低温等离子体活化液对血管内皮细胞增殖和血管生成能力的影响

目的探索低温等离子体(low temperature plasma,LTP)产生的活化液(plasma-activated medium,PAM)对人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖和血管生成的影响,为未来利用PAM促进创伤愈合和抑制肿瘤血管生成提供理论基础。方法选择HUVECs作为体外研究模型,以LTP处理不同时间(0、15、30、45、60、75 s)后的PAM培养液进行分组干预。采用MTT法和细胞周期法测定PAM对HUVECs活力的影响,通过血管生成实验检测PAM对血管生成的影响,采用荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)水平;构建黑色素瘤小鼠模型,免疫组织化学法检测肿瘤组织中CD31的表达以评估血管生成情况。结果LTP处理获得的PAM对HUVECs血管生成具有双向作用,表现为:与对照组(0 s)相比,低剂量(15 s和30 s)处理时,HUVEC细胞活力增加,而高剂量(45 s、60 s和75 s)处理时,细胞活力明显下降(P<0.05);PAM-15 s和PAM-30 s组处于S期的细胞比例明显增高,而PAM-45 s、PAM-60 s、PAM-75 s组处于S期细胞比例显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05);PAM-15 s和PAM-30 s组HUVEC血管生成能力增强,而PAM-45 s、PAM-60 s、PAM-75 s组的细胞血管生成能力降低,血管节点、交叉点、网眼数和血管分支数都明显降低(P<0.05)。此外,HUVECs内ROS水平随着LTP处理时间的延长而升高。PAM处理黑色素瘤小鼠后,对照组肿瘤组织中CD31棕黄色阳性信号大面积分布,各PAM处理组肿瘤组织中CD31棕黄色颗粒分布减少。结论短时间LTP处理的PAM促进了HUVEC的增殖和血管生成;而长时间LTP处理的PAM则抑制细胞活力和血管生成。

附子水提物及附子多糖通过抑制TGF-β1/Smads信号通路发挥抗肾脏纤维化作用机制研究

目的:基于TGF-β1/Smads通路探讨附子水提物及附子多糖对肾脏纤维化的影响及可能作用机制。方法:体外培养肾小球内皮细胞(HRGECs),采用TGF-β1刺激诱导HRGECs纤维化样模型。造模成功后将细胞分为正常组、TGF-β1模型组(30 ng/mL)、附子水提物组(10 mg/mL)、附子多糖组(5 mg/mL)。光学显微镜、扫描电镜观察细胞形态的变化;细胞划痕实验、Transwell实验观察细胞迁移和侵袭能力;RT-qPCR法检测α-SMA、FSP-1、ZO-1、CD31 mRNA表达水平;Western-blot法检测α-SMA、FSP-1、ZO-1、CD31、p-Smad3、Smad7蛋白表达水平。结果:与正常组比较,TGF-β1刺激72 h后HRGECs形态出现纤维化样变,迁移和侵袭能力增强(P<0.01),α-SMA、FSP-1蛋白及mRNA表达升高,ZO-1、CD31蛋白及mRNA表达下调(P<0.05,P<0.01)。与TGF-β1模型组比较,附子水提物组、附子多糖组细胞形态改善,迁移和侵袭能力降低(P<0.01),α-SMA、FSP-1、p-Smad3蛋白及mRNA表达下降;ZO-1、CD31、Smad7蛋白及mRNA表达升高(P<0.05,P<0.01)。结论:TGF-β1可明显诱导肾小球内皮细胞发生纤维化改变。附子水提物及附子多糖对TGF-β1诱导的HRGECs纤维化改变有明显的改善作用,其机制可能与调节TGF-β1/Smads信号通路有关。

等离子体射流对医疗器械的消毒效果研究

为了探索低温等离子体对医疗器械的消毒效果,设计了一种同轴介质阻挡型等离子射流装置,采用中频谐振电源在大气压下的氩气中得到类辉光放电。使用该装置对医疗器械消毒,其试验结果表明,对血压计袖带、医用弯盘以及外科镊子表面自然菌杀灭率>90%的时间分别为90、60和90s。分析表明,大气压DBD氩等离子体射流对医疗器械的消毒效果很好,并推断等离子射流中的带电粒子和活性氧在其灭菌过程中起主要作用。

低温等离子体对细菌内毒素的灭活作用

为了探索低温等离子体对细菌内毒素的灭活效果,以介质阻挡放电方法产生低温等离子体,以大肠杆菌内毒素作为处理对象,采用内毒素休克小鼠模型检测低温等离子体对大肠杆菌内毒素的灭活效果。给3个试验组每只小鼠分别腹腔注射经低温等离子体处理30 s、45 s和60 s后的大肠杆菌内毒素;阴性对照组小鼠,每只腹腔注射磷酸盐缓冲液;阳性对照组小鼠,每只腹腔注射未经低温等离子体处理的大肠杆菌内毒素。注射后观察各组小鼠存活情况,记录存活时间,并对每只小鼠进行称重,总观察时间为120 h。结果发现,阴性对照组小鼠在观察时间内无一例死亡,阳性对照组小鼠24 h的死亡率为100%,3个处理组与阳性对照组比较,小鼠平均生存时间明显延长。而且随着处理时间的延长,小鼠的平均生存时间逐渐延长,平均体重也逐渐增加。表明低温等离子体可破坏大肠杆菌内毒素的活性,且随着处理时间的延长,破坏的程度越大。

低温等离子体对细菌芽孢的灭活研究

目的探讨低温等离子体对细菌芽孢的灭活效果及相关机制。方法采用介质阻挡放电产生大气压低温等离子体,对枯草杆菌黑色变种芽孢进行处理,设定3个放电电极间距和7个处理时间,采用平板记数法记数存活芽孢数,并计算杀灭对数值(KLV)。另外,研究高压电场灭菌效果并对低温等离子体处理后的枯草杆菌黑色变种芽孢进行透射电镜观察,用以初步探讨低温等离子体对细菌芽孢的灭活机制。结果在电极间距分别为3、4和5mm时,低温等离子体对枯草杆菌黑色变种芽孢的KLV超过5时的处理时间依次为25、30、35s。机制研究发现,低温等离子体中的高压电场效应对枯草杆菌黑色变种芽孢的杀灭效果很差;透射电镜结果显示,低温等离子体对枯草杆菌黑色变种芽孢表面和内部结构都有损伤作用。结论低温等离子体对细菌芽孢有良好的杀灭效果,且具有时间剂量依赖性。带电粒子的击穿作用和活性氧的氧化作用可能在低温等离子体杀灭芽孢的过程中起主要作用,而低温等离子体中的高压电场效应可以忽略不计。

低温等离子体对白色念珠菌影响的电镜观察

目的研究低温等离子体对白色念珠菌结构的影响,探讨低温等离子体对白色念珠菌的灭活机制。方法选择白色念珠菌ATCC10231作为实验菌株,以介质阻挡放电方法产生的低温等离子体对其进行处理,使用扫描电镜(SEM)及透射电镜(TEM)分别观察白色念珠菌细胞表面和细胞内部的变化情况。结果低温等离子体处理30 s后,SEM观察显示一些白色念珠菌细胞表面明显出现缺损,而TEM观察显示一些白色念珠菌细胞的细胞壁及细胞膜断裂,核心溶解,菌体近似空壳。结论低温等离子体可破坏白色念珠菌表面和内部结构,这可能是低温等离子体中的带电粒子的击穿作用和活性氧种的氧化作用所致。

等离子体空气杀菌净化机杀灭空气中微生物效果的试验研究

通过研究空气杀菌净化机对自然环境和人工染菌环境中微生物的杀灭作用,检验了空气等离子体发生装置和活性碳装置在空气杀菌净化机杀菌过程中所起的作用,结果发现,其对两种环境中的微生物杀灭效果都达到了国家标准,等离子体发生装置在空气杀菌净化机杀菌过程中起主要作用,有无活性碳过滤层对杀菌效果影响不大。

营养宣教对西安某社区成年人营养知识-态度-行为的影响

目的了解西安某社区成年人的营养知识水平,帮助其树立合理营养、平衡膳食的理念,以促进健康。方法随机抽取西安市某社区136名成年人,在进行多种形式的营养宣教前后,进行营养知识、态度、行为(knowledge-attitude-practice,KAP)调查,比较宣教前后调查对象对问卷中营养问题的知晓率、对营养教育的态度以及饮食行为的变化来评估营养宣教的效果。结果营养宣教后,该社区成年人的营养知识得以提高,饮食理念和饮食行为趋于合理。结论营养宣教可提高社区成年人的营养知识,能改善他们的饮食理念和饮食行为,在社区开展营养宣教活动是十分必要的。

气体等离子体对细菌损伤作用的电镜观察

为探索气体等离子体杀灭细菌的机理,利用扫描电镜技术对紫外线、臭氧以及气体等离子体处理过的金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌菌体表面结构进行了分析和比较。结果,紫外线和臭氧处理后,两试验菌表面结构完整,大小形态基本正常,但两者作用后的金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌细胞质比较疏松;等离子体处理后的金黄色葡萄球菌体积比正常菌增大,胞质变疏松,且菌体间出现融合现象,而大肠埃希菌细胞间隔模糊、融合,细菌形态已难以辨认,且菌体间出现中等密度物质。结果显示,臭氧、紫外线处理过的细菌菌体表面结构完整,空气放电等离子体作用后使细菌的表面结构受到破坏;等离子体对革兰阴性菌细胞壁损伤比对革兰阳性菌细胞壁的损伤明显。

介质阻挡放电和介质阻挡电晕放电灭菌效果的试验研究

应用介质阻挡放电(DBD)和介质阻挡电晕放电 (DBCD)产生的低温等离子体,对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌进行杀灭试验的结果发现,在90s内DBD和DBCD都对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的杀灭对数值KL达到了5。 DBCD使两种菌株减少的速度大于DBD。DBD和DBCD都使大肠杆菌减少的速度大于金黄色葡萄球菌。

专业课的创新创业能力培养实践——以Android应用开发课程为例

针对高校专业课程教学中的创新创业能力培养问题,分析目前高校创新创业教育的现状及存在的主要问题,阐述在国家大众创业、万众创新和高校创新创业教育的大背景下,专业课程教学在创新创业能力培养中的重要作用,并以Android应用开发课程中的创新创业能力培养实践为例,详细阐述课程教学在创新创业教育方面的改革与实践经验,阐明专业课程中融入创新创业教育的必要性和有效性,以及尚待解决的一些关键问题。

低温等离子体处理哺乳动物细胞和活体组织的研究进展和关键问题

大气压低温等离子体(low temperature plasma,LTP)在生物医学领域的应用获得了飞速的发展,从对无生命物体(医疗器械、食品、空气、污水等)的消毒发展到对活体组织消毒和疾病的治疗。本文阐述了LTP对体外培养的哺乳动物细胞生物学特性的影响、对活体组织的消毒、对活体创伤的修复、对皮肤病、口腔疾病及肿瘤的治疗的研究进展,并提出了目前LTP在生物医学领域应用面临的关键问题,以期促进相关的研究工作。

双歧杆菌的检测与鉴定

根据国内、外近期研究成果,本文综述了双歧杆菌的检测及鉴定方法的研究进展,包括糖发酵法、薄层层析法、生物酶法、免疫学方法以及分子生物学方法的进展,并对其优、缺点进行了分析。

卫生检验专业本科生开放实验教学需要关注的几个方面

本科生开放实验能培养学生的严谨作风、创新意识、团结合作精神及论文撰写能力,值得肯定和坚持。本文结合作者自己从事开放实验的教学实践,提出如何进一步提高开放实验质量的几点建议。

介质阻挡放电对人淋巴细胞的作用研究

为了探索低温等离子体对人淋巴细胞的影响，应用介质阻挡放电方法产生低温等离子体，对离体的健康成人（n=20）外周血淋巴细胞进行处理。按照淋巴细胞在下电极的位置，实验设电极中心组、电极边缘组（距离电极中心2．5cm）、电极外周组（距离电极中心5cm）3个等离子体处理组和1个不处理的正常对照组，设5s、15s和30s3个处理时间。结果发现当淋巴细胞距离电极中心〉5cm或处理时间〈5s时，其功能不会受到影响，而当淋巴细胞距离电极中心〈5cm或处理时N〉5s时，等离子体剂量越大，处理的时间越长，淋巴细胞的功能下降的程度越大。进一步研究发现低温等离子体引起淋巴细胞凋亡和坏死可能是其导致淋巴细胞功能下降的原因。

介质阻挡放电对橙汁灭菌及其品质的影响

为了消除加热杀菌的不利影响,开发和研究冷灭菌技术日益受到人们的重视。为此,利用大气压空气中平行平板介质阻挡放电(DBD)产生的低温等离子体对橙汁灭菌效果及品质的影响进行了研究。选取了3种具有代表作用的微生物(革兰氏阳性的金黄色葡萄球菌、革兰氏阴性的大肠杆菌和典型真菌的代表白色念球菌)。研究了不同处理时间下低温等离子体对掺入橙汁中微生物的灭活效果。此外,还研究了低温等离子体对橙汁货架期的影响,并且利用一系列生物医学检测手段和仪器(2,4二硝基苯肼比色法、氢氧化钠滴定法、数字阿贝折射仪、pH计和分光光度计)对经低温等离子体处理前后的橙汁维生素C的质量浓度、总酸、糖度(°Brix)、pH值和浊度进行了测量,考察了pH值对微生物的灭活效果。实验结果表明:低温等离子体可以快速有效地杀灭掺入橙汁中的微生物(金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念球菌)并延长橙汁储存的货架期,而且等离子体对橙汁营养及理化性质的影响不大。pH值在等离子体菌类灭活中不起主要作用,分析后认为等离子体中的带电粒子和氧自由基(ROS)才可能是导致菌类灭活的主要因素。

介质阻挡放电用于细菌灭活的机理研究

为研究低温等离子体灭菌的机理,利用介质阻挡放电(DBD)低温等离子体来进行了细菌灭活实验。试验选取了两种典型细菌:革兰氏阳性的金黄色葡萄球菌和革兰氏阴性的大肠杆菌。将载有细菌悬浊液的盖玻片放置在下平板电极的中央,通过调整电源电压、气隙间距和处理时间来考察电场和等离子体对两种不同细菌的作用;利用电子透射电镜(TEM)观察了等离子体处理后的细菌细胞,以确定细胞的完整性;测量了等离子体处理后的两种细菌悬浊液中蛋白质,核酸和K+的浓度。实验结果表明:在<10s时间内金黄色葡萄球菌死亡率接近100%;<7s内,大肠杆菌死亡率接近100%,取得了良好的灭菌效果。分析认为电场作用不是细菌灭活的主要因素,而等离子体中的氧自由基可以破坏细胞壁和细胞膜,以及细胞质中的蛋白质和核酸,从而起到杀菌的效果。

青蒿素对大鼠肾小球系膜细胞增殖、凋亡及Caspase-3活性的影响

目的:观察青蒿素对大鼠肾小球系膜细胞(mesangial cell,MC)增殖、凋亡及Caspase-3活性的影响。方法:以体外培养大鼠肾小球系膜细胞为研究对象,应用不同质量浓度青蒿素干预系膜细胞,分别采用甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法、荧光倒置显微镜及酶标分析仪检测系膜细胞的增殖、凋亡及Caspase-3活性。结果:与对照组比较,不同质量浓度青蒿素对肾小球系膜细胞的增殖及Caspase-3活性均有不同程度的影响(P<0.01);与地塞米松组比较,其他2组相同质量浓度药物对肾小球系膜细胞增殖及Caspase-3活性均有显著影响(P<0.01),尤以青蒿素联合地塞米松高剂量组的抑制作用最强,且3组药物对肾小球系膜细胞的增殖、Caspase-3活性及其凋亡的影响均呈剂量依赖趋势,在中、高剂量药物联合治疗组中出现了系膜细胞大量死亡。结论:青蒿素能剂量依赖性抑制系膜细胞增殖、增强Caspase-3活性及促进肾小球系膜细胞凋亡。

低气压板-板与多针-板电极结构甲烷气体介质阻挡放电的对比

为深入理解低气压板–板与多针–板电极结构甲烷气体DBD放电特性的差异,主要设计并测量了两种电极结构的放电特性,研究了放电电气参量随气体压强变化规律,测量了两种电极结构的放电区发射光谱,诊断了两种电极结构CH双原子分子的转动温度,利用转动温度近似气体温度,得到了气体温度随气压变化的规律,并对所得到的结果进行了分析和讨论。结果表明:在等气隙条件下,两种电极结构随着气压的升高放电逐渐过渡到不稳定状态,放电半径逐渐缩小,有明显的同心圆形貌;多针-板阵列结构电极相对于板–板电极结构,在电压正半周期时放电电流较大,在电压负半周时放电电流十分微弱。当气压较高时多针–板阵列结构起始放电的极间电压较低;光谱计算表明在其他条件相同条件下,多针-板阵列结构的气体温度较低。