侵染广西罗汉果的小西葫芦黄花叶病毒的鉴定及抗血清制备

在广西临桂罗汉果花叶畸形病株上获得了一个线状病毒分离物LGL-1,寄主范围、蚜传能力测定、病毒粒子形态和细胞病理特征研究表明,它是马铃薯Y病毒科成员。采用马铃薯Y病毒科特异性简并引物做PCR扩增,并测定了分离物LGL-1的基因组3′-末端序列,序列分析表明它是小西葫芦黄花叶病毒(ZYMV)。系统进化树分析揭示,世界范围内的ZYMV分离物主要可分为3大群体,分离物LGL-1为中国特有群体Group III成员。原核表达制备了分离物LGL-1的外壳蛋白抗血清,明确了ZYMV是引起广西罗汉果病害的主要病毒,并且比较了原核表达法和提纯病毒法制备的抗血清,在病样的间接ELISA法检测中结果的差异。

广西水稻品种抗水稻南方黑条矮缩病鉴定

【目的】评价广西生产用水稻品种对水稻南方黑条矮缩病的抗病性,为病害综合防控提供依据。【方法】收集广西主栽水稻品种45份和市场销售的水稻品种53份,采用集团接种法进行室内人工接种抗病性鉴定。【结果】测定的98个水稻品种中,表现高感的品种96个,占测试品种的97.96%;表现中感的品种两个,占测试品种的2.04%。测试品种中未发现抗病品种。【结论】测定的98份广西生产用水稻品种对水稻南方黑条矮缩病均表现感病,需加大对该病害的综合防控及水稻种质资源的抗病筛选利用。

侵染观赏南瓜的黄瓜绿斑驳花叶病毒的初步鉴定

从广西某农业展示中心观赏南瓜上分离到一种直杆状病毒,长约300nm,该病毒分离物P3(NN)在测试的葫芦科作物上表现为系统花叶、褪绿斑及明脉症状,在曼陀罗上为局部褪绿斑,在测试的其它茄科作物及豆科和藜科作物上无任何症状反应。其致死温度为95～100℃。经DACELISA测定,P3(NN)与黄瓜绿斑驳花叶病毒有密切的血清学关系。根据以上结果,初步鉴定P3(NN)为黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV)的一个分离物。

侵染葫芦的黄瓜绿斑驳花叶病毒广西分离物分子鉴定

从广西南宁市郊温室大棚中的葫芦[Lagenaria siceraria(Molina)Stand.]上采集到一个表现脉绿、花叶症状的病毒样品,ELISA检测表明,该样品与黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)有密切的血清学关系,利用RT-PCR方法从样品中扩增获得约500bp的DNA片段,序列分析表明,该片段是CGMMV的外壳蛋白基因,暂将该病毒分离物定名为GX-BG。外壳蛋白基因核苷酸序列系统进化树分析表明,已报道的CGMMV主要分为3大群体,GX-BG与中国辽宁分离物(CGMMV-LN)分别属于不同的群体。

罗汉果花叶病毒(WMV-2-Luo)抗血清制备及ELISA检测技术研究

用西葫芦作为罗汉果花叶病毒 (WMV 2 Luo)的繁殖寄主 ,通过差速离心和PEG二次沉淀法得到WMV 2 Luo的提纯液 ,用该病毒提纯液免疫日本大白兔 ,获得了WMV 2 Luo兔抗血清。经ELISA测定 ,其效价为 1/5 12 0 ,以 0 1mol/L磷酸盐缓冲液 (pH7 8,含 1 5 %NaDIECA)作为样品制备缓冲液 ,用间接ELISA法检测WMV 2 Luo的灵敏度为 1/32 0 0。用此方法检测罗汉果组培苗带毒情况和田间病株均获得成功。

小西葫芦黄花叶病毒在广西瓜类作物上的发生情况初报

用DAC -ELISA对广西各地瓜类作物病毒病样品 4 4 8份进行小西葫芦黄花叶病毒 (ZYMV)检测 ,结果表明 :该病毒在广西瓜类作物上普遍发生 ,ZYMV阳性检出率为 77.6 8% ,西瓜、甜瓜、南瓜、西葫芦、黄瓜、苦瓜、瓠瓜和蛇瓜样品的阳性检出率在 5 8.33%～ 10 0 %之间 ,冬瓜、丝瓜样品的阳性检出率分别为 2 0 %和 2 8.5 7%。ZYMV是侵染广西瓜类作物的主要病毒之一。

葫芦种子传黄瓜绿斑驳花叶病毒的检测

从感染黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)的葫芦植株上收取种子,通过苗期症状观察法、双抗体夹心酶联免疫吸附法(DAS-ELISA)、免疫捕获反转录PCR(IC-RT-PCR)法测定葫芦种子的带毒情况,并用生物学接种方法测定葫芦种子携带病毒的侵染活性。苗期症状观察法结果表明,199株幼苗有2株表现花叶斑驳症状,种子传毒率为1.01%;而利用DAS-ELISA和IC-RT-PCR法随机检测30粒葫芦病株种子,CGMMV检出率为100%。种子各部位携带的CGMMV接种葫芦表现典型的花叶斑驳症状,表明葫芦种子携带的CGMMV具有侵染活性。DAS-ELISA检测葫芦种子CGMMV的灵敏度为1/5120种子研磨液。

黄瓜绿斑驳花叶病毒抗血清制备及应用

用葫芦[Lagenaria siceraria(Molina)Stand.]作为黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)的繁殖寄主,通过差速离心和PEG二次沉淀法进行病毒提纯,用提纯病毒液免疫新西兰兔制备CGMMV抗血清。制备的CGMMV抗血清经间接ELISA法测定效价为1∶5120;利用制备的抗血清检测田间样品,证明其可以用于CGMMV的血清学及免疫捕获RT-PCR检测。研究结果对今后开展葫芦科作物CGMMV检测,及时发现疫情以便采取防控措施,避免病毒扩散为害,确保葫芦科作物的安全生产具有重要意义。

几种药剂防治烟草花叶病毒病田间试验

2005-2006年在广西靖西县进行几种药剂防治烟草花叶病毒病田间对比试验，两年试验结果显示，第3次药后10d4％嘧肽霉素250倍对烟草花叶病毒病的防效最好，两年的防效分别为58．54％和48．93％，与对照药剂2％菌克毒克250倍的防效相当；其他几种供试药剂对烟草花叶病毒病也有一定的防效，第3次药后10d的防效均在40％以上。田间试验结果表明，4％嘧肽霉素、2％菌克毒克、植物基因活化剂、比施壮和3．95％病毒必克Ⅱ号对烟草花叶病毒病均有较好的防治效果，均可作为防治烟草花叶病毒病的一项辅助措施在生产中轮换使用。

广西西瓜花叶病病原病毒鉴定

从广西各西瓜主产区采集到表现花叶症状的样品 12 4份 ,经 EL ISA测定 ,所采样品均与西瓜花叶病毒二号 (WMV— 2 )抗血清呈阳性反应 ,与黄瓜花叶病毒 (CMV)、烟草花叶病毒 (TMV)抗血清呈阴性反应。取典型样本摩擦接种西瓜、西葫芦、南瓜、黄瓜、毛节瓜、瓠瓜、罗汉果等葫芦科植物表现花叶症状 ;接种苋色藜产生局部坏死斑 ;接种番木瓜、普通烟、心叶烟、番茄、辣椒、豇豆等无任何症状反应。该病毒还可通过棉蚜和嫁接传染。病毒初提纯液经电子显微镜观察 ,发现许多大小为 12 nm× (6 0 0～ 80 0 ) nm的线状病毒。 EL ISA测定结果显示 ,该病毒与莴苣花叶病毒 (L MV)、大豆花叶病毒 (SMV )抗血清呈阳性反应 ,它们之间有密切的血清学关系。据此 ,广西西瓜花叶病的病原病毒应为西瓜花叶病毒二号 (WMV— 2 )

水稻品种抗南方水稻黑条矮缩病人工接种鉴定技术规程

南方水稻黑条矮缩病是我国一类农作物病虫害,严重威胁水稻生产和粮食安全。种植抗(耐)病品种是防控该病害的有效措施,但对水稻品种的抗病性评价至今尚未有具体操作规程可循。针对水稻品种抗病鉴定评价及抗源筛选的迫切需求,作者在多年实践的基础上,总结制定了抗南方水稻黑条矮缩病人工接种鉴定技术及评价规程,包括有关术语定义,人工接种鉴定流程、结果调查和抗病性评价等,为规范开展水稻品种抗病性鉴定提供指导和参考。本标准适用于水稻品种及育种材料抗南方水稻黑条矮缩病性状的鉴定与评价。

侵染广西甘蔗的高粱花叶病毒分子鉴定初报

在南宁市郊采到1份表现褪绿条纹、花叶的糖蔗(桂糖95-53)样品(编号为SC-NN1),经差速离心和PEG二次沉淀法提取病毒粗汁液,电镜观察,该病毒为略弯曲的线状,ELISA检测显示该病毒与甘蔗花叶病毒(Sugarcane mosaic virus,SCMV)、高粱花叶病毒(Sorghum mosaic virus,SrMV)多克隆抗血清呈阳性反应,与SCMV单克隆抗血清呈阴性反应,初步判断分离物为SrMV。针对SrMV CP基因设计特异引物,利用RT-PCR和免疫捕获反转录PCR(Immunocapture reverse transcript PCR,IC-RT-PCR)对SC-NN1进行分子检测鉴定,两种方法均扩增出1条长约1.1kb的片段,而健康对照未扩增到任何片段。扩增片段经克隆后测序,序列包含1010个核苷酸,测序结果在NCBI上用BLAST进行同源性分析,该序列与SrMV浙江、云南分离物对应的核苷酸序列同源性大于95.32%,氨基酸序列同源性大于97%,根据马铃薯Y病毒科(Potyviridae)病毒种和株系的划分标准,将SC-NN1鉴定为SrMV。

黑皮果蔗花叶病病原鉴定

在南宁市郊采集到1份表现褪绿条纹、花叶的黑皮果蔗样品(NN-Ba2),经差速离心和PEG二次沉淀法提取病毒粗汁液,在电镜下观察到略弯曲的线状病毒粒子;DAC-ELISA检测显示NN-Ba2与甘蔗花叶病毒多克隆抗体和单克隆抗体呈阳性反应;根据SCMV和SrMV CP基因分别设计合成特异引物,利用RT-PCR对NN-Ba2进行分子鉴定,扩增出大小约900 bp的预期片段,健康对照未扩增到任何片段;NN-Ba2扩增片段经克隆后测序得到719个有效核苷酸,测序结果在DDBJ上用BLAST进行同源性分析,结果显示该序列与已报道的SCMV广东、云南、广西等地分离物对应的核苷酸序列同源性为97.36%～97.77%,根据马铃薯Y病毒科(Potyviridae)病毒种和株系的划分标准,NN-Ba2鉴定为SCMV。田间采集的另外10份表现花叶症状的果蔗样品经ELISA和RT-PCR检测,证明也感染了SCMV。

香蕉花叶心腐病毒(CMV-B)在组培繁殖中的传递规律研究

采集健康的和感染香蕉花叶心腐病毒 (CMV B)的香蕉吸芽 ,进行常规组织培养 ,用间接ELISA法对吸芽叶片及各代不定芽进行病毒检测。根据检测结果并结合继代苗和生根苗的症状表现 ,发现CMV B在常规的组培繁殖中是逐代传递的 ;在 2 8± 2℃和较弱的室内自然散射光条件下培养 ,各代苗病毒检测灵敏度基本一致 ;高温和强光照培养影响病毒的增殖。研究结果还表明 ,在同一带毒母株的不同吸芽和同一带毒吸芽组培繁殖的后代中 ,病毒分布不均匀 ;各代生根苗显症率不一致 ,假植后显症率提高 ;

复合侵染甘蔗的病原病毒RT-PCR检测

根据甘蔗花叶病毒(sugarcane mosaic virus,SCMV)、高粱花叶病毒(sorghum mosaic virus,SrMV)和甘蔗黄叶病毒(sugarcane yellow leaf virus,SCYLV)外壳蛋白(CP)基因序列分别设计合成3对特异引物SCMV-F/R、SrMV-F/R和SCYLV-F/R,以表现花叶和黄叶复合症状的甘蔗叶片总RNA为模板,分别进行3种病毒单一RT-PCR检测,在SrMV和SCYLV特异引物RT-PCR反应体系中分别扩增到约850bp和630bp特异性片段。序列测定及同源性比对结果显示,850bp片段测序所得序列与浙江象山、临平和余杭SrMV分离物(GenBank登录号分别为AJ310194、AJ310195和AJ310198)对应序列同源性95%,630bp片段测序所得序列与广东、广西、福建SCYLV分离物(GenBank登录号分别为GU190165、GU190162、GU190159)对应序列同源性99%,表明该样品同时感染SrMV和SCYLV。在此基础上建立同时检测SrMV和SCYLV的一步双重RT-PCR体系,可检测1×10-6g病叶组织中的病毒,田间样品检测效果良好。

施保克（Sportak）浓乳剂防治香蕉采后病害药效试验

施保克（Ｓｐｏｒｔａｋ）浓乳剂防治香蕉采后病害药效试验秦碧霞蔡健和黄红李为杏（广西农科院植保所南宁５３０００７）香蕉是热带亚热带主要水果之一，但采后贮藏期的轴腐病Ｆｕｓａｒｉｕｍｓｐｐ和炭疽病Ｃｏｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｍｕｓａｅ严重影响香蕉的贮运保鲜...

《大学》“知止”思想及其当代意义

在《大学》中,"知止"与"三纲"、"七证"、"八目"属于同样重要的范畴,它紧密关联着"三纲"的达至、"七证"的获得,以及"八目"的践行。本文试以"知行合一"为进路,从何谓"知止"、"止"于何处、何以能"止"三个层面,对《大学》的"知止"思想作出解析,并指出其当代意义。

N_1N_2混合菌液防治柑桔根结线虫病试验简报

从广西各地柑桔根结线虫二龄幼虫体内分离筛选出的Ｎ１Ｎ２ 混合菌，单独或加增效剂用于防治田间柑桔根结线虫病，药后一个月防效分别为８２．０８％ 和８８．８２％ ，与对照药北农爱福丁的防效８８．４５％ 相当。

与物化一而“游”于“逍遥”——从物我关系视角对《庄子·逍遥游》之解读

庄子以《逍遥游》为宗本,把人们理想中的"好的生活"描绘为"游"于"逍遥"之境的幸福。从物我关系的视角来看,"逍遥"在我、在物,也在物我之外,它是物我统一下的个体存在状态及心灵感应。基于这一视角,从执"我"之性而囿于"有所待"的逍遥、与物化一而"游无穷"、"无己"任物而至"无何有之乡"这三个层面,试对《庄子·逍遥游》作一解读。

荀子的生态伦理思想及其对当代生态文明建设的启示

荀子以"自然"的天和"自觉"的人为基点的生态伦理思想,包含三个基本理念:"万物各得其和以生"的万物和谐理念;"谨其时禁"、"节流开源"的自然保护理念;"节用御欲"、"常虑顾后"的可持续发展理念,荀子的生态伦理思想对当代的生态意识文明建设、生态制度文明建设和生态行为文明建设都具有重的启示和引导作用。