抑制SHP2和FGFR2调控RAS/ERK及PI3K/AKT通路治疗FGFR2融合胃癌

目的:探究共抑制成纤维细胞生长因子受体2(fibroblast growth factor receptor 2,FGFR2)和Src同源2结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶2(Src homology region 2-containing protein tyrosine phosphatase 2,SHP2)在FGFR2融合胃癌中的应用前景与作用机制。方法:构建过表达TACC2-FGFR2融合基因与对照慢病毒载体的人胃癌细胞系MKN45ACC2T-FGFR2、MKN45NC、NUGC4TACC2-FGFR2、NUGC4NC,分别用FGFR2抑制剂AZD4547、SHP2抑制剂SHP099或联药进行处理,通过细胞计数试剂盒(CCK-8)、划痕实验检测肿瘤细胞的增殖、迁移能力。以不同处理方式作用于MKN45TACC2-FGFR2、MKN45NC1 h或48 h后,采用Western blot法检测FGFR2、SHP2以及下游RAS/ERK、PI3K/AKT信号通路变化。结果:在MKN45TACC2-FGFR2与NUGC4TACC2-FGFR2中联用AZD4547与SHP099可以比单药更显著地抑制肿瘤细胞的增殖与迁移。药物处理1 h后,相较于AZD4547单药,联药在MKN45TACC2-FGFR2中进一步抑制了RAS/ERK、PI3K/AKT信号通路。药物处理48 h与1 h相比,AZD4547单药组中磷酸化FGFR与磷酸化SHP2出现了反馈性激活,且始终不能抑制RAS/ERK通路,但联药组可以持续地抑制上游的FGFR2、SHP2信号以及下游的RAS/ERK、PI3K/AKT通路。结论:共抑制FGFR2和SHP2可以通过下调RAS/ERK及PI3K/AKT通路有效抑制FGFR2融合胃癌,为FG-FR2融合突变胃癌患者带来新的治疗模式。

6种中药提取物对胃癌细胞株细胞毒作用及多西紫杉醇增敏作用的研究

目的中医药是我国特有的民族医药宝库,为抗癌药物的研发提供了丰富的资源。文中研究6种中药提取物对2株胃癌细胞系增殖抑制作用并挑选具有多西紫杉醇(Docetaxel,DOC)增敏作用的中药提取物。方法采用MTT法研究6种中药提取物(藤黄酸、白藜芦醇、连翘安博立酸提取物、连翘达玛烷提取物、汉防己甲素、蛇床子素)对于胃癌细胞SGC-7901、BGC-823细胞毒作用。观察低细胞毒剂量的中药提取物对DOC敏感性的影响。采用C I指数法判断连翘达玛烷提取物与DOC的协同作用。结果藤黄酸对于胃癌细胞株增殖抑制作用最强、汉防己甲素次之,白藜芦醇、蛇床子素及连翘提取物细胞毒作用较差。低剂量连翘达玛烷提取物在胃癌2株细胞株具有较强的DOC增敏作用。SGC-7901细胞中等抑制作用时连翘达玛烷提取物与DOC具有协同作用,BGC-823细胞中高抑制作用时2种药物具有显著的协同作用。结论 6种中药提取物具有一定抑制肿瘤细胞增殖的作用。其中,连翘达玛烷提取物具有较强的DOC增敏作用。

大肠癌患者血清VEGF、CEA表达水平与浸润转移关系的研究

目的:探讨大肠癌患者血清VEGF及CEA的表达水平与大肠癌浸润和转移的相关性。方法:应用ELISA法检测68例大肠癌患者血清VEGF、CEA的表达水平,根据不同临床病理因素分组,分别比较各组间阳性率的差异;并比较单检与联检VEGF、CEA在诊断大肠癌肝转移中的价值。结果:大肠癌患者血清VEGF的表达水平与患者的性别、年龄无显著相关(P>0.05),而与肿瘤的组织学分级、浸润深度、淋巴结转移、肝转移及Dukes分期密切相关(P<0.05或P<0.01);CEA的表达水平与患者的性别、年龄、浸润深度及淋巴结转移均无显著相关(P>0.05),而与肿瘤的组织学分型、肝转移及Dukes分期密切相关(P<0.05或P<0.01)。联合检测血清VEGF、CEA对诊断大肠癌肝转移的敏感性可达89.5%。结论:VEGF和CEA与大肠癌的病情发展、浸润和转移有密切相关性,临床上,血清VEGF、CEA的表达水平可作为了解大肠癌生物学行为和判断预后的指标。

深部恶性肿瘤局部热疗的护理

采用内生场热疗仪进行热疗、热化疗、热放疗相结合治疗 15 0例 (15 2 8人次 )胸、腹、盆腔恶性肿瘤病人。结果病人疼痛缓解率为 84 .6 % ,卡氏评分改善 86 .9% ,体重增加 2 4 .6 % ,仅 1例皮肤灼伤 ,3例腹壁脂肪较厚的病人出现脂肪硬结。提示做好热疗过程的护理 ,可减少热疗的不良反应 ,增加治疗肿瘤的敏感性。

体内金属物质对热疗影响的实验研究

目的 确定金属物质是否会引起热积聚 ,损伤内脏局部组织 ,以明确恶性肿瘤热疗的适用范围。方法 家猪麻醉后腹部切开 ,植入金属夹和金属吻合钉 ,给予深部热疗。内生场热疗系统Ⅰ号机 2 2 0V ,5 0 0MA ;Ⅱ号机 2 2 0V ,6 0 0MA ,加温 2 0分钟。金属区域、深部组织、直肠置热电偶测温探头 ,每分钟测温 1次。结果 植入金属部位温度较肛温高 3～ 7℃ ,较深部组织温度高 2～ 6℃ ,脏器局部组织受损。结论 体内金属物质明显聚热损伤内脏组织 ,不宜行热疗。

胃肠肿瘤术后Tu M_2-PK含量的变化

目的:探讨胃肠肿瘤根治手术后无可测量病灶患者血浆TuM2PK变化规律。方法:采用ELISA方法测定37例胃肠肿瘤根治术后无可测量病灶患者血浆TuM2PK的含量并分析。结果:血浆TuM2PK含量分别为:对照组(8.6±3.4)U/ml;术后1个月组(38.5±26.2)U/ml,术后2个月组(22.1±18.2)U/ml;术后3个月以上组(14.6±13.2)U/ml。以≥15U/ml为界,四组阳性检出率分别为0%、78.4%、48.1%、29.7%。对照组与肿瘤各组间含量差异有显著性(P<0.01)。结论:胃肠肿瘤根治手术后无可测量病灶时血浆TuM2PK浓度与手术时间呈负相关。动态检测血浆TuM2PK对于胃肠肿瘤术后的诊断、治疗效果和预后评价具有应用价值,是一个更为理想的、新的、敏感的广谱肿瘤标记物。

c-Kit在进展期胃癌组织中的表达及其与预后的关系

目的研究进展期胃癌组织c-Kit表达及与相关指标和预后的关系,以探讨c-Kit能否作为胃癌分子靶向药物治疗靶点。方法采用免疫组化法研究了69例进展期胃癌组织标本的c-Kit表达及与MDR1和SSTR2的相关性,并对患者进行总生存期随访。结果进展期胃癌组织c-Kit阳性表达率为24.6%。c-Kit表达与患者性别、年龄、分期、分化及脉管和神经侵犯均无相关性。肿瘤组织c-Kit表达与MDR1(P=0.049)和SSTR2(P=0.013)表达有相关性。c-Kit表达阴性患者中位总生存期为13.8个月(95%CI 11.8～15.8个月),c-Kit表达阳性患者中位总生存期为12.5个月(95%CI9.58～15.42个月,P=0.049),两者差异具有统计学意义。ⅢA期病例c-Kit表达阴性患者中位总生存期为26.1个月(95%CI15.36～36.84个月),c-Kit表达阳性患者中位总生存期仅为12.5个月(95%CI7.51～17.49个月,P=0.04)。结论 c-Kit可能是胃癌靶向酪氨酸激酶抑制剂使用靶点,但其相关机制有待体内外研究证实。

浅静脉注射异长春花碱的临床护理

异长春花碱在化疗药物中局部刺激性较强 ,外渗后造成的局部损害较难处理。通过对 16例病人的护理分析 。

连翘乙醇提取物抗肿瘤作用的实验研究

目的观察连翘乙醇提取物体内、体外抗肿瘤活性。方法体外药效学实验用MTT法,体内采用小鼠移植性肿瘤,观察连翘乙醇提取物的抑瘤活性。结果连翘乙醇提取物体外对人肝癌细胞株SMMC-7721、人肠癌细胞株LoVo、人胃低分化腺癌细胞株BGC-823和小鼠H22肝癌细胞的IC50分别为分别为1.03、2.40、1.18、0.73 mg/mL。高低剂量组体内对H22小鼠肝癌抑瘤率分别为53.24%、35.25%。结论连翘乙醇提取物体内外实验具有显著的抗肿瘤活性。

汉防己甲素抑制血管生成的作用

背景与目的:血管生成在肿瘤从良性向恶性转变、癌细胞进入血液循环、转移灶发展和破裂中都起着重要作用。本研究探讨汉防己甲素对体外、体内血管生成的抑制作用及其可能的机制。方法:采用MTT法观察汉防己甲素对人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)和人肠癌LoVo细胞增殖的影响,通过Transwell小室趋化实验、体外小管形成实验观察汉防己甲素对HUVEC迁移、成血管能力的影响。建立裸鼠LoVo细胞皮下移植瘤模型,给予汉防己甲素灌胃,观察用药对肿瘤微血管密度的影响。结果:2～8μg/mL的汉防己甲素作用48h时对HUVEC的细胞增殖抑制率为24.6%～76.9%,对LoVo细胞增殖抑制率为11.6%～14.0%;体外小管形成实验发现,2～8μg/mL的汉防己甲素作用24h时HUVEC小管形成数目减少,且管腔不完整,与对照组比较差异有统计学意义(P值均<0.001)。经2～8μg/mL的汉防己甲素处理12h后HUVEC迁移数明显少于对照组(P值均<0.001)。在裸鼠皮下移植瘤体内实验中,80mg/kg汉防己甲素作用于裸鼠LoVo细胞皮下移植瘤后其微血管密度与生理盐水对照组比较,差异具有统计学意义(P=0.035)。结论:汉防己甲素在体外能有效抑制血管生成,其机制可能与抑制HUVEC增生、迁移和小管形成,诱导HUVEC凋亡,抑制HUVEC DNA的合成有关。汉防己甲素在体内对裸鼠LoVo移植瘤具有抗血管生成作用。

重楼、土鳖虫对人肝癌SMMC-7721细胞增殖抑制的协同作用

目的体外观察重楼及土鳖虫提取物对人肝癌SMMC-7721细胞增殖的抑制作用及两者联合应用的抑制率及相互作用。方法采用MTT法测定两者对人肝癌SMMC-7721细胞的增殖抑制率，利用金式公式判定两药舍用的效果。结果重楼及土鳖虫提取物能抑制人肝癌SMMC-7721细胞的增殖，并呈浓度和剂量依赖性。两者作用于人肝癌SMMC-7721细胞72h的IC50分别为0．17mg／mL和1．99mg／mL。重楼提取物0．1-0．8mg／mL与土鳖虫提取物1～4mg／mL同时给药对人肝癌SMMC-7721细胞可产生单纯相加至协同杀伤作用.结论重楼、土鳖虫提取物联合用药可产生协同作用，两者联合应用在抗肿瘤治疗中具有合理性：

恶性胸腔和腹腔积液中ERCC1和BRCA1 mRNA的表达水平与顺铂敏感性的关系

目的:本研究旨在探讨肿瘤特殊转移灶恶性胸腔/腹腔积液中核苷酸切除修复交叉互补组1(excision repair cross-complementing group 1,ERCC1)基因和乳腺癌易感基因1(breast cancer 1,BRCA1)的表达水平与顺铂体外药物敏感性之间的关系。方法:前瞻性收集46例Ⅳ期恶性肿瘤患者的恶性胸腔/腹腔积液,分离出肿瘤细胞后,采用体外药敏试验三磷酸腺苷生物荧光法检测(adenosine triphosphate-bioluminescence assay,ATP-TCA)法检测肿瘤细胞对顺铂的药物敏感性,实时荧光定量PCR检测ERCC1和BRCA1 mRNA的相对表达水平。结果:在非小细胞肺癌患者的恶性胸腔/腹腔积液中,肿瘤细胞的ERCC1 mRNA相对表达水平与顺铂抗药性呈正相关(P=0.001,r=0.685)。非小细胞肺癌患者(P=0.014,r=0.541)和胃癌患者(P=0.002,r=0.625)恶性胸腔/腹腔积液中肿瘤细胞的BRCA 1 mRNA相对表达水平与顺铂抗药性呈正相关。ERCC1和BRCA1对顺铂药物敏感性的影响存在交互作用(所有患者P=0.010;胃癌患者P=0.027)。结论:恶性胸腔/腹腔积液中肿瘤细胞的ERCC1和BRCA1 mRNA的相对表达水平与顺铂体外药物敏感性相关。联合检测ERCC1和BRCA1这2种基因较只采用其中一种基因在预测顺铂药物敏感性方面的价值更大。

延胡索总碱对人肝癌细胞系HepG2抑制作用及其对microRNA表达谱的影响

目的研究延胡索总生物碱对人肝癌细胞系HepG2的增殖抑制作用及其对HepG2细胞microRNA表达的影响。方法应用MTT(四甲基偶氮唑蓝)法考察延胡索总碱对HepG2细胞的增殖抑制作用;荧光定量RT-PCR技术检测延胡索总碱作用前后HepG2细胞microRNA的表达变化。结果延胡索总碱对HepG2细胞有显著的增殖抑制作用,且呈剂量-效应关系,其半数抑制浓度为(26.61±1.17)μg/mL;延胡索总碱作用于HepG2细胞24、48 h后,检测的15种microRNAs均有变化,尤以let-7a表达的上调和mir-221、mir-222表达的下调为明显。结论延胡索总碱对HepG2细胞有显著的增殖抑制作用,其机制可能与miRNAlet-7a、mir-221、mir-222调控的靶基因有关。

参麦注射液联合多西他赛对荷瘤裸鼠肿瘤血管生长的抑制作用及其机制

背景与目的:血管生成在肿瘤从良性向恶性转变、癌细胞进入血液循环、转移灶的发展中都起着重要作用。本研究探讨参麦注射液10联合多西他赛对裸鼠人大肠癌LOVO皮下移植瘤血管生成抑制作用及其机制。方法:通过建立裸鼠人大肠癌LOVO细胞皮下移植瘤模型,将荷lovo肿瘤裸鼠随机分为4组,(每组5只):①空白对照生理盐水组,生理盐水0.4ml,每天腹腔注射。②参麦组(20ml/kg),每天给药,连续给药2周,腹腔注射。③泰素帝组(5mg/kg),每3天给药1次,连续2周,腹腔注射。④参麦+泰素帝组,参麦(20ml/kg)连续给药2周,腹腔注射;泰素帝(5mg/kg),每3天给药1次,连续2周,腹腔注射。观察参麦注射液,联合多西他赛的抑瘤作用,并采用免疫组化法检测参麦注射液联合多西他赛对肿瘤组织微血管密度、VEGF、TSP1蛋白表达的影响。结果:参麦注射液的抑瘤率为49%,多西他赛的抑瘤率为72.4%,两者联合的抑瘤率为80.0%。参麦注射液、多西他赛及联合用药均能降低肿瘤微血管密度(P分别为0.007,0.003,0.001),下调VEGF蛋白的表达(P分别为0.011,0.002,<0.001)。参麦注射液对TSP1蛋白无调节作用,多西他赛及联合用药可上调TSP1蛋白的表达。结论:①参麦注射液与多西他赛可能通过抑制肿瘤血管生成而发挥抗肿瘤作用,两者联合应用具有次加效应;②下调VEGF蛋白可能是参麦注射液与多西他赛抗血管生成作用机制之一;③上调TSP1蛋白可能是多西他赛抗血管生成另一作用机制,而参麦注射液对此无调节作用。

土鳖虫含药血清对肝癌HepG-2细胞增殖的抑制作用

目的研究土鳖虫含药血清对肝癌HepG-2细胞增殖的抑制作用及其对细胞凋亡和细胞周期的影响,探讨土鳖虫抗肿瘤效应。方法以土鳖虫乳剂给SD大鼠灌胃,采血并制备血清。四氮唑盐法(MTT法)检测含药血清对肝癌HepG-2细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪测定细胞周期和细胞凋亡。结果土鳖虫含药血清可明显抑制肝癌HepG-2细胞体外增殖,20%土鳖虫含药血清作用72h后抑制率高达56.728%,抑制率呈浓度依赖关系。流式细胞仪检测细胞凋亡发现肝癌HepG-2细胞以坏死居多,细胞周期多阻滞于G0-G1期。结论土鳖虫含药血清对肝癌HepG-2细胞体外增殖有明显的抑制作用。

连翘乙醇提取物对人胃癌细胞株BGC-823增殖和凋亡的影响

目的:探讨连翘乙醇提取物(EEFF)对人低分化胃腺癌细胞株BGC-823体外增殖和凋亡的影响。方法:四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测不同EEFF浓度(31.25、62.5、125、250、500和1000μg/ml)处理24、48和72 h对BGC-823细胞增殖的抑制率。Annexin V/PI双染色法通过流式细胞仪检测不同浓度EEFF(0、200和400μg/ml)处理24 h及400μg/ml EEFF分别处理24和48 h的BGC-823细胞凋亡率。结果:EEFF作用于BGC-823细胞24、48和72 h的半数抑制浓度(IC50)分别为(566.21±31.76)、(338.91±29.11)和(159.01±17.23)μg/ml,且其作用呈明显的时效和剂量关系。不同浓度EEFF(0、200和400μg/ml)处理24 h的BGC-823细胞凋亡率分别为8.3%、10.4%和16.4%;400μg/ml EEFF分别处理BGC-823细胞24和48 h的细胞凋亡率分别为18.7%和33.3%。结论:EEFF对BGC-823细胞有抑制增殖和促凋亡作用。

土鳖虫提取液对人胃低分化腺癌细胞BGC-823的抑制作用

目的研究土鳖虫体外对人胃低分化腺癌BGC-823细胞抗肿瘤活性。方法采用MTT法测定了土鳖虫水提物和醇提物对人胃低分化腺癌BGC-823细胞增殖的抑制作用,采用生长曲线测定法检测土鳖虫醇提物对体外培养肿瘤细胞的细胞毒作用。结果土鳖虫水提物不能抑制体外培养的肿瘤细胞,而醇提物能显著抑制人胃低分化腺癌BGC-823细胞增殖,药物作用48h时抑制率最高,并有较好的剂量依赖关系。结论体外土鳖虫水提物没有抗肿瘤活性,醇提物有较强的抗肿瘤作用,值得进一步研究其抑制机理。

小剂量奥沙利铂抗肿瘤血管生成作用的体内实验研究

目的观察小剂量奥沙利铂(L-OHP)对小鼠移植瘤生长的抑制作用及对血管内皮生长因子(VEGF)的表达和微血管密度(MVD)的影响。方法建立肝癌H22小鼠模型后,将小鼠随机分组4组,5%葡萄糖20 mL/kg阴性对照组、环磷酰胺20 mg/kg阳性对照组、奥沙利铂0.75 mg/kg和1.5 mg/kg组,腹腔等容积注射给药,连续10 d,第11天处死小鼠,计算瘤重抑制率,用免疫组化方法测定肿瘤组织中的VEGF和CD34的表达。结果1.5 mg/kg奥沙利铂组的瘤重明显低于阴性对照组(P<0.01),而且肿瘤组织中的VEGF和CD34的表达也明显低于阴性对照组(P<0.01)。结论小剂量奥沙利铂对H22肝癌荷瘤小鼠抑瘤作用明显,能抑制肿瘤组织中VEGF和MVD的表达;小剂量奥沙利铂在体内可能具有抑制肿瘤组织血管生成的作用。