沉香的人工催香方法及其结香机制的研究进展

沉香是应用广泛的名贵药材和顶级香料。天然沉香形成缓慢,野生资源面临枯竭,采用人工方法诱导结香是沉香产业发展的重要研究方向。本文对常见的人工诱导催香方法及主流的结香机制假说进行了归纳总结,对未来如何高效稳定地人工催香及探究结香机制提出了建议,以期为结香率和结香品质的提高及后期的产业规模化提供参考。

抗性突变株筛选法选育碱性脂肪酶高产菌

以扩展青霉 (Penicillumexpansum)P1336为出发菌株 ,研究琥珀酸钠和制霉菌素对菌株生长的影响。经过多代诱变 ,获得一突变株W 2 5 80 ,其产酶水平比出发株P1336菌株提高 34 .7%,该菌菌丝体麦角固醇含量下降了 12 .2 %。

重组拖丝蛋白基因在大肠杆菌中表达条件的优化

对已构建的重组蜘蛛拖丝蛋白基因表达菌株 p NS2 ,以 IPTG为诱导剂 ,建立最适表达条件 .在 LB培养基中添加质量分数为 0 .1 %的甘氨酸和丙氨酸 ,菌体培养至密度 A6 0 0 =0 .5～ 0 .7时加入浓度为 0 .2 mmol/ L的 IPTG,诱导 5 h,可得到表达量占可溶性总蛋白质 2 7.2 %的较好结果 .

灵芝14-3-3蛋白基因的电子克隆与表达分析

通过电子克隆技术,获得14-3-3基因的cDNA序列全长,并采用生物信息学方法,借助电子计算机和相关的生物信息学软件,对该基因编码蛋白从基本理化性质、疏水性/亲水性、亚细胞定位、跨膜区结构、信号肽、高级结构及系统发育树分析等进行了预测和分析。该cDNA编码蛋白由257个氨基酸组成,相对分子质量为29.014 5 kDa,亲水性和疏水性比较平衡,定位于细胞质,不存在信号肽,无跨膜螺旋区,且二级结构由6.23%无规则卷曲,66.54%α-螺旋和27.24%延伸链组成。同源比对分析显示,该酶基因编码的氨基酸序列与污叉丝孔菌、双孢菇和木耳等蘑菇类高等真菌中的14-3-3基因所编码的氨基酸序列高度同源。实时荧光定量PCR结果表明,灵芝14-3-3基因在液体静置培养过程中的表达量显著高于振荡培养。

组织工程新材料蜘蛛拖丝蛋白的重组培养

目的通过对重组蜘蛛拖丝蛋白基因工程菌pNS2生长的培养基进行优化,为获取大量蜘蛛拖丝蛋白提供条件。方法采用单因子试验和正交试验对培养基进行优化。结果获得优化的培养基组成:葡萄糖5.0g/L、蛋白胨5.0g/L、磷酸二氢钾(KH2PO4)15.0g/L、微量元素母液15.0g/L、硫酸镁(MgSO4)0.8g/L、柠檬酸1.7g/L。培养基优化后,工程菌的生长量提高了60.6%。结论优化的培养基为基因工程菌pNS2大规模生产蜘蛛拖丝蛋白奠定了基础。

异常毕赤酵母产生耐温酸性脂肪酶的研究

采用 Rhodamine B指示剂染料法和三丁酸甘油酯琼脂平板透明圈法 ,从 2 3 7份土壤样品中分离得到一株酵母菌 1 0 1 3号 ,能较稳定地产生耐温酸性的脂肪酶 .该菌株经中国科学院微生物研究所鉴定为异常毕赤酵母 ( Pichia anomala) .其产酶培养基组成 ( % ) :豆饼粉 2 .0 ,麦麸 1 .0 ,NH4 NO3 0 .4 ,KH2 PO4 0 .3 ,Mg SO4 · 7H2 O 0 .2 5,豆油 1 .0 .产酶最佳条件 :发酵起始 p H 5.8,温度 2 8℃ ,周期 3 6h.酶最适作用温度4 8℃ ,最适 p H 4 .8.在 p H 4 .8,50℃条件下 4 0 min能保持 60 %以上酶活 .Mg2 + 和 Na+ 对酶有激活作用 ,Zn2 + 、Fe2 + 、 Cu2 + 和 EDTA有抑制作用 .

YAG激光诱变选育产低温脂肪酶罗伦隐球酵母及产酶条件优化

对产低温脂肪酶的罗伦隐球酵母进行YAG激光诱变育种,并对突变株Y-11的产酶条件进行优化。得到其最佳发酵条件为:豆饼粉3.0%,麸皮1.0%,(NH4)2HPO40.5%,MgSO4.7H2O0.05%,CaCl2.2H2O0.1%,初始pH5.5,发酵温度28℃,发酵时间32h,酶活可达到35.6U/ml,比原始菌株提出来高了1.5倍。

低磷胁迫下溶液培养大豆生长和磷素营养特性及其与土培下磷效率特性的关系

采用无磷 (P0 )和低磷 (P1 )溶液培养方法 ,对 1 9份经田间和盆栽土培试验中磷效率特性表现不同的大豆基因型进行研究 ,探讨低磷溶液培养条件下大豆基因型生长和磷素营养特性及其与土培条件下磷效率特性的关系。结果表明 ,在低磷溶液培养下 ,不同大豆基因型吸收溶液中可溶性磷的能力存在差异 ,吸收的磷量可达到自身固有磷量的 5 %～ 80 %左右。土培条件下磷效率比值相对值较小 (即在酸性红壤耕地上适应性较好 )的基因型 ,在低磷溶液培养下 ,不同基因型吸收溶液中可溶性磷的能力有强有弱 ;而磷效率比值相对值较大 (即在酸性红壤耕地上适应性较差 )的基因型 ,亦有相似的表现。低磷处理的不同大豆基因型植株鲜重净增量为无磷处理的 1 7 79%～ 99 0 9% ,植株干重净增量为 1 5 64 %～1 1 6 67%。无磷处理的植株干、鲜生物量 ,地上部干、鲜量 ,磷效率比值和低磷处理的磷效率比值以及种子重与土培条件下大豆基因型磷效率比值相对值呈显著、极显著正相关。

蜘蛛拖丝蛋白基因的构建及在大肠杆菌中的表达

蜘蛛大壶腹线产生的拖丝是非常优良的纤维蛋白 ,具有独特的强度和弹性。基于拖丝蛋白高度重复序列和部分cDNA序列 ,合成蜘蛛拖丝蛋白基因单体 ,通过头尾相连的构建策略 ,得到拖丝蛋白多聚体 ,与原核高效表达载体pET30a(+)连接 ,转化大肠杆菌BLR(DE3) ,用IPTG诱导表达。表达产物经His .Bind树脂金属螯合亲和层析一步纯化 ,纯度达 90 %以上 ,表达量为 2 0mg L。SDS PAGE和蛋白质印迹图谱显示表达产物分子量为 37kD 。

大豆磷效率与形态生理性状的关系

有关低磷红壤上大豆 ( Glycinemax ( L.) Merrill)基因型磷效率特性的研究鲜见报到 .作者选用低磷红壤耕地上生长适应性不同的 1 9个广东大豆地方种质 ,采用低磷红壤盆栽方法 ,对大豆基因型磷效率特性及其与植株形态生理性状的关系进行了研究 .结果表明 :在低磷水平下 ,较之磷效率特性较差的大豆基因型 ,磷效率特性较好的大豆基因型表现出体内磷素的相对积累和体内磷素转化为干生物量的效率的相对减弱 ;不同植株形态生理性状与大豆基因型磷效率特性呈现不同程度的相关 ,植株冠部磷素吸收量相对值与大豆基因型磷效率特性关系密切 。

豆凝乳酶产生菌的筛选及诱变育种

从 1 0 4份土样中分离到一株产豆凝乳酶的芽孢杆菌 ( Bacillussp.) ,酶活为 0 .3 u/ml.经 UV-DES诱变及培养基调整后 ,酶活可达 1 .6u/ml以上 .其最适产酶培养基组成 :麦麸 2 .5%,( NH4 ) 2 SO4 0 .5%,( NH4 ) 2 HPO4 0 .5%,Ca Cl2 0 .0 5%.

极端环境脂肪酶菌种库建立及其酶学性质研究

为得到特殊性质的脂肪酶酶种 ,从来源于极端环境的 2 7份样品中定向筛选脂肪酶产生菌 ,并构建了一个小型的菌种库。其中酵母L112在 2 0℃ ,pH5 .0时酶活为 18.6u ml,属低温酸性酶种。酶学性质研究表明 ,该酶最适作用温度为 2 5～ 30℃ ,最适pH为 5 .4。在pH4 .8,5 0℃条件下 4 0min保持 6 0 %以上酶活。Mg2 + 和Ca2 + 对酶有激活作用 ,Zn2 + 、Fe2 + 、Cu2 + 和EDTA有抑制作用。该产酶菌株经中国科学院微生物研究所鉴定为罗伦隐球酵母 (Cryptococcuslaurentii(Kufferath)C .E .Skinner)。

黑曲霉黄色变株A-2580产耐温酸性蛋白酶发酵条件的优化

经筛选诱变得到一株产生耐温酸性蛋白酶的黑曲霉黄色变株 A-2 5 80 ,对其发酵条件进行了优化 :通过单因子试验和正交试验 ,确定其最适培养基为 (g/L) :麸皮 2 1 .6、豆饼粉 48.4、 NH4Cl 2、 KH2 PO40 .8,p H4～ 5 ,温度 3 0℃的条件下进行振荡培养 ,发酵 72 h,酶活可达 670 0 u/ml.

机械化大罐发酵生产福建老酒挥发性香味物质的分析

采用色谱 -质谱联用分析法 ,以吹扫捕集与溶剂萃取相结合 ,对机械化大罐发酵工艺生产的鼓山牌福建老酒的挥发性香味成分进行剖析 ,以初步揭示挥发性香味成分与福建老酒风格相关联的确切成分 ,进而为完善机械化大罐发酵生产工艺提供科学依据 .

豆乳凝固酶的研究概况

豆乳凝固酶是制备大豆蛋白食品的优质凝固剂。文中对豆乳凝固酶的来源、酶学特性。

青霉素酰化酶表达调控的研究进展

青霉素酰化酶(penicillin acylase,PAC)是抗生素工业的重要酶。它在大肠杆菌中需经过复杂的转录、翻译和后翻译才能成熟,且后翻译过程对活性酶的最终形成影响很大。在阐述PAC的苯乙酸诱导机制的基础上,详细论述了PAC的后翻译过程,并对几种主要的影响因素进行了分析。

豆乳凝固酶产生菌UV-10发酵条件及其酶学性质的研究

豆乳凝固酶产生菌Bacillussp .UV 1 0的最适产酶条件 :初始pH6 4,温度 2 6℃ ,培养时间 1 9h ,需要较大的通气量。酶的最适作用pH和温度分别为 5 8和 70℃。在最适条件下酶活力可达 1 84u/mL。pH6 0～ 7 0稳定性较好。 6 0℃下 1h残余酶活 6 0 %。Ca2 +,Fe2 +,Mg2 +,Na+对其有较强的激活作用 ,而Zn2 +,Al3+则有抑制作用。

渗透休克法提取重组青霉素G酰化酶及酶学性质研究

为简化后期提取工艺,采用渗透休克法提取基因工程菌重组青霉素G酰化酶,回收率92.4%的酶蛋白释放到胞外,纯度达80%,比酶活26.4 U/m g.酶学性质研究表明,K cPGA的最适作用pH和温度分别为pH 7~9和50℃,在pH 5.0~8.0和低于40℃的范围较稳定.

生物工程专业微生物育种学实验教学探索

针对学生以往对实验课兴趣不高,对老师的依赖性强的问题,建立了科研模式的实验课教学方法,让学生自己设计实验,在老师指导下进行科研式的实验研究,在探索中学习知识面,掌握技能。经实践学生的实验操作技能和分析、解决问题的能力以及科研论文写作能力得到良好的训练,激发了学生对科学研究的兴趣。

机械化大罐发酵生产半甜型红曲黄酒工艺优化研究

运用TTC重层法进行机械化大罐发酵试验 ,正交试验选出酵母菌种1# 和3# ,符合发酵质量指标的试验号为5# ,6# ,8# 。酵母接种量为10 % ,糖化酶用量为0.4‰ ,头耙时间为落罐后12h,排掉醪液中积累的CO2。采用该工艺可酿出名优半甜型红曲黄酒 ,提高出酒率10 % ,缩短发酵时间30～45天 ,降低生产成本 。