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用单值-移动极差法建立HBsAg定量检测室内质量控制图 被引量:9
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作者 祝文彩 季伙燕 王惠民 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期634-636,共3页
目的用单值-移动极差(x-MR)法建立HBsAg定量检测室内质量控制图。方法首先用箱线图法剔除HBsAg室内质控数据离群值,然后对剔除离群值后质控数据进行Anderson-Darling(A-D)正态性和独立性检验,再以x珋±2.66×MR为单值控制图控... 目的用单值-移动极差(x-MR)法建立HBsAg定量检测室内质量控制图。方法首先用箱线图法剔除HBsAg室内质控数据离群值,然后对剔除离群值后质控数据进行Anderson-Darling(A-D)正态性和独立性检验,再以x珋±2.66×MR为单值控制图控制限、3.27MR为移动极差控制图控制上限绘制x-MR控制图,并对控制图进行失控分析,比较x-MR与均值-标准差(珋x-s)控制图对失控的监测效果。结果 HBsAg第3个质控数据35.00 ng/mL为离群值;A-D正态和A-D独立分别为0.507和0.609,质控数据兼具正态性和独立性;x-MR图表明第10个质控数据失控,提示存在系统变异。按常规绘制珋x-s控制图则未能检出x-MR控制图所检出的第10个真失控数据。结论 x-MR控制图有助于提高失控判断的灵敏度。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒表面抗原 移动极差 单值-移动极差控制图 均值-标准差控制图 正态性 独立性
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强直性脊柱炎患者HLA-B27、CRP和ESR的水平及相关性分析 被引量:19
2
作者 祝文彩 陈建平 +1 位作者 杨曙梅 鞠少卿 《中国实验诊断学》 2013年第11期2016-2018,共3页
目的探讨强直性脊柱炎(AS)患者HLA-B27、CRP和ESR的水平及相关性。方法检测对54例AS患者和48例健康对照者人类白细胞抗原B27(Human leucocyte antigen B27,HLA-B27)血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)的水平,比较HLA-B27、CRP和ESR在AS的阳性率... 目的探讨强直性脊柱炎(AS)患者HLA-B27、CRP和ESR的水平及相关性。方法检测对54例AS患者和48例健康对照者人类白细胞抗原B27(Human leucocyte antigen B27,HLA-B27)血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)的水平,比较HLA-B27、CRP和ESR在AS的阳性率,探讨三者对AS诊断的相关性。结果 HLA-B27、CRP和ESR在AS患者阳性率分别为90.7%、85.1%、72.2%;AS患者和健康对照组HLA-B27、CRP和ESR的水平存在显著性差异,AS患者HLA-B27与CRP和ESR以及CRP和ESR水平呈正相关(r=0.666;r=0.628;r=0.528,P均<0.05)。结论 HLA-B27是对AS诊断有较高灵敏度实验室诊断指标;CRP和ESR尽管不是AS的特异性诊断指标,但对AS的辅助诊断也具有重要价值,三者同时检测提高AS阳性率,有利于AS辅助诊断。 展开更多
关键词 强直性脊柱炎 人类白细胞抗原B27 C反应蛋白 血沉
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间接计算法与匀相法直接测定LDL-C的比较研究 被引量:3
3
作者 祝文彩 丛辉 +4 位作者 王旭东 苏建友 王跃国 沈荣春 鞠少卿 《现代检验医学杂志》 CAS 2006年第3期31-33,共3页
目的探讨匀相法测定血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)值与P lane lla公式(P公式)、P rledew a ld公式(简称F公式)计算结果。方法收集1 862份标本,在日立7600-020全自动生化分析仪上直接测定;TC、TG、LDL-C、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),同... 目的探讨匀相法测定血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)值与P lane lla公式(P公式)、P rledew a ld公式(简称F公式)计算结果。方法收集1 862份标本,在日立7600-020全自动生化分析仪上直接测定;TC、TG、LDL-C、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),同时运用P公式与F公式计算每份标本对应LDL-C值,进行统计学处理。结果①TG≤4.52 mm o l/L时P公式法、F公式法与均相法的相关性(r=0.909,r=0.841)好于TG>4.52 mm o l/L时(r=0.807,r=0.787)。②总胆固醇(TC)水平对LDL-C结果也有影响;TG≤4.52 mm o l/L时,TC<6.21 mm o l/L组相关性好于TC>6.21 mm o l/L组;而当TG>4.52 mm o l/L时,TC<6.21 mm o l/L组差异最大。结论在确保TC、TG、HDL-C结果准确可靠的情况下,可以用P公式法、F公式法计算LDL-C值作为参考。 展开更多
关键词 胆固醇 三酰甘油 低密度脂蛋白胆固醇 Planella公式:Friedewald公式
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血清BLyS和APRIL水平与系统性红斑狼疮关联性研究 被引量:1
4
作者 祝文彩 倪红兵 +1 位作者 王旭东 鞠少卿 《中国误诊学杂志》 CAS 2007年第14期3191-3193,共3页
目的:探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者血清B淋巴细胞刺激因子(BLyS)和增殖诱导配体(APRIL)蛋白水平与疾病活动性的关系。方法:应用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测SLE活动组(13例)和SLE缓解组(10例)患者血清BLyS和APRIL水平,以健康志愿者(23... 目的:探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者血清B淋巴细胞刺激因子(BLyS)和增殖诱导配体(APRIL)蛋白水平与疾病活动性的关系。方法:应用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测SLE活动组(13例)和SLE缓解组(10例)患者血清BLyS和APRIL水平,以健康志愿者(23例)作为对照;同时将血清BLyS和APRIL水平与患者的临床检验指标(尿蛋白、抗dsDNA抗体)分组进行分析。结果:SLE患者组血清BLyS水平高于健康对照组,且活动期高于缓解期(P<0.05);尿蛋白阳性组血清APRIL水平明显低于尿蛋白阴性组患者(P<0.05);抗dsDNA抗体升高组血清BLyS和APRIL均高于抗dsDNA抗体滴度正常组,但均无统计学意义。结论:SLE患者血清BLyS水平增高,且增高与疾病的活动性有关;尿蛋白阳性组血清APRIL水平明显低于尿蛋白阴性组SLE患者,提示BLyS和APRIL可能参与SLE的发病过程。 展开更多
关键词 红斑狼疮 系统性/血液 膜蛋白质类/血液 肿瘤坏死因子/血液
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PCR-RFLP分析HBV核心启动子基因突变的临床意义
5
作者 祝文彩 张冬雷 +4 位作者 鞠少卿 王惠民 李立人 施健 徐云 《现代检验医学杂志》 CAS 2005年第1期4-7,共4页
目的建立聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)检测HBV核心启动子(BCP)基因突变的方法,并探讨其临床意义。方法PCR扩增HBVBCP区(nt1642-nt2027)基因片段,经限制性内切酶Mb0Ⅰ酶切,琼脂糖凝胶电泳分析BCP(nt1762/nt1764)基因突... 目的建立聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)检测HBV核心启动子(BCP)基因突变的方法,并探讨其临床意义。方法PCR扩增HBVBCP区(nt1642-nt2027)基因片段,经限制性内切酶Mb0Ⅰ酶切,琼脂糖凝胶电泳分析BCP(nt1762/nt1764)基因突变情况,同时应用定量PCR测定了HBVDNA含量。结果149例临床样本的检测结果显示:BCP基因突变在HBeAb(+)慢性乙型肝炎患者(CHB)和HBV无症状携带者(ASC)中的检出率显著高于相应的HBeAg(+)组患者(P<0.01);在HBeAb(+)和HBeAg(+)重症乙型肝炎(SeverehepatitisB,SHB)组中差异无显著性(P>0.05);BCP变异患者血清中HBV-DNA含量比相同模式的野毒株感染高(P<0.05)。结论PCR-RFLP检测HBVBCP基因突变方法简单方便,结果与测序分析一致,具有较好的特异性,适合临床应用;BCP区基因突变可能是HBeAb(+)患者HBV感染的重要原因之一;BCP变异可能与乙型肝炎重症化有一定关系。 展开更多
关键词 PCR—RFLP 乙型肝炎病毒 核心启动子 基因突变
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Calmagite双试剂法测定镁离子
6
作者 祝文彩 孙承龙 《南通医学院学报》 2001年第4期452-452,454,共2页
建立 Calmagite双试剂法测定血清镁离子。该方法操作简便 ,能够消除黄疸、乳糜血清空白干扰 ,具较高准确度 ,与校准血清直接比较 ,^y=0 .9846 ^x+0 .0 2 44 (r=0 .990 9) ,具有推广价值。
关键词 终点法 双试剂 镁离子 血液检验 Calmagite双试剂法
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聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子的制备及其对培养猪肝细胞的影响 被引量:13
7
作者 陈钟 戴新征 +1 位作者 杨欣荣 祝文彩 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2006年第17期1669-1674,共6页
目的:制备聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子并探讨其对培养猪肝细胞形态和功能的影响.方法:以聚乳酸和O-羧甲基壳聚糖为基质材料,采用超声波法制备了聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子,用原子力显微镜对其进行了物理表征,用X射线光电子光谱... 目的:制备聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子并探讨其对培养猪肝细胞形态和功能的影响.方法:以聚乳酸和O-羧甲基壳聚糖为基质材料,采用超声波法制备了聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子,用原子力显微镜对其进行了物理表征,用X射线光电子光谱法对其表面的化学结构进行了表征.用聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子进行原代猪肝细胞培养,并以普通培养作为对照组.观察培养后1 wk内肝细胞的形态和功能变化.结果:聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子制备成功,原子力显微镜下其直径300-500 nm.经过XPS光谱分析显示,C,O,N的比例分别为72.51%,23.69%,3.80%.普通培养的肝细胞,48 h后逐渐失去多边形特征.而与PLA-O- CMC共培养48 h后,肝细胞形成细胞黏附聚集的球形体,大部分肝细胞重建细胞极性,呈现较典型、均匀的多边形形态特征.培养后 24 h,3 d和5 d时,纳米细胞培养组ALB含量高于普通培养组(3.53±0.052,3.48±0.075,3.57 ±0.137g/L vs 3.10±0.179,3.17±0.186,3.10 ±0.219 g/L,均P<0.05);3,5,7 d时,纳米细胞培养组ALT水平明显低于普通组(15.33± 13.05,8.84±8.87,7.00±5.22 nkat/L vs 24.17 ±20.35,16.17±27.49,15.50±11.95 nkat/L, 均P<0.05),而BUN含量虽然有所升高,但是不显著(P>0.05).结论:聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子是肝细胞培养的良好材料. 展开更多
关键词 聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖 纳米材料 肝细胞 培养 肝细胞移植
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95%肝切除与药物诱导大鼠急性肝衰竭模型的比较 被引量:8
8
作者 陈钟 黄华 +2 位作者 吴振宇 祝文彩 李根喜 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 2005年第1期32-35,共4页
目的 探讨一种理想的大鼠急性肝衰竭 (AHF)模型建立方法。方法 SD大鼠 3 6只随机分为 3组 :(1)改良手术诱导组 ,切除约 95 %肝脏组织 ,术中经中叶肝静脉注入 5 %葡萄糖氯化钠溶液 10ml/kg体重 ;(2 )传统手术诱导组 ,术中不行中叶肝静... 目的 探讨一种理想的大鼠急性肝衰竭 (AHF)模型建立方法。方法 SD大鼠 3 6只随机分为 3组 :(1)改良手术诱导组 ,切除约 95 %肝脏组织 ,术中经中叶肝静脉注入 5 %葡萄糖氯化钠溶液 10ml/kg体重 ;(2 )传统手术诱导组 ,术中不行中叶肝静脉穿刺注射 5 %葡萄糖氯化钠溶液 ,其余手术方法同改良手术组 ;(3 )药物诱导组 ,给予D -氨基半乳糖 (D gal) 1.2g/kg腹腔注射。观察手术死亡率、建模后 2 4h大鼠存活率、血谷丙转氨酶 (ALT)、血氨 (NH3)、总胆红素 (TB)和血糖 (BG )。结果 传统手术诱导组手术死亡率高于改良手术组死亡率 (3 3 .3 %∶0 % ) ,改良手术诱导组、传统手术诱导组、药物诱导组大鼠建模成功后 2 4h存活率分别为 0 % ,0 % ,2 5 % ,改良手术诱导组ALT和NH3水平显著高于药物诱导组 (P <0 .0 5 ) ,TB和BG水平低于药物诱导组 ,但差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论 通过改进的 95 %肝切除术可建立较理想的大鼠AHF模型 ,术中经中叶肝静脉注入 5 %葡萄糖氯化钠溶液可减少手术死亡率。 展开更多
关键词 肝功能衰竭/化学诱导 肝切除术 氨基半乳糖/副作用 疾病模型 动物
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南通地区健康人群血清NSE电化学发光法检测参考区间的调查 被引量:7
9
作者 卢美红 鞠少卿 +2 位作者 丛辉 杨曙梅 祝文彩 《现代检验医学杂志》 CAS 2018年第4期59-62,共4页
目的调查和建立南通地区表观健康人群神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)的参考值区间。方法选取2017年1月~2018年1月南通大学附属医院体检中心3 874例健康体检者作为研究对象,其中男性2 767例,女性1 107例,通过问卷调... 目的调查和建立南通地区表观健康人群神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)的参考值区间。方法选取2017年1月~2018年1月南通大学附属医院体检中心3 874例健康体检者作为研究对象,其中男性2 767例,女性1 107例,通过问卷调查和体格检查排除神经系统、血液病、炎症、肿瘤等疾病,采用罗氏cobase 411全自动电化学发光仪检测NSE水平。根据性别、年龄将受检者分组(男女各7组:<30岁,30~39岁,40~49岁,50~59岁,60~69岁,70~79岁,>80岁),对结果进行统计学分析,建立相应的参考区间。分析性别、年龄分组后的组间差异是否有统计学意义;将获得的参考区间与试剂盒提供的生物参考区间进行比较,并进行参考区间的验证。结果 NSE水平呈正态分布,男性血清NSE水平(15.79±3.52ng/ml)明显高于女性(13.79±3.04ng/ml),差异有统计学意义(t=3.102,P=0.037)。但独立样本t检验进行各年龄组间两两比较差异无统计学意义(P>0.05)。采用x^-±1.96s确定参考区间,NSE参考区间为8.47~21.07ng/ml,男性为8.72~21.36ng/ml,女性为8.06~20.10ng/ml,对该研究建立的NSE参考区间进行验证符合标准。结论初步建立了适合该地区表观健康人群的血清NSE参考区间。NSE的参考区间有性别差异,根据不同性别建立的参考区间,可为疾病的诊断和治疗提供准确的依据。 展开更多
关键词 神经元特异性烯醇化酶 年龄 性别 参考区间
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急性肝衰竭大鼠高迁移率族蛋白B1的变化和意义 被引量:6
10
作者 张宇 王刚 +1 位作者 祝文彩 陈钟 《世界华人消化杂志》 CAS 2015年第9期1402-1410,共9页
目的:比较高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein B1,HMGB1)与其他炎症因子在急性肝衰竭(acute liver failure,ALF)大鼠肝组织和血清中出现时间及持续时间,探讨其来源及作用.方法:采用腹腔内注射D-氨基半乳糖(D-galactosamine,D... 目的:比较高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein B1,HMGB1)与其他炎症因子在急性肝衰竭(acute liver failure,ALF)大鼠肝组织和血清中出现时间及持续时间,探讨其来源及作用.方法:采用腹腔内注射D-氨基半乳糖(D-galactosamine,D-Gal)和脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)制备大鼠ALF模型,以腹腔内注射生理盐水作为对照组.于注射后3、6、12、24、48、72 h检测血清中肝功能的变化,观察肝组织病理,实时荧光定量PCR检测肝组织中HMGB1、白介素1β(interleukin 1β,IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,T N F-α)m R N A变化,E L I S A法检测血清中HMGB1、IL-1β、IL-6、TNF-α水平变化,免疫组织化学检测肝组织中H M G B 1表达变化.使用重组高迁移率族蛋白B1(recombinant high mobility group protein 1,r HMGB1)单独尾静脉注射或联合D-G a l、L P S腹腔内注射,观察大鼠的一般情况并计算生存率.结果:采用D-Gal和LPS成功建立大鼠ALF模型.ALF大鼠肝组织中HMGB1 m RNA表达和血清中HMGB1水平高峰均较IL-1β、I L-6、T N F-α出现晚,但其高峰持续时间更长.D-Gal和LPS注射后的3 h,免疫组织化学可见肝细胞中HMGB1由细胞核转移到细胞质中;注射后24-48 h,肝脏正常组织结构消失,HMGB1蛋白自坏死的肝细胞被动释放.添加外源性r HMGB1使大鼠死亡时间提前,ALF大鼠在相同时间点死亡率升高.结论:大鼠ALF过程中HMGB1由坏死的肝细胞被动释放,其出现时间较其他炎症因子为晚.HMGB1与其他炎症因子相互作用,可能进一步促进ALF中的炎症反应. 展开更多
关键词 高迁移率族蛋白B1 急性肝衰竭 炎症因子 全身炎症反应综合症
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不同检测系统测定血糖的方法学对比及偏差评估 被引量:3
11
作者 倪红兵 鞠少卿 +5 位作者 王跃国 徐建辉 丛辉 苏建友 祝文彩 王惠民 《现代检验医学杂志》 CAS 2008年第2期59-61,共3页
目的通过对不同检测系统进行方法学比对分析,探讨各系统之间检测血糖结果是否具有可比性。方法依据美国国家临床实验室标准委员会(NCCLS)EP9-A文件要求,每天随机从临床样本中抽取8份不同浓度的血清样本,分别用两种检测系统进行血糖的测... 目的通过对不同检测系统进行方法学比对分析,探讨各系统之间检测血糖结果是否具有可比性。方法依据美国国家临床实验室标准委员会(NCCLS)EP9-A文件要求,每天随机从临床样本中抽取8份不同浓度的血清样本,分别用两种检测系统进行血糖的测定,共测定5d,记录检测结果,对两种检测系统进行偏倚估计。结果相关系数r=0.998,截距a=0.081,斜率b=0.968,无方法间、内的离群点,测定结果的偏差在允许误差范围内。结论两种检测系统对血糖的测定能得到一致的检测结果。 展开更多
关键词 EP9-A 方法比对 偏差评估
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实时荧光定量PCR检测RAGE mRNA方法的建立及初步应用 被引量:2
12
作者 景蓉蓉 王惠民 +2 位作者 鞠少卿 祝文彩 张志泉 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期55-58,共4页
目的建立实时荧光定量PCR(RTFQ-PCR)检测人晚期糖基化终末产物受体(RAGE)mRNA的方法并研究其在食管癌组织中的表达。方法根据Genebank提供的序列在RAGE基因外显子5和6之间设计引物,应用SYBR GreenⅠ荧光染料,建立检测RAGE mRNA的R... 目的建立实时荧光定量PCR(RTFQ-PCR)检测人晚期糖基化终末产物受体(RAGE)mRNA的方法并研究其在食管癌组织中的表达。方法根据Genebank提供的序列在RAGE基因外显子5和6之间设计引物,应用SYBR GreenⅠ荧光染料,建立检测RAGE mRNA的RTFQ-PCR方法,并对其线性、特异性、灵敏度及重复性进行评价;根据标准曲线计算出食管癌及配对远端正常组织中RAGE mRNA含量,并以RAGE mRNA和18SrRNA含量的比值作为评价RAGE mRNA表达水平指标。结果线性范围为5.0×10^3~5.0×10^9copies/ml,相关系数为-0.98,批内变异系数(CV)为0.63%~8.71%,批间CV为1.52%~12.38%。食管癌及配对远端正常组织RAGE mRNA与18SrRNA浓度的对数比值(^-x±s)分别为0.638±0.068和0.334±0.329(P〈0.005),提示食管癌组织RAGE表达上调。结论RTFQ-PCR检测RAGE mRNA的方法具有灵敏、特异、重复性好等优点,RAGE mRNA表达水平与食管癌存在一定相关性。 展开更多
关键词 晚期糖基化终末产物受体 实时荧光定量PCR 食管癌
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微囊化猪肝细胞移植对急性肝衰竭大鼠肝功能支持的实验研究 被引量:2
13
作者 黄华 陈钟 +2 位作者 吴振宇 祝文彩 陈玉泉 《南通大学学报(医学版)》 2005年第3期166-168,共3页
目的:探讨微囊化猪肝细胞移植治疗大鼠急性肝衰竭的效果。方法:采用原位胶原酶循环肝灌注法分离中国实验用小型猪肝细胞,海藻酸钠-氯化钡法微囊化。应用D-氨基半乳糖(D-gal)1.2g/kg体重腹腔内注射制作SD大鼠急性肝衰竭模型。急性肝衰竭... 目的:探讨微囊化猪肝细胞移植治疗大鼠急性肝衰竭的效果。方法:采用原位胶原酶循环肝灌注法分离中国实验用小型猪肝细胞,海藻酸钠-氯化钡法微囊化。应用D-氨基半乳糖(D-gal)1.2g/kg体重腹腔内注射制作SD大鼠急性肝衰竭模型。急性肝衰竭大鼠随机分为3组。注药24h后分别将PRMI1640培养液2ml腹腔注射为对照组(1组)、2ml游离猪肝细胞(2×107个/ml)腹腔内移植组(2组)、2ml微囊化猪肝细胞(2×107个/ml)腹腔内移植组(3组)。观察移植后大鼠14天存活率、谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TB)的改变。结果:肝细胞移植后大鼠14天存活率:1组为20.0%(5/25),2组为66.7%(16/24),3组为76.0%(19/25),3组间差异有显著性(P<0.05)。移植后第1天1组ALT、TB和移植前相比差异无显著性,2、3组ALT、TB下降。第4天3组ALT、TB均继续下降,2、3组低于1组(P<0.05),2、3两组间差异无显著性(P>0.05)。移植后第7天,ALT进一步下降,3组间差异有显著性(P<0.05);TB3组显著低于2组和1组(P<0.05),2组低于1组但差异无显著性(P>0.05)。移植后第14天,肝功能均明显恢复,ALT、TB2、3组均低于1组(P<0.05),2、3两组间差异无显著性(P>0.05)。结论:微囊化猪肝细胞腹腔内移植可以提高药物诱导急性肝衰竭大鼠的存活率,改善ALF大鼠的肝功能。 展开更多
关键词 急性肝衰竭 微囊化 肝功能 肝细胞移植 实验研究 肝细胞腹腔内移植 D-氨基半乳糖 胆红素(TB) 细胞移植治疗 猪肝细胞 显著性 腹腔内注射 移植后 谷丙转氮酶 ALT 组间差 存活率 海藻酸钠 SD大鼠 腹腔注射 药物诱导 灌注法
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聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子培养的猪肝细胞移植对大鼠急性肝衰竭的治疗作用 被引量:1
14
作者 张春辉 陈钟 +2 位作者 杨欣荣 戴新征 祝文彩 《中国临床医学》 北大核心 2008年第1期58-62,共5页
目的:探讨胶原凝胶包埋的聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子培养的猪肝细胞腹腔内移植对急性肝衰竭(ALF)大鼠的治疗效果。方法:D-氨基半乳糖腹腔内注射制作大鼠ALF模型。48h后分别将培养24h的猪肝细胞悬液(含5.0×10^7个肝细胞,... 目的:探讨胶原凝胶包埋的聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子培养的猪肝细胞腹腔内移植对急性肝衰竭(ALF)大鼠的治疗效果。方法:D-氨基半乳糖腹腔内注射制作大鼠ALF模型。48h后分别将培养24h的猪肝细胞悬液(含5.0×10^7个肝细胞,I组)、I型胶原凝胶固定培养24h的猪肝细胞(含5.0×10^7个肝细胞,Ⅱ组)、I型胶原凝胶包埋的PL-A-O-CMC纳米粒子培养24h的猪肝细胞(含5.0×10^7个肝细胞,Ⅲ组)移植到ALF大鼠腹腔内,并以RPMIl640腹腔内注射作为对照(IV组)。观察移植后大鼠14d存活率,血清白蛋白(ALB)、谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TB)、血氨(NH3)的变化和移植肝细胞的病理变化。结果:移植后14d ALF大鼠的存活率:I组为56.25%,Ⅱ组为62.5%,Ⅲ组为75%,Ⅳ组为18.75%,各移植组高于对照组(P<O.05)。移植后1~5d,I、Ⅱ、Ⅲ组各项肝功能指标改善明显优于Ⅳ组,Ⅲ组肝功能恢复好于同时间其它移植组,肝功能恢复从快到慢依次为Ⅲ、Ⅱ、I、Ⅳ组。Ⅲ组移植肝细胞存活时间最长,炎症浸润最轻。结论:应用胶原凝胶包埋的聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子培养的猪肝细胞腹腔内移植治疗ALF大鼠能显著改善肝功能、提高生存率,聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子用于异种肝细胞移植具有良好的生物相容性,并能延长移植肝细胞的存活时间。关键词肝细胞移植;急性肝衰竭;聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖; 展开更多
关键词 肝细胞移植 急性肝衰竭 聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖 纳米粒子
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臂丛神经自控镇痛对断肢(指)再植患者免疫功能的影响 被引量:2
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作者 许忠玲 黄雪莲 +3 位作者 秦毅彬 朱翔 顾剑辉 祝文彩 《南通大学学报(医学版)》 2007年第1期28-30,共3页
目的:探讨臂丛神经自控镇痛对断肢(指)再植患者免疫功能的影响。方法:断肢(指)再植30例术后随机分为患者臂丛神经自控镇痛(PCRA)和患者静脉自控镇痛(PCIA)组,分别于术前(T0)、术后即刻(T1)、术后第1天(T2)、术后第3天(T3)、术后第5天(T4... 目的:探讨臂丛神经自控镇痛对断肢(指)再植患者免疫功能的影响。方法:断肢(指)再植30例术后随机分为患者臂丛神经自控镇痛(PCRA)和患者静脉自控镇痛(PCIA)组,分别于术前(T0)、术后即刻(T1)、术后第1天(T2)、术后第3天(T3)、术后第5天(T4)测定血液中细胞因子、C-反应蛋白(CRP)、皮质醇以及免疫细胞(中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞)以了解免疫功能状况。结果:与PCIA组比较,PCRA组循环细胞因子白细胞介素-6(IL-6)、IL-8、IL-10、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和应激反应指标CRP和皮质醇等的浓度均无明显变化。此外单核细胞数差异也无统计学意义,但PCRA组术后B淋巴细胞和T-辅助细胞明显减少,自然杀伤(NK)细胞也明显减少。结论:术后臂丛神经自控镇痛对单核细胞功能没有影响,但可使自然杀伤细胞数减少。因此臂丛神经自控镇痛可影响特异性免疫系统,而对先天性免疫系统无影响,并可能减轻与抗感染能力有关的术后淋巴细胞抑制。 展开更多
关键词 断肢(指)再植 臂丛神经 镇痛 免疫
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实时荧光定量PCR检测人APRILmRNA的标准品构建 被引量:4
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作者 王行 王惠民 +3 位作者 王旭东 鞠少卿 祝文彩 张冬雷 《交通医学》 2007年第1期14-16,共3页
目的:构建增殖诱导配体(APRIL)基因的重组质粒的标准品。方法:从肺癌的组织标本中抽提总RNA逆转录合成cDNA,以cDNA为模板扩增目的片段,从胶中回收目的片段,再将回收的目的片段与pGEM-TEasy载体连接并转化宿主菌DH-5α,分别用菌落PCR及... 目的:构建增殖诱导配体(APRIL)基因的重组质粒的标准品。方法:从肺癌的组织标本中抽提总RNA逆转录合成cDNA,以cDNA为模板扩增目的片段,从胶中回收目的片段,再将回收的目的片段与pGEM-TEasy载体连接并转化宿主菌DH-5α,分别用菌落PCR及测序两种方法证实目的片段已成功转染细菌。抽提重组质粒DNA用核酸分析仪测浓度后换算成copies/ml。结果:成功构建了APRIL实时荧光定量标准品的线性范围105~1012copies/ml,批内与批间CV分别为1.34%~3.07%和7.24%~11.41%。结论:该法制备的质粒标准品具有较好的灵敏度和重复性,满足实时荧光定量实验要求。 展开更多
关键词 增殖诱导配体 聚合酶链反应 质粒标准品 T-A克隆
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PLA-O-CMC纳米粒子培养的猪肝细胞移植对急性肝衰竭大鼠肝再生作用的初步研究 被引量:1
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作者 杨欣荣 陈钟 +3 位作者 戴新征 祝文彩 张国寿 陈玉泉 《交通医学》 2006年第3期251-254,F0004,共5页
目的:探讨胶原凝胶包埋聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖(PLA-O-CMC)纳米粒子粘附培养猪肝细胞移植对急性肝衰竭(ALF)大鼠肝的再生作用。方法:D-氨基半乳糖腹腔内注射制作大鼠ALF模型;48h后分别将5mlⅠ型胶原凝胶包埋的PLA-O-CMC纳米粒子粘附培养... 目的:探讨胶原凝胶包埋聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖(PLA-O-CMC)纳米粒子粘附培养猪肝细胞移植对急性肝衰竭(ALF)大鼠肝的再生作用。方法:D-氨基半乳糖腹腔内注射制作大鼠ALF模型;48h后分别将5mlⅠ型胶原凝胶包埋的PLA-O-CMC纳米粒子粘附培养24h猪的肝细胞、5mlⅠ型胶原凝胶固定培养24h的猪肝细胞、5ml培养24h的猪肝细胞悬液(均含5.0×107个)移植到各组ALF大鼠腹腔内,并以5mlRPMI1640腹腔内注射作为阴性对照。观察大鼠14天存活率和受体肝脏的病理变化。结果:移植后14天ALF大鼠的存活率:单纯肝细胞移植组(Ⅰ组)为56.25%,胶原肝细胞移植组(Ⅱ组)为62.5%,纳米胶原肝细胞移植组(Ⅲ组)为75%,阴性对照组(Ⅳ组)为18.75%,各移植组14天存活率高于对照组(P<0.05),各移植组间无统计学意义(P>0.05)。ALF大鼠肝脏再生于ALF后5~7天最为显著;各组肝脏病理变化以Ⅲ组恢复最好,双核细胞最多,肝再生最快。结论:应用PLA-O-CMC纳米粒子和Ⅰ型胶原联合培养猪肝细胞移植于ALF大鼠腹腔内能促进肝脏的再生。 展开更多
关键词 肝细胞移植 肝再生 急性肝衰竭 聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖 纳米粒子
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APRIL siRNA表达载体构建、微流控芯片筛选及转染优化 被引量:1
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作者 丁伟峰 王惠民 +3 位作者 鞠少卿 毛丽萍 陆建荣 祝文彩 《交通医学》 2007年第3期238-241,共4页
目的:构建增殖诱导配体(APRIL)异构体特异性siRNA质粒载体,利用微流控芯片电泳筛选APRIL异构体特异性siRNA表达质粒。方法:以高表达APRIL的人结肠癌细胞株SW480为肿瘤细胞模型,选择APRIL异构体特异性siRNA序列,微流控芯片电泳筛选siRNA... 目的:构建增殖诱导配体(APRIL)异构体特异性siRNA质粒载体,利用微流控芯片电泳筛选APRIL异构体特异性siRNA表达质粒。方法:以高表达APRIL的人结肠癌细胞株SW480为肿瘤细胞模型,选择APRIL异构体特异性siRNA序列,微流控芯片电泳筛选siRNA表达质粒并经测序后转染SW480细胞,半定量RT-PCR法检测瞬时转染前后SW480细胞中APRILmRNA水平。结果:成功构建hOligo637、hOligo1450、hOligo1534、hOligo1750。微流控芯片电泳成功分辨出被双酶切的插入片段。瞬时转染SW480细胞后均产生特异性的mRNA抑制效应。结论:采用微流控芯片电泳成功筛选出APRIL为靶点的siRNA质粒,并可广泛应用于筛选siRNA质粒。 展开更多
关键词 RNA干扰 增殖诱导配体 质粒载体 微流控芯片电泳
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类风湿因子、抗环瓜氨酸肽抗体与抗角蛋白抗体联合测定对类风湿性关节炎诊断价值 被引量:1
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作者 陈建平 杨曙梅 +1 位作者 杨春兰 祝文彩 《医学检验与临床》 2014年第5期22-24,共3页
目的:本文旨在探讨联合测定类风湿因子(RF)、抗环瓜氨酸肽抗体(Anti-CCP)及抗角蛋白抗体(AKA)在诊断类风湿性关节炎(RA)中的应用价值。方法:分别运用免疫速率散射比浊法、化学发光法及间接免疫荧光法检测132例类RA患者及51例... 目的:本文旨在探讨联合测定类风湿因子(RF)、抗环瓜氨酸肽抗体(Anti-CCP)及抗角蛋白抗体(AKA)在诊断类风湿性关节炎(RA)中的应用价值。方法:分别运用免疫速率散射比浊法、化学发光法及间接免疫荧光法检测132例类RA患者及51例非RA患者血清中的RF、Anti-CCP及AKA。结果:RF对RA敏感性为78.0%,特异性为64.7%,阳性预测值85.1%;Anti-CCP对RA敏感性为75.0%,特异性为88.2%,阳性预测值94.2%;AKA对RA敏感性为75.8%,特异性为86.3%,阳性预测值93.5%;RF、Anti-CCP及AKA联合检测诊断RA的敏感性为63.6%,特异性为96.1%,阳性预测值97.7%。结论: RF在RA诊断中敏感性较Anti-CCP及AKA高,但特异性较Anti-CCP及AKA低;RF、Anti-CCP及AKA联合检测的应用,更有助于类风湿关节炎的早期诊断。 展开更多
关键词 类风湿性关节炎 类风湿因子 抗环瓜氨酸肽抗体 抗角蛋白抗体
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人BAFF-R基因启动子活性的初步研究
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作者 袁宏香 钱晶晶 +6 位作者 王惠民 王跃国 吴信华 祝文彩 浦江 申娴娟 鞠少卿 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期349-352,361,共5页
目的以B淋巴细胞刺激因子受体BAFF-R基因5'上游区序列为研究对象,初步鉴定、分析该基因的启动子所在区域。方法克隆BAFF-R基因5'侧翼区1823 bp序列,构建8个含有不同长度启动子序列的荧光素酶报告基因表达质粒pGL3-B1~B8,将这8... 目的以B淋巴细胞刺激因子受体BAFF-R基因5'上游区序列为研究对象,初步鉴定、分析该基因的启动子所在区域。方法克隆BAFF-R基因5'侧翼区1823 bp序列,构建8个含有不同长度启动子序列的荧光素酶报告基因表达质粒pGL3-B1~B8,将这8个序列缺失重组质粒与psv-β-gal质粒共转染细胞,检测荧光素酶的相对活性,确定启动子所在区域。结果8个重组质粒中pGL3-B2、pGL3-B3、pGL3-B5、pGL3-B6启动子的活性较低;pGL3-B7启动子的活性最强,pGL3-B8启动子活性最低。结论BAFF-R基因5'端-288~-430、-712~-868和-1420~-1562三个区段可能存在转录沉默子元件,-617~-712和-1277~-1420区段存在转录增强子元件,BAFF-R基因的核心启动子可能位于-1420~+261区域。 展开更多
关键词 BAFF-R基因 启动子 报告基因 荧光素酶活性
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