麦冬多糖对烟曲霉菌性角膜炎小鼠炎症反应的影响

目的探讨麦冬多糖(OJP)对烟曲霉菌性角膜炎(AFK)小鼠的治疗作用及机制。方法通过对小鼠角膜注射烟曲霉菌(AF)悬浮液建立AFK模型,将54只建模成功的AFK小鼠随机分为5组:模型组(n=11)、低剂量组(n=11)、中剂量组(n=11)、高剂量组(n=11)和激动剂组(n=10);取未建模的小鼠作为对照组(n=10)。低剂量组、中剂量组和高剂量组小鼠分别用50μL浓度为5,10,20 g/L的OJP溶液滴眼。激动剂组小鼠用50μL浓度为20 g/L的OJP溶液滴眼,同时用0.25 mg/kg的Toll样受体4(TLR4)激动剂CRX-527溶液灌胃。对照组和模型组小鼠分别用50μL生理盐水滴眼。各组小鼠均给药1周。治疗结束24 h后,在裂隙灯显微镜下进行角膜炎症评分。采用苏木素伊红(HE)染色观察角膜形态;采用ELISA法检测角膜组织上清液中促炎因子白介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-6水平;采用qRT-PCR分析角膜IL-1β、TNF-α、IL-6、TLR4、髓样分化因子88(MyD88)、核因子-κB(NF-κB)p65的mRNA水平;采用Western blot分析角膜TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白相对表达。结果与对照组比较,模型组大鼠的角膜炎症评分升高(P<0.05),角膜出现明显病变,角膜IL-1β、TNF-α、IL-6蛋白表达和mRNA水平均升高(P<0.05),角膜TLR4、MyD88和NF-κB p65的mRNA水平和蛋白表达均升高(P<0.05)。与模型组比较,低剂量组、中剂量组和高剂量组大鼠的角膜炎症评分降低(P<0.05),角膜病变减轻,角膜IL-1β、TNF-α、IL-6蛋白表达和mRNA水平均降低(P<0.05),角膜TLR4、MyD88和NF-κB p65的mRNA水平和蛋白表达均降低(P<0.05)。与低剂量组比较,中剂量组和高剂量组大鼠的角膜炎症评分降低(P<0.05),角膜病变减轻,角膜IL-1β、TNF-α、IL-6蛋白表达和mRNA水平均降低(P<0.05),角膜TLR4、MyD88和NF-κB p65的mRNA水平和蛋白表达均降低(P<0.05)。与高剂量组比较,激动剂组大鼠的角膜炎症评分升高(P<0.05),角膜病变加重,角膜IL-1β、TNF-α、IL-6蛋白表达和mRNA水平均升高(P<0.05),角膜TLR4、MyD88和NF-κB p65的mRNA水平和蛋白表达均升高(P<0.05)。结论OJP可能通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路减轻AFK小鼠角膜炎症损伤。

玻璃体切割手术联合全视网膜光凝术治疗糖尿病视网膜病变临床疗效观察

目的:观察玻璃体切割手术(PPV)联合全视网膜光凝术(PRP)对糖尿病视网膜病变(DR)的临床疗效。方法:选取29例DR患者(29眼)作为研究对象,根据手术方法的不同分为PPV组(14例,14眼)和PRP组(15例,15眼)。PPV组给予PPV联合PRP治疗,PRP组给予单纯PRP治疗。随访2年后,比较两组患者术前与随访2年后最佳矫正视力(BCVA)以及糖尿病黄斑水肿(DME)、视盘新生血管(NVD)和视网膜新生血管(NVE)出现情况。结果:经过2年随访,PPV组患者BCVA优于PRP组,差异具有统计学意义(P<0.05)。PPV组视网膜前出血/玻璃体出血发生率低于PRP组,差异具有统计学意义(P=0.042)。PPV组随访2年后BCVA较术前轻度提高,但差异无统计学意义(P=0.102)。PRP组随访2年后BCVA较术前显著下降,差异具有统计学意义(P=0.006)。结论:对于NPDR和早期PDR,PPV联合PRP治疗可能维持患者现有视力,甚至提高患者视力,可以作为DR治疗的一种治疗选择。

糖尿病与非糖尿病干眼症患者临床特点及相关细胞因子表达研究

目的:比较糖尿病与非糖尿病干眼症患者的临床特点。方法:收集干眼症患者89例,其中糖尿病干眼症患者42例(DM组),非糖尿病干眼症患者47例(非DM组),比较两组间泪液破裂时间(BUT)、泪液分泌实验、泪液渗透压和炎性因子的表达水平及其相关性。结果:泪膜破裂时间两组比较差异无统计学意义(P<0.05)。角膜染色评分和泪液分泌试验结果两组比较差异均具有统计学意义(P?0.05)。泪液渗透压和白细胞介素-8(IL-8)表达量两组比较差异均具有统计学意义(P?0.05)。而IFN-γ表达量两组比较差异无统计学意义(P<0.05)。两组中角膜染色评分和泪液中IL-8含量具有一定的相关性(r=0.809,P=0.000)。结论:糖尿病和非糖尿病干眼症患者的临床特点有其相同之处,但也存在着一定的差异(角膜染色、泪液渗透压),其可能与泪液中细胞因子的分泌有关。

抑制P-糖蛋白表达逆转视网膜母细胞瘤多药耐药研究

目的:探讨应用RNA干扰(RNAi)技术逆转视网膜母细胞瘤多药耐药的可行性。方法:将设计合成的针对多药耐药基因MDR1的特异性小分子干扰RNA(siRNA),用脂质体转染具有MDR1基因高表达的视网膜母细胞瘤耐药细胞株SO-Rb50/VCR。用实时定量RT-PCR技术和Westernblot分别测定转染前后细胞MDR1mRNA及P-糖蛋白(P-gp)表达的变化;用CCK-8法和TUNEL法检测转染前细胞株(VCR组),转染后细胞(VCR+siRNA组)对不同浓度长春新碱、依托泊苷和卡铂药物敏感性。结果:VCR+siRNA组较VCR组比较,MDR1基因在mRNA水平和蛋白水平表达显著下降,差异具有统计学意义。随着长春新碱、依托泊苷浓度的升高VCR+siRNA组较VCR组比较,细胞存活率显著降低,差异具有统计学意义。不同浓度的卡铂作用于VCR组、CT组和VCR+siRNA组细胞存活率、细胞凋亡率各组见未见显著性差异。随着长春新碱、依托泊苷浓度的升高,VCR+siRNA组较VCR组比较,细胞凋亡率显著性升高,差异具有统计学意义。结论:在SO-Rb50/VCR细胞中,针对MDR1合成的siRNA能够有效地抑制MDR1mRNA和P-gp的表达,并能恢复肿瘤细胞对长春新碱和依托泊苷的敏感性。应用RNAi技术,能够逆转Pgp引起的视网膜母细胞瘤多药耐药性。

内界膜翻转覆盖术与游离内界膜移植术治疗大直径黄斑裂孔的疗效比较

目的比较经睫状体平坦部玻璃体切割术(PPV)联合内界膜翻转覆盖术与PPV联合游离内界膜移植术治疗大直径黄斑裂孔(MH)的临床疗效和安全性。方法将40例(40只眼)大直径MH(最小直径>400μm)患者按随机数字表法分为翻转组(n=20,20只眼)和移植组(n=20,20只眼)。翻转组采用PPV联合内界膜翻转覆盖术治疗,移植组采用PPV联合游离内界膜移植术治疗。观察2组术后2周裂孔闭合率,术前和术后2周和术后1、3、6个月最小视角对数视力表最佳矫正视力(log MAR BCVA)、眼压的水平及术后手术相关并发症、随访6个月的裂孔复发情况。频域光学相干断层成像(SD-OCT)的图像观察MH直径(测量MH最小直径及基底部最大直径)及MH是否闭合。结果术后2周翻转组裂孔闭合率为100.0%,移植组为95.0%。2组术后2周裂孔闭合率比较差异无统计学意义(P>0.05)。log MAR BCVA:翻转组术前为1.01±0.24,术后2周为0.82±0.32和术后1个月为0.72±0.45、术后3个月为0.52±0.25、术后6个月为0.53±0.42;移植组术前为1.09±0.32,术后2周为0.95±0.45和术后1个月为0.93±0.14、术后3个月为0.81±0.24、术后6个月为0.70±0.23。2组术后log MAR BCVA均较术前明显提高,差异有统计学意义(P<0.05);翻转组术后2周和术后1、3、6个月log MAR BCVA均较移植组明显提高,差异有统计学意义(P<0.05)。2组术后2周和术后1、3、6个月眼压与术前比较差异无统计学意义(P>0.05);2组术后均未出现手术相关并发症;2组均随访6个月,均无裂孔复发。结论PPV联合内界膜翻转覆盖术治疗大直径MH效果与PPV联合游离内界膜移植术治疗相当,但翻转组术后log MAR BCVA优于移植组。

有晶体眼人工晶体植入术后高眼压的临床分析

目的 总结有晶体眼后房型人工晶体又称植入型接触镜（ICL）植入术后高眼压的发生原因,探讨其防治方法 。方法 收集2011年1月~2014年5月在西安市第四医院住院的高度近视患者54例（108眼）,均行有晶体眼人工晶体植入术。术后随访3个月,随访项目包括裸眼视力、最佳矫正视力、眼压、裂隙灯检查、眼底检查、人工晶体的拱高。结果术后1 d至术后3个月所有患者裸眼视力均达到或超过术前最佳矫正视力。有13眼术后第1天发生高眼压,眼压25~38.8 mmHg,给予局部、全身降眼压药物或前房穿刺放房水等治疗后,10眼在术后第3天眼压恢复正常水平,2眼在术后第7天停用糖皮质激素滴眼液后眼压逐渐下降。其中有1例患者双眼术后药物治疗1个月,眼压仍控制不良,行人工晶体更换手术。术后3个月随访结束时,所有患者眼压均正常。术后1个月超声生物显微镜测量人工晶体拱高0.5~1.04 mm,人工晶体均未与自身晶状体接触,术后3个月随访自身晶状体无混浊表现。结论有晶体眼人工晶体植入术后高眼压有多种原因,根据病因给予相应的治疗,患者眼压均可恢复正常。

玻璃体切割联合内界膜剥离术治疗黄斑裂孔性视网膜脱落的疗效观察

目的探讨玻璃体切割与内界膜剥离术联合治疗黄斑裂孔性视网膜脱落(MHRD)的疗效。方法选择我院2015年1月至2016年12月收治的80例MHRD患者,随机分为观察组与对照组,每组40例。给予患者眼部麻醉,对照组患者行闭合式标准三切口玻璃体切割术,观察组行玻璃体切割联合内界膜剥离术。治疗1个月后,比较两组患者的黄斑裂孔闭合情况、视力改善情况及并发症发生率。结果治疗后,观察组患者的视力改善率为92.50%(37/40),高于对照组的75.00%(30/40),差异显著(P<0.05)。治疗后,观察组患者的黄斑裂孔闭合率为92.50%(37/40),高于对照组的75.00%(30/40),差异显著(P<0.05)。观察组患者的并发症发生率为5.00%(2/40),与对照组患者的10.00%(4/40)比较,差异不显著(P>0.05)。结论玻璃体切割联合内界膜剥离术治疗黄斑裂孔性视网膜脱落能够提高患者的视力改善率与黄斑裂孔闭合率,降低患者的并发症发生率,具有临床推广价值。

microRNA对人视网膜母细胞瘤肿瘤干细胞多药耐药性的影响

目的通过对人视网膜母细胞瘤(RB)肿瘤干细胞(CSCs)多药耐药性的研究,探讨microRNA对肿瘤干细胞多药耐药性的影响。方法通过流式细胞仪分选Y79细胞中的ABCG2(+)与ABCG2(-)细胞,作为ABCG2(+)组与ABCG2(-)组;采用MTT比色实验比较ABCG2(+)组与ABCG2(-)组对抗肿瘤药物长春新碱、依托泊苷和卡铂的敏感性,得到候选microRNA。从标本库中选择RB组织切片,行LNA-原位杂交,并根据耐药性分为高耐药性组与低耐药性组,通过Real time PCR观察候选microRNA在两组中表达差异。结果 1分选阳性率:ABCG2(+)分选后(91.7%)显著高于分选前(5.7%),差异有统计学意义(P<0.05)。2两组耐药性比较:从各个浓度水平上比较,ABCG2(+)细胞的耐药性明显高于ABCG2(-)细胞,差异有统计学意义(P<0.05)。3分选细胞的凋亡率和细胞内药物蓄积比较:ABCG2(+)组的凋亡率明显低于ABCG2(-)组,差异有统计学意义(P<0.05);ABCG2(+)组的药物蓄积明显低于ABCG2(-)组,差异有统计学意义(P<0.05)。4候选microRNA在不同耐药性RB切片中的表达:高耐药组的microRNA表达率(39.3%)明显高于低耐药组的microRNA表达率低(5.2%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ABCG2(+)是Y79细胞系中的耐药细胞群,microRNA与肿瘤干细胞的侵袭性和耐药性密切相关,调控microRNA可以抑制肿瘤干细胞的耐药性,提高其对化疗的敏感性。

microRNA-125b对人视网膜母细胞瘤增殖和凋亡作用实验研究

目的:探讨microRNA-125b(miR-125b)在人视网膜母细胞瘤细胞中的表达,及其对肿瘤细胞增殖抑制和诱导凋亡的作用。方法:采用RT-PCR方法检测miR-125b在视网膜母细胞瘤细胞系Y79中的表达;构建miR-125b过表达(miR-125bmimic)和抑制载体(miR-125inhibitor)转染Y79细胞,检测miR-125b表达情况;通过细胞凋亡实验和细胞增殖实验(CCK-8)观察miR-125b过表达和抑制表达后,对肿瘤细胞增殖力和凋亡的影响。结果:miR-125b在人视网膜母细胞瘤细胞系中Y79细胞系中呈高表达;miR-125bmimic组(Y79+miR-125bmimic)中miR-125b的表达较miR-NC组(未处理的Y79细胞)表达显著增多,差异具有统计学意义(P<0.05);miR-125binhibitor组(Y79+miR-125binhibitor)中miR-125b的表达较miR-NC组表达显著减少,差异具有统计学意义(P<0.05);miR-125bmimic组较miR-NC组相比,Y79细胞增殖力显著增高,细胞凋亡显著下降,差异具有统计学意义(P<0.05);而miR-125inhibitor组较miR-NC组相比肿瘤细胞增殖力显著下降,细胞凋亡率显著提高,差异具有统计学意义(P<0.05)。miR-125b可能是通过DRAM2基因来发挥其致癌作用;结论:miR-125b可能作为癌基因在视网膜母细胞瘤中发挥作用,并对肿瘤细胞增殖和凋亡具有显著影响。

Adgrv 1基因经Hedgehog通路调控纤毛发育致视网膜色素变性的研究

目的:从Hedgehog(Hh)信号通路分析Adgrv1基因变异致Usher综合征(USH)的机制。方法:基于Adgrv1变异模型小鼠(Adgrv1^(-/-)),野生型(WT)C57BL/6小鼠为对照,从细胞水平和视网膜组织水平采用qRT-PCR、HE、视网膜透射电镜和免疫荧光方法验证Adgrv1基因变异对纤毛结构的影响,分析Hh信号通路关键因子的表达变化。结果:Adgrv1基因在视网膜和原代培养肺成纤维细胞中均有表达,但Adgrv1^(-/-)小鼠表达量显著降低。Adgrv1基因变异可造成光感受器外节盘膜溶解,以及原代肺成纤维细胞纤毛长度明显缩短,在视网膜组织和细胞水平Hh信号通路上Ptch1、Gli基因表达明显下降,而PKA基因表达上升。结论:Adgrv1基因变异致视网膜色素变性,与Hh通路中PTCH1、GLI1蛋白表达降低,使得细胞纤毛缩短,视网膜光感受器细胞外节盘膜溶解有关。

玻璃体切除术联合地塞米松玻璃体内植入剂治疗特发性黄斑前膜

目的:研究玻璃体切除术联合地塞米松玻璃体内植入剂治疗特发性黄斑前膜(IMEM)的疗效。方法:回顾性分析2019-01/2023-01在西安市人民医院诊断为IMEM患者72例72眼,按照不同治疗方式分为A组和B组,A组36眼接受玻璃体切除、黄斑前膜(ERM)剥除术联合地塞米松玻璃体内植入剂治疗;B组36眼仅接受玻璃体切除、ERM剥除术治疗。随访12 mo。比较术前及术后1、3、6、12 mo最佳矫正视力(BCVA)、眼压、黄斑中心凹视网膜厚度(CMT)、黄斑视网膜结构变化。结果:术后1、3、6 mo两组间BCVA比较有差异(均P<0.05),A组视力提高较明显;术后12 mo两组间BCVA比较无差异(P=0.056)。术后1、3、6 mo两组间CMT比较有差异(均P<0.05),A组患者术后CMT降低较B组明显;术后12 mo两组间CMT比较无差异(P=0.165)。两组手术前后各时间眼压比较有差异(F时间=2.763,P时间<0.05;F组间=26.800,P组间<0.05;F交互=5.091,P交互<0.05)。A组术后黄斑视网膜结构变化明显。结论:玻璃体手术联合地塞米松玻璃体内植入剂治疗晚期IMEM,能够在术后6 mo内迅速改善黄斑形态并帮助视功能恢复。

自体游离内界膜移植术治疗玻璃体切割联合内界膜剥除术后未闭合黄斑裂孔患者的临床疗效

目的评价自体游离内界膜移植术治疗玻璃体切割联合内界膜剥除术后未闭合黄斑裂孔患者的临床疗效。方法本研究为回顾性病例研究。收集2016年3月至2018年6月14例(14眼)玻璃体切割联合内界膜剥除术后未闭合黄斑裂孔患者,行自体游离单层内界膜移植术,将黄斑区外残留的内界膜剥除一片略大于黄斑裂孔直径的游离植片,放置于黄斑裂孔中,并将植片边缘置于裂孔边缘下,起到固定作用,然后行气液交换,术后严格俯卧位3~5 d。术前,术后1 d、2周、1个月、3个月通过频域光学相干断层扫描图像观察黄斑裂孔直径及是否闭合,记录患者最佳矫正视力(best corrected visual acuity,BCVA)和眼压。结果术后3个月,13眼黄斑裂孔完全闭合,裂孔闭合率为92.9%;1眼黄斑裂孔直径较术前明显缩小,裂孔周围视网膜贴附良好,但黄斑中心凹可见裸露的RPE层,未见神经上皮层组织。术后各时间BCVA较术前明显提高,差异均有统计学意义(均为P<0.05),其中11眼较术前提高,3眼无变化,但所有患者自诉视物变形症状较术前明显好转。术后2周,仅有1眼眼压高,为33.4 mmHg(1 kPa=7.5 mmHg),给予降眼压滴眼液后恢复正常。术后2周所有患者气体均完全吸收。14眼均未出现手术相关并发症。结论自体游离内界膜移植术治疗玻璃体切割联合内界膜剥除术后未闭合黄斑裂孔,术后裂孔闭合率高,患者视功能改善明显。

miR-29b激活自噬抑制人视网膜色素上皮细胞增殖的实验研究

目的研究miR-29b激活自噬抑制人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)细胞增殖的作用。方法通过病毒颗粒包装转染RPE细胞24~72 h,在倒置荧光显微镜下观察荧光强度检测感染效率,利用实时定量PCR检测miR-29b mRNA表达。采用凝血酶刺激RPE细胞增殖模拟增生性玻璃体视网膜病变模型。使用0.5×103 U·L^-1凝血酶预刺激1 h,然后分别加入miR-29b和Lenti-vector空载体刺激24 h。分为空白对照组(Sham组)、凝血酶刺激组(RPE组)、凝血酶刺激组+miR-29b过表达组(RPE+Lenti-29b组)、凝血酶刺激组+空载体组(RPE+Lenti-vector组)。利用MTT微量酶比色法检测各组RPE细胞增殖情况,Western blot观察微管相关蛋白1轻链3(light chain 3,LC3)Ⅱ表达变化。结果在倒置荧光显微镜下观察发现,RPE+Lenti-29b组和RPE+Lenti-vector组90%以上的RPE细胞成功转染,且RPE+Lenti-29b组miR-29 mRNA水平高表达,与其余3组相比差异均有统计学意义(均为P<0.01)。与Sham组比较,其余3组RPE细胞增殖明显,差异均有统计学意义(均为P<0.05),LC3Ⅱ蛋白表达也明显升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05);与RPE+Lenti-29b组比较,RPE组和RPE+Lenti-vector组细胞增殖明显(均为P<0.05),但LC3Ⅱ蛋白表达明显低于RPE+Lenti-29b组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论上调miR-29b表达可激活RPE细胞中LC3Ⅱ蛋白表达,提高细胞自噬水平,抑制RPE细胞增殖,可能在增生性玻璃体视网膜病变发生及发展中扮演重要作用。

特发性黄斑前膜手术前后嵌合体带改变与视功能的相关性

目的:探讨特发性黄斑前膜(IMEM)患者手术前后黄斑区微结构与术后视功能恢复的相关性。方法:选取2017-01/2019-12就诊于我院的IMEM患者43例43眼,术前、术后3、6、9mo均检测最佳矫正视力(BCVA),进行视物变形(M-chart评分表)评分,并采用频域光学相干断层扫描(SD-OCT)测量中心凹视网膜厚度(CFT)、中心凹下脉络膜厚度(SFCT)、神经节细胞-内丛状层(GC-IPL)厚度及嵌合体(IZ)带缺损长度。结果:术后3、6、9mo,纳入患者BCVA和视物变形程度均较术前逐渐改善(均P<0.05),且BCVA与CFT、IZ带缺损长度均呈正相关(P<0.05),与SFCT、GC-IPL厚度均无相关性(P>0.05);视物变形评分与CFT均呈正相关(P<0.05),与SFCT、GC-IPL厚度、IZ带缺损长度均无相关性(P>0.05)。结论:CFT和IZ带缺损长度与IMEM术后BCVA具有显著相关性,这两项指标可作为预测IMEM术后视功能恢复的指标。

潜伏转化生长因子β结合蛋白2(LTBP2)对氧化型低密度脂蛋白诱导的人视网膜色素上皮细胞氧化损伤的影响

目的探索潜伏转化生长因子β结合蛋白2(LTBP2)对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人视网膜色素上皮(ARPE)细胞氧化损伤的影响。方法0 mg·L^(-1)、50 mg·L^(-1)、100 mg·L^(-1)和200 mg·L^(-1) ox-LDL处理ARPE-19细胞,CCK-8试剂盒和细胞凋亡检测试剂盒检测细胞活力和凋亡水平,Western blot检测不同浓度ox-LDL处理后细胞LTBP2蛋白表达水平。100 mg·L^(-1) ox-LDL处理ARPE-19细胞构建氧化损伤模型。将ARPE-19细胞随机分为对照组,ox-LDL组,转染LTBP2过表达载体或阴性对照的ox-LDL+ov-LTBP2组和ox-LDL+ov-NC组,转染LTBP2 siRNA或阴性对照的ox-LDL+si-LTBP2组和ox-LDL+si-NC组,以及ox-LDL+si-LTBP2+VEGF组。相应处理各组细胞后,采用CCK-8试剂盒和细胞凋亡检测试剂盒检测细胞活力和凋亡水平,酶联免疫吸附实验检测氧化应激标志物活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平,Western blot检测各组细胞LTBP2、P38和p-P38的蛋白表达水平。结果与0 mg·L^(-1) ox-LDL处理后相比,50 mg·L^(-1)、100 mg·L^(-1)和200 mg·L^(-1) ox-LDL处理后APRE-19细胞活力下降,凋亡率升高,LTBP2蛋白表达水平增加,且变化均具有剂量依赖性(均为P<0.05)。与ox-LDL+ov-NC组相比,ox-LDL+ov-LTBP2组细胞LTBP2蛋白表达水平、ROS含量及细胞凋亡率均增加,细胞活力、SOD活性均降低,p-P38/P38比值和VEGF表达量均增加(均为P<0.05)。与ox-LDL+si-NC组相比,ox-LDL+si-LTBP2组细胞LTBP2蛋白表达水平、ROS含量及细胞凋亡率均降低,细胞活力、SOD活性均增加,p-P38/P38比值和VEGF表达量均减少(均为P<0.05)。而与ox-LDL+si-LTBP2组比较,ox-LDL+si-LTBP2+VEGF组细胞凋亡率和ROS含量均增加,细胞活力、SOD活性均降低(均为P<0.05)。结论LTBP2通过激活P38 MAPK信号通路促进VEGF表达加剧ox-LDL引起的ARPE-19细胞氧化应激损伤。

高迁移率族蛋白B-1和NADPH氧化酶衍生活性氧对糖尿病视网膜病变大鼠视网膜电图波幅和玻璃体通透性的影响

目的:探究高迁移率族蛋白B-1(HMGB1)和还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶衍生活性氧(ROS)对糖尿病视网膜病变(DR)大鼠视网膜电图波幅和玻璃体通透性的影响及机制。方法:选取40只雄性SD大鼠,根据实验目的将大鼠分为对照组、DR模型组、HMGB1注射组和ROS抑制剂组。使用链脲佐菌素诱导大鼠糖尿病,进而发展DR模型。通过2’-7’-二氯荧光素-二乙酸酯(DCFH-DA)检测大鼠视网膜组织匀浆中ROS的生成。通过蛋白印迹分析视网膜组织中Nox2、HMGB1、Occludin和ZO-1的蛋白表达。通过PCR分析大鼠视网膜组织匀浆中PARP-1和Caspase 3的mRNA表达。通过视网膜电图分析大鼠a波和b波振幅。通过测量FITC-BSA荧光评估大鼠玻璃体通透性。结果:DR模型组和HMGB1注射组较对照组大鼠视网膜ROS水平升高(均P<0.05),ROS抑制剂组较DR模型组和HMGB1注射组ROS水平降低(均P<0.05)。DR模型组和HMGB1注射组较对照组Nox2和HMGB1的蛋白表达升高(均P<0.05),ROS抑制剂组较HMGB1注射组和DR模型组Nox2和HMGB1的蛋白表达降低(均P<0.05)。HMGB1注射组和DR模型组较对照组大鼠视网膜PARP-1和Caspase 3的mRNA表达升高(均P<0.05)。HMGB1注射组和DR模型组较对照组a波和b波振幅减少(均P<0.05),ROS抑制剂组较HMGB1注射组和DR模型组振幅升高(均P<0.05)。HMGB1注射组和DR模型组较对照组Occludin和ZO-1的蛋白表达降低(均P<0.05),ROS抑制剂组较HMGB1注射组和DR模型组Occludin和ZO-1的蛋白表达升高(均P<0.05)。DR模型组和HMGB1注射组较对照组荧光强度升高(P<0.05),ROS抑制剂组较DR模型组和HMGB1注射组荧光强度降低(P<0.05)。结论:糖尿病视网膜组织中HMGB1和Nox衍生的ROS之间存在正反馈,这可能是促进糖尿病诱导的视网膜电图波幅降低和玻璃体通透性增加的机制。

α_(1)-抗胰蛋白酶抑制高糖诱导大鼠视网膜Müller细胞凋亡实验研究

目的:探讨α1-抗胰蛋白酶(AAT)抑制高糖诱导大鼠视网膜Müller细胞凋亡的效果与机制。方法:大鼠视网永生化膜Müller细胞系在高糖培养基上培养,分为三组:模型组、试验A组、试验B组,分别加入不同浓度的外源性AAT 100μl(加药浓度分别为0、10、100 pg/ml),处理不同时间点换回高糖培养基进行培养。采用MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Transwell小室法检测细胞侵袭,Western blot法检测蛋白表达。结果:处理3、6 h后,试验A组、试验B组的细胞增殖指数、细胞侵袭指数均高于对照组(均P<0.05),试验B组高于试验A组(P<0.05)。处理3、6 h后,试验A组、试验B组的细胞凋亡指数、信号转导及转录活化因子3(STAT3)蛋白相对表达水平均低于对照组(均P<0.05),试验B组低于试验A组(P<0.05)。结论:AAT可抑制高糖诱导大鼠视网膜Müller细胞的凋亡,促进细胞增殖与侵袭,其作用机制可能与抑制STAT3表达有关。

桑色素对视网膜母细胞瘤生长和凋亡的影响

目的探讨桑色素对人视网膜母细胞瘤细胞增生抑制及诱导凋亡的作用。设计实验研究。研究对象人视网膜母细胞瘤细胞Y79细胞。方法不同浓度(0、50、100、150、250μM)桑色素对人视网膜母细胞瘤细胞Y79细胞作用24、48、72小时后,CCK8法检测肿瘤细胞生存率的变化;细胞周期检查法检测肿瘤细胞周期的变化;用TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡的变化。主要指标细胞生存率、细胞周期分布、细胞凋亡率。结果桑色素浓度为150、250μM,与桑色素浓度为0、50、100μM作用于Y79细胞相比,检测时间分别在48、72小时时的细胞生存率显著下降(P<0.05),细胞周期G0-G1期显著增多(P<0.05),S期显著下降(P<0.05),细胞凋亡显著增多(P<0.05)。较高浓度的桑色素,随着作用时间的延长,引起Y79细胞生存率逐渐下降,细胞凋亡率逐渐增多,具有时间依赖性和剂量依赖性。结论桑色素能够抑制视网膜母细胞瘤增生并促进其凋亡,提示桑色素有望成为治疗视网膜母细胞瘤的有效药物。

microRNA-125b对人视网膜母细胞瘤多药耐药性影响的实验研究

目的探讨microRNA-125b(miR-125b)在人视网膜母细胞瘤细胞中多药耐药的作用及其机制。设计实验研究。研究对象人视网膜母细胞瘤SO-RB50细胞。方法用RT-PCR方法检测miR-125b视网膜母细胞瘤细胞株SO-RB50和耐药细胞株SO-Rb50/VCR中的表达变化;化学合成的miR-125b过表达(miR-125mimic组)和抑制载体(miR-125inhibitor组)转染SO-Rb50细胞株,用MTT法和Annexin V-FITC法检测在药物长春新碱、依托泊苷和卡铂,依次作用上述转染细胞后,细胞增生力和细胞凋亡的变化;用蛋白印迹法检测miR-125b过表达和抑制表达后细胞株SO-RB50中MAGE-A/P53蛋白的表达变化。主要指标细胞存活率和细胞凋亡率。结果SO-Rb50/VCR组与SO-RB50组相比,miR-125b的表达显著增高(P=0.002);长春新碱、依托泊苷和卡铂依次作用于转染后的SO-RB50细胞株后,miR-125mimic组与miR-125inhibitor组相比,细胞存活率显著增高(P=0.000),细胞凋亡率显著下降(P=0.000),P53蛋白表达水平显著下降(P=0.001),MAGE-A蛋白表达水平显著增高(P=0.004)。结论在SO-RB50细胞中,下调miR-125b后提高肿瘤细胞对化疗药物敏感性,且miR-125b可能是通过MAGE-A/P53通路调控视网膜母细胞瘤多药耐药性。

视交叉后段视路疾病的眼部表现分析

视路是指从视网膜神经纤维层起，到大脑枕叶皮质纹状区的视觉中枢为止的整个有关视觉的神经传导的经路。视交叉以上的后段视路包括视束，外侧膝状体，视放射和视觉中枢，其通路及其毗邻结构所发生的血管性疾病、肿瘤等给患者带来的视力和视野损害，在临床诊治过程容易发生漏诊和误诊，需要我们给予一定的重视，以便于早期发现患者，避免更严重的全身损害。