑制剂 ,其动力学表现也和已知抑制剂完全不同 ,预计为新的抑制剂 。

元宝枫叶中黄酮类化合物的提取工艺优选

目的优化提取元宝枫叶中黄酮类化合物,并比较不同条件下元宝枫提取物抑制脂肪酸合成酶(FAS)活性的大小。方法采用L16(44)正交试验考察不同提取工艺条件,测定元宝枫叶中黄酮类化合物的量及其抑制FAS活性的大小。结果黄酮类化合物的最佳浸提工艺:25℃温度下,乙醇体积分数为40%,固液比为1∶15,提取2.5h。结论元宝枫叶中黄酮类化合物的量及其对FAS的抑制率之间不呈现正相关。其中一部分黄酮类成分对FAS有抑制作用。

中药寒热相关药性和抑制脂肪酸合酶能力关系的探索

测定了药典中106味温热性中药和119味寒凉性中药对脂肪酸合酶的抑制水平,发现温热药中对该酶强抑制的频数高于寒凉药约38%.进一步分析发现,温热药中的温里和散内寒药中强抑制药的频数大幅提高,而寒凉药中的清热泻火、明目、清虚热药中强抑制药的频数则进一步降低,差异均具有显著性.综合以上结果提出,直接影响能量代谢系统、造成能量代谢率变化是形成中药的寒热药性的因素之一.

首乌藤的化学成分

目的分离和鉴定首乌藤中的化学成分。方法利用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱法等进行分离纯化,并通过理化常数测定和光谱分析鉴定了其化学结构。结果分离得到9个化合物,分别鉴定为:大黄素甲醚(physcion,1)、大黄素-8-甲醚(questin,2)、2,5-二甲基-7-羟基色原酮(2,5-dimethyl-7-hydroxychromone,3)、大黄素(emodin,4)、儿茶素(catechin,5)、大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷(physcion-8-O-β-D-glucopyranoside,6)、决明蒽酮-8-O-β-D-葡糖苷(torachrysone-8-O-β-D-glucopyranoside,7)、大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷(emodin-8-O-β-D-glucopyranoside,8)、2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(2,3,5,4′-tetrahydroxystil-bene-2-O-β-D-glucopyranoside,9)。结论化合物3、7为该种植物中首次分离得到的化合物。

银杏叶丙酮提取物对动物脂肪酸合酶的抑制

银杏叶丙酮提取物（AEGL）对动物脂肪酸合酶（FAS）有强抑制作用。选定的萃取条件是室温下用60％丙酮搅拌萃取30—60min。该萃取液IC50值为4．66μg／mL，抑制能力明显强于已知的FAS抑制剂，有效物的初步分离显示，对FAS有抑制作用的成分可能存在于黄酮组分中。酶学动力学研究表明，抑制包含可逆抑制和不可逆抑制两部分。推测酮酰还原功能域（KR）的NADPH结合部位是其作用部位之一。标准银杏叶提取物EGb761对FAS的可逆抑制和不可逆抑制都明显比银杏叶的60％丙酮萃取液弱，后者对NADPH呈现比较明显的竞争性，不同于EGb761，这表明银杏叶还具有新的应用开发领域。

四川边茶提取物对脂肪酸合酶的抑制作用

四川边茶(康砖)是黑茶的一个主要品种,所含茶多酚与绿茶和红茶不同.本研究利用酶动力学方法测定了边茶萃取物对脂肪酸合酶(Fatty Acid Synthase,FAS,E.C.2.3.1.85)的抑制作用,近几年研究报道该酶是减肥和抑癌的双重潜在靶点.结果表明,边茶萃取物对FAS有可逆和不可逆抑制双重作用,最佳萃取溶剂为50%的乙醇,在常温下5h即可达到最佳萃取效果.用开水泡茶的方法经两次浸取可提取出近60%的抑制FAS有效物,比绿茶的浸出效率约高1倍,但需较长的浸泡时间.边茶的新茶对脂肪酸合酶的抑制能力并不强,存放数年的边茶抑制能力最好,其后有所下降,但大部分抑制活性可保持20年以上,而30年以上保存期可能会使抑制能力明显下降.边茶提取物与底物乙酰辅酶A和丙二酸单酰辅酶A的竞争性质都是竞争性与非竞争性的混合型;对FAS中的酮酰还原反应的抑制不明显,这说明酮酰还原酶结构域并不是其主要作用位点;这些和绿茶及红茶都有不同.由实验结果分析边茶中的抑制剂不同于红茶和绿茶,可能是茶多酚中的茶褐素,其抑制能力高于儿茶素而接近茶黄素.这些结果表明边茶在减肥、抑癌等方面可能具有良好的应用前景.

酸提高绿茶提取物对脂肪酸合酶的抑制活性

脂肪酸合酶和肥胖、癌症等人类重大疾病相关.获取高活性脂肪酸合酶抑制剂有重要应用价值.50%乙醇的绿茶提取物具有抑制脂肪酸合酶和经口服降低大、小鼠体重的功能.该提取物在酸的作用下可明显地提高其抑制脂肪酸合酶的能力.采用1mol/L硫酸或盐酸在100℃下处理绿茶提取物,发现该提取物对脂肪酸合酶的抑制活性随时间逐步提高.在25℃至120℃温度下,提高处理温度使抑制活性提高的速度加快和程度加大.用1mol/L盐酸120℃处理35min或3mol/L盐酸100℃处理30min可使绿茶提取物抑制脂肪酸合酶的半抑制浓度下降20倍左右,达到1μg/ml以下.用pKa值4·76至1·27的1mol/L浓度的4种有机酸在100℃作用150min使绿茶提取物抑制活性分别提高到1·48至5·84倍.提高酸的浓度也使被作用的提取物的抑制活性提高的更多.表现抑制活性提高的速度及程度和氢离子浓度正相关.判断绿茶提取物在酸作用下抑制活性的提高来源于其中所含儿茶素在氢离子作用下发生了化学变化.初步实验表明其变化过程比较复杂,确定其分子机制还需进一步的研究工作.

两类脂肪酸合酶中酮酰还原酶的结构、功能和药物开发前景

自然界中脂肪酸合酶(FAS)以FASⅠ和FASⅡ两种形式存在。存在于动物中的FASⅠ是由多活性中心构成的复合酶,存在于植物和细菌中的FASⅡ则是由多个独立蛋白构成的酶体系。FASⅠ和FASⅡ中催化酮酰基团还原的酶有一定同源性,酶催化动力学和酶抑制动力学的性质相似,因分子量过大,目前尚无详细的FASⅠ空间结构信息。通过比较两种类型FAS中酮酰还原酶结构与功能的异同,进一步了解FASⅠ的结构与功能。对两种不同进化程度和存在形式的同源酶进行比较研究,将有利于揭示复合酶的结构与功能,并利于寻找新型特异性蛋白抑制剂,为新药开发提供先导化合物,具有十分重要的理论意义和应用价值。

首乌藤提取物对动物脂肪酸合酶的抑制及其减肥抑食作用

最新报道脂肪酸合酶(FAS)是治疗肥胖症的潜在靶部位.实验测定表明,中药首乌藤的提取物对FAS具有很强的抑制作用,半抑制质量浓度为(0.61±0.024)μg/mL.同时测定,该提取物对FAS中的酮酰还原反应有强抑制,半抑制质量浓度为(2.14±0.12)μg/mL,说明FAS中的酮酰还原酶是该提取物的作用部位之一.抑制动力学分析表明,首乌藤提取物对FAS的抑制和底物乙酰辅酶A、丙二酸单酰辅酶A之间皆呈非竞争性关系;和NADPH之间在低抑制剂质量浓度下的表现近似反竞争性,在高抑制剂质量浓度下接近竞争性的关系.推测首乌藤中可能有多种FAS抑制剂.用首乌藤提取物口服饲喂大鼠和小鼠,可明显减低实验动物的摄食量和体重;测定实验组大鼠肝脏的FAS活性,明显低于对照组.实验结果对于研究FAS抑制剂和抑制机制以及在防治肥胖症的应用上可能具有重要的价值.

熊果酸抑制脂肪酸合酶及诱导HepG2细胞凋亡机制研究

采用MTT法检测发现熊果酸引起肝癌细胞HepG2活性下降的半抑制浓度IC50为68.23μmol.L-1,通过Hoechst 33258染色法检测得出熊果酸诱导HepG2细胞的凋亡,其作用强度呈药物浓度依赖性.在HepG2细胞培养过程中,加入熊果酸后细胞内脂肪酸合成酶(FAS)的表达量及活性降低.在培养基中添加棕榈酸钠可以在一定程度上补救熊果酸引起的HepG2细胞凋亡.推论熊果酸下调FAS的表达影响了脂肪酸合成,肿瘤细胞缺乏正常代谢所需要的能量及原料,导致肿瘤细胞凋亡.

草莓提取物对脂肪酸合酶及脂肪细胞的抑制作用

脂肪酸合酶(FAS)是治疗肥胖症的潜在靶点.实验测定表明,草莓果肉渣及草莓叶的乙醇提取物再经乙酸乙酯萃取的有效组分对FAS具有强抑制作用,且分别对FAS的底物丙二酸单酰辅酶A、乙酰辅酶A呈非竞争性和竞争性抑制.经HPLC-MS分析,槲皮素和鞣花酸可能是草莓有效组分中起主要作用的物质.草莓叶及果肉渣乙酸乙酯提取组分均可有效抑制3T3-L1前脂肪细胞中脂滴积累,且呈剂量依赖性.实验结果对于研究草莓在防治肥胖症的应用上可能具有重要价值.