不同保鲜剂组合对非洲菊切花保鲜效果的影响

以非洲菊(Gerbera jamesonii Bolus)鲜切花珍爱为试材,研究不同预处理液与瓶插保鲜液组合对丙二醛含量(MDA)、细胞膜透性、细菌含量及瓶插寿命的影响。结果表明,非洲菊切花经预处理液处理12 h后,MDA含量、细菌菌落数均显著低于对照(去离子水),且预处理能降低细胞膜的相对透性。非洲菊切花在瓶插处理期间MDA含量及细胞膜透性出现先下降后上升的变化趋势,瓶插14 d时达到最大值。花茎及瓶插液的细菌菌落数在瓶插过程中呈逐渐上升趋势,鲜花营养剂和免切通用鲜花营养液2种瓶插液表现了较好的抑菌效果。保鲜效果最佳的保鲜剂组合为可利鲜专业1号醒花液+鲜花营养剂,该处理可显著延长切花的瓶插寿命,其预处理及瓶插期间MDA含量、细胞膜透性和细菌菌落数的累积值均显著低于对照。

滇水金凤4CL基因的克隆及表达分析

【目的】4-香豆酰-CoA连接酶(4CL)作为苯丙烷类代谢途径的关键酶之一,对花青素合成起着重要作用。探究滇水金凤4CL基因(命名为Iu4CL)对滇水金凤花色调控的分子机理,为其花色调控及花色育种提供参考依据。【方法】以滇水金凤为材料,采用RT-PCR技术分离克隆Iu4CL1、Iu4CL2、Iu4CL3和Iu4CL4基因,并对其生物信息学进行分析;通过qRT-PCR技术对4CL基因在4种不同花色(白色、粉色、红色和深红色)及其4个不同花发育时期(花苞期S1、始花期S2、盛花期S3和谢花期S4)中的表达情况进行分析。【结果】Iu4CL1、Iu4CL2、Iu4CL3和Iu4CL4的cDNA全长分别为1620、1653、1698、1638 bp,分别编码539、550、565、545个氨基酸;其中Iu4CL1和Iu4CL2分别含有2个和4个内含子,Iu4CL3和Iu4CL4没有内含子。生物信息学分析表明,Iu4CL1、Iu4CL2和Iu4CL4为稳定蛋白,Iu4CL3为不稳定蛋白;4个基因均为无信号肽疏水性蛋白;Iu4CL2有3个跨膜结构,其余3个基因均不存在跨膜结构;Iu4CL基因4个拷贝均属于AMP结合酶超级家族和腺苷酸形成域I类超级家族。同源性分析表明,Iu4CL基因的4个拷贝均与喜马拉雅凤仙花的同源性最高;且Iu4CL1和Iu4CL2处于同一个大的分支中,而Iu4CL3和Iu4CL4处于另一个大的分支中,推测可能为旁系同源。qRT-PCR分析表明,Iu4CL基因的4个拷贝在4种不同花色和4个不同花发育时期的滇水金凤花器官中均有表达,其中Iu4CL1和Iu4CL3基因在白色花器官S3(盛花期)阶段表达量最高;Iu4CL2基因在红色花器官S3(盛花期)阶段表达量达到顶峰;Iu4CL4基因在深红色花器官S3(盛花期)阶段表达量最高。【结论】Iu4CL基因可能在滇水金凤花青素生物合成中发挥重要作用。

观赏用微型兰花组织培养最佳配方的优化

以大花蕙兰‘大凤’×豆瓣兰‘太极圣梅’(Cymbidium hybridium‘Dafeng’×C.serratum var.goeringii‘Taijishengmei’)F1代试管苗为试材,采用在培养基中添加不同的有机物质,筛选最适生长的培养基;并在此基础上,在培养基中添加不同色素,研究其对植株生长的影响及观赏效果,以期为兰花微型培养的观赏应用研究提供参考依据。结果表明:在1/2 MS+IBA 0.5 mg·L^(-1)+6-BA 2 mg·L^(-1)+碳粉0.5 g·L^(-1)的培养基中,添加75 mL·L^(-1)椰汁有利于兰花试管苗叶长、叶宽、株高以及鲜质量的增加,对植株生长效果最好;在1/2 MS+IBA 0.5 mg·L^(-1)+6-BA 2 mg·L^(-1)+碳粉0.5 g·L^(-1)+椰汁75 mL·L^(-1)的培养基中添加不同浓度的食用色素红曲红、叶绿素铜钠盐、栀子蓝,经121℃高温灭菌后培养基的颜色均会发生变化。叶绿素铜钠盐浓度为533.3 mg·L^(-1)的彩色培养基植株生长良好,培养基整体观赏效果最佳。

基于SCAR分子标记和倍性鉴定兰属花卉的研究

基于特异性片段扩增(SCAR)和倍性鉴定兰属花卉,为杂交育种亲本选配奠定基础,以兰属花卉的27个大花蕙兰和31个国兰品种为试材,通过SCAR分子标记和流式细胞仪进行亲缘关系和倍性检测,构建系统进化树。SCAR分子标记构建的系统进化树结果显示:58个品种聚为3支,第1支包括8个大花蕙兰品种(福娘、523、红袍等)和16个国兰品种(碧龙红素、汗血宝马、出水芙蓉等),第2支为11个大花蕙兰品种(金玉满堂、日本香兰、红双喜等)和6个国兰品种(一代天骄、春兰麻壳素、如意素荷等),第3支包括8个大花蕙兰品种(616、黄金岁月、杨贵妃等)和9个国兰品种(碧龙奇莲、西蜀道光、大雪素等);倍性鉴定结果显示:27个大花蕙兰品种中有7个二倍体(日本樱花、绿翡翠、梦境等)、16个三倍体(黄金岁月、蝶影、日本香兰等)、4个四倍体(英雄、523、福娘等)。部分大花蕙兰和国兰品种亲缘关系较近,可用作杂交育种亲本,但由于大花蕙兰倍性较为丰富。因此,大花蕙兰作为杂交育种亲本,选配时需进行倍性鉴定。综上,SCAR分子标记能高效、全面和精准鉴别兰属花卉间的亲缘关系,结合倍性鉴定,可为高效杂交育种奠定基础。

不同LED光质对大花蕙兰‘大凤’×豆瓣兰‘太极圣梅’F1代组培苗生长的影响

以大花蕙兰‘大凤’×豆瓣兰‘太极圣梅’F1代组培苗为试材,采用不同LED光质照射方法,研究了不同LED光质照射对大花蕙兰‘大凤’×豆瓣兰‘太极圣梅’F1代组培苗生长的影响,以期为兰花新品种选育和产业化种苗生产提供参考依据。结果表明:1)黄光(Y)照射下,植株最高、根最粗壮;红光(R)照射下植株根长最长;红蓝黄复合光(RBY)照射下,不定芽增殖系数最大,为2.03;红蓝绿复合光(RBG)照射下植株的叶长、叶宽、叶片数、茎粗、鲜质量效果最佳,分别为3.82 cm、4.36 mm、11.66片、7.97 mm、1.49 g。2)蓝光(B)照射下,可溶性蛋白质含量最高,为0.1157 mg·g^(-1);红蓝复合光(RB)照射下,可溶性糖含量最高;RBG照射下,叶绿素含量最高,为2.15 mg·g^(-1)。综上,与白色荧光相比,LED光质对大花蕙兰‘大凤’×豆瓣兰‘太极圣梅’F1组培苗生长有促进作用;RBG处理促进植株生长和叶绿体色素合成,RBY照射有利于芽增殖,B处理促进蛋白质合成,RB处理促进可溶性糖积累;RGB可作为大花蕙兰‘大凤’×豆瓣兰‘太极圣梅’F1代组培苗生长的最佳光源。

大花蕙兰+豆瓣兰F_(1)代原球茎和根状茎培养研究

以大花蕙兰‘大凤’(Cymbidium hybridium‘Dafeng’)与豆瓣兰‘太极圣梅’(C.serratum var.Goeringii‘Taijishengmei’)F_(1)代原球茎、根状茎为试材,采用在1/2MS培养基中添加不同植物激素的方法,研究了不同植物激素对大花蕙兰‘大凤’与豆瓣兰‘太极圣梅’F_(1)代原球茎与根状茎增殖和分化的影响,以期为兰属植物高效繁育提供参考依据。结果表明:以1/2MS+香蕉80.0 g·L^(-1)+碳粉0.5 g·L^(-1)为基本培养基,加入TDZ 1.0 mg·L^(-1)和NAA 0.2 mg·L^(-1)最有利于根状茎增殖,增殖率达到343.33%;基本培养基加6-BA 2.0 mg·L^(-1)和NAA 0.3 mg·L^(-1)有利于根状茎分化,分化率达到83.33%。原球茎的增殖最佳配方为基本培养基加TDZ 1.0 mg·L^(-1)和NAA 0.2 mg·L^(-1),增殖率达到160.00%;原球茎分化最佳配方为基本培养基加6-BA 2.0 mg·L^(-1)和NAA 0.4 mg·L^(-1),分化率为76.00%。经解剖观察,原球茎和根状茎二者均存在不透明的维管束中心,且根状茎所含不透明的维管束中心比例大于原球茎;此外,F_(1)代根状茎的增殖、芽分化率均高于原球茎。无论根状茎和原球茎,其内部结构均有根的特征,从内到外依次由表皮、皮层和维管组织构成。

2个猪笼草品种耐冷性比较研究

选取了毛猪笼草和Brice 2个猪笼草品种,在人工气候箱内进行了不同温度处理,观察了其冷害发生情况并分析了植株叶片组织相关生化指标的变化趋势。结果表明:毛猪笼草的耐冷性显著高于Brice的,其中Brice在T_1和T_2处理(2 d)后植株叶片出现了冷害;处理5 d后,T_1处理的4株植株全部从茎尖开始死亡,T_2处理的4株植株中有2株从茎尖开始死亡;毛猪笼草在处理18 d后,T_1和T_2处理均在老叶上表现出冷害。随着低温处理天数的增加,可溶性糖和丙二醛含量逐渐增加;过氧化氢酶、过氧化物酶和超氧化物歧化酶活性逐渐增加至第4天后进入平稳水平;而可溶性蛋白含量逐渐下降至第4天后又逐步上升。综上,为避免猪笼草植株受冷害,对于耐冷品种毛猪笼草应保证大棚温度短期内不低于0℃,长期应保证温度在2℃以上;对于不耐冷品种Brice,应保证大棚温度高于2℃。可溶性蛋白含量、过氧化氢酶活性、过氧化物酶活性、超氧化物歧化酶活性变化趋势均在低温处理4 d后出现了拐点,说明猪笼草植株叶片组织耐冷性相关生理代谢调整的周期是4 d,这有助于下一步精细化取样分析研究代谢及分子水平的变化趋势,也有助于明确生产中变温处理的最低间隔时间,以便猪笼草植株有充足的调整适应时间。

间歇浸没式生物反应器在植物组织培养中的应用研究进展

间歇浸没式生物反应器是植物组织培养中的一种新兴技术装备,其基本原理是在无菌条件下将组培苗在培养液中进行周期性浸泡培养以实现快速繁殖。与传统组织培养相比,间歇浸没式生物反应器改进了液体培养的方式,在这种培养方式下,植物组织与液体培养基紧密接触,可刺激和促进植物组织对营养元素和激素的吸收;间歇及连续振动给液体培养基提供了足够氧气,提高了组培苗的繁殖系数。间歇浸没式生物反应器主要应用于快繁后期繁殖苗和生根苗的培育,较好地促进了自动化、机械化和商业化的植物组培快繁技术的发展。因此,间歇浸没式生物反应器具有自动化程度高、生产成本低、组培苗质量好、繁殖系数高、移栽易成活及适应性较强等特点,已在多种植物组织培养上得到应用。为更好地将该系统应用于植物组织培养,文章概述了间歇浸没式生物反应器的发展、参数设置、快繁的优势和缺点等方面的进展情况;同时对间歇浸没式生物反应器技术在植物组织培养中的研究进行展望。

濒危植物峨眉凤仙花叶绿体基因组分析

[目的]对峨眉凤仙花(Impatiens omeiana Hook.f.)叶绿体基因组的结构特征及系统发育进行研究,为其资源保护及开发利用提供理论依据。[方法]基于峨眉凤仙花叶绿体基因组序列,利用生物信息学软件,对叶绿体基因组进行组装、注释、基因特征、序列重复和系统发育分析。[结果]峨眉凤仙花完整的叶绿体基因组长度为152 527bp,共有130个基因,包括86个蛋白质编码基因、8个rRNA基因和36个tRNA基因,GC含量为37%,且具有保守的四分体结构,包括大单拷贝区、小单拷贝区各1个和2个相同的反向重复区域,其长度分别为83 150、17 903、25 737 bp,其中13个基因有1个内含子,2个基因有2个内含子。特征分析表明:峨眉凤仙花叶绿体全基因组中共检测到76个SSR序列,且多以A/T单核苷酸序列为主,其长度为10-91 bp;检测到50 842个密码子,其中以亮氨酸(Leu)最多,色氨酸(Tyr)最少;密码子偏好性分析显示33个RSCU≥1的密码子多数以A/U结尾。通过邻接法(NJ)构建系统发育树发现,峨眉凤仙花与贵州凤仙花亲缘关系最近,均属于棒凤仙花亚属植物。[结论]峨眉凤仙花叶绿体基因组呈典型的四分体结构,SSR序列以A/T单碱基为主;系统发育分析结果将其归为棒凤仙花亚属,上述结果为峨眉凤仙花系统发育学地位及物种鉴定工作提供了重要的分子信息。

大花蕙兰‘大凤’×豆瓣兰‘太极圣梅’F_(1)代试管开花诱导

以大花蕙兰‘大凤’×豆瓣兰‘太极圣梅’(Cymbidium hybridium‘Dafeng’×C.serratum var.goeringii‘Taijishengmei’)F1代试管苗为试材,采用PP333或CCC预处理,添加不同浓度的6-BA,测定植株形态和生理指标,建立试管开花诱导体系,缩短兰花植株生长的童期,以期为兰花高效育种提供参考依据。结果表明:不同浓度PP333或CCC预处理抑制了植株株高、根数和鲜质量的增加,但促进叶片分裂;试管苗预处理培养于1/2MS+PP3331.0mg·L^(-1)+香蕉泥120g·L^(-1)+蔗糖30g·L^(-1)+琼脂8g·L^(-1)+活性炭0.5g·L^(-1)的培养基中30d,再转接到1/2MS+NAA0.2 mg·L^(-1)+香蕉泥120g·L^(-1)+蔗糖30g·L^(-1)+琼脂8g·L^(-1)+活性炭0.5g·L^(-1)的培养基可诱导试管开花,花芽诱导率为6.67%,但花芽后期未顺利开放;PP333或CCC预处理下试管苗植株可溶性糖和可溶性蛋白质含量均高于CK,并促进C/N值的提高以及植株全氮含量的降低。

川西南凤仙花属植物资源调查与评价

本研究通过对川西南5个地区(峨眉山市、洪雅县、宝兴县、盐源县和盐边县)凤仙花属植物进行实地调查,在对其地理分布、形态特征进行分析的基础上,采用层次分析法(AHP)对其进行评价与分析。结果表明,该区域共收集凤仙花属植物22种,分布在海拔700~2 600 m地区,其中大多数分布于海拔1 400~2 600 m地区,占本次调查总数的68.0%;且多生长在山间路旁、草丛、林下湿地等湿度相对较大的地方;株高20~140 cm;花色有白色、紫色、黄色、粉色等,以黄色为主,占本次调查总数的54.0%;叶长1.85~14.95 cm,叶宽1.32~4.64 cm,叶面积2.55~33.79 cm~2;种子直径1.87~5.00 mm,千粒重0.840~8.578 g;综合分析,可将22种凤仙花分为3个等级:Ⅰ级(>3.5分)有9种,可优先大面积开发应用,Ⅱ级(3.0~3.5分)有3种,可适度推广应用,Ⅲ级(<3.0分)有10种,可小范围或暂不开发应用。综上所述,川西南地区凤仙花属植物资源丰富多样,具有花形奇特、花色丰富艳丽、观赏价值高等特点。

蝴蝶兰建兰花叶病毒和齿兰环斑病毒的实时荧光定量PCR检测

建兰花叶病毒(Cymbidium mosaic virus,简称CymMV)和齿兰环斑病毒(Odontoglossum ringspot virus,简称ORSV)是蝴蝶兰生产中的主要病毒病害,建立稳定、灵敏的检测体系是进行病毒早期检测和脱毒技术研究的前提。本研究首先对CymMV和ORSV的外壳蛋白(coat protein,简称CP)基因片段进行克隆和序列比对,随后设计特异性引物,分别构建2种病毒的RT-qPCR(real time quantitative PCR,简称RT-qPC)检测体系,并对云南地区20份样品进行检测。研究结果显示,CymMV和ORSV CP基因序列与其他地区分离物中这2种病毒的核苷酸序列相似性分别为97.92%~98.66%和99.12%~99.56%,其CP基因序列具有保守性。CymMV和ORSV在RT-qPCR体系中最低检出浓度分别为30.9、35.0 copies/μL,灵敏度较RT-PCR(reverse transcription polymerase chain reaction,简称RT-PCR)提高10倍。利用RT-qPCR体系对20份温室样品进行检测,CymMV阳性率为100%,ORSV阳性率为90%,阳性率均高于RT-PCR检测结果。本研究构建的CymMV和ORSV RT-qPCR检测体系将为蝴蝶兰病毒病早期监测和脱毒种苗的培育奠定基础。

滇水金凤花斑形成相关基因IuMYB114和IuMYB36的克隆及表达分析

MYB基因作为植物中最庞大的一个基因家族,在花斑及色素形成、生长发育等过程中发挥着重要作用。本研究以滇水金凤花器官为材料,获得2个MYB基因,分别命名为IuMYB114和IuMYB36,其cDNA分别为315 bp和876 bp,分别编码104个和151个氨基酸。生物信息学分析显示:二者均不具有内含子且均为亲水性不稳定蛋白,IuMYB114基因属于MYB超家族,推测IuMYB36属于新的R2R3-MYB转录因子亚组;IuMYB114和IuMYB36的氨基酸序列与其他物种的同源性均在64%和50%左右;二者均分别与各自的同源序列聚在一起,且处在两个不同分支。qRT-PCR分析发现两个基因在滇水金凤斑区和非斑区中均有表达,但在斑区表达量显著高于非斑区,IuMYB114和IuMYB36基因斑区表达量分别为非斑区的12.83倍和9.88倍,推测两个基因在滇水金凤花斑形成中发挥了重要的调控作用。本研究结果为后续探讨滇水金凤花斑形成的分子调控机理以及进行凤仙花花色改良等方面研究提供了一定的理论依据。

香石竹的多倍体诱导及其变异研究

通过香石竹多倍体的诱导方法比较,结果表明:无菌茎段浸泡法的效果最好,培养基内加秋水仙碱法次之,注射法和涂 法无效。加倍植株与正常植株相比,植株的高度和茎节变矮,叶片缩短并加宽,叶色变深,叶片的气孔增大。对变异材料进行细胞学研究后发现,体细胞染色体数2n=4x=60,为四倍体。

南美水仙组培外植体再生体系建立中的关键技术研究

以南美水仙的鳞茎、叶片和叶柄等营养器官作为外植体进行组织培养 ,着重研究南美水仙最佳外植体、最佳培养基配方的关键技术。研究结果表明 ,诱导的最佳培养基为 MS+6 - BA2 .0 mg/ L+NAA3.0 mg/ L,培养 4 5 d可获得较多的小鳞茎。外植体分化能力的研究表明 ,南美水仙的不同类型外植体能力大小为 :鳞茎 >叶柄 >叶片 ;从鳞茎的不同部位来看 ,基部鳞茎盘 >内层鳞片下部 >外层鳞片下部 >内层鳞片上部 >外层鳞片上部。

5个切花月季品种的叶片离体培养和再生能力的基因型效应

以5个切花月季品种的试管苗叶片为外植体,研究了叶片直接和间接再生2种途径,结果表明:5个品种的叶片再生能力相差较大,直接再生率由高到低排序为卡罗拉(56.1%)、沃蒂(55.6%)、坦尼克(51.6%)、维西利亚(45.0%)、巴比伦(35.2%);愈伤组织诱导率、间接分化率的排列顺序与直接再生率基本相同.上述研究可得出基因型对再生能力具有如下调控效应及特点:不同基因型对培养基种类及植物生长调节剂的要求,对脱分化与再分化能力的调控,对不同组织、器官的再生能力的调控均具有同一性;但不同基因型、甚至同一基因型的不同组织、器官还具有一定的特异性.

切花月季无性系60^Co γ射线离体诱变研究

以月季叶片愈伤组织和再生的不定芽2种材料为外植体,对其体细胞无性系进行离体辐射诱变,研究了^(60)Coγ辐照对叶片愈伤组织再生率、不定芽增殖率及后期生长情况的影响。结果表明,^(60)Coγ射线处理大大降低了叶片愈伤组织的再生频率,叶片再生不定芽更适宜作为离体辐照诱变材料。不定芽的适宜诱变剂量为50～60Gy,由回归方程导出其致死剂量为122Gy,半致死剂量约为76Gy。

云南野生早花象牙参叶片再生体系的建立

以云南野生的早花象牙参叶片为外植体,探讨了叶片的不同部位、植物生长调节剂组合、暗培养、水解酪蛋白和椰子汁对愈伤组织诱导和不定芽再生的影响。结果表明:叶片基部,暗培养,水解酪蛋白和椰子汁均有利于愈伤组织的诱导;暗培养促进了不定芽的再生。适宜早花象牙参叶片愈伤组织形成的诱导培养基为MS+6BA1.5mg·L-1+NAA0.1mg·L-1+水解酪蛋白800mg·L-1+椰子汁50mL·L-1,再生培养基为MS+6BA1.5mg·L-1+NAA0.1mg·L-1,增殖培养基为MS+6BA0.6mg·L-1+NAA0.1mg·L-1,生根培养基为1/2MS+NAA0.8mg·L-1。