酸枣仁汤改善间氯苯哌嗪致小鼠焦虑样行为的作用

目的比较不同配方酸枣仁汤对单次腹腔注射间氯苯哌嗪致小鼠焦虑样行为的改善作用。方法不同配方酸枣仁汤给药7 d,采用高架十字迷宫实验检测其对间氯苯哌嗪诱导的小鼠焦虑样行为的改善作用;采用ELISA方法检测小鼠血清5-羟色胺、皮质酮、促肾上腺皮质激素以及脑中5-羟色胺的含量。结果在高架十字迷宫实验中,单次腹腔注射间氯苯哌嗪4 mg·kg^(-1)能够引起小鼠焦虑样行为,酸枣仁汤原方21.7 g·kg^(-1)可显著延长小鼠开臂停留时间,增加开臂停留时间的百分比,明显上调其血清中5-羟色胺含量,并使下丘脑、杏仁核、海马、皮层中5-羟色胺含量有降低的趋势,但未影响血清促肾上腺皮质激素和皮质酮含量。结论酸枣仁汤原方可改善单次腹腔注射间氯苯哌嗪诱导的小鼠焦虑样行为,其机制可能在于调节其5-羟色胺能神经系统。

网络药理学实验研究相关技术

网络药理学从生物网络的角度系统地揭示药物和机体相互作用的规律和原理,代表了现代生物医药研究的全新哲学理念与研究模式,其实验研究涉及的环节一是基于实验结果进行网络构建所需基本数据的获取,另一个是对所建立的网络预测模型进行实验验证。网络药理学实验技术应具有高通量、可定量、快速、高灵敏度和高准确性的特点,其所涉及的实验关键技术除了组学(基因组、蛋白质组、代谢组和糖组等)技术外,目前主要包括高通量/高内涵技术、双高通量基因表达检测技术和分子相互作用技术等。本文对这三种主要技术在网络药理学中的应用做了综述。

囊泡谷氨酸转运体与神经系统疾病

囊泡谷氨酸转运体(vesicular glutamate transporters,VGLUTs)能特异地装载谷氨酸进入突触囊泡并促进释放,它包括3个成员,其中VGLUT1和VGLUT2是谷氨酸能神经元和它们轴突末端高度特异的标志,同时VGLUT1标志着皮质-皮质投射,VGLUT2标志着丘脑-皮层投射。而VGLUT3则会出现在胆碱能中间神经元、5-羟色胺能神经元、海马和皮层中GABA能中间神经元中。VGLUTs的异常会导致兴奋性神经递质谷氨酸的异常,从而诱发多种神经系统疾病。该文综述了VGLUTs的功能障碍与阿尔采末病(Alzheimer’sdisease,AD)、帕金森病(Parkinson’s disease,PD)、精神分裂症、抑郁症、癫痫、耳聋发病的关系的研究进展,为这些疾病的防治提供新的线索。

六味地黄汤对快速老化小鼠海马差异表达基因的影响

目的研究六味地黄汤(LW)对快速老化小鼠(senescenceacceleratedmouse,SAM)海马差异表达基因的影响,揭示LW增强认知功能的分子作用机制。方法应用快速老化小鼠亚系SAMP8和SAMR1海马差异表达cDNA芯片,比较SAMP8和SAMR1、SAMP8阴性对照和SAMR1阳性对照、石衫碱甲处理的SAMP8和SAMP8阴性对照以及LW处理的SAMP8和SAMP8阴性对照8个基因表达谱,并对LW的药物效应基因进行比较。结果给予SAMP8LW后,基因DUSP12、NSF、STUB1、CAMKⅡα、AMFR、UQCRFS1和11个新基因的表达出现显著差异,这些基因涉及蛋白酪氨酸磷酸酶家族、苏氨酸/丝氨酸蛋白激酶家族、泛素连接酶和线粒体功能等,LW对SAMP8海马的基因表达具有明显的调控作用。结论提示LW作用于认知功能也许是通过维持正常的细胞增殖和分化、保护正常的突触传递、调节Ca2+信号转导、改善线粒体的功能等途径实现的,基因DUSP12、NSF、STUB1、CAMKⅡα、AMFR、UQCRFS1和11个新基因可能是LW改善学习记忆功能的潜在作用靶标。

国外针灸治病作用机制研究概况

对国外近年来针灸效应机制和针灸治疗疼痛、恶心和呕吐、神经退行性疾病以及心脑血管疾病等病的机制实验研究进展进行了概述,对比国内同类研究现状,为国内同行提供借鉴。

学习和记忆相关基因:Calsyntenins家族

Calsyntenins(Cstn)是一个独特的将胞外蛋白水解活性与胞内Ca2+信号转导相连在一起的家族,属于钙结合蛋白,与钙离子结合,参与信号转导和细胞交流。它包括3个成员,分别为calsyn-tenin-1、calsyntenin-2和calsyntenin-3,皆为突触后膜蛋白,主要在脑的神经元中表达,但表达模式各自不同,而且其蛋白也表现出高度的结构多样性。Calsyntenin-1位于中枢神经系统(CNS)突触后膜,是一个突触后膜蛋白水解的蛋白质。有一个结合钙的胞质酸性结构域,是一个通过胞外蛋白水解来调节突触后钙的动力调节子。Calsyntenin-1调节突触后膜下或胞内Ca2+储存库中的Ca2+瞬变,从而参与长时程增强(LTP)和长时程抑制(LTD),与学习和记忆功能紧密相关。尤其是最近研究发现,β淀粉样蛋白前体(APP)和calsyntenins共同作用增加了β淀粉样蛋白(Aβ)的分泌,从而造成神经系统紊乱,促进阿尔采末病(AD)的发生,这对于AD发病机制的揭示和开发新一代治疗AD的药物具有重要的意义。

野大麦幼根的愈伤组织诱导及植株再生

以野大麦（Hordeumbrevisubulatum（Trin．）Link）的幼根为外植体，采用MS培养基附加不同浓度的2，4－D诱导愈伤组织，结果以2，4－D4．0mg／L为最佳。以较低浓度2，4－D培养基进行愈伤组织的继代。在MS培养基附加2，4－D1．0mg／L＋6－BA0．1mg／L，以极低的频率分化出芽，再在附加IAA0．5mg／L＋6－BA2．0mg／L＋KT1．0mg／L＋Sucrose20g／L上的MS培养基上生根，最终再生成完整植株。

野大麦幼根和幼叶悬浮细胞系的原生质体培养

以野大麦（Ｈｏｒｄｅｕｍｂｒｅｖｉｓｕｂｕｌａｔｕｍ（Ｔｒｉｎ．）Ｌｉｎｋ）的幼根、幼叶为外植体，诱导愈伤组织，建立悬浮细胞系。利用胚性悬浮细胞系进行质壁分离处理再游离原生质体，在不同的光照条件下进行原生质体培养，并由原生质体再生出小细胞团。

快速老化模型小鼠海马正反向抑制消减cDNA文库的构建

目的:构建快速老化模型小鼠(SAM)海马正反向抑制消减cDNA文库,以揭示SAMP8学习记忆脑老化的机制,同时为研究阿尔茨海默病(AD)的发病机制提供线索。方法:以快速老化模型小鼠SAMP8和SAMR1海马的总RNA为材料,采用抑制消减杂交方法和蓝白斑筛选克隆构建文库,并用PCR鉴定了文库的质量。结果:成功构建了12月龄雄性SAMP8和SAMR1海马的正反向抑制消减cDNA文库,其中正向文库包含864个克隆,反向文库包含960个克隆,阳性克隆率为96.16%,插入片段范围为250～2000bp。结论:SAMP8和SAMR1海马的正反向抑制消减cDNA文库的构建,为进一步筛选鉴定SAMR1和SAMP8海马差异表达基因提供了丰富的实验材料。

原生质体培养在作物改良中的应用

论述了原生质培养在作物改良实践中的应用,尤其是在遗传转化和体细胞杂交方面的应用研究进展。

开展中药复方研究的系统生物学思路

中药复方是通过大量临床实践产生的具有显著疗效的治疗方法,它强调整体观及辨证论治。将系统生物学宏微并举的成果渗透到中药复方的研究中,形成中药复方研究的系统生物学思路,从药材和制剂的获得、药理和药物代谢动力学的研究,到中药复方二次开发研究,以中医药理论为指导,充分利用现代科学技术揭示中药复方治疗疾病的实质,并进行新药创制,对中医药传承、发扬和光大具有重要意义。

副监护子CHIP与神经退行性疾病

CHIP属于连接酶类,具有E3泛素连接酶活性,参与能量代谢途径和新陈代谢。包括阿尔茨海默病(Alzheimer'sdisease,AD)、帕金森病(Parkinson'sdisease,PD)、亨廷顿病(Huntington'sdisease,HD)等在内的神经退行性疾病的主要病理学特征之一——细胞中异常蛋白的聚集,如tau蛋白和α-突触核蛋白等,副监护子CHIP与分子伴侣,如Hsc70/Hsp70、Hsp90等相互作用对这些异常蛋白的产生具有调节作用。最近研究表明,CHIP改变了Hsc70和Hsp90介导调节的信号通路中蛋白折叠和降解的平衡,参与细胞内蛋白质的质量控制;Hsp70/CHIP伴侣系统在tau蛋白生物学和tau蛋白病理学机制中具有重要作用;CHIP可以作为α-突触核蛋白蛋白酶体降解途径和溶酶体降解途径的分子开关。这些研究进展对于进一步揭示神经退行性疾病的发病机制和研制新一代治疗药物具有重要的作用。

学习记忆相关基因研究进展

学习记忆是脑的重要功能之一,与学习记忆相关的基因很多,它们通过影响突触功能、信号转导、转录和翻译控制、能量代谢等途径进行学习记忆行为的调控。研究相关基因可为阐明学习记忆的分子机制和遗传机制奠定基础。

CCR3在阿尔兹海默病发病机制中的作用研究进展

慢性神经炎症是阿尔茨海默病(AD)发病机制之一,趋化因子及其受体在AD的病理中发挥着关键作用。其中,CC趋化因子受体3(CCR3)在AD患者和动物模型脑中神经元和小胶质细胞表达增加。CCR3基因缺陷小鼠(APP/PS1/CCR^(3-/-))的Tau蛋白过度磷酸化降低和Tau激酶活化减弱,空间记忆缺陷得到改善。给予APP/PS1转基因小鼠CCR3拮抗剂YM344031可减少其皮层和海马中Aβ的沉积,降低APP、APP-C99和-C83片段、BACE1的蛋白表达,减轻星形胶质细胞和小胶质细胞的激活,降低Tau蛋白的Thr181、Thr205和Ser235磷酸化水平,抑制CDK5和GSK3β的活性,增加突触素、Drebrin和PSD95在海马的蛋白表达,恢复在Morris水迷宫实验中受损的空间学习能力。CCR3的配体CCL11可使原代培养的海马神经元CDK5和GSK3β蛋白表达呈时间依赖性增加,Tau蛋白的T181、T205、S235和S199部位的磷酸化水平增加,Aβ_(1-42)的分泌呈剂量依赖性增加,神经元树突分支数目、树突棘密度显著减少,但经CCR3特异性拮抗剂GW766994预处理则可防止其发生。说明CCR3参与AD发病,但是关于CCR3及其配体参与AD发病的具体途径和机制有待进一步研究。

快速老化小鼠海马差异表达cDNA芯片的制作

老年性痴呆(Alzheimer’s disease,AD)是老年人群中最普遍的痴呆类型,是一种神经退行性紊乱疾病,目前临床上还没有有效的治疗方法。快速老化小鼠亚系P8(senescence-accelerated mouse prone8,SAMP8)是研究增龄相关性认知缺陷机制以及研究脑老化机制的良好动物,同时也是研究AD较为理想的实验动物模型之一。cDNA芯片技术可以同时规模研究成千上万个基因的表达,尤其适于AD这种多机制、多靶标、多途径的复杂疾病的研究,为了揭示AD的发病机制,发现用于治疗AD的药物靶标,以SAMP8和SAMR1海马抑制消减cDNA文库中的cDNA片段为材料,以β-actin和G3PDH为内参,设计了16×(1×14)点阵方案,并点制了含有3136个点的SAM海马差异表达cDNA芯片。芯片背景均匀一致,点的大小均一,排列规则整齐。在靶分子与探针杂交过程中,进行了杂交条件和洗涤芯片的优化。将杂交结果进行统计分析,选择差异表达的cDNA进行测序并进行生物信息学分析,用实时定量RT-PCR对部分基因的表达进行了验证,检测了芯片筛选结果的可靠性。该芯片的成功制备为进一步进行差异表达基因的筛选和研究提供了良好的手段,并将成为揭示SAMP8脑老化和AD发病机制的有力手段。

六味地黄汤改善增龄性认知功能衰退的网络药理学机制研究

目的：临床和实验药理学研究表明，六味地黄汤可增强青年人的认知功能，并可改善年龄相关的认知功能衰退。本研究基于网络药理学的理念，揭示六味地黄汤改善增龄相关的认知功能损害的分子机制。方法：使用跳台、穿梭箱和morris水迷宫实验测试快速老化模型小鼠（SAMP8）给予六味地黄汤后的学习记忆能力，并采用cDNA芯片、RT-PCR技术检测六味地黄汤对SAMP8主管学习记忆脑区海马和皮层基因表达的影响，最后使用生物信息学技术分析表达变化基因的分子相互作用网络。结果：六味地黄汤长期给药可增强被动回避反应中的记忆获取和保持能力，促进水迷宫测试中的空间记忆能力，改善条件性被动回避反应中的学习能力。

中国工程科技论坛第128场——“实验动物与生命科学研究”实验动物标准、规范和质量管理专题会议纪要

由中国工程院主办，卫生部科教司、中国实验动物学会、中国药理学会和中国毒理学会支持的中国工程科技论坛第128场——“实验动物与生命科学研究”于2011年10月18—20日在北京顺利召开。来自全国200余名代表出席了此次会议。

网络药理学研究中的网络分析技术

网络分析技术是网络药理学研究中的核心技术,通过整合多种学科理论技术对网络药理学研究中相关的分子网络进行多角度多层次的信息挖掘,以准确、客观地查询出能够产生特定药理作用的成分或成分组合、药物或药物组合,以及具有特定生理功能的关键节点、模块等,从而为新药研发、药物作用机制揭示、疾病机制阐释、生物标志物指明等提供有指导价值的信息,尤其对于以阿尔茨海默病为代表的复杂性疾病研究意义更加突出。本文对近年来网络药理学研究中常用的网络分析技术进行了综述。