星点设计-效应面法优化乙醚提取万寿菊中叶黄素的工艺条件

为优化从万寿菊鲜花中提取叶黄素的提取工艺条件,以乙醚与水的不同混合比例及振荡时间作为考察对象,提取率作为考察指标,在单因素试验基础上,采用星点设计-效应面法,通过对设计的13组试验结果进行多元线性回归分析,建立数学模型,绘出三维效应面图,优化出最佳提取条件为:乙醚与水的体积比为7.12,振荡时间为27.78 min。按照最佳工艺条件实测提取率是2.51%,与理论预测的偏差值为4.9%。该模型失拟项不显著,模型可靠,实验设计简单,具有较好的可预测性。

水溶肥不同施用量对桃生长发育及果实品质的影响

采用3年生桃品种仙岛11号为试材,通过设0(清水对照)、200、350、500、650、800 g/株6个施肥量梯度,观察测定不同施肥量桃树生长发育情况、果实品质变化、香气、经济效益情况,旨在选出最优施肥量,为生产上提供使用依据、减少资源浪费及土壤污染并节约成本。结果表明:施肥量350 g/株处理桃树叶片气孔导度、叶面积与对照相比得到显著提升,分别增加了21.74%、79.76%;单果重、横径、纵径与对照相比分别显著增加了23.42%、7.43%、1.99%;可溶性固形物含量达18.39%,经济效益也得到了明显提高。通过隶属函数法排名得出350 g/株是最优施肥量。

超声波辅助提取大豆异黄酮的条件研究与优化

用脱脂的大豆粉作为实验原材料,采用超声波辅助法提取大豆中的异黄酮。考察在不同的提取因素下,对大豆异黄酮提取率的影响,并确定异黄酮提取实验的最佳提取条件。实验用响应面分析法优化大豆中大豆异黄酮的提取条件,实验分别从超声时间、乙醇浓度、液料比三个条件进行研究,最后,由Design-Expert软件计算得出提取实验的最优条件为:提取时间40 min,液料比20∶1(mL∶g),乙醇浓度70%,在最优条件下进行提取得到大豆异黄酮提取率为2.0505%。

IL-6、Fib、DD对预测高血压患者脑出血风险的价值分析

目的:探讨血清白细胞介素6(Interleukin-6,IL-6)、纤维蛋白原(Fibrinogen,Fib)、D二聚体(D-dimer,DD)水平在预测高血压患者脑出血风险中的应用价值。方法:选取2019年9月至2022年9月本院收治的120例高血压患者为研究对象,随访3y,分析研究对象的脑出血状况。根据是否发生脑出血分脑出血组和未发生脑出血组。采用免疫比浊法检测血清IL-6、Fib、DD水平,并进行多元Logistic回归分析该类患者脑出血的危险因素,采用受试者工作特征(Receiver operating characteristiccurve,ROC)曲线分析血清IL-6、Fib、DD水平预测高血压患者脑出血风险的效能。结果:脑出血组患者高血压病程明显长于未发生脑出血组,有颈动脉粥样硬化病史与脑微出血病史患者占比及血清IL-6、Fib、DD水平均明显高于未发生脑出血组(P<0.05)。多因素多元Logistic回归分析显示,高血压病程较长、有颈动脉粥样硬化病史或脑微出血病史及血清IL-6、Fib、DD水平较高是高血压患者脑出血的重要危险因素。血清IL-6、Fib、DD水平预测高血压患者脑出血的曲线下面积分别为0.871、0.760、0.997。结论:高血压脑出血患者血清IL-6、Fib、DD均呈现高水平表达,在预测该疾病风险中均具有较高应用价值。

同型半胱氨酸联合脂蛋白a及D二聚体在糖尿病早期微血管病变的临床价值

目的分析同型半胱氨酸(Hcy)、脂蛋白a[Lp(a)]和D-二聚体(D-D)在糖尿病早期微血管病变诊断中的应用效果。方法回顾性分析2022年01月~2023年01月接受治疗的90例2型糖尿病患者资料,根据患者微血管病变情况分为微血管病变组(n=40)和无微血管病变组(n=50)。测定所有患者的Hcy、Lp(a)及D-D水平,并分析各指标单独与联合检测对微血管病变的诊断效果。结果微血管病变组Hcy、Lp(a)和D-D水平及检测阳性率均高于无微血管病变组,具有统计学差异(P<0.05)。血清Hcy单独诊断早期微血管病变的AUC为0.896,敏感度70.00%,特异性98.00%,最佳截断点为16.565μmol·L^(-1)。Lp(a)单独诊断早期微血管病变的AUC为0.904,敏感度72.50%,特异性96.00%,最佳截断点为327.160 mg·L^(-1)。血清D-D单独诊断的AUC为0.814,敏感度57.50%,特异性96.00%,最佳截断点为1.910 mg·L^(-1)。血清Hcy、Lp(a)联合D-D检测诊断微血管病变的AUC为0.990,敏感度95.00%,特异性98.00%,显著优于各指标单独诊断效能。结论Hcy、Lp(a)和D-D联合检测对糖尿病患者微血管病变具有较高诊断价值,有助于临床早期发现和预防患者的微血管病变等并发症发生,可改善患者预后。

共情护理与综合护理干预在神经内科脑梗死患者康复中的应用效果

神经内科收治患有脑梗死疾病患者康复中,共情护理和综合护理联合干预效果。方法 随机将2020.02~2023.01我神经内科收治身患76例脑梗死疾病的患者等分至传统组(传统护理模式)/受试组(共情护理和综合护理联合干预模式),对2组各指标水平予以观察对比。结果 本次护理中2组患者的配合度/情绪状态/康复效果/护理质量相关数据对比有突出差异(P<0.05),受试组的共情护理和综合护理联合干预模式之下,能够让脑梗死患者高度配合本次护理工作,对情绪状态/康复效果/护理质量所起到改善作用有显著性。结论 神经内科在对患有脑梗死疾病患者开展康复护理时,可广泛应用共情护理和综合护理联合干预模式,以此获取理想的临床效果。

责任制护理在脑血栓护理中进行推广的意义与价值

分析将责任制护理模式应用到脑血栓护理中的实际方法与价值。方法 本次研究选择以脑血栓患者为研究对象,挑选病历资料齐全、符合研究条件的患者共有140例,做随机分组,70例患者归入参照组,70例患者归入研究组,后者采取责任制护理。在比较研究期间,从生理以及心理两方面深入分析责任制实施的意义与价值。结果 语言功能评分、肢体运动功能评分、神经功能缺损评分结果发展趋势相似,护理前两组的差异可忽略不计,护理后两组差距拉大,且达到P值<0.05的标准,研究组的各项数值变化更明显。焦虑评分、抑郁评分结果发展趋势相似,护理前两组的差异可忽略不计,护理后两组差距拉大,且达到P值<0.05的标准,研究组的各项数值变化更明显。结论 责任制护理比传统护理更适用于脑血栓患者,能够提高患者的生活质量,并带给患者积极的感受,感染患者的情绪,护理人员要提高责任意识,积极贯彻责任制。

筛选耐低温茄子种质资源的方法比较

低温霜冻影响着茄子的栽培范围和栽培时间,因此筛选和培育耐低温的茄子品种和资源,是茄子生产和科研面临的紧要任务。茄子在遭受低温胁迫时,会导致外部形态和内部生理生化发生变化。低温胁迫对叶片的影响最为直观,如叶片出现萎蔫、下垂、有水渍斑等现象。根据茄子在低温胁迫下的形态变化,计算低温伤害指数并进行低温伤害分级,可以清楚的显示其受到低温伤害的程度[1]。

果园生草与除草技术

果园生草是较为科学的现代果园土壤管理技术,于19世纪末在美国出现[1],在欧美、日本等农业发达国家,生草果园已占果园总面积的60%以上,在有的国家甚至超过了90%[2]。果园生草具有很多优点:1)减少土壤和水分流失;2)增加土壤有机质含量,并提高土壤养分和碳源利用率[3-4];3)改善土壤理化性质,增加团粒结构[5-6];4)增加天敌数量和丰富度,提高果园生物多样性[7]。

亚临界萃取与分子蒸馏结合提取艾叶精油及其成分分析

采用亚临界低温萃取与分子蒸馏相结合的方法(亚临界萃取-分子蒸馏法),对汤阴北艾艾叶精油进行提取,作为对比,对同一批艾叶采用水蒸气蒸馏法提取精油.以顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用仪对艾叶和所得精油进行定性和定量成分分析.实验结果表明,用亚临界萃取-分子蒸馏法制得精油的得率(0.25%)显著高于水蒸气蒸馏法(0.13%).艾叶直接进行顶空固相微萃取后测得其主要成分有45种,通过亚临界萃取-分子蒸馏所得精油含42种主要成分,水蒸气蒸馏所得精油含有37种主要成分.亚临界萃取-分子蒸馏所得精油与艾叶所包含主要成分接近,都有含量较高的水合桧烯,但水蒸气蒸馏所得精油高沸点组分及其含量明显少于艾叶或者亚临界萃取-分子蒸馏所得精油.该方法为艾叶及其他富含挥发油成分的植物精油提取分离提供了科学依据和可靠的工业化生产条件.

番木瓜肌动蛋白CpActin基因的克隆及其在果肉中的表达

以番木瓜果肉为试材,提取总RNA,反转录为双链cDNA。采用cDNA末端快速扩增方法(RACE),获得了番木瓜果肉Actin基因的全长cDNA序列,将其命名为CpActin,Genbank登录号为FJ696416。CpActin全长cDNA为1533bp,含有一个1134bp的开放阅读框,编码377个氨基酸,与毛白杨、葡萄、水稻、拟南芥的Actin同源性分别为98.94%、98.67%、96.29%、94.69%。利用邻接法构建了部分高等植物、哺乳动物和真菌的Actin系统进化树,结果表明番木瓜与葡萄的Actin进化距离最小。采用半定量RT-PCR技术分析CpActin基因在不同成熟度番木瓜果实中的表达情况,发现该基因的表达水平没有明显差异,表明CpActin基因可以作为内参,进行番木瓜其他果实基因差异表达的研究。

“石门核桃”种质资源遗传多样性的SSR分析

为了确定“石门核桃”种质资源的遗传多样性,采用SSR标记技术,对20份“石门核桃”实生优株,15份核桃种质资源进行了遗传多样性分析。结果表明,筛选出的16对SSR引物扩增的等位基因变幅为3~10,片段范围100~306 bp,多态性信息含量在0.4810~0.7656之间,具有较高的多态性。采用UPGMA法在遗传距离0.26处将35份资源分为5类,麻核桃种质盘龙纹独自聚为1类,“石门核桃”实生资源与其他种质资源分布于其他4类中。

番木瓜GDP-D-甘露糖焦磷酸化酶基因的克隆及分析

采用cDNA末端快速扩增方法,获得了番木瓜果实GDP-D-甘露糖焦磷酸化酶(GMP)基因的cDNA全长序列,将其命名为CpGMP,GenBank登录号为FJ489652.然后,根据拼接序列设计开放性阅读框上、下游引物,扩增得到了CpGMP基因的开放性阅读框序列和DNA序列.ORF序列编码361个氨基酸,DNA序列包含4个外显子和3个内含子.序列分析表明,番木瓜GMP与大果黄褥花、桃、番茄、拟南芥、水稻GMP的同源性分别为90.30%、89.47%、88.92%、88.09%、85.87%.半定量RT-PCR分析表明,CpGMP基因随着番木瓜果实的成熟表达量逐渐增加,软化时又逐渐降低.

环磷腺苷的合成

以腺苷为原料,经磷酰化得到腺苷的5′- 位二氯磷酸酯,再经强碱环化得到环磷腺苷,收率58%,纯度99%以上。

基于高通量测序发掘番木瓜果实成熟相关miRNA

【目的】番木瓜是典型的呼吸跃变型果实,外源乙烯处理使番木瓜呼吸跃变提前,促进果实成熟。分离番木瓜果实成熟相关miRNA,为深入了解呼吸跃变型果实的成熟分子机制奠定基础。【方法】利用高通量测序技术对乙烯(ETH)、1-MCP和清水对照(CG)处理的番木瓜果实进行miRNA和转录组高通量测序,然后对测序获得数据进行生物信息学分析,进行miRNA鉴定和靶基因预测,并与转录组测序结果进行关联分析。【结果】乙烯、1-MCP和对照处理分别获得10734196、16486803和16067290条纯净序列,共鉴定出523个miRNA。其中,已知miRNA个数为1-MCP(303)、CG(214)和ETH(239),新miRNA个数为1-MCP(184)、CG(188)和ETH(114)。与对照相比,在乙烯处理中上调和下调表达的miRNA分别是123和72条。靶基因预测共获得5053个靶基因,KEGG功能富集分析显示它们参与了戊糖、葡萄糖醛酸转换、淀粉和蔗糖代谢、卟啉和叶绿素代谢、类胡萝卜素合成等代谢途径。筛选出的番木瓜果实成熟衰老相关候选miRNA,包含4个果实软化调控相关miRNA(miR167-y、miR4993-x、miR3946-x和miR5059-x)、3个果实颜色调控相关miRNA(miR4993-x、miR815-y和miR7810-x)、3个激素调控相关miRNA(miR4993-x、miR8004-x和miR9722-x)和4个转录因子调控相关miRNA(miR5641-y、miR9722-x、miR838-y和miR319-y)。【结论】筛选的番木瓜果实成熟衰老相关miRNA为今后果实成熟衰老调控网络研究提供了可能的线索。

肝主疏泄与失眠的理论探析

通过对肝与睡眠的关系、肝失疏泄与失眠的关系等相关理论进行系统归纳与总结,认为肝主疏泄通过调畅气机,调畅情志,维持正常睡眠;肝失疏泄则气机受阻情志不畅,气血失和则心神不安发为失眠。

改良热硼酸小量法提取番木瓜果肉总RNA

通过改良热硼酸小量法提取两个发育时期的番木瓜果实果肉总RNA。结果表明,这种方法能排除番木瓜果肉中多糖、木瓜蛋白酶、色素等物质的干扰,提取到高质量RNA,OD260/OD280在1.7～2.0之间,RNA完整,无DNA、蛋白质等污染。经检验,可以用于后续cDNA-AFLP等分子生物学实验。

2,6-二氯嘌呤核苷的合成工艺研究

以2,6-二氯嘌呤和1,2,3,5-四乙酰核糖为原料,四氯化锡为催化剂,130℃下反应18min,得到中间体2,6-二氯嘌呤-2',3',5'-三乙酰基核苷。该中间体在硫酸-甲醇中脱酰基得到2,6-二氯嘌呤核苷,为白色粉状结晶,收率63%,纯度(HPLC)≥99.0%,熔点152￣154℃。

番木瓜果肉果胶裂解酶基因克隆及反义植物表达载体的构建

采用cDNA末端快速扩增方法,获得了番木瓜果肉果胶裂解酶(Pectate lyase,PL)基因的完整3′端和部分5′端序列。然后,根据本实验室已经获得的PL基因5′端DNA序列及笔者得到的3′端序列设计上、下游引物,以番木瓜基因组DNA为模板扩增得到PL基因的开放性阅读框。该序列编码385个氨基酸,与草莓、桃、芒果、拟南芥氨基酸序列的同源性分别为83.38%、75.76%、73.68%、65.96%。根据PL基因设计特异引物,扩增其保守区片段,将其反向插入pBI 121的CaMV 35 S启动子和Nos终止子之间,成功构建反义植物表达载体pBP,并导入到根癌农杆菌EHA 105中。