艾纳香总黄酮对急性心肌梗死模型大鼠的药效作用及机制研究

目的研究艾纳香总黄酮对急性心肌梗死(AMI)模型大鼠的药效作用及可能机制。方法采用结扎SD大鼠冠状动脉左前降支的方法建立AMI模型。选取造模成功的50只大鼠,按照随机数字表法分为模型组(0.8%羧甲基纤维素溶液)、阳性对照组(复方丹参片,300 mg/kg)和艾纳香总黄酮低、中、高剂量组(3、10、30 mg/kg),每组10只;另取10只作为假手术组(0.8%羧甲基纤维素溶液)。手术1 d后开始灌胃给药,给药体积均为3 mL/kg,每天给药1次,连续4周。记录术前、术后及每周灌胃给药后大鼠心电图S-T段的变化;检测大鼠血流动力学指标[动脉收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、平均动脉压(MAP)、左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP)、左心室内压最大上升速率(+LVdp/dt_(max))和左心室内压最大下降速率(-LVdp/dt_(max))];检测大鼠血清心肌酶[乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶-MB(CK-MB)]和炎症因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、IL-1β]水平;检测大鼠心肌梗死率和心肌组织中磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)的磷酸化水平。结果与模型组比较,给药后各组大鼠心电图S-T段均显著降低(P<0.05);艾纳香总黄酮中、高剂量组大鼠SBP、DBP、MAP、LVSP、+LVdp/dt_(max)、-LVdp/dt_(max)及p-PI3K^(Tyr607)/PI3K、p-Akt^(Thr308)/Akt、p-Akt^(ser473)/Akt比值均显著升高(P<0.05),LVEDP、血清心肌酶和炎症因子水平、心肌梗死率均显著降低(P<0.05)。结论艾纳香总黄酮能改善AMI模型大鼠的心功能;其作用机制与抑制炎症因子表达,激活PI3K/Akt信号通路有关。

大孔吸附树脂纯化黄芪总皂苷的研究

目的研究黄芪总皂苷的大孔吸附树脂分离纯化工艺,为黄芪总皂苷的工业化生产提供参考。方法采用AB-8大孔吸附树脂对黄芪总皂苷进行吸附纯化,以黄芪总皂苷的收率、质量分数为考察指标综合评价。结果60%乙醇提取树脂吸附后用不同体积分数乙醇洗脱,黄芪总皂苷主要集中在40%～80%乙醇部位。树脂对黄芪总皂苷的动态吸附率为10.78mg/mL树脂;不同浓度NaOH溶液对杂质的洗脱效果不同,以0.1%NaOH溶液洗脱效果较好。结论黄芪提取物上AB-8树脂柱,以水和0.1%NaOH洗脱后以80%乙醇洗脱黄芪总皂苷部位可使黄芪总皂苷的收率和质量分数达到较满意效果。

白术黄芪汤及其有效部位组方对小鼠溃疡性结肠炎的疗效观察

目的观察白术黄芪汤及其有效部位组方对小鼠溃疡性结肠炎模型的疗效。方法采用三硝基苯磺酸(TNBS)灌肠法对小鼠进行造模,以疾病活动指数、结肠黏膜组织损伤的大体和病理评分、髓过氧化物酶(MPO)活性为观察指标对其疗效进行综合评价。结果白术黄芪汤及其有效部位组方对造模小鼠的疾病活动指数、结肠黏膜损伤指数、病理组织学评分和MPO活性均有一定疗效;有效部位组方疗效略优,其与模型组比较差异均有显著性意义(P<0.01),与白术黄芪汤组比较差异也有显著性意义(P<0.05)。结论白术黄芪汤及其有效部位组方对小鼠溃疡性结肠炎均有一定疗效,以有效部位组方疗效较好。

甘草总黄酮提取纯化工艺研究

目的研究甘草总黄酮提取分离工艺和分析方法。方法比较3种提取方法——超声波提取法、加热回流法和冷浸法对甘草总黄酮提取效果的影响;采用树脂吸附法精制甘草总黄酮并考察不同参数对提取得率和纯度的影响;采用柚皮苷直接扫描法对甘草总黄酮进行分析研究。结果超声波提取法、加热回流法和冷浸法甘草总黄酮提取率分别为5.46%、6.12%和5.04%,以加热回流法提取效果最好。树脂吸附甘草黄酮类成分主要集中在40%～60%乙醇洗脱部位。结论3种方法中以加热回流法提取甘草黄酮效果最好,树脂精制工艺考虑为纯水洗脱树脂后继以80%乙醇洗脱黄酮类成分。

白术糖复合物提取纯化工艺研究

目的：研究白术糖复合物提取纯化方法。方法：水提法提取白术糖复合物，中性氧化铝、树脂吸附法进行精制纯化，考察不同方法的除杂效果，确定工艺参数；盐酸紫外分光光度法、蒸发光散射法检测提取物中的糖含量。结果：白术提取液经中性氧化铝精制后糖复合物得率与纯度分别为23％～25．5％和56％～60％；根据D900弱碱性阴离子交换树脂、D201阴离子交换树脂、AB-8大孔吸附树脂的静态脱色曲线，它们对白术提取液色素杂质的交换能力大小为D900〉AB-8〉D201；D900离子交换树脂吸附法精制白术糖复合物得率为17％以上，盐酸紫外分光光度法检测糖纯度在76％以上。结论：水提后D900离子交换树脂吸附法精制白术糖复合物效果较好，糖定量分析以盐酸紫外分光光度法较为理想。

笼养停经期猕猴行为、体征及体内性激素变化规律初探

目的 研究停经期猕猴外部体征、表情行为及体内性激素水平变化规律。方法 根据性皮肤规律性变化周期 ,观察停经期猕猴外部体征及表情行为变化 ,并选择时机拍照录像 ,采用放射免疫法检测其体内雌、孕激素变化规律。结果 8只停经期猕猴性皮肤规律变化周期天数平均为 33天 ;停经期猕猴性皮肤浅淡期与正常猕猴经前期体征及行为基本一致 ,性皮肤红肿期与正常猕猴卵泡期基本一致 ;性皮肤浅淡期阴道涂片细胞学变化与正常月经期猕猴经前期基本一致 ,性皮肤红肿期与卵泡期基本一致 ;二猴E2在停经期性皮肤规律变化过程中有一明显分泌高峰 ,大约在指定周期的 11天左右 ,随后在周期第 19天左右亦出现一上升段 ;二猴体内孕酮在停经期性皮肤规律变化过程中有一分泌高峰段 ,大约在指定周期的 19天。结论 停经期猕猴行为、体征及体内性激素水平变化规律与其正常月经周期时基本一致。

天然黄酮(醇)及异黄酮对PPARγ受体的亲和力研究

目的:研究几百种天然黄酮类化合物对PPARγ受体的亲和力作用。方法:采用UCSFDOCK6.0软件对化合物和PPARγ受体2PRG中的活性口袋部位进行分子对接筛选,进行评分。结果:对于2PRG受体而言,异黄酮较黄酮有更好的亲和力,分数低于-32的黄酮只有1%,而异黄酮则有5%。结论:天然黄酮类成分对PPARγ受体2PRG有一定亲和力,以异黄酮类成分亲和力较好。

高脂血症中医证候分布规律文献研究

【目的】通过分析中医药相关文献探讨高脂血症中医证候分布规律。【方法】利用CNKI世纪期刊检索库进行1911～2012年的中医药期刊文献所报道的高脂血症中医辨证分型的文献检索,对其中涉及到的高脂血症临床症状、舌、脉、病性、病位及辨证分型规律进行统计分析。【结果】共检出文献3 986篇,符合要求的为836篇;共出现78种中医证型,68种临床症状,2种舌体,11种舌质,11种舌苔,18种脉象。将上述证型按脏腑病位证素进行统计分析,结果显示肝、脾、肾所占比例分别为43.96%、25.87%、25.49%;将上述证型按病性证素分布进行统计分析,得到高脂血症相关病性证素有11种,其中瘀、痰所占比例分别为27.05%、24.69%。【结论】高脂血症中医临床证候病位证素分布中与"肝"相关的证候为主要证候;病性证素分布中与"痰瘀"相关的证最多。提示"肝"在高脂血症发病中较脾肾占有更重要地位,同时对痰、瘀之邪也不可忽视。

白术黄芪汤及其单药提取部位组方对溃疡性结肠炎的治疗作用

目的探讨白术黄芪汤(DAA)益气健脾作用的物质基础。方法DAA以原方配伍水提,煮沸浓缩至相当于药材1500g.L-1;DAA单药提取部位组方(PEAAG)以组成DAA的3个单药白术、黄芪和甘草提取部位白术糖复合物(AMPS-Ⅱ)、黄芪总皂苷(TSA)和甘草总黄酮(TFG)以4∶3∶3比例混合,加蒸馏水混匀研磨配成储存液,含提取物100g.L-1。用三硝基苯磺酸(TNBS)制备大鼠溃疡性结肠炎模型,造模d2分别灌胃给予DAA(相当于药材15g.kg-1)和PEAAG(含提取部位0.3g.kg-1)连续15d,肉眼观察大鼠结肠病变并进行组织病理学检查。用TNBS制备小鼠结肠炎模型,于d2分别灌胃给予PEAAG及其3个组成部位(剂量均为0.2g.kg-1)连续10d,观察结肠组织髓过氧化物酶(MPO)活性的变化。用一次最大耐受量实验观察DAA和PEAAG的小鼠急性毒性。结果与模型对照组比较,PEAAG组结肠的肉眼和组织病理学评分均降低,DAA组变化不明显。PEAAG和AMPS-Ⅱ可降低TNBS致小鼠结肠炎结肠组织MPO的活性,PEAAG作用更明显,TSA和TFG作用不明显。DAA和PEAAG一次最大耐受量分别为60g.kg-1和4g.kg-1,相当于临床用量的180倍和300～600倍。结论单药提取部位组方PEAAG对溃疡性结肠炎具有较好的治疗作用,在所观察的剂量条件下可能优于原方DAA和3个提取部位,且毒性未增加。

蛇床子超临界提取物肝肾毒性及代谢组学的初步研究

目的以常规毒理学指标研究蛇床子超临界提取物的毒性,比较蛇床子组、模型组和空白组的尿液代谢表型差异。方法将SD大鼠随机分为蛇床子组、四氯化碳组和空白组,给药后收集尿液和血液,采用全自动生化仪测定血清中与肝脏、肾脏功能代谢有关的各项指标,用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱(U-PLC/Q-TOf MS)技术测定大鼠的尿样,利用主成分分析(PCA)对其数据进行处理。结果与空白组比较,蛇床子组中碱性磷酸酶(ALP)活性明显下降,而谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、总胆红素(TBI)、血尿素氮(BUN)、血肌酐(CRE)都略有上升。与四氯化碳组比,蛇床子组中GPT、GOT、ALP都存在非常显著性差异。代谢组学分析组间表型差异明显。结论蛇床子超临界提取物具有一定的毒性,在临床使用时应予注意。

UPLC/Q-TOF-MS/MS法分析厚朴化学成分

目的采用超高压液相色谱串联四级杆飞行时间质谱技术(UPLC/Q-TOF-MS/MS)对厚朴提取物中的化学成分进行检测和分析。方法用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱,以0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相梯度洗脱,使用ESI离子源,在正负离子模式下采集数据;采用与对照品对比和质谱数据分析及检索文献的方法分析化学成分。结果负离子模式下检测出厚朴提取物中14个化合物,其中9个成分经过鉴定均为木脂素类成分,正离子模式下检测出厚朴提取物中24个化合物,其中13个成分通过元素分析为生物碱类成分。结论 UPLC/Q-TOF MS技术是一种快速分析中药复杂化学成分的有效方法。

经前期综合征(肝气逆证)猕猴模型月经周期相关指标观察

目的:了解造模猕猴月经周期血清与尿中性激素及其调节激素与神经递质水平变化规律,为模型评价提供客观依据。方法:造模选择排卵期猕猴,运用挤压笼每天7小时,连续挤压7天;指标检测用毛细管电泳法测定造模猕猴血清及尿中单胺类神经递质水平,放射免疫法测定其性激素及其调节激素水平。结果:造模猕猴血清催乳素(PRL)较正常猕猴备期均升高,统计学处理均达到显著性水平;雌二醇(E_2)及孕酮(P)经前期有降低的趋势;β-内啡肽(β—EP)有升高的趋势;尿中亦有类似变化。造模后猕猴各期血清神经递质均有升高的趋势,尿中亦具有类似变化。结论:造模猕猴月经周期血清、尿中性激素和神经递质水平呈现与该病证近似一致的病理变化,为造模猕猴病证定性提供客观依据。

黄芪及其蜜炙品的UPLC/Q-TOF-MS分析

目的采用超高效液相色谱与串联四级杆飞行时间质谱仪联用技术(UPLC/Q-TOF-MS)进行黄芪及其蜜炙品的成分分析,并比较蜜炙前后主要成分的变化。方法采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱,以0.1%(体积分数)甲酸-乙腈-异丙醇体系梯度洗脱,使用ESI离子源,正、负离子模式下采集数据。应用Markerlynx软件进行主成分分析(principal component analysis,PCA),比较药材炮制前后成分变化。结果通过PCA分析,可以很好地区分蜜炙前后的黄芪药材,并鉴定了包括毛蕊异黄酮、芒柄花素、汉黄芪素、3,9-二-O-甲基尼森香豌豆紫檀酚在内的8种蜜炙前后质量分数变化较大的化合物。结论借助UPLC的快速分离和Q-TOF-MS测定的精确分子量信息,结合PCA模式识别方法可以有效地对黄芪药材蜜炙前后化学成分变化进行分析鉴定。

细胞色素P450与中草药代谢关系的研究进展

细胞色素P450(cytochrome P450,CYP450)是微粒体混合功能氧化酶中最重要的一族,在外源性物质和内源性物质的代谢中具有极其重要的作用。本文综述了与药物代谢相关的CYP亚型、CYP与药物相互作用的关系及中药对CYP的影响,以能合理解释和预测临床上药物间相互作用和药物不良反应等,同时选择合适的方法来评价CYP的活性,为实现临床个体化给药提供科学依据。

择时造模猕猴经前期“病证表现”及其评价

目的 :研究正常猕猴造模后表情行为变化规律。方法 :采用择时挤压造模方法 ,用监视器、照像机跟踪观察记录其造模过程及造模后表情行为变化。结果 :造模过程中及造模后猕猴表情行为变化基本符合经前期综合征肝气逆证临床表现。结论

UPLC/Q-TOF-MS/MS分析蛇床子提取物大鼠体内外化学成分

目的采用超高效液相色谱与串联四级杆飞行时间质谱仪联用技术(U PLC/Q-TOF MS/MS)对蛇床子超临界提取物的体内外成分进行分析和鉴定。方法用ACQUITY UPLC BEHC18色谱柱,以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相梯度洗脱,检测波长254 nm,使用ESI离子源,在正离子模式下采集数据;采用与标准品对比和质谱数据分析及检索文献的方法鉴定化学成分。结果检测出蛇床子超临界提取物中9个化合物,其中5个成分经过鉴定确认均为香豆素类,大鼠口服蛇床子提取物的血浆中检测出欧前胡素和蛇床子素两个原形成分。结论 UPLC/Q-TOF MS技术快速有效,具有较高的灵敏度和分辨率,适宜于鉴定中药复杂的体内外活性成分。

甘蔗烷醇预防给药对家兔高脂血症模型的影响研究

目的:研究甘蔗烷醇在预防高脂血症方面的药用价值。方法:采用兔复制高脂血症模型,采用甘蔗烷醇提取物预防给药,观察对模型动物甘油三酯及胆固醇的影响。结果:预防给药实验12周后,甘蔗烷醇10、5、2.5mg/kg均可非常显著降低TC、TG、LDL-C,10mg组可显著提高HDL-C。结论:甘蔗烷醇预防给药对家兔高脂血症模型具有良好的调节血脂作用。

甘蔗烷醇对家兔高脂血症模型血脂影响研究

用外源性胆固醇和高脂饲料(HFD)复制家兔高血脂模型,以造型动物血脂水平的改变作为观察指标,观察甘蔗烷醇对造型动物血脂水平的影响。

厚朴超临界提取物大鼠体内外化学成分的UPLC/Q-TOF-MS分析

目的采用超高效液相色谱与串联四级杆飞行时间质谱仪联用技术(UPLC/Q-TOF-MS)对厚朴超临界萃取(SFE)提取物进行大鼠体内外化学成分分析。方法用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱,以水(A)/乙腈(B)梯度洗脱,使用ESI离子源,负离子模式下采集数据。初步分析提取物的化学成分、给药后吸收入血成分及其代谢情况。结果厚朴SFE提取物中检测到和厚朴酚、厚朴酚、龙脑基厚朴酚等5个化学成分,其中厚朴酚原型成分吸收入血,并初步鉴定其3个代谢物。结论厚朴酚是厚朴SFE提取物在体内的直接作用物质,结合其代谢产物分析,有助于阐明厚朴SFE提取物的体内药效物质基础。

温肾咳喘片主要成分对HepG2细胞中CYP相关基因表达的影响

观察温肾咳喘片组方中5种主要单体成分甘草酸、厚朴酚、和厚朴酚、蛇床子素和欧前胡素对细胞色素P450(cytochrome P450,CYP)1A2,2D6,2E1和3A4基因表达的影响.采用实时荧光定量PCR技术检测HepG2细胞中药物处理后各CYP mRNA的表达.厚朴酚、和厚朴酚、蛇床子素和欧前胡素在不同浓度均能明显的诱导CYP2E1和CYP3A4,同时欧前胡素也能诱导CYP1A2的表达,而甘草酸、厚朴酚、和厚朴酚、蛇床子素和欧前胡素在不同浓度对CYP2D6的表达均具有较弱的抑制作用.甘草酸、厚朴酚、和厚朴酚、蛇床子素和欧前胡素能明显影响CYP1A2、2D6、2E1或3A4的表达.此研究为中西药物代谢性相互作用及毒理学的研究提供实验依据.