高效液相色谱-串联质谱法同时测定饲料中乙氧基喹啉及其伴生物质

本研究旨在建立一种应用高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)技术同时测定饲料中乙氧基喹啉(EQ)、对氨基苯乙醚(PD)、非那西丁(PC)、乙氧基喹醌亚胺(EQI)和乙氧基喹啉二聚体(EQDM)含量的方法。饲料样品用乙腈提取,经BONDESIL-SI多重杂质吸附材料净化,采用HPLC-MS/MS测定,以0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸乙腈溶液作为流动相,梯度洗脱,Waters BEH C_(18)色谱柱分离。结果表明:通过饲料基质匹配绘制标准曲线,EQ、PD、PC、EQI和EQDM在5~500μg/L范围内线性关系良好[决定系数(R^(2))>0.9950]。方法中EQ、PD和PC的检出限和定量限分别为3.0和10.0μg/kg,EQI和EQDM的检出限和定量限分别为1.5和5.0μg/kg。EQ、PD、PC、EQI和EQDM在3个添加水平(20、50、100μg/kg)的平均回收率为73.77%~98.77%,批内相对标准偏差(RSD,n=6)<10%,批间变异系数<12%。该方法前处理简单,操作方便,适用于饲料中EQ及其伴生物质的同步测定。

固相萃取法结合液相色谱-串联质谱技术测定饲料中庆大霉素含量

本研究建立了一种固相萃取法结合液相色谱-串联质谱技术测定饲料中庆大霉素含量的方法。采用5%三氯乙酸提取液提取饲料样品,用PCX固相萃取柱净化,使用液相色谱-串联质谱检测,以2 mmol/L甲酸铵-0.1%甲酸溶液(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱,Agilent SB-Aq色谱柱分离。庆大霉素含量在1.0~100.0 mg/L线性关系良好(R 2>0.995);方法的检出限为0.03 mg/kg,定量限为0.1 mg/kg;庆大霉素在3个添加水平(1.0、10.0、100.0 mg/kg)下的平均回收率为81.5%~123.6%,相对标准偏差<15%。该方法易于使用,预处理简单,适用于测定饲料中的庆大霉素含量。

全自动免疫亲和柱净化-液相色谱串联质谱法同时测定饼粕类饲料原料中黄曲霉毒素

研究旨在建立全自动免疫亲和柱净化-液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)同时测定饼粕类饲料原料中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2(AFB1、AFB2、AFG1、AFG2)含量的分析方法。通过比较不同提取条件和净化方式对黄曲霉毒素(AFs)检测结果的影响,确定较佳前处理方法。样品经40%乙腈提取、磷酸盐缓冲液稀释,采用自动免疫亲和柱净化,得到的样品溶液使用LC-MS/MS进行定量分析。基于上述方法对花生粕、豆粕、棉籽粕等饲料原料样品进行分析测定,结果表明:AFs在0.02~10.00 ng/mL范围内线性关系良好(R2≥0.9950),方法定量限为0.1μg/kg,平均回收率为82.2%~109.8%,RSD≤8.9%。该方法可批量自动化处理样品,提高工作效率,避免因人员操作导致的结果偏差,适合于饲料原料中多种AFs的精准测定。

无标记表面等离子共振免疫传感快速测定动物尿液中沙丁胺醇残留

本研究旨在建立一种无需标记的直接竞争表面等离子共振(SPR)免疫传感器,以快速测定动物尿液中沙丁胺醇的残留。试验首先利用氨基偶联原理,将沙丁胺醇单克隆抗体固定到CM7传感器芯片表面,然后通过优化单抗固定浓度、pH和固定时间,以及芯片活化和封闭时间,进而得到最佳分析条件。结果表明:沙丁胺醇在0.1~6.0 ng/mL浓度范围内线性关系良好[相关系数(R2)为0.9998],最低检出限(LOD)可达0.01 ng/mL,在添加浓度为0.5、1.0和5.0 ng/mL时,方法的平均回收率为87.82%~97.67%,批内变异系数(相对标准偏差)为1.51%~2.67%,批间变异系数为2.86%~5.53%。将该SPR免疫传感器与超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)确证分析方法进行实际尿液样品测定比较,结果能够保持一致。本研究建立的直接竞争SPR免疫传感方法简便、快速、灵敏,且无需复杂的生物标记,适用于动物尿液中沙丁胺醇残留的日常检测分析。

基于金属有机框架的表面增强拉曼散射传感器及其在食品安全检测中的应用

基于表面增强拉曼散射(Surface enhanced Raman scattering,SERS)的传感体系是分析化学领域强有力的技术手段,在医药、食品、环境等领域均得到了良好的应用。拉曼活性基底是SERS传感体系的关键,开发性质优良的新型SERS基底是当前的研究热点。近年来,金属有机框架(Metal-organic frameworks,MOFs)材料以其孔隙率高、结构可调、功能丰富等特性而备受关注,结合MOFs和SERS的分析检测技术表现出了选择性广、灵敏度高和稳定性强等优势。本文阐述了MOFs作为SERS基底在SERS传感器中的不同功能,以及MOFs-SERS传感器在食品安全检测中的应用,提出了MOFs-SERS传感器存在的问题和挑战,并对其未来发展前景进行了展望。

超高效液相色谱-三重四极杆/复合线性离子阱质谱测定新型饲料添加剂枯草三十七肽

本研究旨在建立利用超高效液相色谱-三重四极杆/复合线性离子阱质谱(UPLC-QTRAP/MS)测定饲料中新型饲料添加剂枯草三十七肽的方法。饲料和添加剂样品用甲醇-水-甲酸溶液(5∶3∶2,V∶V∶V)提取,适当稀释后上UPLC-QTRAP/MS测定,基质匹配外标法定量。结果表明,枯草三十七肽在0.5~50μg/L范围内线性良好,其相关系数≥0.9979;方法检出限为0.05 mg/kg,定量限为0.2 mg/kg;在0.2、0.4、2、10 mg/kg 4个添加水平下,方法的平均回收率为86.4%~99.8%,批内变异系数为1.2%~7.1%,批间变异系数在2.9%~8.8%之间。该方法前处理简单,操作方便,适用于饲料添加剂中枯草三十七肽的检测。

液相色谱-串联质谱法同时测定饲用血液制品中18种β-受体激动剂

【背景】饲用血液制品是一种非常规动物源性饲料原料,由家畜或家禽的血液凝成块后经高温蒸煮,压除汁液、晾晒、烘干后粉碎而成,主要用于畜牧养殖。但由于动物养殖过程中存在非法使用β-受体激动剂的现象,一些含有β-受体激动剂的血液制成饲用血液制品可能成为对人类健康潜在的危害源头。为了降低安全风险,研究饲用血液制品中β-受体激动剂的方法是十分必要的。β-受体激动剂检测方法主要有酶联免疫吸附分析(ELISA)法、高效液相色谱(HPLC)法、气质联用(GC-MS)法和液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)法等。目前所有方法或标准大多针对商业成品饲料或动物源性食品,缺乏对饲用血液制品中β-受体激动剂的检测技术进行相关的研究。【目的】为了研究和监控饲用血液制品中β-受体激动剂的情况,研究建立了固相萃取结合液相色谱-串联质谱检测饲用血液制品中18种β-受体激动剂的方法。【方法】称取2 g(精确至0.01 g)血液制品样品于50 mL离心管中,准确加入20 mL乙酸铵提取液(pH=5.2)和50μLβ-葡萄糖苷酸酶/芳基硫酸酯酶,漩涡混合均匀,于37℃水解过夜(应大于16h),然后8000 r/min离心5 min,取5 mL上清液转移至另一离心管中,加入0.5mL高氯酸溶液,漩涡混合30 s,然后于8000r/min离心5min,上清液备用。PCX固相萃取小柱依次用3 mL甲醇,3 mL水活化。取上清液过柱,用3 mL水和3 mL甲醇淋洗,抽干,用3 mL氨水甲醇溶液洗脱,洗脱液于50℃氮气吹至近干,用1.0 mL 0.1%甲酸水+乙腈溶液(95+5)溶解,过0.22μm滤膜。进Waters TQ液相色谱串联质谱仪检测,使用ACQUITY UPLC BEH C18(100 mm,2.1 mm,1.7μm)色谱柱。乙腈和0.1%甲酸溶液做流动相,梯度洗脱。质谱电离方式采用电子喷雾离子源,正离子检测方式,多反应监测(HRM)。喷雾电压为3.5 kV;雾化气温度为480℃;源温度为150℃;雾化气流速为600L·h^-1;锥孔气流速为5 L·h^-1。脱溶剂气、锥孔气、碰撞气均为高纯氮气。【结果】18种β-受体激动剂在5-100μg·L^-1呈良好的线性关系,相关系数在0.99-0.999之间。在血粉、血浆蛋白粉、血球蛋白粉三种基质中在5、10和50μg·kg^-1三个添加水平上的平均回收率为65.1%-110%之间,相对标准偏差小于15%,批间变异系数小于20%。检出限为低于5ng·g^-1。【结论】从方法回收率、精密度结果及实际样品的检测结果来看,该方法适用于血液制品中β-受体激动剂的监测。

液相色谱-串联质谱法同时检测饲料中7种精神类药物

建立了液相色谱-串联质谱同时检测饲料样品中7种精神类药物(硝西泮、奥沙西泮、氯丙嗪、异丙嗪、地西泮、奋乃静、硫利达嗪)的方法。通过对提取溶剂、净化等预处理条件及LC-MS/MS分析条件的优化,可以同时检测饲料中7种违禁精神类药物。饲料样品经乙腈/水(9:1,V/V)提取后,过MCX固相萃取柱净化,氮吹至干,用1mL乙腈/水(2:8,V/V)溶解后测定,采用SRM模式进行定性与定量分析。7种精神类药物在饲料中的回收率为53.9%～110.2%;相对标准偏差为3.4%～18.4%;硝西泮、奥沙西泮、氯丙嗪、异丙嗪的检出限为1.0ng/g;对地西泮、奋乃静、硫利达嗪的检出限为5.0ng/g。结果表明,本方法可用于饲料中7种精神类药物的测定。

饲用酸化剂中甲酸、乙酸、丙酸、乳酸、柠檬酸的同步测定

实验建立利用高效液相色谱同时测定饲用酸化剂中甲酸、乙酸、丙酸、乳酸、柠檬酸含量的方法。采用Grom-Sil org acid柱(250 mm×2.1 mm,5μm)进行分析。流动相为pH值2.5磷酸水溶液;流速为1.0 ml/min;检测波长为210 nm;柱温为30℃。在此色谱条件下,5种有机酸分离良好。平均回收率均大于85%,RSD小于10.0%。对实际样品的检测结果表明:该方法操作简便易行,准确可靠。

高效液相色谱法同时测定预混合饲料中维生素C、维生素B_2及其磷酸盐

本研究建立了高效液相色谱（HPLC）同时测定预混合饲料中维生素c、维生素B：及其磷酸盐形式维生素C-2-磷酸酯（VCP）、维生素琰-5-磷酸钠（VB，P）的方法。预混合饲料用1．5mmol／L四丁基硫酸氢铵缓冲溶液提取后，进行HPLC检测。采用ZorbaXEclipsePlusC18色谱柱（250rTlfnX4．6mm，5μm），以1．5mmol／L四丁基硫酸氢铵缓冲溶液（pH=3．0）与甲醇作为流动相，梯度淋洗。在此色谱条件下，维生素c、维生素B。VCP和VB2P的线性关系良好，检出浓度分别为3、1、1、3mg／kg，定量限为10、5、5、10mg／kg。应用该法测定了预混合饲料中维生素c、维生素B2、VCP和VB2P，平均回收率为81．5％～106％，相对标准偏差（RSD）均小于10％。

离子色谱法与滴定法测定甜菜碱含量的不确定度评估

甜菜碱(betaine)是一种重要的饲料添加剂。目前饲料添加剂甜菜碱含量的检测方法主要采用农业行业标准NY 399—2000、国家标准GB/T 23710—2009(非水滴定法和离子色谱法)检测。在实际工作中发现两种检测方法对产品检测结果具有一定差异。为此我们参考JJF 1059、CNAS-GL06对两种检测方法的不确定度进行了评定。

液相色谱串联四极杆线性离子阱质谱测定秸秆发酵饲料中米酵菌酸和毒黄素

本研究旨在建立利用液相色谱串联四极杆线性离子阱质谱(LC-MS/MS-QTRAP)测定秸秆发酵饲料中米酵菌酸和毒黄素的方法。秸秆发酵饲料样品用1%甲酸溶液+乙腈溶液(15+85)提取,经多重机制杂质吸附技术净化后,上LC-MS/MS-QTRAP测定,基质匹配外标法定量。结果表明:米酵菌酸和毒黄素在1~100μg/mL内线性关系良好,其相关系数>0.9950;方法检出限为0.7μg/kg和1.5μg/kg,定量限为2μg/kg和5μg/kg;在5、10μg/kg和100μg/kg 3个标准浓度添加水平下,平均回收率为82.8%~102%,相对标准偏差为1.8%~14.7%。应用此方法对50份不同来源的秸秆发酵饲料样品进行了检测,其中6份样品中检出米酵菌酸或毒黄素,其含量为3.5~56.7μg/kg,本研究建立的方法可用于秸秆发酵饲料中米酵菌酸和毒黄素含量的检测分析。

多重杂质吸附结合液相色谱串联质谱测定宠物饲料中牛磺酸

本研究采用多重杂质吸附净化技术结合液相色谱-串联质谱仪(LC-MS/MS)建立了宠物饲料中牛磺酸含量的检测方法。宠物饲料样品经0.5 mol/L盐酸溶液提取,使用多重杂质吸附技术富集净化后,上LC-MS/MS分析测定。结果表明:牛磺酸在宠物饲料中的检测回收率>85%,变异系数<10%,检出限为5 mg/kg。该方法适用于宠物饲料中牛磺酸含量的测定。

高效液相色谱法测定饲料中氯羟吡啶含量

本研究建立了用高效液相色谱法检测饲料中氯羟吡啶的含量方法。饲料经甲醇提取后,用氧化铝柱净化分离,浓缩,用甲醇溶解,定容。进高效液相色谱检测,以SB-C正常柱(150mm×4.6mm)为分离柱,以水和乙腈(10∶90,V∶V)作为流动相,用紫外检测器于270nm处检测。应用此方法,将氯羟吡啶以1、10mg/kg和100mg/kg含量添加到空白饲料中,测得回收率在90%～102%之间,变异系数均低于5%,方法的定量限为1mg/kg。结果表明:该检测方法可用于饲料中氯羟吡啶的检测。

3种吸附剂对黄曲霉毒素B_1吸附能力的研究

【目的】体外试验评价3种吸附剂(吸附剂A:主成分为酵母细胞壁提取物;吸附剂B:主成分为水合铝硅酸盐;吸附剂C为复合物,主成分是酵母细胞壁及水合铝硅酸盐)对黄曲霉毒素B1(AFB1)的吸附效果,并通过吸附剂对摄入AFB1肉仔鸡生长性能及血清蛋白水平的影响验证体外试验结果。【方法】(1)pH为2.0、6.0、8.0的磷酸盐缓冲溶液(PBS溶液)、人工胃液和人工肠液环境下吸附剂对AFB1的吸附能力;(2)吸附剂对AFB1的结合速率;(3)吸附剂结合AFB1形成的复合体的稳定性;(4)240只1日龄雄性AA肉仔鸡,随机分为8个处理,比较吸附剂对摄入AFB1肉仔鸡生长性能及血清蛋白水平的影响。【结果】(1)5种酸碱条件下吸附剂结合AFB1的能力大小顺序为B>C>A;(2)吸附剂B在10min内对AFB1吸附率达到97.69%,且60min内一直处在96.03%以上,而吸附剂A、C在60min内对AFB1的吸附能力不稳定;(3)与吸附剂A、C相比较,体外条件下吸附剂B与AFB1形成的复合体解吸附率最低;(4)与基础组比较,AFB1组肉仔鸡采食量、体重增加显著下降,料重比显著增加(P<0.05),血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLOB)水平均显著下降(P<0.05)。3种吸附剂均能提高肉仔鸡生长性能,吸附剂B能显著改善摄入AFB1污染日粮(98.98μg·kg-1)的肉仔鸡血清蛋白水平的降低,添加吸附剂A或C效果不显著。【结论】3种吸附剂对AFB1均有一定的吸附作用,吸附剂B的作用效果优于吸附剂A和吸附剂C。结果提示,将吸附剂B应用于被AFB1污染的家禽饲料中,与其它霉菌毒素管理措施相结合,能降低AFB1对肉仔鸡的危害。

高效液相色谱法测定饲料中的苏丹红Ⅰ～Ⅳ

本文建立了饲料中苏丹红Ⅰ～Ⅳ号的高效液相色谱的分析方法,采用乙腈提取样品中的苏丹红,氮吹富集,经Aglient ZORBAX80A Extend-C18柱分离,紫外检测器检测,4种物质的检出浓度均为0.01μg/mL,实际样品中4种物质的检出限为0.05mg/kg。采用标准添加法测定苏丹红的回收率,0.05、0.1、0.2、1.0、2.0mg/kg5个不同添加水平的回收率均大于80%。结果表明该方法灵敏度高,检出限低,分析时间短,可满足高通量饲料样品中苏丹红的日常检测。

利用沸石吸氨氮机理解决预混合饲料中维生素B1测定的准确度研究

沸石粉是目前常用作预混合饲料载体的重要组成部分,但由于沸石粉的吸附作用,常会引起某些预混料中维生素B1含量测定出现较大偏差,回收率低下。本文采用3 mol/mL的氯化铵甲醇溶液作为提取剂,提取液经高效液相色谱进行分离测定,外标法定量。结果表明:通过氯化铵的解吸附作用,使得维生素B1的回收率由原来的70%提高到了90%以上。

高效液相色谱法同时测定饲料中5种糖皮质激素方法研究

糖皮质激素是由肾上腺皮质分泌的一类甾体激素，具有调节糖、脂肪和蛋白质的生物合成和代谢的作用．还具有抗炎作用。糖皮质激素类药物根据其血浆半衰期分短、中、长效3类。短效激素包括氢化可的松、可的松。中效激素包括强的松、强的松龙、甲基强的松龙、去炎松。

固相萃取-高效液相色谱法测定饲料中5种磺胺类药物的研究

建立了固相萃取-高效液相色谱(SPE-HPLC)测定饲料中磺胺嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲恶唑、磺胺喹恶啉5种磺胺类药物的方法。考察了碱性氧化铝小柱的最大饱和容量及洗脱条件,优化了色谱条件:流动相为乙腈和水(257∶5,v/v),流速为1.0 mL/min,检测波长为270 nm。在优化条件下,方法的最低定量限分别为磺胺嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶5 mg/kg;磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲恶唑、磺胺喹恶啉2 mg/kg。方法的线性范围在0.2～200μg/mL之间,线性相关系数高于0.9996。将该方法用于鸡配合饲料、猪配合饲料和浓缩饲料中磺胺类药物残留的测定,不同添加浓度的回收率均高于80%,相对标准偏差≤10%,能够满足实际样品的分析要求。