应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱检测细菌耐药性的初步研究

目的研究基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)用于检测鉴定细菌耐药性的可行性。方法对临床分离的耐药谱明确的8属11株细菌及相应的标准菌株,经相同条件培养后,应用MALDI-TOF-MS进行检测,并分析其耐药株和标准株质谱图的差异。另外,对临床分离的30株金黄色葡萄球菌同时进行药物敏感性实验和MALDI-TOF-MS检测。结果应用MALDI-TOF-MS检测细菌耐药性时,对葡萄球菌检测结果较好,尤其是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,而对其它细菌耐药性检测效果较差。结论MALDI-TOF-MS检测细菌耐药性适用于部分细菌。

长期食用何首乌对小鼠造血系统的影响

目的探讨长期食用何首乌后,小鼠造血系统的变化。方法小鼠随机分为2组,对照组,喂饲正常饲料;何首乌饲料组,喂饲添加何首乌的饲料,10个月后,处死小鼠,应用流式细胞仪分析外周血、脾脏、胸腺及骨髓中各种细胞。结果何首乌饲料组小鼠,脾脏B细胞增多,胸腺CD4+细胞增多,CD8+细胞减少;骨髓造血干细胞显著减少,其中静止期细胞增多,增殖分裂期细胞减少。结论长期适量食用何首乌有助于减缓小鼠造血系统的衰老,维持造血系统稳定。

枸杞对小鼠辐射损伤后造血系统修复的促进作用

目的探讨枸杞在小鼠辐射损伤后造血系统修复过程中的作用。方法小鼠随机分为3组,正常对照组不做任何处理,喂饲正常饲料;另外2组,给予4.5 Gy照射后,喂饲正常饲料或添加枸杞的饲料,1个月后,处死小鼠,应用流式细胞仪分析外周血、脾脏、胸腺及骨髓中各种血细胞。结果枸杞饲料组小鼠,外周血细胞总数及B细胞增多,骨髓细胞总数减少,骨髓前体B细胞及未成熟B细胞增多,造血干、祖细胞均显著减少。结论枸杞促进辐射损伤后造血干细胞动员及分化,加速造血系统的恢复。

黑葡萄穗霉的研究进展

黑葡萄穗霉是一种腐生菌,能够产生多种毒素,给人类生活和健康带来严重影响。本文就黑葡萄穗霉的形态特征、生长特性、抗原组分及基因、所产毒素及其它生物活性产物、毒理学实验和检测方法等进行综述。

Cramp转基因小鼠的构建及鉴定

目的建立系统性表达Cramp转基因模型小鼠,为研究Cramp在衰老中的作用提供模型动物。方法把Cramp cDNA插入系统性表达CMV启动子下游,构建转基因表达载体,显微注射法建立Cramp转基因小鼠。PCR鉴定转基因小鼠的基因型,用RT-PCR和Western blotting方法筛选高表达品系。结果成功构建Cramp cDNA转基因载体,建立了Cramp转基因小鼠,通过RT-PCR和Western blotting方法筛选出3个高表达品系。结论建立了系统表达Cramp转基因小鼠,转入的Cramp基因在骨髓、脾脏、肝脏等组织高表达,为研究Cramp基因在衰老中的作用及机制提供了动物模型。

Cramp基因敲除对小鼠骨髓造血干细胞的影响

目的研究Cramp基因敲除在衰老过程中对小鼠造血干细胞的作用。方法应用流式细胞仪分析3月龄及12月龄Cramp基因敲除小鼠及同窝野生型小鼠的骨髓造血干细胞的比例及不同发育阶段B淋巴细胞的比例。结果与野生型小鼠相比,12月龄Cramp基因敲除小鼠的骨髓长期造血干细胞增多,多潜能造血祖细胞减少;前体B淋巴细胞和未成熟B淋巴细胞减少,成熟B淋巴细胞增多。结论在衰老过程中,Cramp基因敲除对骨髓造血干细胞及B淋巴细胞发育有重要影响。

初中物理教学方法选择与创新探究

新课程标准要求物理教学必须以学生为主体,通过教师熟练灵活地运用各种教学方法,达到培养学生熟练掌握物理知识,全面发展的目标。教学方法的创新是提高初中物理教学质量和效率的关键,结合多年的教学实践,对初中物理教学应该在教学过程中采取哪些具体的教学方法,加强教学方法的创新进行深入的探讨和分析。

空气微生物研究进展及室内空气净化消毒措施

空气中的微生物对人类生活和健康有广泛影响。目前,国内外对多种场所的空气微生物情况进行了研究,这些研究着重于微生物浓度及种属的调查,毒理学方面的研究相对较少,国外多为空气真菌孢子及毒素的毒理学研究。同时,针对空气微生物的净化消毒措施也在不断发展,室内常用的如臭氧灭菌、静电捕获、空气过滤等。本文就空气微生物的研究进展及室内空气净化消毒措施进行综述。

Exo-1基因对端粒酶缺陷小鼠造血干细胞植入效率的影响

目的利用不同的造血干细胞移植方式,探讨Exo-1基因缺失对端粒酶基因敲除小鼠的造血干细胞植入效率的影响。方法以CD45.1小鼠的骨髓细胞或骨髓造血干细胞为供体,以端粒酶基因敲除小鼠或Exo-1基因和端粒酶基因双敲除小鼠为受体,在给予不同剂量X线照射或不照射的情况下,重复进行静脉注射全骨髓细胞或分选的骨髓造血干细胞(c-kit+、Sca-1+、lineage-,KSL),于移植后1个月取外周血,流式分析嵌合率。结果未经X线照射及1 Gy、2 Gy照射情况下,端粒酶基因缺陷受体小鼠的外周血中供体来源的细胞嵌合率较低;6 Gy照射后,供体来源的外周血细胞嵌合率仍低于50%,而且端粒酶基因缺陷受体小鼠在移植后1个月内死亡较多;3 Gy照射可形成较高嵌合率,Exo-1基因缺失对端粒酶缺陷小鼠的造血干细胞植入效率的影响不显著。结论以端粒酶缺陷小鼠作为衰老模型研究造血干细胞植入效率时,3 Gy X线照射能够有效地形成较高的外周血供体细胞的嵌合率,但是Exo-1基因没有进一步提高造血干细胞在端粒酶敲除小鼠的植入效率。

Cramp过表达对小鼠骨髓造血干细胞功能的影响

目的研究Cramp蛋白过表达对小鼠骨髓造血干细胞自我更新和分化能力的影响。方法应用流式细胞仪分析Cramp过表达转基因小鼠及同龄野生型小鼠的骨髓、脾脏、胸腺等组织器官中各种细胞的比例;分选骨髓造血干细胞,体外培养,观察其克隆形成能力。结果与野生型小鼠相比,Cramp过表达转基因小鼠的骨髓、脾脏、胸腺等组织器官中各种细胞的比例、骨髓造血干细胞的克隆形成能力等均无明显变化。结论本研究中,Cramp过表达转基因小鼠骨髓造血干细胞的分化能力、克隆形成能力无明显变化。

ApoE 基因敲除对小鼠 B、T 淋巴细胞的影响

目的了解Apo E基因敲除对淋巴细胞的影响。方法用不同抗体标记Apo E基因敲除及同窝野生对照小鼠的外周血、脾脏、骨髓等细胞,应用流式细胞仪进行分析,比较两组之间的差异。结果对检测结果进行统计分析发现,与野生型小鼠相比,Apo E基因敲除小鼠的外周血、脾脏淋巴细胞、短期造血干细胞均有改变,骨髓前体B淋巴细胞、胸腺T淋巴细胞、长期造血干细胞等没有显著变化。结论 Apo E基因敲除后,小鼠外周血及脾脏B淋巴细胞减少,骨髓短期造血干细胞增加,但B及T淋巴细胞发育,以及骨髓长期造血干细胞、淋系共同祖细胞都没有显著变化。

E2F1基因敲除小鼠骨髓造血干、祖细胞减少

目的了解转录因子E2F1基因敲除对造血干、祖细胞的影响。方法用不同抗体标记E2F1基因敲除及同窝野生对照小鼠的外周血、脾脏、骨髓等细胞,应用流式细胞仪进行分析,比较两组之间的差异。结果对检测结果进行统计分析发现,与野生型小鼠相比,E2F1基因敲除小鼠的外周血、骨髓细胞均有改变,脾脏细胞未见明显变化,骨髓前体B细胞、髓系祖细胞、造血干细胞等均有显著变化。骨髓造血干、祖细胞减少,G1期造血干细胞减少。结论 E2F1基因敲除可使小鼠造血干、祖细胞减少。

Exonuclease-1缺失延缓端粒酶缺失小鼠造血微环境的衰老

目的研究Exo-1对端粒酶缺失小鼠造血微环境衰老的影响。方法以端粒酶基因敲除小鼠(Terc-/-)和Exo-1基因敲除小鼠(Exo-1-/-)杂交,并进一步互交产生第三代端粒酶基因敲除小鼠(G3Terc-/-)以及第三代Terc和Exo-1双基因敲除小鼠(G3Terc-/-Exo-1-/-)。以CD45.1野生型小鼠的骨髓细胞为供体,以2月龄G3Terc-/-或G3Terc-/-Exo-1-/-小鼠为受体,进行骨髓移植。在受体小鼠9月龄时,取骨髓、脾脏、胸腺、外周血等组织器官的细胞进行流式分析,研究G3Terc-/-和G3Terc-/-Exo-1-/-受体小鼠中的野生型供体来源的造血干细胞的发育分化。结果同G3Terc-/-小鼠相比,G3Terc-/-Exo-1-/-双基因敲除受体小鼠骨髓中野生型供体来源的B220+细胞比例升高,前体B细胞的比例也明显升高;脾脏B220+细胞的比例明显升高;胸腺发育正常;外周血中B220+细胞比例升高。结论 Exo-1缺失延缓了端粒酶基因敲除小鼠造血系统微环境的衰老,从而逆转了端粒功能障碍引起的骨髓造血干细胞发育分化异常。

Ⅲ期非小细胞肺癌同步放化疗治疗的临床研究

背景与目的：目前,单纯采用放疗或化疗治疗不能手术的Ⅲ期非小细胞肺癌疗效均不甚理想。为此,本研究探讨了针对同步放化疗治疗不能手术的Ⅲ期非小细胞肺癌的疗效及毒副反应。方法：212例不能手术的Ⅲ期非小细胞肺癌患者用抽签法随机分为A、B、C、D 4组：A组采用常规分割放疗,B组采用常规分割放疗同步化疗,C组采用超分割放疗同步化疗,D组采用加速超分割分段放疗同步化疗。4组肿瘤灶放疗总剂量均为65~70 Gy,B、C、D组在放疗同时给予依托泊苷、顺铂化疗两个周期,A、B、C、D 4组在放疗结束后,均给予上述方案维持化疗2至4个周期。结果：A、B、C、D组有效率分别为50.9%、73.5%、75.5%、77.3%。经统计处理,B、C、D组有效率均明显高于A组（P〈0.05）,而B、C、D 3组间差异无显著性（P〉0.05）。4组的1、2、3年生存率分别为28.3%、15.1%、7.55%;58.5%、32.1%、20.8%;62.3%、33.9%、22.6%;60.3%、35.8%、22.6%。B、C、D 3组的1、2、3年生存率明显高于A组（P〈0.05）,而B、C、D 3组间差异无显著性（P〉0.05）。毒副反应主要为骨髓抑制、放射性食管炎、放射性肺炎,各组间差异无显著性（P〉0.05）。结论：同步放、化疗是目前不能手术切除的Ⅲ期非小细胞肺癌的一种较理想的治疗模式。

罗汉果和熟地增加小鼠造血干细胞的数量和功能

目的罗汉果和熟地具有增强机体免疫力,延年益寿的作用。本文研究罗汉果和熟地对造血干细胞的影响。方法各组小鼠连续喂养罗汉果或熟地3个月,流式细胞仪测量小鼠的外周血、脾脏和骨髓中免疫细胞和造血干细胞的变化;小鼠用半致死剂量的放射线照射后,连续喂养罗汉果或熟地1个月后,流式细胞仪测量罗汉果或熟地对于免疫细胞和造血干细胞损伤修复的作用。结果分析检测结果发现,与对照组相比,长期喂养罗汉果或熟地的小鼠骨髓和外周血中B细胞的比例降低,粒细胞的比例增加,T细胞没有明显变化;骨髓中造血干细胞的数量增加,尤其是长期造血干细胞数量增加显著。半致死剂量的放射线照射后,罗汉果或熟地喂养1个月,小鼠的粒细胞和T细胞都有明显的改善,造血干细胞的数量明显增加。结论罗汉果或熟地长期服用会增加小鼠造血干细胞的数量和功能,促进了辐射所致的骨髓抑制小鼠的造血干细胞的恢复。

恒河猴 p53基因沉默靶点在细胞水平的验证

目的：为建立恒河猴 p53基因沉默模型，首先在细胞水平筛选和测定恒河猴 p53基因有效沉默靶点。方法测定非洲绿猴肾来源成纤维细胞 COS-7中 p53基因的表达水平；对恒河猴 p53基因做生物信息学分析，优选靶序列设计 shRNA，克隆入慢病毒载体 FUGW-TDT，转染 COS-7细胞，以 real-time PCR 检测 p53 mRNA 抑制水平，以 Western blot 检测 p53蛋白水平表达变化。结果在 COS-7细胞检测到 p53基因的表达；生物信息学筛选到3个靶片段，分别位于 p53 mRNA 的238～258 bp，681～701 bp，169～189bp，均在开放阅读框内； p53三个靶位点的沉默效率在 mRNA 水平分别为（87.17±4.03）％，（72.62±14.11）％，（76.22±0.98）％；在蛋白水平的沉默效率分别为（84.44±2.18）％，（71.0±1.18）％，（74.17±0.95）％。结论在细胞水平筛选得到3个有效的 p53基因沉默靶点，可用于后续的恒河猴基因沉默研究。

利用流式荧光原位杂交法测定细胞端粒长度

目的建立利用流式荧光原位杂交法检测细胞端粒长度的技术方法。方法以端粒酶敲除的G3小鼠和同龄野生型小鼠为检测对象,分离其外周血中的单个核细胞后与肽核酸荧光探针杂交,用流式细胞仪采集和分析其端粒长度,分别用荧光原位杂交方法和SYBR Green荧光定量PCR方法验证其准确性。结果流式荧光原位杂交法测定G3小鼠细胞端粒相对长度与C57BJ/6野生型小鼠相比为0.5345,荧光定量PCR测定端粒相对长度为0.5717,结果基本一致。结论流式细胞术与原位杂交方法结合起来检测细胞端粒的平均长度可靠易行,对单个核细胞端粒平均长度的检测有较高的实用性。

一种简单实用的血液循环模型

一种简单实用的血液循环模型张炜芳石桂英陈晋原赵荣瑞（山西医科大学生理学教研室太原０３０００１）关键词血液循环模型，心血管中图号Ｒ３３１．３心脏和血管组成机体的循环系统，血液在其中按一定的方向流动，周而复始，称血液循环。心脏是一个由心肌组织构成并具有瓣...

国有企业预算管理的创新路径策略研究

为了提升国有企业的管理水平,使企业面对日益复杂的经济形式,不断提升自身的市场竞争力,对国有企业开展预算管理是现行有效的措施。目前,大部分国有企业已经开展了预算管理工作。然而,随着互联网时代的到来,经济形势愈发多样化,目前的预算管理体制已经不能满足时代的需求。因此,优化预算管理已成为众多国有企业面临的首要问题,国有企业的工作人员应当客观分析目前预算管理工作中遇到的问题,针对这些问题探究解决的策略。本文分析了国有企业实行预算管理的重要作用,从预算管理工作的现状和问题入手,讨论了预算管理的创新路径策略研究。