pcDNA3.1-Smac真核表达载体的构建及表达

目的:构建人的smac基因真核表达载体pcDNA3.1-Smac,并在肺腺癌A549细胞中表达。方法:采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术从人睾丸组织中扩增到smac基因,构建重组真核表达载体pcDNA3.1-Smac。酶切及测序鉴定重组质粒正确后,脂质体介导转染至肺腺癌A549细胞中。采用RT-PCR、Westernblot法检测外源基因smac的表达,MTT法检测细胞生长抑制率。结果:PCR扩增片段与预期片段大小相符,插入片段测序结果与GenBank公布的一致,表明人smac基因克隆及真核表达载体pcDNA3.1-Smac构建成功。在mRNA水平和蛋白水平,转染后的细胞中外源基因smac表达均明显增加。转染smac质粒72h后,细胞的生长抑制率较转染空质粒组显著增加。结论:成功构建重组真核表达载体pcDNA3.1-Smac,并在肺癌A549细胞中进行了表达;验证了转染后对肺癌细胞生长有抑制作用。

Smac促凋亡机制及其与肺癌的关系

由于线粒体蛋白Smac具有促进细胞凋亡作用,因而成为肿瘤研究中重要的凋亡调控因子之一。本文概述了Smac的结构、细胞定位和组织分布;通过Smac与IAPs、TRAIL和其它凋亡调节因子的相互作用,阐述了其促进肿瘤细胞凋亡的作用机制;并从表达、预后和治疗等方面论述了Smac在肺癌中的研究进展。研究表明,Smac表达状况与肺癌的发生发展、预后评估及化疗效果相关。而且,Smac模拟小分子肽能通过级联放大效应增加肺癌细胞化疗敏感性,因此,Smac对肺癌的预后评价和治疗等均有重要的作用。

布地奈德联合氨溴索氧化驱动雾化吸入预防成人开胸术后肺炎的临床疗效

目的:探讨布地奈德联合氨溴索氧化驱动雾化吸入对于预防成人开胸术后肺炎的临床效果。方法:采用随机、开放、平行的病例对照试验,于西安交通大学第一附属医院胸外二科住院患者中选择符合研究标准的患者80例作为研究对象。入组患者随机分为实验组和对照组,实验组患者进行术前3 d的雾化吸入用药,采用氧化驱动布地奈德2 mg联合氨溴索60 mg雾化吸入,对照组术前不进行雾化吸入,各组患者术后治疗方案一致。结果:基线资料显示,两组间患者在性别、年龄、病种、吸烟情况等方面差异不具有统计学意义(P>0.05)。手术前12 h血气分析结果显示,实验组PaO_2为(88.40±9.40)mm Hg,PaCO_2为(38.30±6.10)mm Hg;对照组PaO_2为(85.09±7.18)mm Hg,PaCO_2为(41.21±3.15)mm Hg,两组P值分别为0.029和0.011,差异具有统计学意义。实验组40例患者中发生术后肺炎者3例,发生率为7.50%;对照组40例患者中发生术后肺炎患者10例,发生率为25.00%,P值为0.034,差异具有统计学意义。进一步分析不同病种及手术方式对术后肺炎发生率的影响,显示在实验组及对照组中,食管癌患者的术后肺炎发生率均较肺癌患者术后肺炎发生率低,差异具有统计学意义(P<0.05)。实验组中肺楔形切除术、肺叶肺段切除术及肺袖式切除术例数分别为2、21及1例,对照组中相应例数为2、21及2例。两组间,肺癌不同手术方式患者的术后肺炎发生率差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:患者术前3 d应用布地奈德联合氨溴索氧化驱动雾化吸入进行呼吸道准备,可大大减低术后肺炎的发生率。

3D打印技术在全肺切除术后的应用

目的探讨3D打印技术在全肺切除术后应用的可行性。方法选用犬作为研究对象,使用3D技术打印出双侧肺模型,外科手术建立左、右全肺切除术的动物模型后,分为对照组及3D打印肺假体植入组;术后观察1年,分别比较左、右肺全切后对照组及假体植入组早期并发症及远期并发症的发病情况,并对相应组织进行病理学分析,验证假体的组织相容性,并观察有无严重的不良反应。结果在3D打印肺假体移植术后,经过1年的随访,3D打印肺假体植入组实验用犬晚期并发症的发病率较低。CT图像显示,进行对侧肺扩大切除的对照组犬发生了动态纵隔移位。相反地,在3D打印的肺移植个体中,纵隔的位置没有明显的改变。病理结果显示,3D打印的肺并没有引起任何的副作用,显示了受体良好的组织相容性和耐受性。结论 3D打印的肺假体可以安全、有效地移植给受体,有效地治疗因气管缺损或肺缺损导致的疾病,且无显著排斥反应及其他严重副作用。

细胞周期蛋白D1的高表达与雌激素受体表达及乳腺癌患者良好预后相关

目的探讨细胞周期蛋白D1(cyclin D1)与雌激素受体(ER)在乳腺癌中的表达和临床意义。方法采用免疫组织化学方法检测102例乳腺癌组织和60例正常乳腺组织标本中cyclin D1及ER蛋白表达,结合临床病理及术后5年随访资料,分析cyclin D1与ER相关性及与预后之间的关系。结果与正常乳腺组织相比,乳腺癌组织中cyclin D1和ER表达显著性增加,且cyclin D1表达与肿瘤组织学分级、TNM分期、ER蛋白表达相关。Spearman相关性分析显示,cyclin D1与ER表达水平呈正相关。Kaplan-Meier生存分析发现,cyclin D1高表达组乳腺癌患者生存期明显高于低表达组。Cox多因素分析表明cyclin D1、ER及TNM分期是影响患者预后的独立因素。结论 Cyclin D1在乳腺癌组织高表达,与ER表达正相关,且指示良好的预后。

循环肿瘤细胞和外泌体miR-21检测在肺磨玻璃样病变诊断中的应用

目的:评价循环肿瘤细胞(CTC)联合外泌体miR-21检测方法用于肺磨玻璃样病变(GGO)临床诊断的实用性和可行性,为GGO的诊断提供依据。方法:按照GGO诊断标准和排除标准筛选出70例患者,均进行胸腔镜下肺段切除,术后病理诊断为肺癌的患者为病例组(n=24),术后病理诊断为良性病变的患者为对照组(n=46)。术前所有患者通过免疫磁珠负向富集方法从外周血中捕获CTC,采用肿瘤特异性叶酸配体-寡核苷酸偶合物标记捕获的CTC,同时检测同一标本的外泌体,纯化鉴定外泌体,检测患者血清外泌体miR-21表达水平。利用受试者工作特征(ROC)曲线评价CTC和外泌体miR-21对GGO患者的诊断效能。结果:病例组患者CTC阳性率高于对照组(P<0.05)。病例组和对照组不同病理类型患者CTC阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05)。纯化样品具备外泌体特征。病例组患者血清外泌体miR-21表达水平高于对照组(P<0.05)。CTC的ROC曲线下面积(AUC)为0.891,外泌体miR-21的AUC为0.711,均具有较好的特异性。二者联合检测的灵敏度和特异度分别为85.64%和86.79%。结论:CTC结合外泌体miR-21检测可以应用于早期肺癌的临床诊断,其灵敏度和特异度较高。

镍钛合金记忆线皮内缝合技术对乳腺癌改良根治术后切口美容效果及放射性皮肤损伤的影响

目的:探究镍钛合金记忆线皮内缝合技术对乳腺癌改良根治术后切口美容效果及放射性皮肤损伤的影响。方法:回顾性分析2016年04月至2021年01月98例行乳腺癌改良根治术患者相关资料,依据患者术后缝合方式分为试验组(n=50)和对照组(n=48),分别采用镍钛合金记忆线皮内缝合技术和传统丝线间断缝合技术。采用温哥华瘢痕评估量表(Vancouver scar scale,VSS)对两组患者手术切口瘢痕情况进行评估比较,采用自制的调查问卷对两组患者手术区域美容效果满意度进行调查比较。采用放射治疗肿瘤协作组(Radiation Therapy Oncology Group,RTOG)急性放射损伤分级标准对两组接受术后放疗患者急性放射性皮肤损伤情况进行对比观察。结果:试验组患者的VSS总评分明显低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);且试验组患者VSS的血管分布、色泽、柔软度、厚度4个特点评分均明显低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。试验组患者总体满意率(92.00%)和满意度级别均明显高于对照组(52.08%),差异具有统计学意义(P<0.05)。所有放疗患者均出现急性放射性皮肤损伤,试验组3、4级急性放射性皮肤损伤的发生率明显低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);试验组急性放射性皮肤损伤发生级别明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:乳腺癌改良根治术切口缝合时采用镍钛合金记忆线皮内缝合技术可以有效抑制术后瘢痕形成,美容效果好,患者满意度高,同时对降低术后放疗患者急性放射性皮肤损伤的发生率和严重程度也起到了积极的作用,值得进一步探索和推广。

完全胸腔镜与辅助小切口肺癌切除术的临床疗效比较

目的:比较完全胸腔镜(completed video-assisted thoracoscopic surgery,CVATS)与辅助小切口肺癌切除术(video-assisted mini-thoracotomy,VAMT)的临床疗效。方法:138例肺癌患者(Ⅰ~a期10例、Ⅰ~b期39例、Ⅱ~a期47例、Ⅱ~b期37例、Ⅲ~a期5例),采用完全胸腔镜手术(CVATS组)62例,胸腔镜辅助小切口手术(VAMT组)76例,对比两组术式的临床疗效。结果:CVATS组手术时间、住院费用均高于VAMT组,但住院时间较短;术中出血量、淋巴结清扫个数、术后置管时间比较两组无统计学差异。术后第1、4天血液炎症因子水平较术前均有显著升高,VAMT组高于CVATS组;术后第1、4天胸腔引流液中IL-6和IL-10水平,VAMT组较CVATS组均高,但CRP水平比较两组无统计学差异。两组患者术后并发症发生率分别为9.68%vs 9.21%,比较未见统计学差异。结论:CVATS或VAMT行肺癌切除,在手术切除率、淋巴清扫、出血及并发症等影响患者安全的主要指标间并无显著区别,仅在手术时间、住院费用等非主要指标略有差异;临床仍应根据术者的习惯、熟练程度及病变的需要选择。

后疫情时代胸外科留学生SPOC混合教学模式探索

目的 探讨后疫情时代小规模限制性网络在线课程(SPOC)混合教学模式在留学生胸外科线上教学中的应用。方法 选取新冠疫情后2020及2021年学习《外科学》课程的留学生130人作为研究对象,按照班级随机分为实验组(62人)和对照组(68人)。实验组采用新型SPOC联合PBL/CBL的混合教学模式,对照组采用传统教学模式。采用学生平均成绩评价学习效果;问卷调查明确学生对教学方法满意度、对能力提高的评价以及学生对该教学模式的认可度。结果 实验组学生的平均成绩显著优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。问卷调查分析发现学生对教学方法的满意度及能力提高的评价均明显优于对照组,两组间相比差异具有统计学意义(P<0.05)。在总体评价方面,实验组认可度和希望继续采用该教学方法的比例均显著优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.001)。结论 新型SPOC联合PBL/CBL的混合教学模式可以充分利用SPOC平台的共享资源,开拓学习的积极性和主动性,凝练缜密临床思维。提升胸外科教学质量和教学效果,值得在后疫情时代留学生医学教学过程中推广。

吲哚美辛诱导食管癌EC109细胞凋亡的Smac依赖性机制

目的:研究Smac表达下调对吲哚美辛诱导的食管癌EC109细胞凋亡的影响,并探索其内在分子机制。方法:使用Smac-siRNA脂质体法转染食管癌EC109细胞,将细胞分为空白对照组,siRNA-control阴性对照组和siRNA-Smac组。使用不同浓度的吲哚美辛处理各组细胞,MTT检测细胞活力变化,流式细胞术检测其对细胞凋亡的影响,Western blot法检测Caspase-9、3以及XIAP、survivin表达情况。结果:采用不同浓度吲哚美辛处理后,细胞活力明显受到抑制;Smac siRNA可明显降低Smac在RNA水平和蛋白水平的表达;吲哚美辛可引起各组凋亡率明显增加,单纯导入siRNA-Smac片段并不能引起细胞凋亡变化,siRNASmac联合药物能明显降低EC109细胞凋亡率(P<0.05)。在蛋白水平,siRNA-Smac组的survivin表达无明显变化,XIAP表达明显增强;Caspase-9及Caspase-3的活性片段明显表达减弱(P<0.05)。结论:NSAIDs药物吲哚美辛可诱导食管癌EC109细胞凋亡,这种作用一定程度上依赖于Smac的正常表达;Smac表达降低后其对XIAP的抑制减弱,Caspase-9和Caspase-3的活化受到抑制,而survivin在其中并不起决定性作用。

热疗通过提高活性caspase-3的表达促进食管癌EC109细胞凋亡

目的:探讨不同温度热疗诱导食管癌EC109细胞的生长抑制、细胞凋亡及其与天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白水解酶-3(caspase-3)蛋白表达变化的关系。方法:采用PCR仪精确控制温度,对食管癌EC109细胞行37℃(对照),43℃,45℃,47℃热疗处理,四甲基偶氮唑蓝(Tetrazolium bromide,MTT)法检测细胞生长抑制率,碘化丙啶(Propidium iodide,PI)/磷脂结合蛋白V(Annexin V)双染流式细胞仪测定细胞凋亡率,蛋白印迹(Western bolt)法检测caspase-3蛋白表达。结果:食管癌细胞在37℃,43℃,45℃处理下,细胞生长抑制率随温度升高而增多,并有显著性差异,43℃细胞凋亡率达到最高,三者差异显著。45℃和47℃生长抑制及凋亡率均无明显差异。总-caspase-3(pro-caspase-3)表达随温度升高而增多,而活性csapase-3(actived-caspase-3)在43℃表达最多。结论:热疗通过提高活性caspase-3表达诱导食管癌EC109细胞凋亡,在43℃凋亡率达到最高。

过表达人细胞S期激酶相关蛋白2(Skp2)促进MCF-7乳腺癌细胞生长及S期细胞增加

目的构建带FLAG标签的细胞S期激酶相关蛋白2(Skp2)基因真核表达载体pc DNA3-FLAG-Skp2并检测其对MCF-7乳腺癌细胞生长及细胞周期的影响。方法采用反转录PCR从MDA-MB-231乳腺癌细胞中扩增Skp2基因,构建重组真核表达载体pc DNA3-FLAG-Skp2。酶切及测序鉴定重组质粒正确后,脂质体介导转染至MCF-7乳腺癌细胞中。采用Western blot法检测FLAG-Skp2的表达,Alamar blue比色法绘制细胞生长曲线,流式细胞术检测细胞周期。结果 PCR扩增片段与预期片段大小相符,测序结果与Gen Bank结果一致。Western blot结果显示质粒转染48 h后,细胞成功表达融合蛋白FLAG-Skp2。过表达Skp2的MCF-7乳腺癌细胞较对照组生长速度明显加快,S期细胞显著增多。结论成功构建人Skp2真核表达载体pc DNA3-FLAG-Skp2。过表达Skp2的MCF-7细胞生长加快,S期细胞增多。

推进具有中国特色的住院医师规范化培训的对策

住院医师规范化培训制度是医学人才成长的必要阶段,在世界各地都有通行的方法,我国近年也在全力推进住院医师规范化培训制度,并且做出了一定的成绩,但同时也暴露出一系列问题。本文就我国各地区现行住院医师规范化培训现状及国外具有代表性国家的医师培训制度做一综述及比较,由此来提出适合我国国情的住院医师规范化培训策略,以供参考。

内科学见习中培养七年制学生临床思维能力的体会

临床思维能力是每一位临床医师的基本功。在七年制学生内科临床见习中，注重启发式教学，使教学个体化，模拟教学与临床实践紧密结合，同时推动网络教学、多媒体教学、双语教学的应用，这有助于扩展见习生临床诊治思路，减少临床漏诊和误诊率。从而加强七年制医学生临床思维能力的培养，最大限度地提高内科见习的教学质量。

关于网络环境下著作权保护问题的思考

计算机网络技术的迅猛发展,对经济社会发展起着巨大的推动作用,但也给著作权领域中的权利保护带来了新的挑战。加强对网络环境下著作权保护,是时代发展的要求,也是利益平衡的体现。明确网络服务提供者的共同责任,完善著作权集体管理制度,加强网络道德建设,是目前加强网络环境下著作权保护可行和有益的做法。

重组金属蛋白酶组织抑制因子-3与顺铂联合应用对肺癌细胞A549生长抑制与凋亡的影响

目的探讨重组金属蛋白酶组织抑制因子-3(rhTIMP-3)和顺铂(cis-platinum,DDP)联合应用对肺癌细胞株A549生长和凋亡的影响。方法分别或联合应用不同浓度的rhTIMP-3、DDP作用于A549细胞,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法分析细胞生长抑制作用,流式细胞术测定细胞周期分布和凋亡率。结果 rhTIMP-3与DDP均可抑制A549细胞的增殖,rhTIMP-3作用结果呈时间、浓度依赖性,DDP的作用结果呈浓度依赖性,二者都可以诱导A549细胞凋亡。rhTIMP-3使细胞阻滞在S和G2/M期,DDP可造成细胞S期的阻滞,当两者联合应用时对A549细胞的生长抑制作用明显加强,对诱导凋亡有明显协同作用。结论 rhTIMP-3、DDP均可抑制A549细胞的增殖,并可诱导其凋亡;二者联合应用不仅能增加细胞生长的抑制作用,而且有协同诱导细胞凋亡作用。

新型冠状病毒肺炎疫情期间肺癌患者的应对措施

新型冠状病毒肺炎(COVID-19)是近段时间我国面临的重大公卫事件,我国是肺癌大国,为了加强肺癌患者对这一疾病的认识,在疫情期间,使广大肺癌患者做好自身疾病的管理,做好对新型冠状病毒肺炎的预防。本文结合肺癌患者自身特点,对新型冠状病毒肺炎的易感性、鉴别诊断、防护、治疗,以及肺癌患者的随访、抗肿瘤用药、营养、手术等方面进行探讨,并结合两者的关系综合归纳,可以为广大肺癌患者更好地应对疫情提供参考。

非小细胞肺癌中IL-8与MCP-1的表达及其临床意义

目的:探讨IL-8与MCP-1在非小细胞肺癌中的表达相关性及其与非小细胞肺癌发生发展的关系,为寻找临床治疗的新靶点提供依据。方法:选取我院自2009年6月-2014年12月收集的非小细胞肺癌组织及其对应的正常组织80例,应用免疫组化的方法检测非小细胞肺癌中IL-8与MCP-1的表达,分析其与年龄、性别、是否转移、临床分型、临床分期及病理类型等临床病理因素的关系。结果:IL-8在非小细胞肺癌中阳性表达54例(67.5%),明显高于其在正常组织中阳性表达的19例(23.8%),差异具有统计学意义(P<0.05)。MCP-1在非小细胞肺癌中阳性表达59例(73.8%),在正常组织中阳性表达12例(15.0%),两者比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:IL-8及MCP-1在非小细胞肺癌中的表达明显增高,二者表达呈正相关,且均与肿瘤的分化、是否淋巴结转移及肿瘤分期有关。

沙利度胺对晚期肺腺癌并恶液质综合征的疗效研究

目的:评价沙利度胺对晚期肺腺癌并CACS治疗的有效性和安全性。方法:选取210例体重减轻10%以上的,确诊晚期肺腺癌并发恶液质的患者,随机分为实验组和对照组。治疗组每晚服用沙利度胺100 mg,维持治疗8周,同时两组均给予营养支持,主要评价标准是体重和营养状况的变化。结果:用药8周后,204例(对照组104例,实验组100例)用于评估,治疗组在治疗前后平均体重、食欲、ECOGPS评分、乏力的改善均具有统计学意义。便秘、过度镇静在两组间有统计学差异(P=0.002和P=0.004),其他症状均无统计学差异。结论:沙利度胺对缓解晚期肺腺癌并发恶液质患者治疗有效,且耐受良好。