人DC与黑色素瘤细胞融合疫苗体外诱导特异性抗肿瘤CTL

目的:探讨HLA-A2-的黑色素瘤细胞与HLA-A2+的树突状细胞(DC)融合后体外诱导Me-lan-A特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的作用及交叉抗原递呈的能力。方法:用PEG法将黑色素瘤细胞与DC融合,在含GM-CSF的RPMI1640完全培养基条件下继续培养24～48h,然后将融合细胞与Me-lan-A特异性T细胞共同培养,用细胞内细胞素染色法检测其诱导CTL的活性,流式细胞术分析T细胞的活化率。结果:从异体外周血分离的单核细胞在GM-CSF及IL-4条件下培养6d后,未成熟的DC能表达一定的CD80,CD83,CD86,HLA-DR和HLA-ABC等共刺激分子,而经TNF-浕,PGE-2及CD40L诱导成熟的DC,则这些分子的表达进一步上调。融合细胞体外活化Melan-A特异性T细胞的效率为16.72%±4.26%,阴性对照为0.21%±1.84%,阳性对照为28.60%±5.67%。融合细胞活化的CTL能有效地溶解HLA-A2的黑色素瘤细胞。结论:HLA-A2-的黑色素瘤细胞与HLA-A2+阳性的DC融合肿瘤疫苗,能在体外有效地交叉递呈MHC-I限制性肿瘤抗原,并诱导Melan-A特异性的CTL和有效地杀伤黑色素肿瘤细胞。

二亚硝基哌嗪诱发转基因小鼠鼻咽上皮细胞恶性转化的研究

本文报道化学致癌物二亚硝基哌嗪（DNP）诱发转基因小鼠鼻咽上皮细胞体外恶性转化。转化细胞表现为形态学改变，生长寿命延长，停泊非依赖性生长，染色体异常，接种裸鼠后形成肿瘤。电镜观察这些细胞呈低分化鳞癌细胞特征，实验结果表明，体外培养的携带EB病毒潜伏膜蛋白瘤基因的转基因小鼠鼻咽上皮细胞在小鼠肝微粒体酶（S9mix）活化下，对DNP的转化具有一定的敏感性，

8株人黑色素瘤细胞系的建立及其生物学特性研究

目的 :从人黑色素瘤组织建立一系列黑色素瘤细胞系 ,命名为黑色素瘤细胞系 1- 8号 (HME1- 8) ,并研究鉴定其体外细胞生物学与免疫学特性。方法 :取黑色素瘤组织进行组织块培养法 ,待长满 90 %汇合面后消化传代培养 ,并进行形态学、生长动力学、免疫学及致瘤性等生物学特性研究。结果 :该系列黑色素瘤细胞系已在体外培养生存 1- 2年 ,传 6 0 - 10 0余代 ,其生物学特性显示 :①这些细胞系体外生长的倍增时间为 34. 2 - 5 9. 5h ;②软琼脂集落形成率平均值在 8. 6 % - 2 6 . 2 %之间 ;③接种至裸鼠后具有较高的致瘤性 ;④染色体核型分析为非整倍体 ,众数为 6 4 - 117条 ;⑤透射电镜下可观察到细胞含丰富的核糖体及黑色素颗粒 ;⑥免疫组化分析显示细胞浆内含大量阳性棕色黑色素颗粒 ;⑦肿瘤抗原检测显示 8株黑色素瘤细胞系的Melan -A抗原阳性率为 75 % ,MAGE - 1阳性率为5 0 % ,MAGE - 2阳性率为 37 .5 % ,MAGE - 3阳性率为 6 2 .5 %。结论 :8株黑色素瘤细胞系经体外长期培养后已永生化 ,形成了连续传代细胞系 ,具有明显的黑色素瘤细胞恶性表型特征。

LAK细胞治疗42例中晚期恶性肿瘤的疗效观察

该文报道了来自患者自体或同种异体LAK细胞对 42例中晚期癌症患者的疗效分析 ,其中CR 2例 ,PR 14例 ,MR 12例 ,SD 11例 ,PD 3例。总有效率为 38 10 % ,绝大多数患者都有不同程序的临床症状改善、生活质量提高、生存期延长 ,未观察到严重毒副反应。

T细胞直接活化与交叉活化研究进展

T细胞介导的免疫应答在机体排斥肿瘤的过程中起核心主导作用 ,原始的CD8+ T细胞分化成效应细胞 ,在自身MHCⅠ类分子存在的条件下能识别特异性抗原肽 ,CD8+ CTL可直接识别、杀伤表达特异性抗原的肿瘤细胞。多数抗原加工通道能产生有效的CD8+

茶多酚在体外诱导HL-60细胞的凋亡

目的：寻找新的肿瘤细胞凋亡诱导剂。方法：选用茶的主要活性成分茶多酚，采用噻唑蓝（ＭＴＴ）还原法，ＤＮＡ凝胶电泳以及透射电镜技术，在体外观察了茶多酚对人急性早幼粒白血病细胞（ＨＬ－６０）凋亡的影响。结果：被２５０ｍｇ／Ｌ茶多酚作用５ｈ后ＨＬ－６０细胞进行凝胶电泳呈现出典型的ＤＮＡ条带，透射电镜下看到凋亡小体，茶多酚对ＨＬ－６０细胞凋亡的诱导活性平行于它的细胞杀伤作用。结论：在体外培养条件下。

人二倍体细胞株HLF-02的建立及其生物学特性

目的 :建立HLF 0 2细胞株 ,为老年学 ,肿瘤学 ,病毒学 ,药物学和生物遗传学等研究提供新的实验材料。方法 :人二倍体细胞株HLF 0 2取于肺组织 ,用胰蛋白酶消化肺组织 ,可获 90 %以上具有正常代谢活性的肺细胞 ,对存活的肺成纤维细胞进行形态学观察、生长特性检查、核型分析、电镜观察和异种移植等。结果 :建成的HLF 0 2细胞株其形态表现、电镜观察、核型分析和异种移植等均符合二倍体细胞特征。经过 10个月的体外培养 ,共传 5 0代 ,细胞倍增时间 75 .5h ,染色体始终保持二倍体特性 ,异种移植成瘤试验阴性 ,无支原体污染。结论 :HLF 0 2是一株人二倍体细胞株 ,可用于对细胞老年学 ,肿瘤学 ,病毒学 ,药物学和生物遗传学等方面的研究。

茶抗消化系统肿瘤的研究进展

茶抗消化系统肿瘤的研究进展赵燕１曹进１祝和成２作者单位：１．湖南医科大学茶与健康实验室（长沙４１００７８）２．湖南医科大学肿瘤研究所近年来，随着医学与茶学学科交叉日益紧密，茶及茶中很多组分的抗肿瘤研究呈现十分活跃的局面，尤其在茶抗消化系统肿瘤研究领域...

改良的新生猪胰岛细胞体外培养

介绍一种通过细胞分离及体外培养获得大量新生猪胰岛细胞团的方法。新生猪胰腺经 0 .5～ 1mg .ml- 1的V型胶原酶消化 8～ 1 2min ,再经体外培养 7d ,可获大量纯化的胰岛细胞团。同时 ,新生猪胰岛内的B细胞不仅胰岛素分泌功能良好 ,而且其超微结构正常。提示新生猪胰岛细胞可作为异种移植治疗 1型糖尿病重要的供体来源。

表没食子儿茶素没食子酸酯诱导HL60细胞程序性死亡

目的：探讨儿茶素类化合物的抗癌作用机制。方法：以儿茶素的主要成分表没食子儿茶素没食子酸酯（ＥＧＣＧ）为实验材料，使用噻唑蓝（ＭＴＴ）还原法，ＤＮＡ凝胶电泳，透射电镜技术，观察了ＥＧＣＧ对人急性早幼粒白血病细胞（ＨＬ６０）程序性死亡的影响。结果：０．５５×１０－３ｍｏｌ·Ｌ－１ＥＧＣＧ作用５ｈ后，琼脂糖凝胶电泳下，ＨＬ６０细胞呈现典型的ＤＮＡ条带，透射电镜观察到凋亡小体。

人结肠癌耐药细胞系SW480/ADM的建立及其生物学特性

目的 建立人结肠癌SW4 8 0耐阿霉素细胞系 (SW4 8 0 /ADM) ,研究其耐药机制及逆转。方法 应用人结肠癌细胞系SW4 8 0,以递增阿霉素 (ADM)浓度的方法,体外连续培养建成一株SW4 8 0 /ADM。观察该细胞生长规律。用MTT比色法检测该耐药细胞系的多药耐药性;以流式细胞术检测该耐药细胞的细胞周期分布、细胞表面多药耐药基因 (MDR)的表达产物P-糖蛋白 (P gp) 、多药耐药相关蛋白 (MRP)及谷胱甘肽硫转移系统 (GSH/GST)的表达;用高效液相色谱仪检测耐药细胞内阿霉素含量。结果 SW4 8 0 /ADM细胞与SW4 8 0细胞相比,生长缓慢,倍增时间延长,细胞周期分布发生改变;SW4 8 0 /ADM细胞较SW4 8 0的阿霉素半数抑制浓度 (IC50 )增大 1 3. 2 2倍,并对多种抗癌药物产生耐药性。SW4 8 0 /ADM细胞表面MDR的表达产物P gp,MRP和GSH/GST的表达均较SW4 8 0细胞显著升高 (P< 0. 0 1 )。SW4 8 0 /ADM细胞内阿霉素含量明显低于SW4 8 0细胞。结论 SW4 8 0 /ADM细胞对阿霉素的耐药是获得性的,并呈多药耐药性特征,可用于对人结肠癌耐药、逆转和MDR机制等方面的研究。

汉防己甲素和长春新碱对人视网膜母细胞瘤细胞系HXO－Rb_（44）生长的抑制作用

用汉防己甲素（ｔｅｔｒａｎｄｒｉｎｅ，ＴＤＲ）、长春新碱（ｒｉｎｃｒｉｓｌｉｎｅ，ＶＣＲ）分别对人视网膜母细胞瘤细胞系ＨＸＯ－Ｒｂ＿（４４）生长的影响进行观察，结果显示：ＴＤＲ在１～４０μｇ／ｍｌ范围内对ＨＸＯ－Ｒｂ＿（４４）细胞有明显抑制作用（Ｐ＜０．０５），半数抑制浓度ＩＣ５０为２．４５μｇ／ｍｌ；ＶＣＲ对该细胞系也有较强的抑制作用，ＩＣ５０为０．３１μｇ／ｍｌ。提示ＴＤＲ与ＶＣＷ一样，在体外对Ｒｂ细胞有较强的抑制作用，可能成为治疗视网膜母细胞瘤的新药。

3种光敏剂对5株人鼻咽癌细胞PDT量效关系的研究

用ＭＴＴ法比较了不同能量的脉冲铜蒸气激光、不同浓度的３种光敏剂（ＰＳＤ－００７、ＢＨｐＤ和ＹＨ－ｐＤ）对５株人鼻咽癌细胞（ＣＮＥ２、ＨＮＥ１、ＨＮＥ２、ＨＮＥ３，和ＨｏＮＥ１的体外杀伤效应。结果表明：（１）激光合并光敏剂即令能量较低、剂量较小，也能显示明显的杀伤效应，而单用激光或单用光敏药物则只在较高能量和较大剂量时才显示轻微杀伤效应。（２）５株鼻咽癌细胞对３种光敏剂的ＰＤＴ敏感性彼此存在着差异。（３）在一定激光能量和光敏剂浓度时，ＰＳＰ－００７的杀伤效应优于ＢＨｐＤ和ＹＨｐＤ，而ＹＨｐＤ又稍优于ＢＨｐＤ。

人骨髓成骨细胞体外培养

目的 研究人骨髓基质干细胞体外培养及其成骨特性 ,为骨组织工程学研究提供成骨种子细胞。 方法 以人髂骨区骨髓为材料进行体外人骨髓基质干细胞培养 ,传代后改用含地塞米松、β -甘油磷酸纳和维生素C的条件培养基进行培养 ,用倒置显微镜观察、碱性磷酸酶染色、四环素荧光标记等方法对所培养的细胞进行生物学特性研究。 结果 接种细胞 4d即可传代 ,在条件培养液中 2周形成多层结构 ,并出现黑色结节 ,ALP染色阳性 ,结节四环素荧光标记、钙染色阳性 ,Ι型胶原免疫组化染色呈黄褐色。 结论 采用本法在体外培养的人成骨细胞生长良好 ,并具有成骨细胞形态特征和生物学特性 ,可做为临床所需的成骨种子细胞来源 ,为骨组织工程学研究奠定了实验基础。

黑色素瘤细胞系HME1的建立及其生物学特性分析

目的 :建立一株黑色素瘤细胞系 ,并分析其体外生物学特性。方法 :取黑色素瘤活检组织进行组织块法原代培养 ,待长满 90 %后 ,消化传代培养并进行生长动力学、形态学及致瘤性等生物学特性鉴定。结果 :该细胞系已在体外培养生存 1 8个多月 ,传 90余代。其生物学特性如下 :该细胞系接种至裸鼠后可致瘤 ,其移植瘤细胞形态与原实体瘤相似 ;检测第 2 0代细胞生长曲线 ,其倍增时间为 5 6 .9h ;第 2 0代细胞软琼脂集落形成率平均为 1 9.1 % ;染色体核型分析为非整倍体 ,众数为 92条 ;透射电镜下可观察到细胞表面有丰富的微绒毛、核糖体及黑色素颗粒 ;SP免疫组化分析显示 ,细胞有HMB 4 5表达。结论 :该黑色素瘤细胞经体外培养后已永生化 ,形成了连续传代细胞系 。

野生蚕抗菌肽对癌细胞的杀伤作用及其超微结构的研究

目的从野蚕蛹血淋巴中分离纯化抗菌肽,并研究野蚕抗菌肽对体外培养癌细胞的杀伤作用及超微结构的影响。方法采用MTT法检测野蚕抗菌肽对癌细胞的杀伤作用,并用透射电镜观察野生蚕抗菌肽对癌细胞超微结构的影响。结果野蚕抗菌肽对体外培养的A549、HepG2、SW620、HME1四株癌细胞具有较强的杀伤作用,而对HNE1鼻咽癌细胞和MCF-7乳腺癌细胞杀伤作用较弱,透射电镜观察发现野蚕抗菌肽处理癌细胞后其细胞表面微绒毛减少、细胞膜破损,线粒体肿胀并形成空泡,核被膜消失、核浓缩聚集靠边呈块状或新月状凋亡小体。结论野蚕抗菌肽可有效地杀伤人体不同系统的癌细胞,并诱导HepG2癌细胞凋亡。

肿瘤干细胞四氮唑化合物比色法快速药物敏感试验

报告用四氮唑化合物比色法对已建立的肿瘤细胞株及36例手术切除的肿瘤标本(肝癌7例,胃癌8例,结肠癌15例,乳腺癌6例)作化疗药物敏感试验。结果表明,本法所需肿瘤细胞种植密度低,72hrs后即可得到结果,对制定化疗方案有指导意义。是一种有推广价值的方法。

宫颈癌细胞系HCE_(1)的建立及其生物学特性

从 5例手术切除宫颈癌标本中取材进行体外培养 ,并建成一个新的连续细胞系 ,命名为湖南宫颈癌上皮细胞系 1号 (HCE1)。该细胞已在体外生存 18个多月 ,传 80多代。其生物学特性显示 :①该细胞系接种至裸鼠后可致瘤 ,其移植瘤细胞形态与原实体瘤相似 ;②电镜下可观察到细胞表面有丰富的微绒毛及核糖体 ;③检测第 2 5代细胞生长曲线 ,其倍增时间为 45 8h ;④计数 6个平皿软琼脂集落形成率平均值为 14 8% ;⑤染色体核型分析为非整倍体 ,众数为