血链球菌拮抗可疑牙周病原菌机理探讨Ⅱ细菌素的产生及影响因素

血链球菌产生细菌素（血链素）至培养上清液中，无论是需氧或厌氧环境，血链球菌均可产生血链素。采用无水乙醇沉淀法提取血链球菌培养上清液中的蛋白质，运用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析其蛋白成份，发现有１３０ｋｄ、１２０ｋｄ、７４ｋｄ、和５６ｋｄ四条蛋白区带，通过电泳凝胶弥散法抑菌试验显示，５６ｋｄ蛋白带具很强的抑菌活性，提示此蛋白质可能为血链素的所在位置。

血链球菌与牙周可疑致病菌混合培养研究──Ⅰ．定量培养分析

运用定量混合培养技术，以变形链球菌作为对照，分析了血链球菌与常见牙周可疑致病菌的相互关系。结果表明，血链球菌对牙周可疑致病菌均有很强的抑制作用，抑菌率接近１００％，变形链球菌虽然对牙周可疑致病菌也有一定的抑制作用，但强度远低于血链球菌的作用。另外，血链球菌对牙周可疑致病菌的抑制作用也是随条件而改变的，当中间普氏菌菌落数为血链球菌菌落数的６．２５倍时，血链球菌的生长完全受到抑制，显示了两者相互拮抗关系。

人釉原蛋白基因的扩增及其真核表达克隆的构建

目的 构建人釉原蛋白基因真核表达克隆。方法 从胚龄 2 0周的引产胎儿牙胚中提取总 RNA,RT- PCR法扩增人釉原蛋白编码区基因 ,重组到真核表达载体 Pc DNA3.1中 ,经酶切和 DNA序列分析验证。结果经 RT- PCR扩增后 ,得到大小约 5 70 bp的特异性产物 ,与预期的人釉原蛋白 m RNA编码区碱基长度一致 ,重组克隆 Pc DNA3.1- AMG的测序结果显示 ,与 Gen Bank中的人釉原蛋白基因 (AMEL X)序列仅在第 4 85位碱基发生错配 (G→ C) ,但不影响氨基酸组成。结论 本研究成功的构建了人釉原蛋白基因真核表达克隆 ,为进一步研究牙周组织再生的基因治疗奠定了基础。

血链球菌拮抗可疑牙周病原菌机理探讨I．血链球菌培养上清液抑菌活性研究

本研究建立一种敏感的抑菌试验，微量琼脂糖弥散法，分析血链球菌培养上清液的抑菌作用。结果发现，牙周病原菌在血链球菌培养上清液中孵育３０ｍｉｎ，菌落形成数低于对照组，微量琼糖弥散法测定血链球菌培养上清液的抑菌活性，显示血链球茵培养１２ｈ后，培养上清液出现抑菌活性，７２ｈ达高峰。在有蔗糖及ｐＨ８．５ＴＰＹ培养基中培养的血链球菌上清液可形成较大抑菌环，厌氧环境培养的血链球菌上清掖抑菌活性略高于需氧环境。

牙周细菌的相互作用及其意义

近年来牙周病细菌病因学的研究揭示,牙周菌群的组成与变化是影响牙周健康与疾病的关键因素,而细菌间的相互作用是影响牙周细菌组成和导致牙周菌群改变的一个重要方面。本文从牙周细菌的相互凝集作用、相互营养关系和相互拮抗作用三方面综述近年来国外学者对牙周细菌的相互作用研究的结果,以及它们在牙周病变发生发展中的意义。

血链球菌与牙周可疑致病菌混合培养研究──Ⅱ．扫描电镜观察和电子探针应用分析

运用扫描电镜技术分析血链球菌与牙周可疑致病菌混合培养的形态学变化。结果显示血链球菌能与牙周可疑致病菌中的长杆菌如具核梭杆菌、生痰二氧化碳噬纤维菌相互凝集形成玉米棒状结构，与短杆菌如牙龈紫质单胞菌、中间普氏菌、伴放线放线杆菌相互凝集。运用电子探针技术分析细菌细胞膜的离子变化，显示血链球菌与牙周可疑致病菌混合培养时，血链球菌细胞在离子无变化，牙周可疑致病菌细胞膜离子发生变化，钙、磷离子浓度降低，提示血链球菌抑制牙周可疑致病菌的机理与细胞的通透性改变有关。

白细胞介素1对牙龈成纤维细胞增殖和前列腺素E_2产生的影响

本研究采用外用血单核细胞,以SiO2作为刺激因子,经培养后,Sephadex G—75凝胶柱层析分离IL—1,观察IL—1对牙龈成纤维细胞PGE2的产生和细胞增殖的影响,PGE2的测定采用放免分析,以3H—TdR掺入反映增殖情况。发现IL—1明显促进牙龈成纤维细胞PGE2的产生,也明显促进牙龈成纤维细胞增殖,说明IL—1能通过促进PGE2的产生而介导一系列牙周组织的病理过程,另外,还能通过促进牙龈成纤维细胞的增殖而在牙周组织修复中而起着重要作用。

牙龈上皮细胞胸腺细胞激活因子产生的研究

4个牙龈组织标本,用体外培养方法进行了上皮细胞培养,以鼠胸腺细胞增殖反应分析其胸腺细胞激活因子(ETAF)的产生。发现牙龈上皮细胞在体外培养中能自发产生 ETAF,且大肠杆菌脂多糖、龈上和龈下菌斑的提取液能促进牙龈上皮细胞 ETAF 的产生。Sephadex G-75凝胶柱层析发现牙龈上皮细胞 ETAF 主要位于分子量15000和50000处。牙龈上皮细胞能产生 IL-1样的 ETAF,可能在局部组织的健康与疾病过程中具有重要意义。

牙周病的家庭护理

牙周病治疗要想成功,一方面要有详尽的、多样化、个性化的治疗计划和医生精湛、细致的治疗技术,另一方面需要患者的认真配合和持之以恒的良好的家庭口腔卫生护理,二者缺一不可。2008年6月《广东牙病防治》编辑部特邀华南地区的牙周病专家就"牙周病的家庭护理"这一主题进行了讨论,各位专家分别对牙周病的病因、牙周基础治疗的重要性、牙周病防治发展趋势、牙周病家庭护理方法和产品选择、传统医学在牙周护理中的贡献等方面发表了精辟见解,为口腔医生临床工作提供了宝贵的经验和参考。本次讨论会由广东省口腔医院院长章锦才教授主持。

现代生活与口腔卫生

随着经济的发展,人们生活水平的提高以及多年来口腔专业人员的大力宣传,大众的口腔保健意识大大提高,口腔保健逐渐为大众所重视。维护良好的口腔卫生不仅对于预防口腔疾病具有重要作用,同时也是现代文明生活的重要组成部分。最近《广东牙病防治》杂志编辑部组织了内地、香港、台湾的部分专家就“口腔卫生与现代生活”这一主题进行了讨论,这些专家分别从口腔卫生维护措施、口腔卫生对疾病防治和个人的影响以及口腔卫生在现代生活中的重要性等方面发表了各自精辟的见解,以期为读者提供一定的参考。本次专家论坛由广东省口腔医院章锦才教授主持。

口腔链球菌丙酮酸氧化酶基因调节区的DNA序列分析

目的 了解口腔链球菌丙酮酸氧化酶基因调节区的分子结构。方法 将从口腔链球菌丙酮酸氧化酶基因 (Sopox)的上游区序列体外扩增得到的 ,并经证明含有启动子活性的 1 30kb片段和PBK_CMV质粒DNA用HindⅢ单酶切产物连接 ,转化E .coliJM10 9,筛选阳性菌落 ,增菌后取质粒DNA ,再经HindⅢ酶切鉴定。将阳性克隆进行DNA序列分析。结果 重组克隆酶切产物经 1%琼脂糖凝胶电泳显示 ,获得约为 1 30kb的条带 ,与预计片段大小相符证实其为阳性重组克隆。重组克隆测序获得Sopox基因上游序列共计 135 0bp。结论 Sopox基因调节区序列的获得为进一步阐明口腔链球菌产生过氧化氢的分子机理奠定基础。

中间普里沃菌基因多态性及其在成人牙周炎患者龈下菌斑中的分布

目的 :了解中间普里沃菌 (P .i)的基因多态性及其在成人牙周炎 (AP)病变部位与健康部位的分布特点。方法 :采用随机引物多聚酶链扩增法 (APPCR)法用引物OPA 0 3和OPA 13对来自 2 5例AP的 10 1株P .i作基因型分析。结果 :用引物OPA 0 3对 10 1株P .i的APPCR分析 ,得到 7种不同的基因型 ,用引物OPA 13对 97株P .i的APPCR分析 ,得到 12种不同的基因型 ;同一患者口内有 1～ 4种基因型 ,以 1种为主 ,同一患者病变部位与健康部位均可有 1～ 3种基因型 ,以 1种为主 ;P .i在病变部位的优势基因型与P .i在健康部位的优势基因型基本一致 ,未发现与牙周健康状态相关的特定基因型P .i。结论 :中间普里沃菌是内源性致病菌 ,在适宜的条件下过度生长导致牙周炎。

口腔厌氧菌研究进展(综述)

近二十多年来,由于厌氧微生物培养方法、鉴定手段等的发展,使得口腔厌氧菌的研究有了突破性的进展,在口腔环境内发现了许多新的厌氧菌种菌属,对许多原有的厌氧菌进行了重新分类和命名,极大地丰富了厌氧微生物学。同时。

人釉原蛋白重组质粒PcDNA3-AMG在COS-1细胞系中的表达

目的研究人釉原蛋白(AMG)重组质粒PcDNA3-AMG在COS-1细胞系中的表达。方法采用脂质体载体法将釉原蛋白重组质粒PcDNA3-AMG导入COS-1细胞系,用Zeoin筛选得到稳定转染克隆,并经ELISA检测细胞内和细胞培养液中重组釉原蛋白AMG的表达。结果在未经转染的对照组细胞内和细胞培养液中均未检测到AMG的表达,而经转染的实验组不论细胞内或细胞培养液中均检测到AMG的较高表达,重组质粒PcDNA3-AMG转染组细胞内AMG浓度达0.253μg/ml。结论PcDNA3-AMG具有较强的在真核细胞系中表达和分泌AMG的能力,适宜基因工程体外制备重组釉原蛋白。

消炎痛和放线菌酮对骨吸收影响的体外研究

以新生鼠头盖骨体外培养作为模型,观察牙周袋壁组织培养液的骨吸收活性,及肖炎痛和放线菌酮的抑制效应,发现袋壁组织培养液能明显促进新生鼠头盖骨Ca^(2+)的释放(骨吸收活性为44.2±4.1％,对照组为18.7±2.3％,p<0.01),在袋壁组织的培养过程中加入消炎痛(100ng/ml)或放线菌酮(10μg/ml)并经透析,则明显抑制其骨吸收活性(抑制57.3％和77.3％)。说明PG和IL-1等都可能在体内牙槽骨的吸收过程中有着重要意义,并为临床用药物阻断牙槽骨吸收提供了理论依据。

牙周炎部位牙龈成纤维细胞的生化机制——DNA单链断裂和DNA损伤修复系统功能减弱

牙周炎症的牙龈组织中存在的超氧离子可引起细胞 DNA 单链断裂,正常细胞 DNA 单链断裂能及时修复,如果大量 DNA 单链断裂不能很快修复,则可导致局部基因表达和调节异常。作者对牙周炎症部位和健康部位成纤维细胞 DNA 单链断裂状况,DNA 损伤修复的重要酶——DNA 连接酶和多聚腺嘌呤二磷酸核糖(PADPR)合成酶的活性进行了研究,结果表明,牙周炎症部位牙龈成纤维细胞的 DNA 单链断裂数目明显高于健康部位者(P<0.01);其 DNA 连接酶活性及 PADPR 合成酶活性均显著低于健康部位的酶活性(P<0.01);作者对实验结果的可能机制进行了分析讨论。

补体C1q对牙龈成纤维细胞作用的研究

牙龈成纤维细胞可因补体Ｃ１ｑ受体的特征分为两个亚群，一群成纤维细胞表面含高密度、高亲和力的Ｃ１ｑ受体，另一群成纤维细胞则只含少数低亲和力的Ｃ１ｑ受体。为了阐明Ｃ１ｑ与牙龈成纤维细胞相互作用的本质和意义，研究了Ｃ１ｑ时健康部位、龈炎部位和牙周支部位牙龈成纤维细胞生长和胶原合成的影响，发现Ｃ１ｑ能促进上述部位牙龈成纤维细胞的生长和胶原合成，尤对牙周炎部位的牙龈成纤维细胞的作用最为明显。说明Ｃ１ｑ通过与牙龈成纤维细胞在面全体的相互作用，在调节牙龈组织结构和功能中起着重要作用，同时也说明了牙周炎部位牙龈成纤维细胞的亚群组成发生了变化。