端粒酶反义hTERT基因治疗对卵巢癌细胞生长抑制作用及其对顺铂疗效的影响

目的 :探讨端粒酶反义hTERT对卵巢癌细胞生长抑制作用及对顺铂疗效的影响。方法 :以TRAP PCR ELISA法检测卵巢癌SKOV3、ES 2细胞中端粒酶活性 ;以MTT法及流式细胞术测定反义hTERT对卵巢癌细胞生长的抑制作用、细胞周期阻滞及细胞凋亡的诱导作用及对CDDP疗效的影响。结果 :SKOV3及ES 2细胞中端粒酶活性分别为 2 .17U、2 .2 7U。反义hTERT能降低卵巢癌细胞端粒酶活性 ,以剂量依赖性方式抑制癌细胞生长 ;反义hTERT10 μmol L作用 2 4、72h后G1期细胞所占比例分别为 33 16%、5 3 4 7% ,细胞凋亡发生率分别为 11 66%、13 93% ;而联合应用顺铂时 ,G1期细胞比例分别为 4 2 17%、38 98% ,细胞凋亡发生率分别为 18 66%、2 7 61%。当反义hTERT取 10、2 0、4 0 μmol L时 ,卵巢癌SK OV3、ES 2细胞对顺铂的敏感性分别增加 10 4～ 2 5 5倍、11 7～ 2 0 2倍。结论 :端粒酶反义hTERT基因治疗能通过抑制端粒酶活性、增强细胞周期阻滞及诱导细胞凋亡等途径抑制卵巢癌细胞生长 ,与CDDP合用能增强对癌细胞的杀伤作用。

新辅助化疗在晚期卵巢癌中的疗效评价

卵巢癌是目前复发率、病死率较高的妇科恶性肿瘤,特别是晚期卵巢癌,其中肿瘤细胞减灭术未能切除的大块残留病灶是导致患者术后化疗耐药、复发及预后不良的重要原因。近三十年的临床观察证实,新辅助化疗可缩小晚期卵巢癌原发灶及转移灶的体积,提高理想细胞减灭术的成功率,从而改善患者预后。近年临床观察发现,虽然新辅助化疗能提高部分晚期卵巢癌手术彻底性,但患者生存期并未得到有效延长。因此需要对新辅助化疗在晚期卵巢癌中的疗效及意义进行客观评价。

TLR3在宫颈抗病毒免疫及宫颈病变中的作用

Toll样受体3(toll-like receptor 3,TLR3)是天然免疫中重要的模式识别受体(PRRs)家族成员之一,可以特异性地识别病毒双链RNA,激活宿主保护性免疫反应,清除病毒。TLR3主要表达于免疫细胞,也可在上皮细胞及上皮细胞来源的肿瘤细胞中表达,在机体抗感染、炎症反应、肿瘤进展等病理生理过程中发挥重要作用。女性生殖道黏膜是抵抗病原微生物感染的重要屏障,TLR3参与女性生殖道生理、病理改变。对TLR3在宫颈人乳头瘤病毒(HPV)持续性感染、宫颈癌前病变及宫颈癌发生中的作用进行综述。

女性生殖道HPV感染的临床诊治进展

女性生殖道人乳头瘤病毒(HPV)感染与外阴癌、宫颈癌发生、进展及预后有关,特别是HPV高危亚型感染。因此HPV分型诊断对预测病变转归、决定治疗方法等有重要意义。本文将对近年来有关女性生殖道HPV感染的临床诊断方法及治疗方面的新进展进行综述,特别是HPV感染的免疫治疗、HPV疫苗的研究进展等。

转基因动物在卵巢肿瘤研究中的应用

转基因动物技术为人类恶性肿瘤模型的建立提供了有利工具。在妇科肿瘤研究方面,转基因动物,特别是转基因小鼠的出现,极大地推动了卵巢肿瘤研究的进展,尤其是在卵巢肿瘤的发生与进展机制、多药耐药及卵巢肿瘤的生物治疗等方面。因此,就转基因动物模型的研究基础与常用方法及其在卵巢肿瘤研究中的应用作一综述。

卵巢癌转移机制的分子细胞生物学研究进展

卵巢癌的转移是一个多步骤、多因素参与的极其复杂的过程,用现代分子生物学的研究进展对转移的主要发生机制及有关的癌基因、抑癌基因改变进行研究,为从不同水平阻断肿瘤的转移提供了理论依据。

表皮生长因子受体在妇科肿瘤中的应用

近年来的研究表明,表皮生长因子(EGF)与表皮生长因子受体(EGFR)在肿瘤形成及胚胎发生等方面有重要意义,目前常用来检测EGFR的方法有免疫组织化学染色法、酶联免疫吸附试验(ELISA)法、放射免疫法及放射自显影法等。在宫颈肿瘤、子宫内膜癌、卵巢肿瘤、乳腺癌、早期妊娠胎盘的合体滋养细胞中均发现有EGFR的过度表达,这种过度表达与肿瘤组织的生物学行为、预后及滋养细胞的功能分化有密切的关系。

子宫颈癌的早期诊断方法

宫颈癌是女性多发的恶性肿瘤,如未及时发现和治疗,死亡率很高。但从宫颈病变发展到宫颈癌是一个较长的过程。因此,只要早期发现,积极治疗,宫颈癌是完全可以预防和治愈的。不久前,媒体报道了演艺界名人梅艳芳因患宫颈癌而香消玉殒的消息,引起了人们的广泛关注,不少读者向本刊询问宫颈癌有关防治知识,为此,本刊特邀天津医科大学总医院妇产科的专家和医生们撰写了本组文章,为读者答疑解难。

高危型人乳头瘤病毒E6/E7 mRNA在宫颈病变筛查中的作用研究

目的：探讨高危型人乳头瘤病毒（ HPV） E6/E7 mRNA在宫颈病变筛查中的作用。方法选取2011年6月-2012年7月因宫颈疾病在天津医科大学一中心临床学院天津市第一中心医院妇产科就诊的患者74例，行宫颈液基薄层细胞学检查（ TCT）及阴道镜下活检组织病理学检查，以病理学检查为金标准，比较高危型HPV E6/E7 mRNA检测与HPV DNA分型检测高级别宫颈病变〔宫颈上皮内瘤变（CIN）Ⅱ及以上〕及非典型鳞状细胞（ASC-US）患者（ n＝25）高级别宫颈病变的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值。结果病理学检查示慢性宫颈炎患者20例， CIN患者42例，其中CINⅠ10例、 CINⅡ12例、 CINⅢ20例，宫颈癌患者12例。高危型HPV E6/E7 mRNA检测与HPV DNA分型检测宫颈病变总检出率分别为60.8％（45/74）和66.2％（49/74），差异无统计学意义（χ2＝0.467， P＞0.05）。两种方法检测慢性宫颈炎及CINⅠ、 CINⅡ～Ⅲ、宫颈癌的检出率比较，差异均无统计学意义（ P＞0.05）。高危型HPV E6/E7 mRNA检测与HPV DNA分型检测高级别宫颈病变的敏感度、阳性预测值、阴性预测值比较，差异均无统计学意义（ P＞0.05）；两组特异度比较，差异有统计学意义（ P＜0.05）。高危型HPV E6/E7 mRNA检测与HPV DNA分型检测ASC-US患者高级别宫颈病变的敏感度、阳性预测值、阴性预测值比较，差异均无统计学意义（ P＞0.05）；两组特异度比较，差异有统计学意义（ P＜0.05）。结论与HPV DNA分型检测方法相比，高危型HPV mRNA检测对预测高级别宫颈病变特异度更强，特别是对TCT检测为ASC-US患者的分流意义更为明确，可作为宫颈病变筛查和ASC-US患者分流管理的有效措施。

PI3K/Akt信号转导通路与卵巢癌顺铂耐药相关性的研究

目的:研究卵巢癌顺铂(DDP)耐药与磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号转导通路的关系。方法:根据LY294002作用浓度将SKOV3和SKOV3/DDP细胞分别分为5μmol/L+DDP、10μmol/L+DDP、20μmol/L+DDP、40μmol/L+DDP、DDP组及对照组。MTT法检测40μmol/L LY294002对SKOV3和SKOV3/DDP细胞DDP敏感性的影响;Western blot法检测SKOV3和SKOV3/DDP细胞各实验组PI3K、Akt表达水平。结果:SKOV3和SKOV3/DDP细胞经LY29400240μmol/L作用后,对DDP敏感性分别增加了67.36%、76.56%。LY294002可降低SKOV3和SKOV3/DDP细胞中PI3K和Akt表达。SKOV3细胞对照组PI3K和Akt蛋白相对浓度值均低于SKOV3/DDP细胞对照组(t分别为26.005和23.477,均P<0.05)。结论:PI3K/Akt信号通路异常与卵巢癌DDP耐药有关,抑制PI3K/Akt信号通路能增强卵巢癌DDP敏感性。

VEGF-C MMP9及TIMP-1在宫颈癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF-C)、基质金属蛋白酶MMP9及其抑制物TIMP-1在宫颈癌组织中的表达,及与宫颈癌临床病理特征的关系。方法:采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接染色法(SP法),检测62例宫颈癌Ⅰ、Ⅱ期患者癌组织中VEGF-C、MMP9及其抑制物TIMP-1的表达,并进行统计学分析。结果:VEGF-C、MMP9及其抑制物TIMP-1在宫颈鳞癌Ⅰ、Ⅱ期均为高表达。VEGF-C在宫颈癌Ⅰ、Ⅱ期和有淋巴转移者的表达率分别为73.8%、85%、100%。MMP9为66.7%、75%、93.3%。TIMP-1为64.3%、60%、66.7%,VEGF-C、MMP9及TIMP-1在浸润间质≥1/2的表达高于<1/2(P<0.05)者;其表达与浸润深度及淋巴结转移相关。结论:VEGF-C与宫颈癌的侵袭和转移密切相关;MMP9及其抑制物TIMP-1与肿瘤的浸润及侵袭转移有关,VEGF-C、MMP9及TIMP-1在宫颈癌转移中发挥了重要作用。

子宫内膜癌患者血清脂联素水平变化及意义

目的观察子宫内膜癌患者血清脂联素水平的变化,并探讨其意义。方法 ELISA法测定64例子宫内膜癌及25例正常对照者的血清脂联素。结果正常对照者及子宫内膜癌患者血清脂联素水平分别为(13.33±5.61)、(8.20±4.17)mg/L,两者相比,P<0.01;多因素回归分析显示,血清脂联素水平降低是子宫内膜癌发病的独立危险因素(P<0.01,OR=0.824);不同分期及不同分化程度的子宫内膜癌患者血清脂联素水平相比,P均<0.05。结论子宫内膜癌患者血清脂联素水平降低,是子宫内膜癌发病的独立危险因素。

RNA干扰ERCC1基因表达对卵巢癌顺铂敏感性的影响

目的研究ERCC1基因表达与卵巢癌顺铂耐药的关系。构建携带ERCC1基因小发夹干扰RNA的重组质粒表达载体,观察RNA干扰ERCC1基因表达对卵巢癌顺铂敏感性的影响。方法RT-PCR方法检测COC1、COC1/DDP细胞中ERCC1基因表达,基因重组技术构建携带ERCC1小发夹干扰RNA的重组质粒表达载体,脂质体法转染COC1/DDP细胞,RT-PCR及westernblot方法检测转染后细胞内ERCC1mRNA和蛋白的表达,MTT法检测转染后细胞对顺铂敏感性的改变。结果COC1/DDP细胞中ERCC1基因表达明显高于COC1细胞。重组质粒转染后,COC1/DDP细胞中ERCC1mRNA和蛋白表达显著下调。转染后细胞对顺铂的敏感性显著增加。结论COC1/DDP中ERCC1基因表达增强与卵巢癌顺铂耐药相关。RNA干扰抑制ERCC1基因表达能增加卵巢癌耐药细胞COC1/DDP对顺铂的敏感性。

脂联素对子宫内膜癌细胞增殖凋亡的影响

目的:研究脂联素对子宫内膜癌细胞增殖凋亡的影响及其信号的传导。方法:免疫细胞化学方法及RT-PCR法检测子宫内膜癌Ishikawa3-H-12细胞AdipoR1/R2蛋白及mRNA的表达,不同浓度脂联素(2.5,5,10,20μg/ml)作用子宫内膜癌细胞30min,Western blot检测AMPK磷酸化程度,不同浓度脂联素作用细胞48h及AMPK抑制剂(复合物C)预处理后脂联素再作用48h后,MTT试验及流式细胞仪检测不同处理组细胞的增殖及凋亡。结果:子宫内膜癌Ishikawa3-H-12细胞AdipoR1/R2蛋白呈棕黄色颗粒状表达,并可见AdipoR1/R2基因表达。除2.5μg/ml浓度外,其余浓度组脂联素均显著诱导AMPK磷酸化,不同浓度组AMPK活化差异有统计学意义(F=27.985,P<0.01),脂联素以浓度依赖模式诱导子宫内膜癌细胞AMPK活化。脂联素以浓度依赖模式显著抑制子宫内膜癌细胞增殖(F=13.322,P<0.01),诱导子宫内膜癌细胞凋亡(F=46.826,P<0.01),复合物C可以阻断脂联素诱导的细胞增殖抑制及凋亡。结论:脂联素可能通过影响AMPK信号通路抑制子宫内膜癌细胞增殖,促进凋亡。

ERK信号转导通路对肿瘤细胞生物学行为的调控

细胞外信号调节激酶(ERK1/2),又称p44/p42丝裂原活化蛋白激酶,为信号转导的重要分子。ERK1/2信号转导通路是丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路家族的一条,此信号通路异常与多种肿瘤的发生、发展密切相关。在恶性肿瘤细胞中,由于各种机制导致ERK过度活化,促进细胞增殖、抑制凋亡、促进细胞侵袭,影响细胞分化。现就ERK对肿瘤细胞生物学行为的影响进行综述。

宫颈癌中c-erbB-2蛋白表达及临床意义

为了探讨ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白在宫颈癌中的表达及其临床意义，用免疫组化ＡＢＣ法观察了１０例正常宫颈组织，１６例慢性宫颈炎组织，１２３例宫颈鳞癌中ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白表达。结果显示：宫颈鳞癌中ｃ－ｅｒｂＢ－２阳性表达（３４．１５％）显著高于正常（０／１０）及炎症组织（１８．７５％）（Ｐ＜０．０１），且ｃ－ｅｒｂＢ－２表达随临床期别升高而增加，其中Ⅲ期（５５．３６％）显著高于０期（０／３）、Ⅰ期（７．６９％）、Ⅱ期（１９．６１％）（Ｐ＜０．０１）；ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白表达与宫颈癌分化程度及存活率呈负相关。结果提示，ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白过度表达可能作为判断宫颈癌恶性程度及预后指标之一。

卵巢癌多药耐药机制的研究进展

卵巢癌的主要治疗包括细胞减灭术及术后以DDP为基础的联合化疗,而卵巢癌多药耐药是目前治疗失败的主要因素,本文将就近期关于卵巢癌多药耐药机制方面的研究新进展进行综述。

卵巢癌复发患者的二线治疗

卵巢癌的复发与耐药是严重影响患者生存率的主要因素之一,本文将综述卵巢癌复发与耐药的危险因素、分类及近年来卵巢癌复发与耐药患者二线治疗的新发展。