MAP添加液对冰冻解冻去甘油红细胞保存的质量影响

目的观察冰冻解冻去甘油红细胞悬浮于MAP添加液中对保存效果的影响,探索最佳保存方式。方法本研究将采集后d 3的400 mL全血,离心制备成浓缩红细胞,使用ACP 215全自动血细胞仪,加入40%复方甘油溶液,置于-65℃超低温冰箱中保存30 d,解冻去甘油洗涤后,等量分离成两袋,以添加0.9%氯化钠溶液为对照组;添加MAP为实验组,两组保存于2~6℃冷藏条件下,分别于0、1、3、5、7、14 d取样检测血液学参数指标、溶血指标、细胞代谢指标,观察两组在14 d保存期内的质量变化情况。结果研究发现两组红细胞在解冻去甘油后6项质控项目包括容量、血红蛋白含量、游离血红蛋白含量、白细胞残留量、甘油残留量、无菌试验的检测值均符合《全血及成分血质量要求》(GB18469-2012);压积、红细胞计数、Hb洗涤后回收率、MCV符合《冰冻红细胞质量评价指标专家共识》检测限值,血小板残留量超过检测限值(≤1%);在14 d保存期内,两组的RBC、Hct、MCV和血红蛋白含量值无统计学意义;两组游离血红蛋白、溶血率和K+值随保存时间延长而增加,分别于3、5、7、14 d;3、5、7、14 d;14 d组间有统计学意义(P<0.05),两组红细胞渗透脆性于14 d组间有统计学意义(P<0.05);两组ATP、pH值随保存时间延长而下降,分别于3、5、7 d;1、3、5、7、14 d组间有统计学意义(P<0.05)。结论悬浮于MAP添加液中的冰冻解冻去甘油红细胞可将血液保存期延长至7 d,本研究为相关标准的制定提供参考依据。

上海地区单采血小板阳性细菌筛查结果评估

目的对上海市血液中心检测的405392袋单采血小板细菌结果进行回顾性分析,评估上海地区单采血小板细菌污染发生及控制情况,为制定细菌污染检测策略和预防措施提供依据。方法2017年1月—2023年12月,上海市血液中心将采集至少间隔24 h的单采血小板从母袋中取样至留样袋,并接种于需氧培养瓶内,使用自动化微生物培养系统进行细菌筛查,统计分析阳性细菌数据。结果2017年1月—2023年12月使用3种培养系统共检测到423例初始阳性标本,通过统计分析,初始阳性率为10.43×10^(-4)、确认阳性率为1.95×10^(-4)、不确定阳性率为1.33×10^(-4)、不一致阳性率为0.12×10^(-4)、取样污染引起的假阳性率为0.32×10^(-4)、仪器误报引起的假阳性率为6.71×10^(-4),3种培养系统组间差异无统计学意义(P>0.05)。经过MALDITOF MS质谱共检测出32种,151株细菌。其中确认阳性结果中表皮葡萄球菌、头葡萄球菌、人葡萄球菌所占比例较高;在不确定结果中短芽孢杆菌、表皮葡萄球菌、头状葡萄球菌所占比例较高;在不一致阳性结果中主要是解淀粉芽孢杆菌、星座链球菌、自溶菌、坚韧类芽孢杆菌;在假阳性(取样污染)结果中短芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、莫哈维芽孢杆菌、人葡萄球菌所占比例较高。确认阳性结果中初始报阳时间在12 h内被检出的细菌主要是蜡样芽胞杆菌、加氏乳球菌、地衣芽孢杆菌;在(12~24)h内被检出的细菌主要是表皮葡萄球菌、泛血败菌属、停乳链球菌。确认阳性细菌中,皮肤条件致病菌组的数量明显高于环境条件致病菌和常见致病菌组,差异有统计学意义(P>0.05)。结论通过使用自动化微生物培养系统对单采血小板进行细菌筛查,能有效地控制细菌污染的发生,保障单采血小板制品输注安全,同时本研究也可为献血者皮肤消毒流程优化及有效性评估措施的标准或规程提供参考依据。

过氧化氢雾化消毒机对血液运输车消毒效果的观察

目的 评估过氧化氢雾化消毒机对血液运输车车厢消毒效果。方法 采用过氧化氢雾化消毒机对车厢内部进行消毒,检测车厢内部自然环境空气菌落、嗜热脂肪杆菌(ATCC12980)芽孢菌片和车厢内左右两侧和靠近驾驶室内壁的中心点、车厢内部门把手位置、内置制冷机组四周中心的表面菌落数的检测,评价消毒效果。结果 消毒后车厢内部自然环境空气菌落和物体表面菌落数均合格且灭杀对数值均>1.00,嗜热脂肪杆菌(ATCC12980)芽孢菌片的灭杀率为100%,消毒后仅内门把手和内置制冷机组靠近驾驶室(前)检测到细菌,菌落中位数分别为4.21 CFU/cm^(2)(范围为0 CFU/cm^(2)~6.84 CFU/cm^(2))和6.84 CFU/cm^(2)(范围为0 CFU/cm^(2)~8.42 CFU/cm^(2)),其余检测位置均无菌生长。过氧化氢雾化消毒机人工操作时间的中位数为45 s(范围为40 s~51 s),常规消毒喷雾所需人工操作时间的中位数为610 s(范围为605 s~613 s)。结论 采用过氧化氢雾化消毒机消毒能满足空气菌落及车厢内部物体表面的消毒要求,提高工作效率,增加安全性。

过氧化氢雾化消毒机对采供血机构终末消毒效果的观察

目的观察过氧化氢雾化消毒机使用低浓度过氧化氢消毒剂对采供血机构中的体检区域(以下简称"体检区")环境和物体表面进行终末消毒的效果,提供一种安全、高效、易于操作、对人体无害并且对设备无腐蚀作用的简便方法。方法使用雾化过氧化氢消毒机对体检区进行消毒,比较消毒前后空气和物体表面菌落数的差异,评估消毒效果。结果消毒后,对过氧化氢残留量检测5个点位共25次检测,结果为(0.7~1)ppm,,无统计学差异(P>0.05);空气沉降菌检测5个点位共25次测试,检测结果的四分位数为(0~2)CFU/皿,合格率达到100%,消毒后和消毒前细菌检测结果具有统计学意义(P<0.05),符合GB15982-2012《医院消毒卫生标准》II类环境的要求;工作台、献血者座椅、屏风和门把手消毒后表面菌落检测结果的四分位数分别是(0~24.1)CFU/cm^(2)、(1.6~55.4)CFU/cm^(2),(0~7.2)CFU/cm^(2)和(0~4.8)CFU/cm^(2),与GB15982-2012《医院消毒卫生标准》III类物体表面平均微生物的检测要求比较,合格率分别为80%,48%,100%和100%,上述检测位置消毒后菌落数较消毒前有大幅度下降,具有统计学意义(P<0.05);使用表面接触平皿按压法和棉拭纸涂抹法对消毒后工作台、献血者座椅的物体表面菌落数进行检测,前者的检出率高于后者且具有统计学意义(P<0.05)。结论过氧化氢雾化消毒机消毒后,过氧化氢残留量符合说明书规定的要求;对于体检区环境中空气终末消毒效果可以100%符合GB15982-2012中II类环境要求;而物体表面微生物数终末消毒后明显低于消毒前。

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱在采供血机构环境污染调查中的应用

目的用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术调查采供血机构环境污染情况,评价应用价值。方法采集消毒后献血场所空气、献血者皮肤穿刺部位、血小板保存箱、血小板采集设备、相关实验耗材的物体表面和工作人员袖口表面,培养后挑选典型菌落使用微生物质谱技术进行鉴定,与2017~2021年5月间血液成分中检出细菌鉴定结果比对。结果无菌生长占21.20%,菌落数≤4.0 CFU/皿占62.20%,菌落数>4.0 CFU/皿占16.60%,合格率从高到低依次为血小板保存箱、消毒后献血场所空气中沉降菌、血小板采集设备、消毒后献血者皮肤穿刺部位、血小板耗材表面、医护人员工作服表面,消毒后献血者皮肤穿刺部位与其他采集位置检测菌落数进行比较,t值分别为2.0371、1.508、2.109、1.961和1.778,均无显著性差异(P>0.05);回顾分析2017~2021年5月血液成分细菌污染,检出30例细菌,其中单采血小板被检出率最高,单采血小板与红细胞类和血浆细菌污染次数比较,t值分别为1.731和2.272,均无显著性差异(P>0.05),与浓缩血小板污染次数比较,t值为2.875,具有显著性差异(P<0.05)。结论血液成分污染细菌多来源于空气菌群、献血者手臂皮肤消毒后残留菌群、相关设备物料表面,严格做好采供血场所的消毒工作,建立消毒监测方法、制定血站行业的消毒卫生标准,对降低细菌污染有临床意义。

原料全血30℃保存24 h后制备的悬浮红细胞和血浆质量变化情况的初步研究

目的将全血分别在冷藏(4±2)℃与室温(30±1)℃条件下保存24 h,比较2种温度条件下由全血分离所得的悬浮红细胞及血浆在保存期内的质量变化。方法本次研究纳入20名健康无偿献血者,每人献400 mL全血,将其分成2份,每份200 mL。对照组在冷藏条件下保存;实验组在室温条件下保存,于24 h后将2组全血离心,分离血浆入转移袋,加入50 mL MAP红细胞保存液,制备得到悬浮红细胞。2组悬浮红细胞均放置在冷藏条件下保存,于保存d 1、7、14、21、35分别无菌取样检测Hb、Hct、MCV、溶血率、pH、K^+、葡萄糖、ATP、2,3-DPG、红细胞渗透脆性值等指标;2组血浆分别于全血采集1 h后及全血保存24 h后进行无菌取样,检测Ⅷ因子含量。结果分离所得血浆在全血采集1 h后与保存24 h后Ⅷ因子含量无明显变化。在35 d保存期内,悬浮红细胞的Hb、Hct和MCV值无显著性差异;d 35,研究发现实验组红细胞渗透脆性高于对照组(4.9±0.2 vs 4.7±0.2;P<0.05);2组溶血率、K+值随保存时间延长而增加,分别于d 7、14、21、35;d 1、7、14、21组间有显著性差异(0.29±0.14 vs 0.11±0.09、0.39±0.22 vs 0.18±0.08、0.80±0.22 vs 0.24±0.07、0.93±0.22 vs 0.38±0.11;10.5±1.2 vs 5.4±0.7、21.7±2.0 vs 18.6±2.6、24.8±1.6 vs 22.7±2.7、29.2±2.5 vs 27.1±2.8;P均<0. 05);2组ATP、2,3-DPG、葡萄糖、pH值随保存时间延长而下降,分别于d 14、21、35;d 1、7、14;d 1、7、14、21、35;d 1、7、21组间有显著性差异(4.2±0.2 vs 4.7±0.2、3.6±0.2 vs 4.5±0.2、3.1±0.3 vs 3.9±0.2;1.96±0.44 vs 10.67±0.87、1.33±0.34 vs 3.27±0.88、0.82±0.29 vs 1.49±0.45;23.2±1.1 vs 29.4±1.5、22.0±1.3 vs 27.4±1.1、21.5±0.8 vs 25.1±1.1、18.7±1.5 vs 22.8±1.2、16.1±1.8 vs 19.1±1.7;6.8±0.1 vs 7.0±0.1、6.7±0.1 vs 6.8±0.1、6.4±0.1 vs 6.5±0;P均<0.05)。结论与冷藏(4±2)℃保存条件下相比,全血在室温(30±1)℃保存24 h后进行离心制备,35 d保存期内的溶血率增加,2,3-DPG值下降;而分离所得血浆在全血采集1 h后与保存24 h后Ⅷ因子含量无明显变化。本研究为相关标准或规程的制定提供参考依据或以此来指导临床用血。

2016—2018年上海地区单采血小板制品细菌污染检测结果分析与展望

目的对2016—2018年上海市血液中心检测的88 066袋单采血小板制品细菌结果进行回顾性分析,评估上海地区单采血小板制品细菌污染发生及控制情况,为制定细菌污染检测策略和预防措施提供依据。方法将2016年7月至2018年6月上海市血液中心采集的单采血小板共88 066袋（2种单采设备分别为Amicus和MCS＋）,接种于BPA（需氧瓶）使用Bact/Alert 3D 240自动化微生物培养系统进行细菌检测,并将数据按时间顺序等分为2个阶段统计分析。结果单采血小板细菌检测结果显示：1） 2个阶段初始阳性率OR值为0. 73,确认阳性率OR值为15. 45,仪器误报引起的假阳性率OR值为0. 44,不确定阳性率OR值6. 76,P均〈0. 05。2）确认阳性在2种单采设备出现比例,P〉0. 05。3）所有细菌的平均检出时间最短的依次是大肠埃希菌、败血泛菌、头状葡萄球菌、短小芽孢杆菌、类芽孢杆菌属、人型葡萄球菌。结论通过对2016—2018年上海地区单采血小板制品进行细菌检测项目,能有效的控制细菌污染发生,减少因细菌感染引起的输血不良反应,保障单采血小板制品输注安全。为提高细菌检测捕获率,以及更好的保障献血者和受血者安全,提出以下改进方向：优化检测方法,提升细菌检测效率。建立血液安全监测体系,完善评估与回告机制。

冷沉淀制备时间对凝血因子的影响

目的通过检测冷沉淀(使用采集10h以内400ml全血制备的原料血浆制成)中的Ⅷ因子和纤维蛋白原含量,以期找到制备冷沉淀原料血浆的最长制备允许间隔时间。方法选取150袋全血,分为3组,每组50袋,分别于全血采集后6h内、6～8h、8h～10h制备成新鲜冰冻血浆。然后用3组新鲜冰冻血浆分别制备成冷沉淀,检测其中的Ⅷ因子含量和纤维蛋白原含量。结果全血采集后6h内、6～8h、8h～10h的血浆最终制备成的冷沉淀的Ⅷ含量(IU/袋)分别为(120±3 1.5)、(104.9±23.6)、(112.3±30.7);3组纤维蛋白原含量分别为(344.9±86.9)mg、(349.9±120.9)mg、(355.2±105.9)mg;3个不同时间段制备的冷沉淀其Ⅷ因子含量和纤维蛋白原含量比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论制备冷沉淀原料血浆的最长制备允许间隔时间可以控制在全血采集后10h内。

制定悬浮红细胞类制品溶血性指标的探讨

目的探讨悬浮红细胞、悬浮少白细胞红细胞保存期末游离血红蛋白含量内控标准的制定。方法使用邻-甲联苯胺法在冬夏两季分别对悬浮红细胞、悬浮少白细胞红细胞各50例保存0、21、35d后的上清液中游离血红蛋白含量进行检测。结果冬季悬浮红细胞和悬浮少白细胞红细胞保存0、21、35d的游离血红蛋白值(g/L)分别为0.11±0.05、0.54±0.12、0.62±0.17和0.17±0.15,0.73±0.16、0.82±0.21;夏季悬浮红细胞和悬浮少白细胞红细胞保存0、21、35d的游离血红蛋白值(g/L)分别为0.15±0.06、0.62±0.11、0.88±0.15和0.21±0.16、0.76±0.15、0.97±0.17。结论制定悬浮红细胞类制品溶血性指标的内控标准非常有必要,有利于血站开展对该类血液制品的质量控制。

核酸检测标本运输模式的探讨

目的探讨使用自制的标本运输箱运输核酸标本的可行性。方法按献血屋标本运输模式和标本长途运输模式2种不同的要求,在两种规格的标本运输箱中,放入标本和保温剂,观察在45℃的环境中,标本运输箱的保温时间。结果在45℃的环境中,标本运输箱可保持2℃～8℃的温度范围3～6 h。结论本中心自行研制的标本运输箱能满足核酸标本运输的要求。

冷沉淀制备时间对凝血因子的影响

目的通过检测冷沉淀(使用400ml全血采集10h以内ACD-B分离制备的原料血浆制而成)中的Ⅷ因子含量和纤维蛋白原含量,以期找到制备冷沉淀原料血浆的最长制备允许间隔时间。方法选取150袋全血,分为3组,每组50袋,分别于全血采集后【6h、6～8h、8～10h制备成新鲜冰冻血浆。然后3组新鲜冰冻血浆分别制备成冷沉淀,检测其中的Ⅷ因子含量和纤维蛋白原含量。结果全血采集后【6h、6～8h、8～10h的血浆最终制备成的冷沉淀其Ⅷ含量分别为【6h(120±31.5)IU、6～8h(104.9±23.6)IU、8～10h(112.3±30.7)IU;

三种自动化微生物培养系统检测性能比较及评价

目的比较3种自动化微生物培养系统(Versa TERK、BACTEC FX、Bact/Alert 3D)的细菌检测性能,探讨快速及准确的病原学检测方法。方法使用3种不同检测原理的自动化微生物培养系统对11株标准菌株进行培养检测,比较不同浓度的菌液在需氧和厌氧瓶中的检出时间,对3种自动化微生物培养系统检测效果进行评价。结果 3种自动化微生物培养系统5 d内均检测出11株标准菌株,在需氧瓶中所有细菌平均检出时间最短的依次是Versa TERK (13.44 h)、BACTEC FX (22.13 h)、Bact/Alert 3D (26.61 h);而在厌氧瓶中,所有细菌的平均检出时间最短的依次是BACTEC FX(15.86 h)、Bact/Alert 3D (17.52 h)、Versa TERK (17.65 h)。在所有细菌中,大肠埃希氏菌最早被检出,该菌在Versa TERK需氧瓶中被检出时间最短(7.43±0.75 h);白色假丝酵母菌被检出时间最晚,该菌在Versa TERK需氧瓶中被检出时间最短(20.26±1.25 h)。同时3种自动化微生物培养系统均能检出30 CFU/mL、50 CFU/mL、100 CFU/mL、200 CFU/mL 4个浓度的细菌,且细菌的浓度会影响微生物培养系统的检出时间,浓度越高,细菌检出时间越短。结论 3种自动化微生物培养系统均可满足采供机构全血及血液成分细菌检测的需求,其中Versa TERK的细菌检出时间略早于另外2种系统;另外细菌浓度的改变会影响3种自动化血微生物培养系统的检出时间。

2016—2018年中国国际输血感染预防和控制(CITIC)项目细菌检测室间质评结果分析

目的通过对2016—2018年参加CITIC项目细菌检测室间质评的实验室检测结果作回顾性分析,以评估参评实验室开展血液检测细菌筛查项目的总体水平。方法2016—2018年CITIC室间质评的样品共90例分发至参评实验室,通过定期上报数据的收集,并对收集的数据信息进行统计分析,分析检测实验室地区、性质、分类、使用的检测系统种类、室间质评不符合结果情况、同一菌种不同浓度在BacT/ALERT BPA和BD Standard/10 Aerobic/F系统需氧瓶中的被检出时间比较等。结果统计结果显示:1)2016—2018年度CITIC细菌检测质评项目的参考数据。在所有90份参考样品中共设置8份'教育型'样品;除2017年第1、3次、2018年第3次质评活动外,其余6次均设置阴性样品。2)2016年样品结果数共1 030例,其中假阳性结果8例(0.78%),假阴性结果7例(0.68%);2017年样本结果数共1 210例,其中假阳性结果3例(0.25%),假阴性结果6例(0.50%);2018年样品结果数共1 510例,其中假阳性结果10例(0.56%),假阴性结果19例(1.26%);3)参评实验室6种细菌培养设备室间质评共出现53例不符合结果,其中假阴性结果32例,假阳性结果21例。结论参评实验室通过参加CITIC细菌室间质评项目,是实验室自我检测能力评估的方式之一,同时也能获取不同实验室之间比对的检测结果,了解各实验室间、试剂厂家与技术人员之间的水平差异,获得交流和培训的机会,从而持续监控和改进实验室检测水平,同时室间质评样本设计方案和后续分析有待进一步优化。

核酸检测标本运输模式的探讨

目的探讨使用自制的标本运输箱运输核酸标本的可行性。方法按献血屋标本运输模式和标本长途运输模式两种不同的要求,在两种规格的标本运输箱中放入标本和保温剂,观察在45℃的环境中,标本运输箱的保温时间。结果在45℃的环境中,标本运输箱可保持2～8℃的温度范围3～6h。结论该中心自行研制的标本运输箱能满足核酸标本运输的要求。

现用手臂皮肤碘伏消毒方式对不同献血人群消毒效果的研究

目的评价现用手臂皮肤消毒方式对不同献血人群消毒前与消毒后表面微生物分布特征和变化特点,为制定合适的消毒方式或标准提供依据。方法利用接触皿采样法采集200名献血者手臂消毒前后的皮肤表面标本,进行细菌培养,分离纯化后通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪(MALDI-TOF MS)鉴定分析。结果200名献血者皮肤消毒监测结果符合标准;消毒前样本中共检测到49种细菌,其中革兰阳性菌、革兰阴性菌占比分别为75.51%(37/49)和24.49%(12/49),在消毒后样本中共检测到19种细菌,其中革兰阳性菌、革兰阴性菌占比分别为84.21%(16/19)和15.79%(3/19);室内组消毒后细菌残留率明显低于室外组,P<0.05,室内组消毒后残留率最高是鲍曼不动杆菌、洛菲不动杆菌、腐生葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、短芽孢杆菌、弯曲芽孢杆菌、疮疱丙酸杆菌。室外组消毒后残留率最高是环状芽孢杆菌、头葡萄球菌、溶血葡萄球菌。组间比较表明,室外组皮肤消毒后头葡萄球菌和表皮葡萄球菌的残留率明显高于室内组,P均<0.05。结论尽管现用手臂皮肤消毒方式能获得符合标准的消毒效果,但消毒后仍有细菌残留,细菌残留率及残留微生物种类可能与献血者的工作环境相关,本研究也可为相关标准或规程的制定提供参考依据。

血液中心对献血者皮肤消毒效果的评估

目的了解血液中心对献血者皮肤消毒效果状况,为献血者安全皮肤消毒提供依据。方法通过回顾性分析,对上海市血液中心不同血液采集点献血者皮肤消毒状况进行调查与评估。结果共监测4342例献血者,皮肤消毒后无菌生长率为79.16%,总合格率为98.25%。从皮肤消毒后检出阳性的样本中分离到腐生葡萄球菌。该血液中心对献血者皮肤消毒采用5组方法,其中采用碘酊擦拭+酒精脱碘消毒法(方法3)消毒效果合格率最高。不同献血场所的献血者皮肤消毒合格率比较无显著性差异。结论该血液中心对献血者皮肤消毒方法种类多,但以碘酊与酒精双消毒方法效果最可靠。