昆明山海棠片治疗银屑病实验研究及其作用机理探讨

目的:探讨昆明山海棠片(THH)治疗银屑病的实验依据及其作用机制。方法:通过雌鼠阴道上皮、鼠尾鳞片表皮和心得安诱导皮损动物模型,观察THH对银屑病各实验动物模型的影响。结果:能够抑制小鼠阴道上皮细胞有丝分裂;增加小鼠尾部鳞片颗粒层形成,降低小鼠血清中IL-2含量,升高IL-4含量;能够促使豚鼠耳部皮肤角化过度减轻、颗粒层恢复、棘层变薄,表皮突延伸、乳突上伸减轻,毛细血管充血及炎症细胞浸润不同程度减轻,降低耳廓厚度及耳组织中IFN-γ、TNF-α和ICAM-1及血清中VEGF表达水平,从而改善银屑病病理状态,起到治疗银屑病的作用。结论:THH对银屑病模型动物有较好治疗作用;其作用机制可能通过对免疫机制的调节、抑制细胞炎症因子及改善血管内皮细胞等作用,减轻皮肤过度角化而发挥其治疗银屑病的作用,本研究为临床应用THH治疗银屑病提供可靠依据。

浅谈硫代乙酰胺致肝纤维化动物模型的研究进展

肝纤维化是一种所有慢性肝病共有的病理改变,是因细胞外基质(Extracellular Matrix,ECM)合成增多,降解相对不足,沉积在肝内而引起的。硫代乙酰胺诱导的肝纤维化模型具有稳定、重复性较好的特点。近年来的研究结果表明,给药的剂量及周期与肝纤维化的形成程度密切相关,部分细胞因子表达对该模型的进程具有显著的促进或阻碍作用,这些特点可为研究该模型的科研人员提供可靠的参考依据。

血尿安胶囊防治血尿的药效学及机制研究

目的评价血尿安对肾性血尿的防治作用及其相关机制,为临床应用提供实验依据.方法采用脂多糖（LPS）致小鼠急性肾功能损伤模型、牛血清白蛋白（BSA）加LPS以及四氯化碳（CCl4）等联合诱导血尿大鼠模型考察药物对肾脏组织以及相关功能的影响.结果小鼠注射LPS后,其肾指数、血清BUN及CREA水平显著升高,与对照组比较差异有统计学意义;血尿安3.0g·kg^-1可显著降低LPS小鼠血清BUN水平,与模型组比较差异具有统计学意义.大鼠在联合给予BSA、CCl4及LPS8周后,其尿蛋白及隐血显著升高,血清CREA水平显著升高,肌酐清除率显著降低,肾指数显著增加,其肾脏IL-1α、IL-1β、IL-10以及MCP表达均显著降低,与对照组比较有统计学差异;血尿安各剂量组可显著降低造模大鼠尿隐血,血尿安2.5g·kg^-1及5.0g·kg^-1还可显著减少其尿蛋白浓度;血尿安2.5g·kg^-1可显著降低造模大鼠血清CREA水平,升高其尿CREA水平;血尿安5.0g·kg^-1可显著降低造模大鼠的尿量及其血清BUN、CREA水平,升高其尿CREA水平;血尿安10.0g·kg^-1能显著降低造模大鼠肾脏IL-1α、MIP-1α、IL-1β、IL-6、IL-10、IFN-γ、MCP-1、IP-10含量,而血尿安2.5g·kg^-1能显著升高大鼠肾脏IL-1β、IL-10含量,与模型组比较差异有统计学意义.结论血尿安对免疫异常引起的血尿有较好的防治作用,其作用机理可能与对炎症细胞因子的调节有关.

基于多靶点防治AD策略的候选新药脑智复的药理作用及其机制研究

目的评价脑智复多靶点防治阿尔茨海默病(AD)的作用。方法雌性小鼠去势后30d,海马内注射Aβ1-42和鹅膏蕈氨酸(IBO)以复制AD模型,次日将造模小鼠分为模型组、脑智复低剂量组、脑智复中剂量组、脑智复高剂量组及吡拉西坦组并相应给药,每天灌胃1次,连续4周,另设假手术组(对照组)进行跳台、Morris水迷宫及生化指标的检测。结果与对照组比较,模型组小鼠跳台试验中的潜伏期显著缩短(P<0.05),错误次数增加(P<0.05),在水迷宫中寻找逃逸平台的逃避潜伏期延长(P<0.05),进入逃逸平台的次数减少(P<0.05),在逃逸平台周围游泳的路程、在有效区域内的游泳时间及路程减少(P<0.05);脑组织的丙二醛水平明显升高,乙酰胆碱水平及超氧化物歧化酶活力明显下降(均P<0.05)。脑智复高、中剂量组中上述指标显著改善。结论脑智复具有体内多靶点防治AD的作用。

肝宝胶囊对胆管结扎大鼠肝纤维化的机理研究

目的:探讨肝宝胶囊对胆管结扎大鼠肝纤维化的药效及其机制。方法:雌性SD大鼠,假手术组仅游离肝门部胆总管,其它各组以胆管结扎的方法制备大鼠胆汁淤积性肝纤维化模型,恢复性饲养5d后随机分为假手术组、模型组、双环醇0.1 g/kg、水飞蓟素胶囊0.1 g/kg、肝宝胶囊1.0、2.0、4.0原生药g/kg组。每天灌胃给药1次,连续4周。假手术组和模型组给予等体积0.5%CMC-Na溶液。末次给药后24小时,取肝脏、脾脏称湿重并计算其脏器指数,取血测定ALT、AST等生化指标,取肝脏测定其羟脯氨酸、胶原堆积、α-SMA表达以及IL-1α等细胞因子水平。结果:胆管结扎大鼠在造模4周后,其血清ALT、AST、TBIL、DBIL、γ-GT、ALP含量明显升高,A/G、ALB明显降低,肝脏指数显著增加,肝脏组织羟脯氨酸(Hyp)、胶原堆积及α-SMA表达明显增加,肝脏IL-18、MIP-1α、TGF-β1含量升高,IL-1α、IL-4、IL-10及TNF-α含量降低,与假手术组比较差异均有统计学意义。肝宝胶囊1.0g/kg可显著降低胆管结扎大鼠血清AST、ALT、TBIL、DBIL、γ-GT、ALP活性,升高其血清ALB水平及A/G比值,降低其肝脏组织Hyp、IL-18、TGF-β1含量及胶原堆积,升高IL-1α含量。肝宝胶囊2.0g/kg可显著降低胆管结扎大鼠血清AST、ALT、TBIL、DBIL、γ-GT、ALP活性,升高其血清ALB水平及A/G比值,可显著降低肝脏组织Hyp及TGF-β1含量,升高其IL-4及TNF-α含量。肝宝胶囊4.0g/kg可显著降低胆管结扎大鼠血清AST、ALT、TBIL、DBIL、γ-GT、ALP活性,升高其血清ALB水平及A/G比值,降低肝脏组织Hyp、MIP-1α、IL-18、IL-6及TGF-β1含量,升高其IL-1α、TNF-α、IL-13及PDGF-BB含量。结论:肝宝胶囊能有效地减轻胆总管结扎诱导的肝纤维化大鼠的肝损伤及纤维化程度,其作用机制可能与其能够降低大鼠肝脏组织内细胞因子IL-18及TGF-β1水平,减少HSCs活化有关;也可能与其能够减少肝脏趋化因子MIP-1α的合成与分泌,从而阻断MIP-1α所致的恶性循环,使肝纤维化逐步好转有关。

补肾还聪胶囊对血管性痴呆大鼠的影响

目的:研究补肾还聪胶囊对血管性痴呆的防治作用,并初步探讨其可能的作用机理,为进一步开发成为防治血管性痴呆的中药新药打下基础。方法:SD大鼠永久性大脑中动脉闭塞导致的血管性痴呆,造模后24小时,将模型大鼠随机分为模型组、尼莫地平0.02 g/kg、补肾还聪胶囊20 g/kg、10 g/kg及5 g/kg组,同时设假手术组。每天灌胃给药1次,连续35天。利用Morris水迷宫对各组大鼠进行学习记忆能力检测,观测学习记忆能力,于行为学实验结束后第二天,取血测定超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA),一氧化氮(NO),一氧化氮合酶(NOS),诱导性一氧化氮合酶(iNOS),取脑组织测定单胺氧化酶(MAO),乙酰胆碱(Ach),胆碱乙酰转移酶(ChAT),乙酰胆碱酯酶(AChE)的活性等指标。银染观察大鼠海马CA1区神经元染色。结果:Morris水迷宫实验显示,第一天各组大鼠逃避潜伏期无差异,其余几天模型组大鼠在定位航行试验中隐匿平台平均逃避潜伏期较正常组显著延长,补肾还聪胶囊20 g/kg,10 g/kg剂量组平均逃避潜伏期较模型组显著缩短,跨越原平台位置次数明显增加。空间探索试验中模型组跨越原平台位置次数,在原平台象限滞留时间及原平台象限内的游程占总游程的百分比明显减少。空间探索试验中,与模型组比较,补肾还聪胶囊20 g/kg剂量组平台象限滞留时间及平台象限游程占总游程的百分比显著增加。生化检测结果显示:模型组脑组织Ach,ChAT含量较假手术组显著降低,与模型组比较,补肾还聪胶囊20 g/kg,10 g/kg剂量组提高了Ach,ChAT含量。模型组大鼠血清SOD活性较假手术组明显降低,MDA、NO、NOS、iNOS活性较假手术组明显升高,补肾还聪胶囊20 g/kg及10 g/kg可显著对抗脑缺血所致上述指标的改变,与模型组比较有统计学差异。模型组大鼠脑组织MAO活性较假手术组明显升高,而这种升高可被补肾还聪胶囊20 g/kg,10 g/kg,5 g/kg剂量组抑制(P<0.05)。银染结果显示:补肾还聪胶囊明显改善血管性痴呆大鼠海马CAl区神经元数量的减少。结论:补肾还聪胶囊可显著改善VD大鼠的学习记忆功能,其作用机制可能与其具有抗氧化应激、改善胆碱能系统功能、减少海马区神经元的损伤有关。

一种新的镇痛物质——蝎毒五号的镇痛作用及其机制探讨

目的:探讨从蝎毒分离、纯化的多肽(蝎毒五号)的镇痛作用及其镇痛作用机制。方法:通过醋酸扭体法、热板法和甲醛致痛法评价蝎毒五号的药理作用;通过运用纳洛酮拮抗实验,探索蝎毒五号镇痛作用与阿片受体的关系;记录大鼠坐骨神经给药前后动作电位潜的变化情况,探索蝎毒五号对神经传导的影响;通过局部给药,观察小鼠对光热甩尾潜伏期的变化情况,进一步探讨蝎毒五号的镇痛机制。结果:静脉注射蝎毒五号0.6mg/kg、0.3mg/kg和0.15mg/kg均能明显提高小鼠对热板法引起的痛阈值,减少醋酸扭体次数;蝎毒五号0.6mg/kg和0.3mg/kg也能显著降低小鼠对甲醛致痛的第一相和第二相反应。其镇痛作用不能完全被纳洛酮所拮抗。蝎毒五号1.112mg/ml、0.834mg/ml、0.626mg/ml、0.470mg/ml均可明显减小大鼠坐骨神经的动作电位幅度,减慢传导速度,其中蝎毒五号0.470mg/ml还可显著缩短大鼠坐骨神经动作电位时长和去极化时间。在局部作用中,蝎毒五号能延长光热致小鼠甩尾反应潜伏期。结论:蝎毒五号的中枢和外周镇痛作用均较明显,其作用机制可能部分与作用于阿片受体以及阻断神经传导有关。

血尿安胶囊对急慢性肾炎血尿模型的作用及机制研究

目的:评价血尿安胶囊对急慢性肾炎型血尿的防治作用及机制,为临床应用提供实验依据。方法:采用脂多糖(LPS)致小鼠急性肾功能损伤模型、牛血清白蛋白(BSA)加LPS以及四氯化碳(CCl4)等联合诱导血尿大鼠模型考察药物对肾脏相关功能的影响。结果:小鼠注射LPS后,其肾指数、血清BUN及CREA水平显著升高;血尿安胶囊3.0g/kg可显著降低LPS小鼠血清BUN水平。大鼠在联合给予BSA、CCl4及LPS 8周后,其尿蛋白及隐血显著升高,血清CREA水平显著升高,肌酐清除率显著降低,肾指数显著增加,其肾脏IL-1α、IL-1β、IL-10以及MCP表达均显著降低;血尿安胶囊各剂量组可显著降低造模大鼠尿隐血,血尿安胶囊2.5g/kg及5.0g/kg还可显著减少其尿蛋白浓度;血尿安胶囊2.5g/kg可显著降低造模大鼠血清CREA水平,升高其尿CREA水平;血尿安胶囊5.0g/kg可显著降低造模大鼠的尿量及其血清BUN、CREA水平,升高其尿CREA水平;血尿安胶囊10.0g/kg能显著降低造模大鼠肾脏IL-1α、MIP-1α、IL-1β、IL-6、IL-10、IFN-γ、MCP-1、IP-10含量,而血尿安胶囊2.5g/kg能显著升高大鼠肾脏IL-1β、IL-10含量。结论:血尿安胶囊对LPS所致的小鼠急性肾损伤有一定的保护作用,对LPS+BSA+CCl4等联合诱导的大鼠免疫异常性血尿有较好的防治作用,其作用机理可能与对炎症细胞因子的调节有关。

一种具有镇痛作用的新蝎毒多肽的分离纯化研究

目的从蝎毒中寻找一种新的镇痛多肽,考察其分离纯化的最佳条件,并对其生物活性进行研究。方法通过应用Superdex 75凝胶层析预装柱,对样品的不同处理方法、洗脱流速、不同洗脱液以及样品浓度对分离条件进行考察,采用SDS-PAGE电泳鉴定各组分纯度以及分子量。热板法和醋酸扭体法检测生物活性。结果蝎毒溶解后直接低温离心,过滤,上层析柱;样品浓度为10 mg/ml,以0.05 M PBS p H=7.2缓冲液洗脱,洗脱流速为1.0 ml/min,为其最佳分离、纯化条件。分离纯化所得的5号组分,具有很好的镇痛作用,SDS-PAGE电泳显示其呈单一条带。分子量大致为10KDa-15KDa之间。结论选用Superdex 75凝胶层析预装柱可获得一种新的具有镇痛作用的蝎毒多肽,具有良好的开发应用前景。

析因设计探讨黄芩南五味子协同防治肝纤维化的作用

目的:评价黄芩、南五味子在防治肝纤维化方面所表现的相互作用。方法:将SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组、黄芩提取物2g/kg、南五味子浸膏2g/kg以及黄芩提取物2g/kg+南五味子浸膏2g/kg,每天灌胃给药一次,连续4周,对照组和模型组则给以等体积的0.5%CMC;同时,除对照组外,其余各组动物均腹腔注射二甲基亚硝胺(DMN)10mg/kg,每天1次,每周连续3d,持续4周。末次给药后24h,取血清检测总胆红素(T-Bi L)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP),谷氨酰转移酶(γ-GT)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)等生化指标。取肝脏称其重量,测定羟脯氨酸(Hy P)含量;取同一叶肝脏分别进行HE、Masson染色观察组织形态变化和胶原堆积情况。结果:DMN大鼠血清TP和ALB显著降低,T-Bil、ALP、γ-GT、AST、ALT以及肝脏组织Hy P水平都显著升高;HE染色显示肝脏纤维化明显,Masson染色显示胶原容积百分比显著增加,与对照组比较有统计学差异。南五味子浸膏2g/kg可显著对抗DMN引起的肝脏指数降低、可显著增加DMN大鼠血清ALB,显著降低DMN大鼠血清T-Bi L、γ-GT、AST和ALT活性。其肝脏纤维化病变以及胶原堆积均明显减轻;黄芩提取物2g/kg可显著对抗DMN肝脏胶原纤维的生成;黄芩提取物2g/kg+南五味子浸膏2g/kg可显著对抗DMN引起的肝脏指数降低,降低DMN大鼠血清T-Bi L、AST、ALT、γ-GT和肝脏组织Hy P,显著改善其肝脏病理组织结构以及胶原堆积。方差分析结果显示南五味子浸膏2g/kg、黄芩提取物2g/kg在增加DMN大鼠血清ALB水平和降低其肝脏组织Hy P方面表现出显著的协同增效作用。结论:研究结果表明黄芩与南五味子配伍能协同防治DMN诱导的大鼠肝纤维化,其协同作用机理值得进一步探讨。

芩味胶囊防治肺纤维化的作用及其机制探讨

目的:探讨芩味胶囊对博莱霉素致小鼠肺纤维化的作用。方法:雄性小鼠假手术组经气管注射生理盐水,其他各组经气管注射博莱霉素以制备肺纤维化模型,术后第二天将注射博莱霉素注射的小鼠分为模型组、芩味胶囊2.0,4.0原生药g/kg组,醋酸泼尼松10 mg/kg。每天灌胃给药1次,连续4周。假手术组和模型组给予等体积0.5%CMC-Na溶液,末次给药后24 h,取肺脏称湿重并计算其脏器指数,取右肺测定其羟脯氨酸,左肺用于HE、Masson染色及免疫组化法测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和TGF-β1的表达。结果:模型组肺组织炎细胞浸润明显增加,羟脯氨酸含量明显升高,胶原堆积及α-SMA表达明显增加,与假手术组比较差异均有统计学意义。芩味胶囊2.0,4.0原生药g/kg组均可降低Hyp羟脯氨酸含量,减少胶原堆积及α-SMA和TGF-β1的表达,减少炎细胞浸润。结论:芩味胶囊对博莱霉素所致的小鼠肺纤维化具有较好的防治作用,其作用可能与其抑制TGF-β1表达、减少成纤维细胞活化有关。

肝宝胶囊抗免疫性肝纤维化及其机制的研究

目的:探讨肝宝胶囊对免疫性肝纤维化小鼠的治疗作用及机制。方法:选用全雌Balb/c小鼠,随机分为对照组、模型组、肝宝胶囊1.25、2.5、5 g生药/kg、双环醇0.1 g/kg,正常组小鼠尾静脉注射等体积无菌生理盐水溶液,其他各组尾静脉注射ConA 13 mg/kg造模,每周一次,连续7周;造模的同时分别灌胃药物或0.5%CMC-Na,每天一次,连续7周。末次给药后24小时,取肝脏、脾脏称湿重并计算其脏器指数,取血测定ALT等生化指标,取肝脏测定其羟脯氨酸、胶原堆积、α-SMA表达以及IL-10等细胞因子水平。结果:小鼠在注射ConA 13 mg/kg 7周后,其血清ALT、AST活性及TP、GLB、LN含量明显升高,A/G、ALB明显降低,肝脏指数和脾脏指数显著增加,肝脏组织羟脯氨酸(Hyp)、胶原堆积及α-SMA表达明显增加,肝脏IL-10、IL-12p70含量升高,而其IL-13、IL-4的含量降低,与对照组比较差异有统计学意义。肝宝胶囊1.25 g生药/kg可显著降低ConA小鼠血清ALT活性及GLB水平,升高其血清ALB水平及A/G比值,降低其肝脏羟脯氨酸含量及胶原堆积,显著降低小鼠肝脏组织的IL-10、IL-12p70、IL-13、TNFα、MCP-1以及MIP含量。肝宝胶囊2.5 g生药/kg可显著降低Con A小鼠血清ALT活性、GLB和LN水平,升高其血清ALB水平及A/G比值,降低其肝脏羟脯氨酸含量及胶原堆积,减少α-SMA表达,显著降低小鼠肝脏组织的IL-12p70、IL-13、TNFα、MCP-1以及MIP含量。肝宝胶囊5.0 g生药/kg可显著降低ConA小鼠血清ALT活性、GLB和LN水平,升高其血清ALB水平及A/G比值,降低其肝脏羟脯氨酸含量及胶原堆积,减少α-SMA表达,显著降低小鼠肝脏组织的IL-12p70、IL-13、TNFα、MCP-1、MIP以及TGFβ1含量。结论:上述研究结果表明肝宝胶囊防治ConA诱导小鼠的肝纤维化可能与其能够显著抑制和肝纤维化各阶段有关的细胞因子表达有关,而其抑制IL-10表达的作用,提示该药可能对病毒引起的慢性肝炎及肝纤维化有较好的疗效,其详细作用机理还有待进一步深入研究。