人工智能辅助诊断系统在液基细胞学宫颈腺上皮病变筛查中的应用价值

目的:探讨人工智能(AI)辅助系统在宫颈腺上皮病变细胞学诊断中的应用价值。方法:收集诊断为非典型腺细胞(AGC)的液基细胞学薄层宫颈涂片143例,阴性涂片631例,所有涂片均进行AI辅助阅片和中级医师阅片,以主任医师复核的诊断结果为金标准,进行对比分析,并统计特异性、敏感性等指标。结果:宫颈涂片腺上皮细胞病变的检测中,AI辅助阅片系统的阳性率为15.7%、特异性为99.8%,而中级医师阅片的阳性率为18.3%、特异性为99.2%,两组间差异无统计学意义(P>0.05)。AI辅助系统的准确率为97.0%,敏感性为84.6%,中级医师阅片的准确率为99.2%,敏感性为99.3%,两组间差异具有统计学意义(P<0.05)。AI辅助阅片的ROC曲线下面积(AUC)为0.922,低于中级医师阅片的0.993,差异有统计学意义(P<0.05)。此外,AI辅助阅片与中级医师阅片的诊断一致率达到99%,相应的Kappa值为0.888,表明两种阅片方法基本一致。结论:AI辅助系统在宫颈腺上皮病变的诊断中展现出较高的特异性,然而其敏感性相对较低,存在一定的漏诊可能性。尽管AI辅助阅片的准确率尚未达到中级医师的水平,但其仍展现出重要的诊断潜力。未来的研究和发展应着重于提升AI辅助阅片系统的敏感性,并通过临床验证来确保其在实际应用中的可靠性和安全性。

人工智能在甲状腺针吸细胞病理诊断中的应用进展

细胞病理学检查是恶性肿瘤初步诊断的关键步骤。近年来,随着计算机图像处理技术和模式识别与人工智能技术的飞速发展,人工智能被广泛应用于恶性肿瘤的诊断领域中,其在细胞病理诊断中具有良好的适用性。人工智能应用于细胞病理诊断可显著提高阅片速度、降低诊断医师的劳动强度、提高工作效率,避免因主观因素而产生误差,是一种具有较高应用价值的恶性肿瘤筛查技术手段。本文对人工智能在甲状腺细胞学中的应用进展进行介绍和回顾。

非小细胞肺癌患者细胞学标本EGFR基因突变检测及其临床病理意义

目的:探讨细胞学标本在非小细胞肺癌(NSCLC)的诊断及个体化治疗中的临床应用价值。方法:收集352例新鲜细胞学标本制片后,行常规HE染色;同时选择TTF-1、NapsinA、CK7、CEA、CD56、Syn、P63、CK5/6、WT-1、E-cadherin等抗体对来源不明的肿瘤细胞进行免疫细胞化学标记,并对明确诊断为NSCLC的病例,采用突变扩增阻滞系统(ARMS)检测表皮生长因子受体(EGFR)基因突变情况。结果:352例患者中,345例有癌细胞。经临床及免疫细胞化学证实345例恶性细胞中,NSCLC有335例,且NSCLC细胞学标本中有302例DNA提取成功,占90.15%(302/335)。EGFR基因检测结果显示,EGFR共突变123例,总突变率为40.73%(123/302)。其中,第18、19、20、21外显子的突变率分别为0.99%(3/302)、19.21%(58/302)、0.66%(2/302)和19.87%(60/302);EGFR 18、19、21外显子突变占EGFR突变总数的98.37%(121/123)显著高于EGFR 20外显子突变(P<0.05)。302例患者中,女性患者EGFR突变率为54.35%(75/138),明显高于男性患者29.27%(48/164)(P<0.05);非吸烟患者EGFR的突变率为51.49%(104/202),显著高于吸烟者19%(19/100)(P<0.05)。276例腺癌中EGFR突变率44.20%(122/276);非腺癌EGFR突变率4.34%(1/23);腺癌EGFR突变率明显高于其他类型(P<0.05)。结论:利用新鲜细胞学标本,结合免疫细胞化学标记和ARMS分子病理技术有助于晚期非小细胞肺癌的诊断,并为表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKIs)个体化治疗提供可靠依据。

自噬在顺铂诱导食管癌TE1细胞死亡中的作用

目的观察顺铂联合自噬特异性增强剂beclin1和特异性抑制剂3-MA对食管癌细胞增殖抑制的影响,探讨自噬在顺铂诱导的食管癌TE1细胞死亡中的作用。方法 MTT法检测空白对照组、顺铂组、顺铂分别联合beclin1和3-MA组对食管癌TE1细胞增殖抑制作用的影响;Western blot法检测顺铂对食管癌TE1各组细胞中bcelin1蛋白表达的影响;MDC荧光染色检测各组细胞内自噬囊泡数量的变化;流式细胞仪检测各组细胞中细胞周期和凋亡的改变。结果 MTT检测各组细胞的增殖抑制率分别为:1.06%,31.59%,18.93%,51.44%。DDP组能有效抑制TE1细胞的增殖。与单独使用DDP组相比,beclin1+DDP组对TE1细胞的增殖抑制率明显降低(P<0.01);3-MA+DDP组对TE1细胞的增殖抑制率明显增高(P<0.01);Western blot检测各组细胞中beclin1蛋白表达量分别为0.319±0.029,1.175±0.06,1.537±0.076,0.91±0.047(P<0.01);荧光显微镜观察beclin1+DDP组中MDC标记的自噬荧光强度最高,细胞质内出现了明显的绿色荧光;FCM检测细胞周期分布结果显示,各组细胞中G0/G1期细胞比例分别为(44.82±0.437)%,(56.25±0.624)%,(27.553±0.085)%,(66.48±0.638)%;各组细胞中S期细胞比例分别为(34.85±0.235)%,(24.417±0.607)%,(51.8±0.721)%,(19.167±0.666)%。各组细胞的凋亡率分别为(1.237±0.015)%,(4.813±0.025)%,(1.32±0.01)%,(6.117±0.035)%(P<0.01)。结论顺铂可以诱导食管癌TE1细胞自噬和凋亡;反应性的自噬活性增强可能与顺铂耐药的形成有关,自噬水平的下调可能增加了食管癌细胞对化疗药物顺铂的敏感性,提示监测及调控肿瘤细胞的自噬水平可能为逆转食管癌顺铂耐药提供新的思路。

HE染色细胞学涂片和FFPE标本用于EGFR突变检测的对比分析

目的探讨HE染色细胞学涂片与FFPE标本中EGFR检测的一致性。方法收集275例HE染色细胞学涂片标本,经HE染色及免疫细胞化学染色确诊为非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC),刮取HE染色细胞学涂片中的肿瘤细胞进行DNA提取,并行EGFR检测,与配对的275例FFPE标本应用荧光PCR法检测EGFR突变。结果113例HE染色细胞学涂片检测有EGFR突变,阳性率为41.1%;其中G719X突变4例,19del 41例,L858R突变58例,20ins 3例,获得性耐药T790M和19del双突变6例,L858R和S768I双突变1例。113例FFPE标本检测到EGFR突变,其中G719X、L858R、20ins、L858R和S768I双突变结果与细胞学结果一致,19del 47例,未检测到T790M和19del双突变。2例EGFR野生型FFPE标本检测失败。结论HE染色细胞学涂片与FFPE标本EGFR检测比较,具有较好的敏感性和特异性。HE染色细胞学涂片可广泛用于EGFR检测,是一种稳定、结果可靠的检测方法,尤其对于不能获得组织标本进行病理诊断的患者,可以指导临床酪氨酸激酶抑制剂的治疗。

非小细胞肺癌EGFR基因突变在外周血与淋巴结针吸标本中的对比分析

目的检测非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者外周血与淋巴结针吸标本EGFR基因突变率及两者的一致性,探讨外周血标本EGFR基因突变的临床应用价值。方法采用ARMS法检测105例NSCLC患者淋巴结针吸标本及其配对外周血EGFR基因突变状态,比较外周血和淋巴结针吸标本基因突变的一致性,分析EGFR基因突变与NSCLC临床病理特征的关系。结果105例外周血中检出45例突变(突变率为42.86%),淋巴结针吸标本中检出50例突变(突变率为47.62%),两者一致性为83.81%(88/105),差异有统计学意义(Kappa=0.674,P<0.001)。外周血标本EGFR基因突变与患者性别、是否吸烟、临床分期及病理类型有关(P<0.05),与患者年龄及淋巴结直径无关(P>0.05);淋巴结针吸标本EGFR基因突变状态与患者性别、是否吸烟及病理类型有关(P<0.05),与患者年龄、淋巴结直径及临床分期无关(P>0.05)。结论NSCLC患者外周血与淋巴结针吸标本EGFR基因突变一致性较高,在无法获得组织及细胞学标本时可以检测外周血EGFR基因状态,为NSCLC患者提供临床诊疗帮助。

细针穿刺细胞学诊断骨外尤因肉瘤1例

患者女性,27岁,因发现右肘部肿物1年,肿物增大伴疼痛2个月入院。查体:右肘窝处可见一肿物,大小19 cm×18 cm×10 cm,质硬,活动度差,表面未见破溃、出血。右肘部有触痛,右肘关节活动受限。右肘关节X线示:右肘关节骨质未见异常,右肘关节周围软组织内多发肿物;MRI示:右肘关节内软组织肿物,建议针吸活检除外恶性肿瘤。

膜式细胞采集器在脱落细胞免疫组化染色中的临床应用

临床上常遇到胸、腹水及心包积液性质难以确定的病例，传统的离心涂片血细胞成分通常较多，涂片较厚，行免疫组化染色后背景着色不易判断真、假阳性，易误诊。目前常用的薄层液基细胞学涂片不适于胸、腹水及心包积液的细胞提取。

甲状腺髓样癌1例

患昔女性，78岁，因甲状腺肿物及纵膈病变入院。入院后查血Calcitonin〉2000pg／mL（5．17～9．82pg／mL）、CEA35．43．g／mL（0～5ng／mL）、TG在正常参考值内。颈部超声：甲状腺多发实性及囊实性结节，考虑为TI-RADS3级；左侧颈部及锁骨上窝多发实性占位。CT示：气管周围前上纵膈软组织肿物，侵袭性胸腺瘤？

细针穿刺细胞学诊断浅表血管黏液瘤1例

患者女性,42岁。脐周缓慢生长无痛性肿物2年,无外伤史,无明显不适。查体：于脐周部可见一大小约1.5 cm×1.5 cm×1 cm的肿物,呈息肉状隆起于皮肤表面,表面呈灰褐色,无红肿及破溃。触诊肿物呈囊实性,与周围组织分界清楚,无明显压痛,无其他阳性体征。临床诊断：脐周肿物性质待查。行脐周肿物细针穿刺,进针后感觉质软,抽出半透明胶冻样物少许,肿物较穿刺前略缩小。

EUS-FNA细胞学在诊断胰腺神经内分泌肿瘤中的应用价值

目的探讨超声内镜引导下细针穿刺(endoscopic ultrasound guided fine needle aspiration,EUS-FNA)细胞病理学对胰腺神经内分泌肿瘤(pancreatic neuroendocrine tumors,PanNETs)的诊断价值。方法对11例PanNETs的EUS-FNA细胞学涂片及免疫细胞化学染色涂片进行观察分析,同时收集临床及术后组织病理资料。结果11例中10例细胞病理学诊断为PanNETs,1例诊断为胰腺实性假乳头状瘤。其中11例PanNETs中G1级3例,细胞学主要表现为较为均匀一致的细胞,也可见成团细胞,细胞大小较为一致,偶可见瘤巨细胞;G2级7例,细胞大多散在分布,细胞成浆细胞样。G3级1例,细胞似裸核,弥散分布,染色质粗糙。免疫细胞化学染色结果示,肿瘤细胞Syn(11/11)及CgA(10/11)均阳性,Ki-67增殖指数1%~25%,与术后组织病理表达相近。结论胰腺EUS-FNA细胞病理学联合免疫细胞化学染色可以对神经内分泌肿瘤作出正确诊断,但也有其局限性。

Beclin1和HLAⅠ、Ⅱ在人卵巢癌SKOV3细胞中的表达

目的探讨转染Beclin1质粒的自噬基因Beclin1和免疫应答效应分子HLAⅠ、Ⅱ在人卵巢癌SKOV3细胞中的表达,分析Beclin1在卵巢癌免疫应答中的作用。方法应用基因转染技术、RT-PCR、Western blot法检测Beclin1质粒转染SKOV3细胞前后Beclin1和HLAⅠ、Ⅱ的mRNA和蛋白表达水平的变化。应用免疫荧光显微镜观察Beclin1质粒转染SKOV3细胞后,其自噬小体的变化。用MTT法检测Beclin1质粒转染SKOV3前后细胞的增殖活性。结果 SKOV3细胞转染Beclin1质粒后,Beclin1的转录和翻译水平分别是空载体组的5、2倍。荧光显微镜观察,转染Beclin1质粒组卵巢癌细胞MDC标记的自噬小体数量显著增多。RT-PCR和Western blot结果显示,转染Beclin1可诱导HLAⅠ、Ⅱ等位基因的转录和翻译。Beclin1质粒组的HLAⅠ-A、B、C和HLAⅡ-DP、DQ、DR的mRNA分别是空载体组的2、1.6、3倍和2、6、3倍;其HLAⅠ、Ⅱ的蛋白表达分别是空载体组的2、1.6倍。MTT结果显示,Beclin1质粒组与空载体组、空白对照组相比,在转染24、48、72、96 h后,其细胞生长抑制率分别为42.6%、37.8%、24.35%、14.81%。结论在人卵巢癌SKOV3细胞中,转染外源性Beclin1可诱导细胞自噬并使免疫应答效应分子HLAⅠ、Ⅱ的表达增加。HLAⅠ、Ⅱ表达的增加可能使卵巢癌细胞免疫应答增强。转染外源性Beclin1可抑制卵巢癌SKOV3的细胞增殖。

晚期非小细胞肺癌细胞学涂片EML4-ALK融合基因的检测及意义

目的探讨利用细胞学涂片标本对晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者进行棘皮动物微管相关蛋白样4-间变性淋巴瘤激酶(echinoderm microtubule-associated protein-like 4-anaplastic lymphoma kinase,EML4-ALK)融合基因检测的可行性。方法收集48例NSCLC患者的细胞学涂片标本,HE染色常规诊断,免疫细胞化学染色分型,采用FISH技术检测EML4-ALK融合基因。结果 48例细胞学标本EML4-ALK融合基因阳性率为8.33%(4/48),其中31例NSCLC恶性胸腔积液标本中检测出3例EML4-ALK融合基因,17例NSCLC细针穿刺标本中检测出1例EML4-ALK融合基因。结论采用NSCLC细胞学涂片进行EML4-ALK融合基因检测,方法可靠,具有实用性。

细针穿刺细胞学诊断朗格汉斯细胞组织细胞增生症1例

患儿男，7岁，因左面部肿物2周，局部轻触痛，于2017年7月2日来我院就诊。查体：面型两侧不对称，左面部咬肌区明显隆起，可触及一大小3cm×3cm×3cm肿物，界限欠清，表面光滑，质地中等，基底固定，活动度差，轻度压痛。左面部超声示：左面部隆起处皮下囊实性包块，左侧腮腺及颌下腺声像，考虑炎性改变，双侧颈部淋巴结稍大。

细针穿刺诊断外阴颗粒细胞瘤1例

患者女性,45岁,子宫肌瘤切除术后5年,无意中发现阴阜区肿物3天入院。查体：阴阜区皮下可见一直径为1 cm的质韧结节,边界尚清,表面暗红色,局部无压痛。门诊行针吸活检。病理检查镜检：细胞圆形或多角形,细胞之间相互融合成片;胞质丰富,含有明显的嗜酸性颗粒;细胞核较小,

非小细胞肺癌患者外周血及胸水中EGFR基因突变的研究

目的检测非小细胞肺癌患者外周血与新鲜胸水EGFR基因突变率及两者的一致性,探讨外周血标本在EGFR基因突变的临床应用价值。方法采用ARMS法检测51例非小细胞肺癌患者新鲜胸水及其外周血EGFR基因突变状态,比较外周血和新鲜胸水基因突变的一致性,分析EGFR基因突变与患者临床特征关系。结果 51例外周血中检出20例突变(突变率39.2%),其中19del突变11例(55%,11/20),L858R突变8例(40%,8/20),G719X突变1例(5%,1/20);新鲜胸水中检出24例突变(突变率47.1%),其中19del突变13例(54.2%,13/24),L858R突变10例(41.7%,10/24),G719X突变1例(4.1%,1/24)。两者突变一致性为80.4%(41/51),差异具有统计学意义(Kappa=0.603,P=0.000)。外周血及新鲜胸水EGFR基因突变状态均与性别、是否吸烟和病理类型有关(P<0.05),而与年龄及TNM分期无关(P>0.05)。结论非小细胞肺癌患者外周血与新鲜胸水EGFR基因突变一致性较高,在无法获得组织及细胞学标本时可以检测外周血EGFR基因状态,为非小细胞肺癌患者提供临床诊疗帮助。

荧光原位杂交诊断胸水直接涂片EML4/ALK融合基因1例

患者女性，76岁，左侧肺癌病灶靶向放疗后，出现大量胸水。将送检胸水用一次性病变细胞采集器（B型）（北京金木信诚公司）富集细胞后，将膜片细胞富集面置于防脱载玻片上，来回拖动几次，使膜上细胞转移至载玻片上（图1、2），固定，HE染色，镜下观察。

晚期非小细胞肺癌患者恶性胸水中表皮生长因子受体的突变检测

目的探讨胸水表皮生长因子受体(EGFR)基因检测对晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)治疗的预测价值。方法纳入62例NSCLC患者,胸水取样通过ARMS检测EGFR基因突变,随访其口服吉非替尼的有效率、疾病控制率及无进展生存期。结果 EGFR突变患者的EGFRTKI治疗的有效率及疾病控制率均优于野生型患者(P<0.05),EGFR突变患者的无进展生存期优于野生型患者,但是两者之间的差异不显著(P>0.05)。结论胸水的EGFR基因检测对于NSCLC患者的EGFR-TKI治疗具有一定的预测价值。

全自动DNA图像分析系统在胰腺恶性肿瘤诊断中的价值

目的:评估全自动DNA图像分析(DNA-ICM)系统在诊断胰腺恶性肿瘤中的价值。方法:108例可疑胰腺恶性肿瘤患者行超声内镜引导下细针穿刺,所获标本分别行常规细胞学检测及DNA-ICM检测,以组织病理学诊断结果为标准,参考临床随访资料,分析细胞学、DNA-ICM及两者联合的诊断价值。结果:常规细胞学诊断的敏感性(93.1%)、特异性(95.2%)、阳性预测值(98.8%)、阴性预测值(76.9%)及准确率(93.5%)均高于DNA-ICM(分别为90.8%、90.5%、97.5%、70.4%、90.7%),但两者之间的差异均无统计学意义(P>0.05)。两种方法联合诊断的各项指标分别为敏感性(95.4%)、特异性(90.5%)、阳性预测值(97.6%)、阴性预测值(82.6%)及准确率(94.4%)。两者联合诊断的敏感性、阴性预测值、准确率均高于单独诊断,但其差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:DNA-ICM联合细胞学诊断有很好的临床应用价值,DNA-ICM是胰腺细胞学诊断的一种较好的辅助诊断手段。

胸腔积液肺腺癌细胞中CXCR4、Ki67、MDM2、N-cadherin的表达及其与EGFR突变状态的关系

目的:研究胸腔积液肺腺癌细胞中趋化因子受体4(CXCR4)、增殖细胞核抗原Ki67、鼠双微体2(MDM2)和N-钙黏蛋白(Ncadherin)的表达与表皮生长因子受体(EGFR)突变状态的相关性。方法:收集46例晚期肺腺癌患者的胸腔积液,采用HE染色联合免疫细胞化学染色(ICC)法检测胸腔积液中是否含肿瘤细胞,突变扩增系统(ARMS)检测胸腔积液中癌细胞的EGFR基因突变状态,将癌细胞分为EGFR-TKI敏感突变组和EGFR野生型组。采用ICC法检测胸腔积液中肺腺癌细胞CXCR4、Ki67、MDM2和Ncadherin的表达,分析这些蛋白的表达阳性率和EGFR突变状态的相关性。结果:46例肺腺癌患者的恶性胸腔积液细胞中,31例(67.4%)存在EGFR-TKI敏感突变。CXCR4、Ki67、MDM2、N-cadherin表达阳性率与EGFR突变状态相关(r分别为0.452、0.428、0.417、0.524,均为P<0.05),且EGFR-TKI敏感突变组细胞CXCR4、Ki67、MDM2、N-cadherin表达的阳性率明显高于EGFR野生型组(P<0.05)。结论:EGFR突变状态与CXCR4、Ki67、MDM2和N-cadherin的表达相关,EGFR突变状态下,胸腔积液肺腺癌细胞的CXCR4、Ki67、MDM2和N-cadherin的表达阳性率高于非突变状态下的表达阳性率。